朱兆锋；汪永；浦卉；马慧娟；汪凯；李寿玲
目的：研究安徽省汉族人氨基糖苷类抗生素致耳聋( AAID)患者基因突变与其非综合征性耳聋( NSHL)的关系,建立口腔黏膜细胞基因组DNA新一代基因测序法( NGS)。方法由122例NSHL患儿及120例健康儿童,取得口腔黏膜基因组DNA,应用NGS对GJB2、12S rRNA 基因测序。结果口腔黏膜细胞的基因组DNA质量较好,能满足NGS 研究需要；在122例NSHL患者中,28例GJB2基因突变,占耳聋患者的22．95%；10例12S rRNA基因突变,占耳聋患者的8．20%。120例健康儿童中,未发现基因突变( P <0．01)。结论口腔黏膜细胞基因组DNA 的NGS检测法能用于检出安徽省汉族人 AAID 基因突变；在安徽 NSHL 患者中GJB2、12S rRNA基因突变有其一定的特点,能对安徽省汉族人AAID基因突变研究提供帮助。
作者：徐彬；余元勋；王迎新；李建平；刘萍；张立 刊期： 2016年第11期
白癜风是一种常见的色素脱失性疾病，以皮肤或黏膜色素减退为特征。依据欧洲、日本、沙特阿拉伯、中国的诊疗指南，对白癜风患者进行分期、分型、分部位论证，其治疗方法主要有外用激素、钙调磷酸酶抑制剂、光疗和手术移植等。白癜风的治疗仍是一大难题，目前认为联合疗法治疗白癜风为有效。
作者：鲁功荣(综述)；许爱娥(审校) 刊期： 2016年第11期
目的：研究ILK抑制剂QLT0267对转分化人晶状体上皮细胞( HLECs) E-钙黏蛋白( E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、磷酸化Akt( p-Akt)和磷酸化糖原合酶激酶-3β( p-GSK3β)的影响,探讨ILK介导Akt信号通路在HLECs转分化的作用。方法选择传3代HLECs进行实验,实验分三组：TGF-β2组加入含有浓度为100 ng/L的TGF-β2培养基,ILK抑制剂组加入10 nmol/L QLT0267预处理1 h后,再加入浓度为100 ng/L TGF-β2培养基培养48 h,对照组加入无血清培养基。 Western blot法检测HLECs E-cadherin、α-SMA、p-Akt和 p-GSK3β的变化。采用免疫荧光技术检测HLECs E-cadherin、α-SMA、p-Akt、p-GSK3β的表达。结果与对照组比较,TGF-β组E-cadherin表达减弱,α-SMA、p-Akt和p-GSK3β的表达增强,差异有统计学意义。与TGF-β组比较,ILK抑制剂组α-SMA、p-Akt 和 p-GSK3β表达明显减弱,E-cadherin的表达明显增强,差异有统计学意义( F =12．325、17．686、8．547、6．812,P <0．001),QLT0267部分逆转TGF-β诱导的 HLECs α-SMA、p-Akt、p-GSK3β和 E-cad-herin的表达。结论 ILK介导Akt信号通路参与TGF-β2诱导的HLECs转分化过程,QLT0267通过特异性结合ILK,影响下游信号的传导,降低了HLECs的转分化。 ILK介导Akt信号通路可能在后囊膜混浊过程中发挥重要作用。
作者：朱玉广；朱艳；孙宝琪；陈晨；李珺；李霞 刊期： 2016年第11期
目的：建立大鼠脂肪间充质干细胞( ADSCs )体外分离培养和细胞标记的方法，探讨CM-DiI标记ADSCs在体外传代示踪的可行性。方法无菌切取SD大鼠腹股沟脂肪组织，运用酶原消化并差速贴壁的方法获取原代细胞并进行传代培养。观察细胞形态，对第3代ADSCs进行细胞表型鉴定和成骨成脂分化能力鉴定。采用 CM-DiI标记第3代ADSCs并进行传代培养，荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察荧光标记情况，流式细胞仪检测标记率。结果 AD-SCs呈长梭形、漩涡样生长，传代后细胞生长增殖速度加快。流式细胞仪检测结果显示 CD29、CD90阳性表达， CD34、CD45、CD31阴性表达。茜素红和油红O染色显示ADSCs具有成骨成脂分化潜能。 CM-DiI标记的红色荧光存在于细胞膜和细胞质，不存在于细胞核，传代培养后荧光有所衰减，第3、6、9代的荧光标记率分别为97．09%、66．21%和37．86%。结论大鼠ADSCs的生长增殖能力强，具有多向分化潜能，采用CM-DiI标记ADSCs简单易行且示踪效果良好，可为后期体内实验提供依据。
作者：周虹；郭杏；李丹；高小春；熊爱兵；谭美云 刊期： 2016年第11期
目的：研究肝硬化腹水患者并发自发性细菌性腹膜炎( SBP)的多种危险因素,为临床早期诊断和预防提供依据。方法回顾性分析肝硬化腹水患者184例,其中78例并发SBP(SBP组),106例未并发SBP(非SBP组),收集相关临床资料,对可能影响SBP发生的因素进行单因素分析及多因素Logistic回归模型分析。结果单因素分析结果显示SBP病史、血清总胆红素水平、Child-pugh评分、凝血酶原时间、血钠水平、合并肝性脑病6个因素在两组患者间比较差异均有统计学意义( P<0．05)。将有意义的单因素进一步行Logistic回归分析,结果表明SBP病史、血清总胆红素水平、血钠水平是肝硬化腹水并发SBP的独立高危因素。结论 SBP病史、血清总胆红素水平、血钠水平是肝硬化腹水患者并发SBP的独立危险因素,对有这些高危因素的肝硬化腹水患者,应高度警惕SBP的发生。
作者：张毅；孔德润 刊期： 2016年第11期
目的：根据活化蛋白激酶C受体1( RACK1)的蛋白结构，构建其缺失突变体的真核表达质粒，研究RACK1缺失突变体在真核细胞内的表达及定位改变。方法根据RACK1蛋白的结构域特点，以 pcDNA3．1-RACK1-FLAG 为模板，构建真核表达质粒pcDNA3．1-RACK1(51-317)-FLAG、pcDNA3．1-RACK1(93-317)-FLAG、pcDNA3．1-RACK1(135-317)-FLAG、pcDNA3．1-RACK1(180-317)-FLAG、pcDNA3．1-RACK1(219-317)-FLAG；Western blot检测上述重组质粒在HEK 293T细胞中的表达；免疫荧光技术检测RACK1的各缺失突变体在COS7细胞中的定位情况。结果成功构建了RACK1各缺失突变体的真核表达质粒；Western blot结果表明，除pcDNA3．1-RACK1(219-317)-FLAG外，其余缺失突变体在 HEK 293T 细胞中均有效表达；免疫荧光实验表明RACK1缺失突变体在COS7细胞中主要定位在胞质，细胞核中也有少量分布。结论成功构建了RACK1缺失突变体真核表达质粒，并在 HEK 293T和 COS7细胞中成功表达；在COS7细胞中不同缺失突变体的表达定位均有差异，与野生型的RACK1相比也有所不同，表明缺失不同的结构域后其在细胞中的定位表达也发生了改变。这为研究RACK1各结构域的功能提供了重要依据。
作者：朱亮亮；韩卢；王蓓华；耿慧武；潘林鑫；刘晓颖；范礼斌 刊期： 2016年第11期
回顾性分析67例行窄带成像技术联合放大内镜( NBI-ME)进行胃部病变检查的患者内镜资料。患者均经白光内镜检查疑为恶性病变者，后进一步行NBI-ME并靶向活检。终患者接受内镜下切除或手术切除，以术后病理结果为金标准，分析比较两次活检结果在早期胃癌诊断中的诊断准确率。终诊断胃炎1例，低级别上皮瘤变8例，高级别上皮瘤变24例，早期胃癌34例。白光内镜活检及NBI-ME靶向活检的敏感性、特异性及准确率分别为48．28%、88．89%、53．73%及72．41%、77．78%、73．13%。 NBI-ME靶向活检诊断早期胃癌的敏感性及准确率明显高于白光内镜活检(P<0．05)，两者特异性差异无统计学意义(P>0．05)。诊断阳性率与性别、年龄、病变位置、肉眼分型无关。故对于白光内镜下疑似恶性病变，需结合NBI-ME进行靶向活检病理检查，有助于提高早期胃癌的检出率。
作者：江婷婷；王亚雷 刊期： 2016年第11期
制备阴性对照病毒转染的传代神经干细胞( NSCs ),同期制作大鼠脊髓损伤模型,随机分为实验组、假手术组、空白组,并对其进行术后行为学评分。3d后取实验组再次手术,尾静脉输注已用阴性对照病毒标记的大鼠NSCs浓缩液。于1周和6周时对假手术组、实验组大鼠行10%福尔马林灌注,以固定的大鼠脊髓段落,福尔马林浸泡存放去除的脊髓段1 d,石蜡包埋后切片。获得大量尚未分化、悬浮生长的NSCs球。完成NSCs的传代。实验组的行为学评分结果比假手术组分值高。实验组大鼠脊髓损伤区脊髓空洞体积较假手术组小。初步证明注射NSCs液的大鼠恢复速度高于假手术组和空白组,NSCs移植能够减小脊髓损伤处的空洞体积和促进血管生长,从而促进脊髓损伤后神经功能的恢复。
作者：杜宁；陈志；申才良；张峰；宋旆文 刊期： 2016年第11期
目的：研究金丝桃苷( Hyp)对大鼠脑基底动脉舒张作用及可能的作用机制。方法采用微血管张力测定仪检测Hyp对血栓素A2受体激动剂( U46619)和KCl预收缩的大鼠脑基底动脉环的舒张作用；研究去内皮、大电导钙激活钾通道( BKCa )阻断剂、蛋白激酶C( PKC)激动剂或抑制剂对其血管舒张作用的影响。结果 Hyp(10-5~10-3 mol/L)浓度依赖性地舒张U46619(10-7 mol/L)和KCl(60 mmol/L)预收缩的大鼠脑基底动脉(P<0．001)；去除内皮后,Hyp的舒张血管作用减弱(P<0．01)；BKCa阻断剂(IBTX,10-7 mol/L)、PKC激动剂( PMA,3×10-7 mol/L)均能抑制Hyp的舒血管作用(P <0．01,P <0．001)；而 PKC 阻断剂(Bis-1,3×10-6 mol/L)能促进Hyp的血管舒张作用(P<0．05)。结论Hyp对大鼠脑基底动脉有舒张作用,其作用机制可能与激活BKCa通道、抑制PKC有关。
作者：丁兰；陈志武；郭岩 刊期： 2016年第11期
取90 g SPF级SD大鼠的双后肢骨髓，分别使用直接贴壁法和密度梯度离心法获得大鼠骨髓单个核细胞，用内皮培养体系EGM-2培养基进行定向诱导分化7~14 d获得大鼠内皮祖细胞。免疫荧光染色和细胞功能学鉴定内皮祖细胞，观察内皮祖细胞出现的时间和数量， CCK-8法鉴定细胞的增殖能力。与密度梯度离心法相比，直接贴壁法在内皮祖细胞出现的时间、数量和增殖能力差异有统计学意义(P<0．01)。因此，相对于密度梯度离心法，直接贴壁法培养出的内皮祖细胞分化时间更短、数量更多且增殖能力更强。
作者：方晓；王康康；高维陆；张辉；尹宗生 刊期： 2016年第11期
目的：观察载脂蛋白E基因敲除( ApoE KO)对小鼠海马CA3区神经元形态结构改变以及微管相关蛋白2(MAP-2)表达的影响。方法10只野生型C57BL/6J小鼠为对照组,10只ApoE基因敲除小鼠为KO组,普通饲料喂养3个月。采用分光光度计检测血脂变化；取两组小鼠脑组织,HE染色和电镜技术观察海马CA3区结构改变,免疫组织化学技术观察两组小鼠海马CA3区MAP-2表达变化,采用计算机图像分析系统检测其平均光密度( MOD)值。结果与对照组比较,KO 组小鼠血浆总胆固醇、血浆三酰甘油、低密度脂蛋白含量明显升高(P <0．05,P <0．01)。光镜下, KO 组小鼠海马CA3区锥体细胞较小,排列稀疏松散。电镜下,KO 组海马神经元内线粒体肿胀变性,嵴消失；神经纤维髓鞘松懈；突触小泡数量减少,突触间隙模糊等。免疫组织化学结果显示,对照组小鼠海马神经元内MAP-2高表达, KO 组含量明显减少；图像分析显示KO 组CA3区MAP-2 MOD 值明显降低(P <0．05)。结论 ApoE KO 小鼠海马神经元结构出现病理改变,MAP-2表达下降,提示ApoE KO 与神经退行性病变有一定联系。
作者：季丹；黄大可；桂丽；贾雪梅 刊期： 2016年第11期
目的：探讨控制性低中心静脉压对精准肝脏切除手术患者术中出血量和术后转归的影响。方法择期行精准肝脏切除手术患者40例,随机分成对照组和低中心静脉压( LCVP)组。 LCVP组患者在肝脏切除期间通过调节体位、药物控制等方法维持中心静脉压( CVP)≤0．49 kPa,对照组CVP不予干预。于麻醉诱导前5 min ( T0)、肝脏切除前5 min(T1)、肝脏切除后5 min(T2)、手术结束时(T3)行动脉血气分析,记录术中出血量、补液量等指标,观察术后胃肠功能恢复时间、术后并发症发生情况及术后住院时间等。结果两组患者基本资料比较差异无统计学意义。与对照组比较,LCVP 组术中补液量明显减少(P <0．05),术中尿量明显增多(P <0．05),出血量差异无统计学意义。两组患者血气分析、术后胃肠功能恢复时间、术后住院时间及术后并发症发生率比较差异无统计学意义。结论控制性低中心静脉压未能显著减少精准肝脏切除手术患者术中出血量,对术后转归亦无明显影响。
作者：王雷；张雷；刘训芹；陈立建；郑立东；顾尔伟 刊期： 2016年第11期
将64例用子宫颈扩张双球囊引产的足月双胎妊娠初产妇作为研究组，将同时期随机抽取的64例以同样方法引产的足月单胎妊娠初产妇作为对照组，比较两组的引产结局。用Logistic回归分析对引产后剖宫产分娩的影响因素进行分析。两组产妇的促宫颈成熟情况、引产时间、阴道分娩率比较，差异无统计学意义；两组母儿结局比较，差异无统计学意义。 Logistic回归分析结果显示双胎妊娠不是引产后剖宫产分娩的危险因素。与单胎妊娠相比，子宫颈扩张双球囊在双胎妊娠引产中达到了相同的引产效果，且没有增加母儿不良结局，值得临床上进一步推广。
作者：彭芳林；郑剑兰；王丽娜；汪文雁；田秀秀；张小琼；马钦玲；余水兰 刊期： 2016年第11期
目的：应用三维斑点追踪成像(3D-STI)技术分析化疗对肺癌患者左室心肌收缩功能的影响。方法追踪观察54例拟行化疗的肺癌患者,分别采集化疗前、化疗3个周期、化疗6个周期三个时点的常规超声心动图数值和3D-STI应变参数,应用后者获得左心室整体面积应变( GAS)、整体纵向应变( GLS )、整体圆周应变( GCS )、整体径向应变( GRS)等参数,对上述参数进行比较分析,并应用受试者工作特征( ROC)曲线评价三维应变参数对诊断心脏毒性的应用价值。结果化疗6个周期组GAS、GLS、GCS明显低于化疗前组、化疗3个周期组(P <0．05),化疗3个周期组GAS、GLS明显低于化疗前组( P<0．05)；ROC曲线显示,左心室GAS的曲线下面积为0．947,以-30．2%为截断值时,判断化疗药物对左室功能损害的特异性为91．2%,敏感性为85．0%。结论 GAS检出化疗药物对肺癌患者心脏毒性的特异性、敏感性较高,3D-STI可早期检测化疗药物对肺癌患者的心脏毒性损害,具有较高的临床参考价值。
作者：陈娜；郑慧；周旺；李朝密；许芳芳；胡莉莉；陆友金 刊期： 2016年第11期
目的：探讨T细胞免疫球蛋白及黏蛋白家族-3( Tim 3)对poly( I ∶ C)活化的小鼠肝Kupffer细胞调节作用并探讨其相关机制。方法将真核表达质粒pcDNA3．1-Tim 3转染小鼠肝Kupffer细胞,以Realtime PCR和Western blot法验证Tim 3在小鼠肝Kupffer细胞的表达。通过ELISA法检测质粒pcDNA3．1-Tim 3,并使用Tim 3阻断型抗体和核转录因子kappa B(NF-κB)抑制性配体对 poly(I ∶ C)活化的小鼠肝Kupffer细胞因子[肿瘤坏死因子-α( TNF-α)、白介素-1β( IL-1β)、白介素-6(IL-6)]产生影响,Western blot法检测NF-κB p65、IκBα蛋白表达。结果 Tim 3抑制小鼠肝Kupffer细胞分泌炎性因子 TNF-α、IL-6、IL-1β, Western blot 结果显示其降低小鼠肝Kupffer细胞NF-κB p65蛋白和提高IκBα蛋白表达。结论 Tim 3通过NF-κB通路参与了poly( I：C)诱导小鼠肝Kupffer细胞活化的调节。
作者：牛坚；王月；王人颢；刘斌 刊期： 2016年第11期
目的：观察重组抗人表皮生长因子受体人源化单克隆抗体注射液(MIL41)对Her2高表达人乳腺癌细胞体内外的抑制作用。方法通过流式细胞仪分析人乳腺癌细胞Bcap37中Her2受体的表达量， CCK8法测定MIL41在体外对乳腺癌细胞Bcap37生长的抑制作用；在体内研究中采用人乳腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立评价MIL41对肿瘤生长的抑制作用。结果体外实验表明 Bcap37为 Her2受体过表达的人乳腺癌细胞， CCK8法检测结果显示MIL41对受试细胞Bcap37的生长有较强抑制作用。体内实验表明受试药MIL41对受试的人乳腺癌细胞Bcap37的裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制效应，同时呈现出良好的浓度依赖关系。分别给予3、6、12 mg/kg不同浓度的受试药，其瘤体积抑制率分别为33．7%、47．8%、59．0%，瘤重抑制率分别为29．6%、44．7%、55．6%。结论 MIL41对Bcap37人乳腺癌细胞在体内外的生长有较强的抑制作用。
作者：曹玉婷；王珊珊；杨德宣；李琳娜；袁守军 刊期： 2016年第11期
回顾性分析同期完成的尸体与活体供肾移植术前微量淋巴细胞毒( CDC)交叉配型实验检测结果与术后临床效果的内在关系。尸体供肾移植组术前CDC检测结果相对于活体供肾移植组显著增高(P<0．05)，术后受者死亡/肾丢失、排斥反应/延迟恢复发生率，尸体供肾移植组显著高于活体供肾移植组( P <0．05)。移植后在出现受者死亡/肾丢失、排斥反应/延迟恢复以及肺部感染这些不良事件时，尸体供肾移植组CDC检测结果在9%以上或者活体供肾移植组在4%以上的占比均显著高于未发生临床不良事件，两种不同来源的肾脏移植都应尽可能的选择术前CDC检测结果偏低的受者进行移植。
作者：钟涛；廖贵益；许伟；程越；胡海亮；张循善；卞茂红 刊期： 2016年第11期
脊髓损伤的治疗已经成为当前医学研究的热点之一。但是，由于脊髓损伤后神经通路再形成和重建的复杂性，使目前所取得的实际疗效仍然不乐观。振荡电场刺激在促进神经再生方面具有其独特的优势，并被逐渐应用于脊髓损伤的治疗。振荡电场是使直流电场的极性每隔15 min反转1次，在阳极造成脊髓轴突退化之前将其电极转化成阴极，从而促进脊髓轴突的双向生长。现就振荡电场刺激在脊髓损伤治疗应用中的研究进展进行综述。
作者：黄先甲；张坤坤(综述)；钱军；荆珏华(审校) 刊期： 2016年第11期
目的：研究真核细胞翻译起始因子2AK2(EIF2AK2)蛋白对Nod样受体蛋白3( NLRP3)炎症体激活及细胞分泌IL-1β的影响。方法在HEK-293细胞中，通过转染凋亡相关斑点样蛋白( ASC)、NLRP3、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和促白细胞介素-1β(pro-IL-1β)基因构建NLRP3炎症体，并检测EIF2AK2蛋白过表达对细胞分泌炎症性细胞因子IL-1β的影响；通过免疫共沉淀研究EIF2AK2蛋白和NLRP3蛋白相互作用。后在人单核THP-1细胞中通过siRNA干扰验证EIF2AK2对IL-1β分泌水平的影响。结果在 HEK-293细胞中，过表达 EIF2AK2蛋白能激活NLRP3炎症体后诱导细胞分泌IL-1β，并且IL-1β分泌水平随EIF2AK2表达水平提高而增加。免疫共沉淀结果显示EIF2AK2蛋白能和NLRP3蛋白发生相互作用。 THP-1细胞中siRNA干扰抑制EIF2AK2表达后发现细胞分泌IL-1β减少。结论 EIF2AK2蛋白能调控NLRP3炎症体的激活从而影响细胞分泌促炎症因子IL-1β。
作者：鞠小丽；王强 刊期： 2016年第11期
收集经荧光素钠眼底血管造影( FFA)、相干光断层扫描( OCT)检查确诊为渗出性老年性黄斑变性的25只眼为观察对象,所有患眼按3+PRN方案,接受10 mg/ml康柏西普0．05 ml玻璃体腔注射,行注射前后自身对照研究。采用糖尿病视网膜病变早期治疗研究视力表检查佳矫正视力( BCVA),OCT检查测量黄斑中心凹视网膜厚度( CRT)。对比分析治疗前后患眼BCVA、CRT的变化,同时观察随访期间眼部与全身不良反应情况。治疗后1、2、3个月及末次随访时患眼平均BCVA较治疗前提高,差异有统计学意义( t=4．27、6．43、7．75、7．36,P<0．05)；平均CRT较治疗前降低,差异有统计学意义( t =11．97、10．49、10．02、8．67, P <0．05)。随访期间未见与治疗相关的严重眼部并发症及全身不良反应。
作者：戴琰琰；蒋正轩；廖荣丰 刊期： 2016年第11期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
