学术投稿

PJ34对A549/DDP细胞耐药相关基因表达的影响

韩柯;郝吉庆

关键词:肺腺癌, PARP-1抑制剂, 顺铂, 耐药性, 多药耐药基因
摘要:目的 探讨PJ34对肺腺癌顺铂耐药(A549/DDP)细胞多药耐药相关基因的影响.方法 将A549/DDP细胞分为对照组、顺铂单药组、PJ34单药组、PJ34联合顺铂组,RT-PCR法检测细胞内肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药蛋白(MRP)、P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱα(TOPO-Ⅱα)mRNA转录水平.结果 除了TOPO-Ⅱα外,其余四种耐药相关基因mRNA在A549/DDP细胞内的转录水平明显高于A549细胞(P<0.05).经PJ34处理后的A549/DDP细胞内MRP、P-gp mRNA转录水平下降(P<0.05),且呈浓度及时间依赖性.结论 LRP、MRP、P-gp、GST-π可能参与了A549/DDP细胞对顺铂的继发耐药,PJ34可能通过下调MRP、P-gp mRNA转录水平而间接增加顺铂对DNA的损伤.
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    经导管气管内滴注方法制作一种操作简捷可靠、剂量精确的小鼠单侧肺损伤模型.经导管分别滴注生理盐水(NS组)、0.05%伊文斯兰(EB组)、脂多糖(LPS组)至小鼠左肺,6h测呼吸功能(Pehn),24 h取肺脏进行病理分析,插管成功率为100%.解剖显示EB组小鼠左肺均匀分布EB,右肺无明显异常;NS组和EB组小鼠Pehn差异无统计学意义,LPS组Pehn与NS组、EB组比较差异有统计学意义(P<0.001);NS组和EB组小鼠双肺病理HE染色均无明显病理学改变,LPS组小鼠肺出现严重肺损伤.

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    作者:王璇;严光 刊期: 2016年第08期

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    目的 探索低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因诱导牙髓干细胞(DPSCs)在体外的成血管作用.方法 对HIF-1 α进行基因突变,构建突变型、野生型以及对照组的慢病毒载体;体外培养DPSCs;分别用3种慢病毒转染DPSCs后,检测细胞转染效率、目的基因HIF-1d在mRNA及蛋白水平的表达,MTr法检测慢病毒载体对细胞增殖的影响;目的基因转染成功后,qPCR、Western blot法检测HIF-1 α调控DPSCs成血管因子的表达.结果 MTT结果表明慢病毒载体对DP-SCs的增殖几乎无影响.qPCR和Western blot法检测目的基因HIF-1α成功表达,HIF-1α能够显著上调DPSCs的成血管因子的表达(P<0.05).突变组和野生组的成血管作用明显强于对照组(P<0.05),而突变组又优于野生组(P<0.05).结论 HIF-1 α基因可以促进DPSCs血管向分化作用.

    作者:邓立方;朱友明;王银龙 刊期: 2016年第08期

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    作者:张英平;王霖;刘蝉;韩玲玲;夏鹰;张亚中;刘虎;夏瑞祥 刊期: 2016年第08期

  • MPO-ANCA相关性血管炎中抗溶酶体相关膜蛋白-2抗体的作用初探

    目的 初步探讨抗溶酶体相关膜蛋白-2抗体(LAMP-2A)在髓过氧化物酶抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎(MPO-AAV)中的存在及意义.方法 采用ELISA法分别检测入选者周围血的LAMP-2A、髓过氧化物酶抗中性粒细胞胞质抗体(MPO-ANCA)、溶酶体相关膜蛋白-2(LAMP-2)、髓过氧化物酶(MPO)及活化补体C5a水平,比较LAMP-2A阳性与阴性患者间临床资料及上述指标间的差别,并分析其相关性.结果 MPO-AAV患者中LAMP-2A的阳性率为48.44%,阳性率在有无肾、肺损害患者中差异无统计学意义;病例组LAMP-2水平显著高于对照组(P <0.001);LAMP-2A阳性患者C5a、MPO及LAMP-2水平显著高于阴性患者(P<0.01),并且LAMP-2A分别与C5a、MPO及LAMP-2水平呈显著正相关性(rs=0.056、0.525、0.723,P<0.001),与MPO-ANCA及BVAS无明显相关性.结论 MPO-AAV中自身抗体LAMP-2A常见,其独立于自身抗体MPO-ANCA,可能通过促进补体旁路激活、结合升高的自身抗原(LAMP-2)等途径影响MPO-AAV的临床损害,更确切的作用和意义有待进一步探讨.

    作者:桂雅迪;帅宗文;胡子盈;张铭明;武琳琳;陈珊宇 刊期: 2016年第08期

  • 室间隔缺损修补术中三尖瓣适当切开技术的临床应用

    回顾性分析近5年行膜周部室间隔缺损(VSD)修补的1 263例患者的临床资料,分为三尖瓣适当切开技术(TVD)组(537例)与非TVD组(726例),比较两组术后残余分流、传导阻滞、三尖瓣返流等的发生率.两组围手术期无死亡病例,主动脉阻断时间、体外循环时间等差异无统计学意义;TVD组发生一过性房室传导阻滞10例,无完全性房室传导阻滞;非TVD组发生一过性房室传导阻滞35例,完全性房室传导阻滞2例.术后随访TVD组发生VSD小量残余漏2例,非TVD组11例;TVD组发生轻度以上三尖瓣返流(TR)7例,非TVD组9例.两组患者VSD修补术后一过性传导阻滞、残余漏及总计并发症情况比较,差异有统计学意义(P<0.05).TVD是一安全有效的技术,能显著改善VSD暴露,减少并发症,且不影响三尖瓣的正常功能.

    作者:韦小勇;严中亚;朱正艳;雷虹;吴一军;卢中;孙云 刊期: 2016年第08期

  • 三叉神经痛模型大鼠三叉神经节神经元中NPR-A表达量的变化

    目的 检测三叉神经痛(TN)模型大鼠的三叉神经节(TG)神经元中NPR-A受体mRNA表达量的变化.方法 采用眶下神经缩窄术和经眶下孔注射肿瘤坏死因子α(TNF-α)将雄性SD大鼠随机分成6组,即对照组1(假手术组)、对照组2(生理盐水注射组)、眶下神经缩窄模型组(ION-CCI组)术后1周和2周以及经眶下孔注射TNF-α组(TNF-α组)注射后1周和2周.Q-PCR法检测NPR-A受体mRNA的表达.结果 每组大鼠TG均表达NPR-A受体mRNA.其中ION-CCI组术后2周以及TNF-α组注射后1周和2周TG内NPR-A受体mRNA表达含量均显著高于相应对照组(n=4,P<0.05).结论 大鼠TG表达的NPR-A受体可能与大鼠TN及炎性痛的发生和发展相关.

    作者:韩良;崔曼曼;徐文华;刘悦雁;王烈成;王元银 刊期: 2016年第08期

  • 自噬在内质网应激诱导的肝星状细胞凋亡中的作用研究

    目的 研究内质网应激诱导HSC凋亡的过程中自噬的发生与否及其作用,为肝纤维化的逆转提供新的思路.方法 采用血小板衍生生长因子(PDGF-BB)诱导大鼠肝星状细胞系HSC-T6活化模型,在此基础上,给予ERS诱导剂毒胡萝卜素(TG)刺激24 h,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3B的表达,MDC染色法观察自噬小体的生成,观察TG对HSC自噬的影响,进一步采用3-MA阻断自噬,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,观察自噬在内质网应激诱导的肝星状细胞凋亡中的作用.结果 TG可以诱导HSC凋亡,伴随着自噬的发生,用3-MA阻断自噬可以增强TG诱导的HSC凋亡.结论 内质网应激诱导HSC凋亡的过程伴发自噬,阻断自噬可以增强内质网应激诱导的HSC凋亡.

    作者:汪应红;王欢;左龙泉;王亚飞;黄涛;范宇哲;李凡杰;王旭东;黄艳 刊期: 2016年第08期

  • PJ34对A549/DDP细胞耐药相关基因表达的影响

    目的 探讨PJ34对肺腺癌顺铂耐药(A549/DDP)细胞多药耐药相关基因的影响.方法 将A549/DDP细胞分为对照组、顺铂单药组、PJ34单药组、PJ34联合顺铂组,RT-PCR法检测细胞内肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药蛋白(MRP)、P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱα(TOPO-Ⅱα)mRNA转录水平.结果 除了TOPO-Ⅱα外,其余四种耐药相关基因mRNA在A549/DDP细胞内的转录水平明显高于A549细胞(P<0.05).经PJ34处理后的A549/DDP细胞内MRP、P-gp mRNA转录水平下降(P<0.05),且呈浓度及时间依赖性.结论 LRP、MRP、P-gp、GST-π可能参与了A549/DDP细胞对顺铂的继发耐药,PJ34可能通过下调MRP、P-gp mRNA转录水平而间接增加顺铂对DNA的损伤.

    作者:韩柯;郝吉庆 刊期: 2016年第08期

  • 环耙明对M1型巨噬细胞分泌iNOS的影响

    目的 研究环耙明在巨噬细胞极化过程中的作用.方法 用100 ng/ml脂多糖(LPS)和20 ng/ml干扰素γ(IFN-γ)处理RAW264.7 24 h刺激成M1型巨噬细胞,用20ng/ml白介素-4(IL-4)处理RAW264.7 24 h刺激成M2型巨噬细胞,用荧光定量PCR(QPCR)法检测各分型中一氧化氮合成酶(iNOS)、CD86、精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206、GLi1、ptch1 mRNA水平的表达;用QPCR法、Western blot法、免疫荧光法检测加入环耙明后对M1型巨噬细胞分泌iNOS的影响.结果 M1型巨噬细胞高分泌iNOS、CD86、M2型巨噬细胞高分泌Arg-1、CD206(P<0.01);40 nmol/L环耙明刺激后,M1型巨噬细胞中ptch1 mRNA水平的表达明显增强且在100 nmol/L时达到大值(P<0.01);经环耙明1 000nmol/L刺激后有效降低了iNOS的mRNA和蛋白水平,可能提示环耙明会促进巨噬细胞向M2型巨噬细胞分化.结论 环耙明能够明显地降低M1型巨噬细胞中iNOS的分泌.

    作者:叶家宝;李俊;徐晓军;黄成;孟晓明 刊期: 2016年第08期

  • SETDB1在乳腺癌中的表达及对癌细胞株增殖和迁移能力的影响

    目的 研究组蛋白甲基化酶SETDB1在乳腺癌中的表达情况及对其癌细胞株增殖和迁移能力的影响.方法 采用RT-PCR、Western blot和IHC方法检测38例乳腺癌与癌旁组织及癌细胞株中SETDB1的表达水平;采用稳定转染方法筛选出沉默SETDB1基因的克隆细胞株,采用CCK-8、软琼脂克隆形成及流式细胞术检测沉默SETDB1后对肿瘤细胞增殖能力的影响;采用Transwell方法检测沉默后对肿瘤细胞迁移能力的影响.结果 38例乳腺癌与癌旁组织中23例癌组织、13例癌旁组织阳性表达(P<0.05),SETDB1的mRNA水平相对表达量分别为(1.20 ±0.08)、(0.96±0.05)(=2.44,P<0.05);沉默T47D中SETDB1基因后,GFP、sh2、sh4株形成克隆个数分别是(70.00±2.00)、(42.67±1.53)和(13.33±1.53)个(F=834.00,P<0.001);细胞周期中sh2株出现了G0/G1期阻滞,而sh4株出现了G2/M期阻滞(P< 0.01);48 h穿膜个数分别是(54.25±1.71)、(16.50±1.29)、(9.00 ±0.82)个(F=1344.00,P<0.001).结论 SETDB1在乳腺癌中高表达,沉默该基因可影响癌细胞株的增殖和迁移能力,有望作为乳腺癌诊断及治疗的新靶点.

    作者:王小利;许德英;刘刚;常永超 刊期: 2016年第08期

  • 结直肠癌组织中Id-1表达、临床意义及预后分析

    目的 研究结直肠癌组织中DNA结合分化抑制蛋白1(Id-1)蛋白表达情况及与结直肠癌患者预后的相关性.方法 收集手术切除的结直肠癌和正常黏膜组织各50例,应用免疫组化SP法检测结直肠癌及正常黏膜组织中Id-1的表达,分析其与临床各病理因素的相关性;结合随访资料,应用Kaplan-Meier法和Log-rank检验分析Id-1的表达与结直肠癌患者生存的相关性;并建立Cox回归模型评估Id-1及各临床病理因素与患者预后的相关性.结果 结直肠癌组织中Id-1表达阳性率为72.00%(36/50)明显高于正常黏膜组织的24.00% (12/50)(x2=23.431,P=0.000);Id-1的表达与肿瘤浆膜浸润(x2 =4.521,P=0.034)、肿瘤TNM分期(x2=7.044,P=0.008)、淋巴结转移(x2=15.253,P=0.000)、肝转移(x2=8.333,P=0.003)、脉管浸润(x2=4.079,P=0.043)明显相关;死亡患者Id-1的表达程度为85.19%,明显高于生存患者的56.52%(x2=5.062,P=0.025);Id-1表达水平与结直肠癌患者预后明显相关(RR=1.193,P=0.002).结论 Id-1在结直肠癌组织中呈高表达,与结直肠腺癌的发生、侵袭有较高的相关性,且与患者生存期显著相关,是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素.

    作者:武雪亮;王立坤;薛军;杨东东;屈明;郭飞;杨瑞敏;刘博;李青 刊期: 2016年第08期

  • ESM-1乳腺癌组织中的表达及其临床意义

    目的 研究内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)作为敏感的分子标志物对乳腺癌预后的预测及复发的判断.方法 选取133例乳腺癌患者石蜡标本,进行癌组织和癌旁组织切片,采用免疫组化法研究ESM-1蛋白的表达,分析ESM-1与肿瘤生物学行为及患者预后之间的关系.结果 ESM-1的表达在乳腺癌组织中弱,而在癌旁组织中强;在分期早的肿瘤中表达高于分期晚的肿瘤.ESM-1和乳腺癌的预后有着密切的关系,在腋窝转移阳性患者中ESM-1表达低于腋窝阴性患者且差异有统计学意义(P<0.05),人类表皮生长因子受体2(HER-2)过表达患者中ESM-1的表达低于HER-2无扩增患者,差异有统计学意义(P<0.05),其他相关因素差异无统计学意义.结论 ESM-1可以成为判断乳腺癌患者预后的一个分子标志物,ESM-1在组织中的高表达往往预示着该患者有较好的预后和长期的生存.

    作者:颜蕴文;徐晓军;陈樱;张素梅;汪渊;张敬杰 刊期: 2016年第08期

  • miRNA21抑制剂对食管癌细胞凋亡的影响

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    作者:李红霞;李玉芝;高峻峰;刘思涵;葛磊;鲍扬漪;汪正广 刊期: 2016年第08期

  • 以激素为主联合抗生素治疗血白细胞升高突发性耳聋

    目的 分析血白细胞计数水平与以激素为主传统治疗方案治疗突发性耳聋(SSNHL)疗效的关系.探讨抗生素的使用对白细胞计数升高的SSNHL患者疗效的影响,并研究白细胞计数升高SSNHL患者的发病机制.方法 选取SSNHL患者102例.按照入院血常规检查结果分为白细胞计数正常组与白细胞计数升高组,白细胞计数正常患者61例采用以激素为主的传统治疗,将白细胞计数升高组患者随机分为两组,19例采用以激素为主的传统治疗,22例采用激素为主的传统治疗联合抗生素治疗,通过比较治疗前后纯音听阈结果,探讨3组疗效差异.结果 激素为主的传统治疗方案总有效率为62.5%,白细胞计数正常患者有效率为68.9%,而白细胞计数升高患者有效率为42.1%,组间差异有统计学意义(P<0.05).白细胞计数升高患者,采用激素为主的传统治疗联合抗生素治疗的有效率(72.7%)高于单纯以激素为主的传统治疗(42.1%),组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 细菌感染可能与白细胞计数升高SSNHL的发病有关.白细胞计数水平可为临床用药方案的选择提供依据.

    作者:周启瑞;杨见明;吴净芳;宋杨;朱永军;曹卫;陈会 刊期: 2016年第08期

  • 肠出血性大肠杆菌z4832基因缺失突变株的构建

    目的 利用Red重组系统的同源重组功能,敲除肠出血性大肠杆菌O157∶H7 (EHEC O157∶H7)的乙酰转移酶基因z4832,构建z4832基因缺失突变株.方法 EHECO157∶H7的基因组作为模板,PCR扩增目的基因两侧的同源臂序列;将上下游同源臂连接于pUC19-kana质粒上卡那霉素(kana)抗性基因的两端;PCR扩增获得中间嵌合卡那霉素抗性基因的同源臂线性片段,利用质粒pKD46介导的重组技术敲除z4832基因,利用pCP20质粒介导的重组技术去除抗性标记.PCR扩增及DNA测序验证目的基因缺失后,测定突变株及野生株的生长曲线,检测在抗菌药物氧氟沙星中的存活率.结果 成功构建EHEC O157∶H7 z4832基因缺失突变株.z4832缺失突变株生长速度与野生株差异无统计学意义,但在含氧氟沙星的LB培养基中突变株存活率升高(P<0.05),在含氧氟沙星的M9培养基中存活率下降(P<0.05).结论 构建z4832缺失突变株,研究z4832与肠出血性大肠杆菌耐药性之间的关系,为进一步研究乙酰转移酶在EHEC O157∶H7中的作用机制奠定了基础.

    作者:谭林林;王建新;李涛;王慧 刊期: 2016年第08期

  • 妊娠妇女TSH、FT4及FT3正常参考值研究

    选择产检的孕妇进行血清甲状腺激素(TSH)、血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、血清游离甲状腺素(FT4)检测,并随访其妊娠结局.其中正常早期妊娠孕妇207例,中期妊娠孕妇791例,晚期妊娠孕妇196例.结果显示TSH、FT3、FT4服从正态分布.正常妊娠妇女妊娠早、中、晚期TSH均数分别为:2.29、2.44、2.47 mlU/L,双侧95%参考值范围为1.93 ~ 2.84、2.35 ~ 2.54、2.24~2.69 mIU/L.正常妊娠妇女妊娠早、中、晚期FT4均数分别为:1.32、1.26、1.01 ng/dl,双侧95%参考值范围为0.95~1.67、1.00~ 1.52、0.95 ~1.06 ng/dl.正常妊娠妇女妊娠早、中、晚期FT3均数分别为:2.75、2.63、2.51 pg/ml,双侧95%参考值范围为2.61~2.96、2.59 ~2.68、2.39 ~2.61 pg/ml.提示妊娠期甲状腺功能参考值与非孕期有一定差异,不同地区建立不同妊娠参考值对诊断妊娠期甲状腺疾病可能更合理.

    作者:朱凤琴;吕发辉;吴艳;凤林;何金芳;黎琼 刊期: 2016年第08期

  • 中国人群中Hsp90AB1基因多态性和SLE发病的关联研究

    目的 探讨Hsp90AB1基因多态性与中国汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)发病之间的关系.方法 对278例SLE患者和278例正常对照者采用病例对照研究.HapMap数据库和Haploview软件筛选出中国人群Hsp90AB1基因标签SNPs,采用Multiplex SNaPshot技术进行基因分型.运用SPSS 10.01软件进行统计分析.应用在线软件进行单倍型统计分析.结果 rs9367190位点的基因型(CC、CA、AA)的频率在SLE组与对照组分布差异无统计学意义(P>0.0125),而等位基因C、A的频率在SLE组与对照组分布差异有统计学意义(P<0.0125);采用显性模型(CCvs CA+AA:校正OR=0.649,95% CI:0.464~0.908,P=0.012)分析结果差异有统计学意义,但隐性模型分析结果差异无统计学意义(P >0.012 5).而rs13296位点的基因型GG、GA、AA的频率以及其等位基因G、A频率在SLE组与对照组的分布均差异无统计学意义(P>0.0125);显性模型和隐性模型分析结果差异均无统计学意义(P >0.012 5).单倍型A/G与SLE发病之间存在关联(OR=0.668,95% CI:0.512~0.871,P=0.003).结论 在中国人群中Hsp90AB1基因多态性(rs9367190)可能和SLE发病关联.

    作者:谷园园;邹延峰;徐建华;胡华青;孙秀秀;陶金辉;徐胜前;刘爽;王德光 刊期: 2016年第08期

  • 受体相互作用蛋白激酶1在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

    目的 探讨受体相互作用蛋白激酶1(RIPl)蛋白在食管鳞癌中的表达情况及临床意义.方法 应用Western blot法和免疫组织化学法检测并且分析100例食管鳞癌患者的癌组织、相应癌旁组织和对应正常黏膜组织中RIP1的表达情况.结果 71%食管鳞癌组织中RIP1蛋白的表达水平高于对应癌旁组织和正常黏膜组织,20%食管鳞癌癌旁组织RIP1蛋白的表达水平高于对应癌组织和正常食管黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05).食管鳞癌组织中高表达的RIP1蛋白水平与其TNM分期、病理分级、有无淋巴结转移有关(P<0.05),与性别、年龄无关.癌旁组织中高表达的RIP1蛋白水平与肿瘤浸润深度、TNM分期有关(P<0.05),与性别、年龄、有无淋巴结转移及病理分级无关.结论 RIP1蛋白在食管鳞癌中的高表达可能与肿瘤的病理分级、TNM分期及预后有关,对于食管鳞癌的发生发展有一定的预测作用.

    作者:崔凯;耿慧武;姬强;朱克超;卢晨;夏杰;刘晓颖;于在诚 刊期: 2016年第08期

安徽医科大学学报杂志

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