马典庆;何义富;罗会芹;闫滢;李慧;陈文菊;吴书胜
目的:探讨T细胞免疫球蛋白及黏蛋白家族-3( Tim 3)对poly( I ∶ C)活化的小鼠肝Kupffer细胞调节作用并探讨其相关机制。方法将真核表达质粒pcDNA3.1-Tim 3转染小鼠肝Kupffer细胞,以Realtime PCR和Western blot法验证Tim 3在小鼠肝Kupffer细胞的表达。通过ELISA法检测质粒pcDNA3.1-Tim 3,并使用Tim 3阻断型抗体和核转录因子kappa B(NF-κB)抑制性配体对 poly(I ∶ C)活化的小鼠肝Kupffer细胞因子[肿瘤坏死因子-α( TNF-α)、白介素-1β( IL-1β)、白介素-6(IL-6)]产生影响,Western blot法检测NF-κB p65、IκBα蛋白表达。结果 Tim 3抑制小鼠肝Kupffer细胞分泌炎性因子 TNF-α、IL-6、IL-1β, Western blot 结果显示其降低小鼠肝Kupffer细胞NF-κB p65蛋白和提高IκBα蛋白表达。结论 Tim 3通过NF-κB通路参与了poly( I:C)诱导小鼠肝Kupffer细胞活化的调节。
作者:牛坚;王月;王人颢;刘斌 刊期: 2016年第11期
目的:研究人EB病毒诱导的基因3(EBI3)及其突变体在哺乳动物细胞中的表达及定位差异及其原因。方法基于NCBI 数据库中人EBI3氨基酸的序列分析,利用分子克隆技术构建人EBI3真核表达质粒pcDNA3.1-EBI3-FLAG、单独包含氨基端或羧基端Ⅲ型纤连蛋白(FN3)结构域的缺失突变体的表达质粒pcDNA3.1-EBI3(1~135)-FLAG 和 pcDNA3.1-EBI3(125~230)-FLAG 以及第210位天冬氨酸(Asp)点突变体Asp210的表达质粒pcDNA3.1-EBI3-D210AFLAG; Western blot 方法检测EBI3及其突变体在HEK 293T 细胞中的表达;免疫荧光实验观察人EBI3及各突变体在 COS7细胞中的定位。结果成功构建了下游携带FLAG 标签的人EBI3及其突变体的真核表达质粒;Western blot 结果显示重组蛋白均能在HEK 293T 细胞中稳定表达;经激光共聚焦显微镜观察,EBI3及其缺失突变体在COS7细胞的表达位置发生明显变化。结论人EBI3及其突变体真核表达质粒均能在HEK 293T、COS7细胞中成功表达;人EBI3缺失突变体在COS7细胞中的定位发生明显变化,氨基端结构域可能在EBI3蛋白的正确定位中发挥重要作用;EBI3蛋白的第210位Asp 的突变影响了其在细胞内的定位。
作者:邢雪梅;耿慧武;潘林鑫;刘泽宇;姚亮;邓欢欢;刘晓颖;范礼斌 刊期: 2016年第11期
目的:探讨控制性低中心静脉压对精准肝脏切除手术患者术中出血量和术后转归的影响。方法择期行精准肝脏切除手术患者40例,随机分成对照组和低中心静脉压( LCVP)组。 LCVP组患者在肝脏切除期间通过调节体位、药物控制等方法维持中心静脉压( CVP)≤0.49 kPa,对照组CVP不予干预。于麻醉诱导前5 min ( T0)、肝脏切除前5 min(T1)、肝脏切除后5 min(T2)、手术结束时(T3)行动脉血气分析,记录术中出血量、补液量等指标,观察术后胃肠功能恢复时间、术后并发症发生情况及术后住院时间等。结果两组患者基本资料比较差异无统计学意义。与对照组比较,LCVP 组术中补液量明显减少(P <0.05),术中尿量明显增多(P <0.05),出血量差异无统计学意义。两组患者血气分析、术后胃肠功能恢复时间、术后住院时间及术后并发症发生率比较差异无统计学意义。结论控制性低中心静脉压未能显著减少精准肝脏切除手术患者术中出血量,对术后转归亦无明显影响。
作者:王雷;张雷;刘训芹;陈立建;郑立东;顾尔伟 刊期: 2016年第11期
目的:探讨Sir2对帕金森病( PD)转基因果蝇是否有神经保护作用及与线粒体未折叠蛋白反应( UPRmt )的相关性。方法选用Mhc-GAL4启动子,利用经典的GAL4-UAS系统构建Mhc-GAL4/UAS系统Pink1 B9 PD转基因果蝇模型,通过遗传干预使Sir2在Mhc-GAL4/UAS系统PD转基因果蝇运动神经元内过表达,观察Sir2过表达对果蝇运动神经元变性是否具有神经保护作用,然后通过 RNAi 技术抑制UPRmt相关基因热休克蛋白60(Hsp60)、GCN-2的表达,观察Sir2过表达对抑制果蝇运动神经元变性的作用,以及验证这种作用是否与UPRmt相关。结果 Sir2过表达明显抑制了PD转基因果蝇运动神经元变性,显著改善了果蝇运动能力,而在 UPRmt被抑制后, Sir2的保护作用明显减弱。结论Sir2对PD转基因果蝇具有神经保护作用,而这种神经保护作用与UPRmt相关。
作者:戚欣欣;肖志超;范晓丽;孙莉;李清华 刊期: 2016年第11期
目的:探讨合并慢性鼻塞的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者鼻阻塞与多导睡眠监测(PSG)的相关性。方法纳入经PSG诊断为OSAHS且合并慢性鼻塞的患者60例,对患者进行鼻阻力( RM)计和鼻声反射( AR)仪检查,获得150 Pa双侧鼻腔吸气总阻力( ITR)、双侧鼻腔呼气总阻力( ETR)、0~5 cm鼻腔容积( NCV)、鼻腔小横截面积( NMCA)参数数据,用Spearman法分析RM、AR各参数与PSG参数之间的相关性。结果 ETR与觉醒总次数( rs=0.353,P=0.006)、觉醒指数(AI)(rs =0.374,P=0.003)呈正相关性,与非动眼睡眠Ⅲ期和Ⅳ期时间百分比( N3+N4,%)(rs =-0.316,P=0.014)呈负相关性。 ETR值越大,觉醒总次数越多, AI值越高, N3+N4(%)值越低。纳入的RM、AR各参数与呼吸暂停低通气指数( AHI )、低血氧饱和度( LSaO2)、平均血氧饱和度( ASaO2)均未见明显相关性。结论在合并慢性鼻塞的OSAHS患者中,呼气鼻阻力增加可能是睡眠觉醒增加和睡眠结构紊乱的危险因素,鼻阻塞对呼吸暂停指数无明显影响作用。
作者:席晨琛;汪银凤;许为青 刊期: 2016年第11期
目的:探讨磁共振成像( MRI)在宫颈癌和子宫内膜癌分期中的应用价值并分析MRI误判的可能原因。方法巴结转移时预测准确性明显下降。子宫内膜癌同时合并子宫肌瘤、子宫腺肌病、子宫内膜息肉、盆腔炎症,宫颈癌同时合并子宫肌瘤、宫颈息肉、盆腔炎症时误判可能性大。
作者:程允;朱颍 刊期: 2016年第11期
目的:观察内关穴联合足三里穴经皮穴位电刺激(TAES)对神经外科开颅手术患者术后恶心呕吐(PONV)发生率的影响。方法择期行开颅手术患者100例,随机分为对照组(50例)、TAES组(50例)。所有患者手术结束前静脉推注阿扎司琼10 mg,TAES组在术后电刺激双侧内关穴及足三里穴30 min。记录患者术后0~2、2~6、6~24及24 h内 PONV发生情况。结果100例患者中有92例患者完成并纳入实验。对照组和TAES组分别有24例(55.3%)和15例(33.3%)发生恶心呕吐。与对照组比较,TAES组术后0~2 h PONV的发生率差异无统计学意义,术后2~6、6~24及24 h内 PONV 的发生率降低,差异有统计学意义( P <0.05)。结论在常规治疗的基础上,内关穴联合足三里穴经皮穴位电刺激能进一步降低开颅手术患者PONV的发生率。
作者:殷国兵;李娟;康芳;黄祥;王瑞婷 刊期: 2016年第11期
目的:研究人参皂苷Rk3对肝癌HepG2细胞凋亡影响。方法体内实验采用HepG2细胞裸鼠腋部皮下接种,制备荷瘤鼠肝癌模型,分为生理盐水组、人参皂苷Rk3(25、50、100 mg/kg)组和5-氟尿嘧啶(5-Fu,20 mg/kg)组;体外实验分为正常组、人参皂苷Rk3(20、40、80μmol/L)组和5-Fu (50μg/ml)组;MTT法检测HepG2细胞增殖;流式细胞术检测HepG2细胞凋亡;RT-PCR法检测HepG2细胞中Bax、Bcl-2,cleaved-Caspase-3、DR4和 DR5 mRNA 表达;Western blot法检测HepG2细胞中 Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3、DR4和DR5蛋白表达。结果人参皂苷Rk3(100 mg/kg)够明显抑制瘤体重量( P<0.05);人参皂苷Rk3(20、40、80μmol/L )能明显抑制HepG2细胞增殖,诱导HepG2细胞凋亡;人参皂苷Rk3(20、40、80μmol/L)能显著增加Bax、cleved-Caspase-3、DR4和DR5蛋白和mRNA的表达,降低Bcl-2蛋白和mR-NA 的表达( P <0.05)。结论人参皂苷 Rk3可能通过DR4、DR5诱导HepG2细胞凋亡。
作者:范洁;张磊;王啸 刊期: 2016年第11期
目的:观察重组抗人表皮生长因子受体人源化单克隆抗体注射液(MIL41)对Her2高表达人乳腺癌细胞体内外的抑制作用。方法通过流式细胞仪分析人乳腺癌细胞Bcap37中Her2受体的表达量, CCK8法测定MIL41在体外对乳腺癌细胞Bcap37生长的抑制作用;在体内研究中采用人乳腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立评价MIL41对肿瘤生长的抑制作用。结果体外实验表明 Bcap37为 Her2受体过表达的人乳腺癌细胞, CCK8法检测结果显示MIL41对受试细胞Bcap37的生长有较强抑制作用。体内实验表明受试药MIL41对受试的人乳腺癌细胞Bcap37的裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制效应,同时呈现出良好的浓度依赖关系。分别给予3、6、12 mg/kg不同浓度的受试药,其瘤体积抑制率分别为33.7%、47.8%、59.0%,瘤重抑制率分别为29.6%、44.7%、55.6%。结论 MIL41对Bcap37人乳腺癌细胞在体内外的生长有较强的抑制作用。
作者:曹玉婷;王珊珊;杨德宣;李琳娜;袁守军 刊期: 2016年第11期
目的:通过比较双能量CT腹部能谱成像后,混合能量模式( Quality Check,140 kVp )与单能量模式( Mono,70 keV)重建图像的质量,选择适合临床应用的重建模式。方法应用双能量能谱CT(Discovery CT750HD),对60例受检者进行腹部平扫及双期增强扫描,分别采用混合能量模式及单能模式进行重建。测量并比较肝脏、脾脏、胰腺及腹腔脂肪的CT值,计算各组织器官的信噪比、对比噪声比,并以评分方法比较两组图像质量。结果单能量重建组中各器官的SNR、CNR均高于混合能量组( P<0.05),单能量重建组主观评分明显高于混合能量组( P<0.001)。结论单能量模式重建图像显著优于常规混合能量模式重建图像,可在临床中常规运用。
作者:韦炜;邓克学;赵英明;罗英姿 刊期: 2016年第11期
白癜风是一种常见的色素脱失性疾病,以皮肤或黏膜色素减退为特征。依据欧洲、日本、沙特阿拉伯、中国的诊疗指南,对白癜风患者进行分期、分型、分部位论证,其治疗方法主要有外用激素、钙调磷酸酶抑制剂、光疗和手术移植等。白癜风的治疗仍是一大难题,目前认为联合疗法治疗白癜风为有效。
作者:鲁功荣(综述);许爱娥(审校) 刊期: 2016年第11期
取90 g SPF级SD大鼠的双后肢骨髓,分别使用直接贴壁法和密度梯度离心法获得大鼠骨髓单个核细胞,用内皮培养体系EGM-2培养基进行定向诱导分化7~14 d获得大鼠内皮祖细胞。免疫荧光染色和细胞功能学鉴定内皮祖细胞,观察内皮祖细胞出现的时间和数量, CCK-8法鉴定细胞的增殖能力。与密度梯度离心法相比,直接贴壁法在内皮祖细胞出现的时间、数量和增殖能力差异有统计学意义(P<0.01)。因此,相对于密度梯度离心法,直接贴壁法培养出的内皮祖细胞分化时间更短、数量更多且增殖能力更强。
作者:方晓;王康康;高维陆;张辉;尹宗生 刊期: 2016年第11期
目的:建立人胃癌 SGC-7901/TCF7L2细胞株,观察其生物学特性。方法使用质粒稳定转染技术,获得高表达TCF7L2蛋白的胃癌细胞株 SGC-7901/TCF7L2及其空转对照组SGC-7901细胞株( SGC-7901/CON)。采用qRT-PCR和Western blot 法分别检测 SGC-7901/TCF7L2和 SGC-7901/CON两细胞株中的TCF7L2 mRNA和蛋白表达水平;光学显微镜下观察并比较两种细胞株的细胞形态;划痕实验比较两者的迁移能力;用细胞计数法分别检测两者对顺铂和卡铂的耐药情况;裸鼠体内荷瘤实验比较两者在体内成瘤的能力。结果经稳定转染技术成功建立稳定的SGC-7901/TCF7L2细胞株,其TCF7L2的mRNA和蛋白表达量均较SGC-7901/CON细胞株明显升高;光镜下SGC-7901/TCF7L2细胞形态较对照细胞形态多样,伪足增多,体积增大,胞质内颗粒物质增多;迁移能力和对铂类的耐受性较对照细胞明显增强;SGC-7901/TCF7L2细胞在小鼠体内的成瘤能力也明显增强。结论 TCF7L2可以增强人胃癌细胞株SGC-7901的恶性生物学特性,SGC-7901/TCF7L2细胞株的建立为胃癌发生发展机制研究及其靶向药物开发提供基础。
作者:付翠群;沈国栋;沈干;胡世莲 刊期: 2016年第11期
目的:应用三维斑点追踪成像(3D-STI)技术分析化疗对肺癌患者左室心肌收缩功能的影响。方法追踪观察54例拟行化疗的肺癌患者,分别采集化疗前、化疗3个周期、化疗6个周期三个时点的常规超声心动图数值和3D-STI应变参数,应用后者获得左心室整体面积应变( GAS)、整体纵向应变( GLS )、整体圆周应变( GCS )、整体径向应变( GRS)等参数,对上述参数进行比较分析,并应用受试者工作特征( ROC)曲线评价三维应变参数对诊断心脏毒性的应用价值。结果化疗6个周期组GAS、GLS、GCS明显低于化疗前组、化疗3个周期组(P <0.05),化疗3个周期组GAS、GLS明显低于化疗前组( P<0.05);ROC曲线显示,左心室GAS的曲线下面积为0.947,以-30.2%为截断值时,判断化疗药物对左室功能损害的特异性为91.2%,敏感性为85.0%。结论 GAS检出化疗药物对肺癌患者心脏毒性的特异性、敏感性较高,3D-STI可早期检测化疗药物对肺癌患者的心脏毒性损害,具有较高的临床参考价值。
作者:陈娜;郑慧;周旺;李朝密;许芳芳;胡莉莉;陆友金 刊期: 2016年第11期
目的研究精神分裂症患者的疼痛共情能力。方法选取42例精神分裂症患者和42例对照者,采用中文版人际反应指针量表(IRI-C)以及疼痛共情范式比较两组共情特质和疼痛共情能力。结果在IRI-C 上,患者组观点采择、想象力、同情性关心及IRI-C 总分均低于对照组,患者组判断疼痛图片的正确率低于对照组,判断疼痛和中性图片的反应时长于对照组,对疼痛图片评级得分低于对照组;患者组想象力、IRI-C 总分与对疼痛评级呈正相关性;疼痛判断任务的正确率与阴性症状得分呈负相关性、与IRI-C 总分呈正相关性。结论精神分裂症患者的疼痛共情能力存在缺陷。
作者:柏晓蒙;朱春燕;董毅;何孔亮;陈新贵;汪凯 刊期: 2016年第11期
目的:探讨同型半胱氨酸( Hcy)对实验性结肠炎大鼠结肠黏膜中可溶性血栓调节蛋白( sTM)、蛋白C( PC)、游离蛋白S( fPS)水平及血栓调节蛋白( TM)、内皮细胞蛋白C受体( EPCR) mRNA表达的影响。方法 SD大鼠分为正常组:组1[生理盐水(NS)皮下注射+NS灌肠]、组2(Hcy皮下注射+NS灌肠);TNBS模型组:组1(NS皮下注射+TNBS灌肠)、组2(Hcy皮下注射+TNBS灌肠)。实验结束时采用ELISA法检测大鼠结肠黏膜中sTM、fPS、PC水平,采用RT-qPCR法检测大鼠结肠黏膜中 TM、EPCR mRNA 的表达水平。结果与TNBS模型组1相比, TNBS模型组2大鼠血浆及结肠Hcy水平均显著增高,大鼠结肠黏膜中sTM、PC和fPS水平降低(P<0.05),大鼠结肠黏膜中TM、EPCR mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论 Hcy可以加重大鼠结肠炎症损伤,其机制可能是影响PC的抗炎与抗凝功能,引起肠道微循环血栓前状态。
作者:陈义;丁少桢;梅俏;刘晓昌;胡静;韩玮;许建明 刊期: 2016年第11期
目的:根据活化蛋白激酶C受体1( RACK1)的蛋白结构,构建其缺失突变体的真核表达质粒,研究RACK1缺失突变体在真核细胞内的表达及定位改变。方法根据RACK1蛋白的结构域特点,以 pcDNA3.1-RACK1-FLAG 为模板,构建真核表达质粒pcDNA3.1-RACK1(51-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(93-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(135-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(180-317)-FLAG、pcDNA3.1-RACK1(219-317)-FLAG;Western blot检测上述重组质粒在HEK 293T细胞中的表达;免疫荧光技术检测RACK1的各缺失突变体在COS7细胞中的定位情况。结果成功构建了RACK1各缺失突变体的真核表达质粒;Western blot结果表明,除pcDNA3.1-RACK1(219-317)-FLAG外,其余缺失突变体在 HEK 293T 细胞中均有效表达;免疫荧光实验表明RACK1缺失突变体在COS7细胞中主要定位在胞质,细胞核中也有少量分布。结论成功构建了RACK1缺失突变体真核表达质粒,并在 HEK 293T和 COS7细胞中成功表达;在COS7细胞中不同缺失突变体的表达定位均有差异,与野生型的RACK1相比也有所不同,表明缺失不同的结构域后其在细胞中的定位表达也发生了改变。这为研究RACK1各结构域的功能提供了重要依据。
作者:朱亮亮;韩卢;王蓓华;耿慧武;潘林鑫;刘晓颖;范礼斌 刊期: 2016年第11期
选取122例患者共124个肿块进行常规超声、声触诊组织量化( VTQ)、声触诊组织成像( VTI)检查及BI-RADS分级,得出肿块的剪切波速度值及平均光密度值,以病理结果为金标准,绘制ROC曲线,比较VTQ、VTI及声脉冲辐射力成像( ARFI)与BI-RADS分级联合这三种方法的诊断价值,评价ARFI在新版 BI-RADS 分级中的意义。经病理证实,124个乳腺肿块中恶性病灶50个、良性病灶74个。 VTQ的ROC曲线下面积( AUC)为0.900,所对应的界值为3.49 m/s,VTI的平均光密度值的 AUC 为0.923,所对应的界值为202.20。恶性病灶VTQ≥3.49 m/s个数为38,<3.49 m/s个数为12。良性病灶VTQ≥3.49 m/s个数为3,<3.49 m/s个数为71(P=0.000)。恶性病灶平均光密度值≥202.20的个数为45,<202.25的个数为5。良性病变平均光密度值≥202.20的个数为7,<202.25的个数为67(P=0.000)。三者联合方法在诊断乳腺肿瘤的敏感度(92.0%)、特异度(93.2%)、阳性预测值(88.5%)、阴性预测值(94.5%)、准确率(92.7%)及约登指数(0.917)。声脉冲辐射力成像联合超声BI-RADS分级诊断乳腺肿瘤有较高的应用价值。
作者:张杰;隋秀芳;王磊;叶磊;崔亚云 刊期: 2016年第11期
目的:研究重楼皂苷Ⅰ对低氧喉癌Hep-2细胞增殖及缺氧诱导因子-1α( HIF-1α)、血管内皮生长因子( VEGF )表达的影响。方法采用MTT法检测重楼皂苷Ⅰ对细胞增殖的影响,实时定量PCR( RT-PCR)法检测低氧条件下重楼皂苷Ⅰ对Hep-2细胞HIF-1α mRNA、VEGF mRNA表达的影响。采用 Western blot 法检测低氧条件下,重楼皂苷Ⅰ对Hep-2细胞 VEGF、HIF-1α、信号传导与转录激活因子3(STAT-3),磷酸化信号传导与转录激活因子3(p-STAT-3)蛋白表达的影响。结果重楼皂苷Ⅰ对低氧喉癌Hep-2细胞的增殖有抑制作用;其中,1.5、3、6μg/ml浓度组重楼皂苷Ⅰ可下调低氧Hep-2细胞HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达。同时,重楼皂苷Ⅰ抑制了STAT-3、p-STAT-3的表达。结论重楼皂苷Ⅰ能抑制低氧条件下喉癌Hep-2细胞增殖和HIF-1α、VEGF的表达,可能与其下调 STAT-3表达及抑制STAT-3的磷酸化有关。
作者:邓碧凡;廖敏;邱荣敏;高波;张云桂;马燕;龙剑文 刊期: 2016年第11期
回顾性分析67例行窄带成像技术联合放大内镜( NBI-ME)进行胃部病变检查的患者内镜资料。患者均经白光内镜检查疑为恶性病变者,后进一步行NBI-ME并靶向活检。终患者接受内镜下切除或手术切除,以术后病理结果为金标准,分析比较两次活检结果在早期胃癌诊断中的诊断准确率。终诊断胃炎1例,低级别上皮瘤变8例,高级别上皮瘤变24例,早期胃癌34例。白光内镜活检及NBI-ME靶向活检的敏感性、特异性及准确率分别为48.28%、88.89%、53.73%及72.41%、77.78%、73.13%。 NBI-ME靶向活检诊断早期胃癌的敏感性及准确率明显高于白光内镜活检(P<0.05),两者特异性差异无统计学意义(P>0.05)。诊断阳性率与性别、年龄、病变位置、肉眼分型无关。故对于白光内镜下疑似恶性病变,需结合NBI-ME进行靶向活检病理检查,有助于提高早期胃癌的检出率。
作者:江婷婷;王亚雷 刊期: 2016年第11期