张世杰；宋晓丹；马慧敏；朱春江；欧维琳；莫碧文
目的构建瑞替普酶(r-PA)融合蛋白的原核表达体系，并研究DsbA、DsbC、pKJE7、pGro7、pTf16等分子伴侣对其复性的影响。方法将r-PA基因克隆到表达载体质粒PET-32a中，通过异丙基硫代半乳糖苷( IPTG)诱导，在宿主菌E. coli BL21中进行表达。在复性时分别添加不同分子伴侣，研究不同分子伴侣对融合蛋白体外复性的影响。结果 SDS-PAGE和Western blot 结果表明 r-PA 融合蛋白正确表达，分子伴侣DsbA、pKJE7、pTf16对融合蛋白的复性有明显效果，体外溶圈实验表明复性后的r-PA具有纤溶活性。结论分子伴侣能有效帮助r-PA融合蛋白的复性。
作者：王伟；邹文艺；范清林；宋礼华 刊期： 2013年第11期
目的观察慢性束缚应激对小鼠下丘脑腹内侧核(VMH)烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐(NADPH)氧化酶表达及活性氧(ROS)氧化应激损伤的影响。方法实验分为对照组和慢性束缚应激组,每周记录小鼠24 h摄食量和体重变化,用二氢乙啡啶(DHE)染色法检测 VMH ROS 的生成,HE 染色观察 VMH 形态学变化,免疫组化检测 VMH NOX2、p47phox 和 RAC1的表达,Western blot法检测下丘脑PKCα、NOX2、p47phox和RAC1的表达。结果与对照组比较,慢性束缚应激能明显降低小鼠24 h摄食量和体重；DHE染色结果显示,慢性束缚应激能明显增加小鼠VMH神经元ROS的生成；HE染色结果显示,慢性束缚应激能明显导致VMH神经元损伤；免疫组化和蛋白印迹结果显示,与对照组比较,慢性束缚应激小鼠VMH神经元PKCα、NOX2、p47phox和RAC1的表达明显增加。结论慢性束缚应激可导致小鼠VMH神经元损伤,其机制可能与增加VMH神经元NAD-PH氧化酶介导的ROS生成增多有关。
作者：王玉婵；武汪洋；李卫平；尹艳艳；孙立；熊莉；李维祖 刊期： 2013年第11期
目的探讨负压封闭引流联合人工真皮自体表皮移植修复外伤性创面的临床疗效。方法25例外伤性创面均进行扩创并在负压封闭引流辅助下行人工真皮移植，平均3~5 d更换一次负压引流装置。平均在移植人工真皮后14 d行自体表皮移植修复创面。结果24例创面应用该方法成功治愈。仅1例因患儿创面位于肛周，负压装置经常漏气，创面被粪便反复污染，终导致创面感染，不得不将人工真皮移除。术后随访24例患者6~18个月，受访者均对效果满意。皮片色泽良好，质地柔软，耐磨，无挛缩，功能基本恢复，创面无复发。供区无或仅伴轻度色素沉着，无瘢痕增生。结论负压封闭引流联合人工真皮自体表皮移植是修复外伤性创面的有效手段，值得临床推广应用。
作者：张陈威；柳大烈；梁智；杜晓杨；刘飞 刊期： 2013年第11期
核内染色质成分组蛋白释放至细胞外便成为胞外组蛋白。近证实胞外组蛋白是一种内源性损伤相关分子模式(DAMP)分子，能诱导组织细胞尤其是血管内皮细胞损伤、激活白细胞和血小板、促进异常凝血过程与血栓形成、直接或间接造成炎症反应与免疫反应，导致多器官功能障碍综合征(MODS)。抗组蛋白抗体、激活蛋白C(APC)、C反应蛋白(CRP)可拮抗胞外组蛋白细胞毒性作用。
作者：蒋训(综述)；高蕾；余卫平(审校) 刊期： 2013年第11期
目的探讨母鼠孕期和哺乳期经水摄入双酚 A (BPA)对子代未成年期体重的影响。方法将妊娠的ICR母鼠随机分成 BPA 低、中、高剂量组(2.2829、22.8290、228.2900μg/L)、空白对照组和溶剂对照组；母鼠自妊娠第0天(GD 0)至仔鼠出生后第21天( PND 21)经饮水暴露BPA,孕期每3 d记录1次母鼠体重,仔鼠体重在哺乳期每3 d记录1次,断乳后至PND 42期间每周记录1次。结果各BPA暴露组母鼠孕期体重、窝平均仔鼠数及断乳前仔鼠平均体重与对照组相比差异均无统计学意义；PND 42时BPA高剂量组仔鼠体重与对照组相比显著增加(P<0.05)；PND 28~PND 42时各组雌性仔鼠体重均无明显差异；PND 35时中、高剂量组及PND 42时BPA各组雄性仔鼠体重与对照组相比均显著增加(P<0.05,P<0.01),以PND 42时高剂量组增加更为显著。结论母鼠孕期及哺乳期暴露较低剂量BPA对子代未成年期的体重有一定影响,而且对雄性子代影响更明显。
作者：李云；房魏；李美玲；沈彤 刊期： 2013年第11期
将24例行蓝碟装置手辅助腹腔镜(HALS)直肠癌手术的患者与同期21例行传统开腹手术的患者进行比较。结果显示,45例患者均能顺利完成手术,未发生邻近脏器组织损伤。其中采用HALS直肠癌切除手术方式的患者,手术时间较传统开腹手术时间延长并不明显,但手术创伤出血、术后疼痛及功能恢复等均较传统开腹手术有明显优势,且患者术后恢复快,并发症少。
作者：戴恒兵；宁忠良；朱志强；吴杨；姚寒晖；邵峰 刊期： 2013年第11期
目的观察 miR-451与巨噬细胞游走抑制因子(MIF)在胃癌组织中的表达情况,并探讨其与胃癌相关临床因素的关系。方法收集25例胃癌患者的胃癌组织和胃癌旁组织,应用RT-PCR法检测miR-451及MIF mRNA的相对表达水平,分析其相关性并探讨与胃癌相关临床因素的关系。结果miR-451在胃癌组织中明显低表达(P<0.01),而MIF mRNA在胃癌组织中明显高表达(P<0.01),在胃癌组织中,miR-451与 MIF mRNA 表达呈显著负相关( P <0.01),miR-451及 MIF mRNA 与胃癌的分化程度、TNM 分期、浸润深度及淋巴结转移相关(P <0.01)。结论miR-451及MIF mRNA与胃癌的分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关,miR-451可能通过抑制MIF负向调控了胃癌的发生、发展作用。
作者：汪伟；孙晓娜；张玉峰；党中勤；牛学恩；刘晓峰 刊期： 2013年第11期
目的研究医院环境及临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病特征，为MRSA的医院感染防控提供依据。方法使用 MicroScan walkaway-40SI 全自动微生物分析仪对医院环境与临床分离MRSA进行鉴定。通过多重PCR扩增特异基因片段进行SCCmec基因分型，并应用spa分型技术进行同源性分析。结果SCCmec分型结果显示，环境分离的7株MRSA分为两型：其中SCCmecⅢ型6株；SCCmecⅣ型1株。临床分离44株 MRSA分为四型：其中SCCmecII型8株、Ⅲ型22株、Ⅳ型12株、吁型1株，未检出I型菌株，并有1株未能分型。 SCCmec Ⅲ型MRSA主要分布在新生儿监护病房(NICU)、呼吸内科、重症监护病房(ICU)和神经外科。对MRSA进行spa基因分型可见：NICU主要流行株为t437型，呼吸内科主要流行株为t030型，而ICU和神经外科流行株均为t034型，且上述科室环境与临床分离株高度同源。结论医院环境与临床分离的MRSA均以SCCmec Ⅲ型为主。 spa分型结果显示两类MRSA同源性较高，科室之间存在同型MRSA的交叉传播。 MRSA定植于医院环境是导致其医院感染流行传播的重要因素。
作者：刘周；姚杰；杨凯；周强；管世鹤 刊期： 2013年第11期
将90例寻常型痤疮患者和90例急性及亚急性湿疹患者各自均分成治疗组(45例)和对照组(45例)，治疗组使用复方黄柏液治疗，对照组分别予以姜黄消痤擦剂、3%硼酸溶液湿敷治疗，分别比较两组临床疗效。复方黄柏液治疗痤疮、湿疹的总有效率均高于对照组(P<0.05)；治疗组发生不良反应较对照组明显减少(P<0.05)。复方黄柏液对寻常型痤疮、急性和亚急性湿疹的疗效确切，安全性高。
作者：王再兴；林达；范利；林国书；周文明；肖风丽；王培光；刘盛秀；杨春俊；李卉；王红艳；张学军；杨森 刊期： 2013年第11期
目的构建中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)基因真核表达质粒并转染小鼠神经瘤细胞系(N2A),建立稳定表达MANF的细胞系,并观察MANF对内质网(ER)应激诱导细胞凋亡的影响。方法将MANF基因克隆至pEGFP-C2载体中,经酶切、聚合酶链式反应(PCR)、测序检测其构建的正确性,脂质体转染法将重组质粒转染入N2A细胞,经 G418(500μg/ml)连续筛选,获得稳定表达MANF的神经细胞系。细胞免疫荧光法观察MANF的定位,蛋白质印迹法(Western blot)和反转录PCR法(RT-PCR)鉴定稳转细胞系中MANF的蛋白和基因表达水平。在稳定转染细胞系中,分别用4μg/ml衣霉素(TM)处理16 h和10μmol/L β淀粉样蛋白(Aβ)处理24 h诱导ER应激,Western blot法检测CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达和 Caspase-3的激活情况。结果构建的 pEGFP-C2-MANF质粒经酶切测序等鉴定确定构建成功,经G418抗性筛选出稳定转染 MANF 的 N2A 细胞系,RT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光法证明稳转细胞中MANF的基因和蛋白水平均高表达,并且MANF的细胞定位准确。诱导ER应激后,MANF能显著抑制CHOP的表达和Caspase-3的激活。结论成功建立稳定表达MANF的神经细胞系,并且发现MANF可以抑制ER应激诱导的神经细胞凋亡。
作者：陈滢；李成锦；杨文；程里；安然；都建；沈玉君；冯利杰；沈玉先 刊期： 2013年第11期
目的观察不同浓度维生素C(Vit C)对膀胱癌T-24细胞增殖和凋亡的影响,并了解其可能的机制。方法使用不同浓度Vit C干预体外培养的膀胱癌T-24细胞,然后通过缩胆囊素八肽(CCK-8)检测T-24细胞增殖情况,用流式细胞术检测细胞周期的变化及其凋亡率结果,RT-PCR法检测Survivin mRNA、Caspase-3 mRNA的表达。结果400μg/ml Vit C可将T-24细胞阻滞于S期,诱导其凋亡并且下调Sur-vivin mRNA 的表达、上调 Caspase-3 mRNA 的表达。4、40μg/ml的Vit C对人膀胱癌T-24细胞无明显抑制增殖作用,而400μg/ml Vit C对人膀胱癌T-24细胞增殖有显著抑制作用。结论400μg/ml Vit C可抑制T-24细胞增殖、诱导其凋亡,其机制可能与下调Survivin mRNA表达、上调Caspase-3 mRNA表达有关。
作者：刘升学；孙文国；白先忠；覃展偶；张天禹 刊期： 2013年第11期
目的通过检测经鼻给予转化生长因子-β1( TGF-β1)对癫痫持续状态后大鼠海马中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-18蛋白含量的影响,探讨TGF-β1在匹罗卡品癫痫形成进程中的抗痫及神经保护机制。方法用匹罗卡品建立癫痫持续状态(SE)模型,SE后3 h,采用经鼻给予大鼠重组人TGF-β1或等量PBS溶液。各组动物于SE后24、48、72 h处死取材,应用免疫组化法确定海马区细胞因子蛋白的表达及分布特征,采用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测海马组织IL-1β、IL-6、IL-18蛋白含量。结果TGF-β1能有效减少癫痫大鼠海马中 IL-1β和 IL-6的合成与表达(P<0.05,P <0.01),对IL-18表达影响不明显。结论经鼻给予TGF-β1有效抑制了癫痫持续状态大鼠急性期海马致痫细胞因子IL-1β、IL-6蛋白的合成与表达,具有神经保护及抗癫痫形成的作用。
作者：张慧敏；刘益民；王玉 刊期： 2013年第11期
目的探讨不同程度的精索静脉曲张(VC)对精液质量和精子非整倍体率的影响及手术后的改善情况。方法34例患者经彩色多普勒超声(CDFI)诊断为VC并按不同曲张程度分为亚临床型(SVC)(n=8)、VC I级(n=13)、VCII级(n=7)和VCⅢ级(n=6)，分析精液指标，应用X、Y、18号染色体探针对其进行多色荧光原位杂交实验，检测精子染色体非整倍体数目。 VC II级和VC Ⅲ级患者行腹腔镜精索静脉高位结扎术，术后3个月复查精液指标及非整倍体数目并与术前比较。结果VC II组与VC Ⅲ组非整倍体率显著高于对照组(P<0.01)；VCII组及VCⅢ组患者行手术治疗后，精子密度、活率、活力均较术前改善(P<0.01)，非整倍体较术前显著下降(P<0.01)；Pearson相关分析显示曲张程度与非整倍体数呈正相关。结论VC导致精子染色体非整倍体增多，手术对VC II级和VC Ⅲ级患者精液质量有较明显改善作用，同时在一定程度上降低了非整倍体率。
作者：王琦；于德新；徐秀民；褚晗；王大明；谢栋栋；王毅；张涛；闵捷；张志强 刊期： 2013年第11期
目的研究肿瘤坏死因子(TNF)-α对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白三烯D4(LTD4)和E4(LTE4)表达的影响,从而探讨其在哮喘发病过程中作用机制。方法48只雌性BALB/c小鼠随机均分为6组：正常对照(A)组,哮喘模型(B)组,TNF-α(0.1μg/kg)腹腔注射给药(C1)组, TNF-α(0.4μg/kg)腹腔注射给药(C2)组,TNF-α(0.1μg/kg)雾化吸入给药(D1)组,TNF-α(0.4μg/kg)雾化吸入给药(D2)组。建立哮喘小鼠模型,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化,收集BALF 进行炎性细胞计数,酶联免疫疫吸附(ELISA)法检测其 LTD4和 LTE4水平。结果①HE染色显示B、C、D组气道炎症明显改变,C、D组BALF中炎性细胞计数、嗜酸性粒细胞( EOS)明显高于 B 组( P <0.05)；于 ELISA法结果显示BALF中LTD4和LTE4水平：B、C、D组高于A组(P<0.01),C、D组明显高于B组(P<0.05),C2组明显高于C1组(P<0.05),D2组明显高于D1组(P<0.05),但C1组和D1组之间、C2和D2组之间比较,差异无统计学意义。结论TNF-α可引起肺内炎性介质LTD4和LTE4产生增加,同时引起EOS和其他炎性细胞在气道和肺组织局部募集、浸润,维持和加重了哮喘病理改变,这可能是哮喘炎症状态持续存在的发生机制之一。
作者：张世杰；宋晓丹；马慧敏；朱春江；欧维琳；莫碧文 刊期： 2013年第11期
目的通过多排螺旋CT门静脉成像(CTPV)来探讨PV管径与肝硬化严重程度及食管胃底静脉曲张出血的关系；分析不同肝硬化程度下食管胃底静脉曲张出血的发生情况。方法肝硬化组(n=60)按Child-Pugh分级分为A级29例,B级23例,C级8例,按食管胃底静脉曲张有无出血分为出血组(n=30)和未出血组(n=30),所有患者均行 CTPV检查,采用大密度投影(MIP)、容积再现(VR)及多平面重建(MPR)多种方法来测量PV(PV)分支及各属支的管径和观察门脉高压侧支循环的影像学特征。另选15例正常体检者记为正常对照组。结果通过测量所有肝硬化患者的PV主干(MPV)、PV肝内分支及其属支胃左静脉(LGV)、脾静脉(SPV)和肠系膜上静脉(SMV)的管径,除PV右支(RPV)及SMV的直径在出血组与未出血组间差异无统计学意义外,其余各管径[PV左支(LPV)、PV、LGV及SV]在两组间差异均有统计学意义(P<0.05)；肝硬化Child-Pugh A、B、C 3组与正常对照组比较,PV系统管径差异均有统计学意义(P<0.05)。在不同肝硬化程度下,各组管径有不同的差异性,Child-Pugh A、B、C 3组间的出血率差异有统计学意义(P<0.05),随着Child-Pugh分级的增大,出血率不断增高。结论出血组中的PV系统的管径较未出血组大；不同肝硬化程度下各组PV肝内分支和属支与正常对照组有显著的差异性,各组管径在不同肝硬化分级下也不相同,因而不同的肝硬化程度可以预测食管胃底静脉曲张的出血率。
作者：余杨红；丁山；邓克学 刊期： 2013年第11期
目的观察与比较伊立替康或奥沙利铂联合氟尿嘧啶类药物一线治疗晚期胃癌的疗效和安全性。方法71例初治晚期胃癌患者,分别使用伊立替康(37例)180 mg/m2 d1或奥沙利铂(34例)85 mg/m2 d1联合氟尿嘧啶类药物：5-氟尿嘧啶(5-Fu)400 mg/m2静推 d1,2+5-Fu 600 mg/m2持续静滴22 h d1,2+亚叶酸钙200 mg/m2 d1,2,14 d为1周期或口服卡培他滨1.0 g/m21日2次, d1~14,21 d为1疗程或口服替吉奥25 mg/m21日2次,d1~14,21 d为1疗程。结果65例患者可评价疗效。伊立替康组和奥沙利铂组的有效率分别为32.35%和22.58%,疾病控制率分别为76.47%和70.97%,中位无进展生存时间分别为5个月(3.962~6.038个月)和4个月(2.730~5.270个月),两组间差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者不良反应易耐受,主要为粒细胞减少和恶心、呕吐。伊立替康组腹泻发生率较高,为45.95%。奥沙利铂组外周神经损伤的发生率为29.41%。结论伊立替康或奥沙利铂联合氟尿嘧啶类药物一线治疗晚期胃癌的疗效相当,不良反应可以耐受。
作者：卜丽佳；张逸寅；熊福星；郝吉庆 刊期： 2013年第11期
目的探讨改良快速顺序诱导(RSI)气管插管期间应激反应的影响。方法将60例择期行胃癌、结直肠癌根治术患者按全麻诱导方法不同随机均分为两组：改良RSI组和常规RSI组。记录两组患者麻醉诱导前(T1)、麻醉诱导后2 min(T2)、气管插管后1 min (T3)、气管插管后5 min (T4)患者的心率( HR)、平均动脉压( MAP)、血脉搏氧饱和度(SPO2)、动脉血氧分压( PaO2)和动脉血二氧化碳分压(PaCO2)，并于T1、T3、T4相应时点抽取静脉血样，测定血浆皮质醇和血糖的浓度。结果与T1时点比较，常规RSI组在T2时点MAP、HR明显下降(P<0.05)，而改良RSI组在T2时点MAP、HR无明显下降，差异无统计学意义；与T2时点比较，常规 RSI 组在 T3时点 MAP、HR 明显升高( P <0.05)，而改良RSI组在T3时点MAP、HR无明显升高；两组患者PaCO2和SPO2无明显改变；与改良 RSI组比较，常规RSI组PaO2在T2时点明显升高(P<0.05)，但麻醉诱导时间明显延长(P<0.05)，两组血浆皮质醇及血糖浓度各时点比较无明显升高。结论改良的RSI与常规的RSI比较血流动力学更平稳，气管插管应激反应轻。
作者：徐四七；王胜斌；檀彧庆；居霞；胡胜红；徐煌 刊期： 2013年第11期
目的探讨人血清糖蛋白的糖链结构信息在常见妇科肿瘤临床诊断中的价值。方法收集123例临床血清样本，其中乳腺癌31例、宫颈癌24例、卵巢癌19例、健康女性体检者49例，通过自制的包含15种不同凝集素的凝集素芯片来测定人血清中糖蛋白的糖链结构信息，利用SPSS 15.0统计软件进行分析，采用逐步判别分析法建立关于样本分组的判别函数方程。结果首先建立用于区分健康者与肿瘤患者的判别函数方程，对健康样本和肿瘤样本的回判正确率分别为85.7%、83.8%，总的判别正确率为84.6%；然后针对肿瘤组再建立用于区分乳腺癌、宫颈癌和卵巢癌的判别函数方程，结果对乳腺癌、宫颈癌和卵巢癌的回判正确率分别为96.8%、75.0%、78.9%，总的判别正确率为85.1%。结论人血清糖蛋白的糖链结构信息与妇科肿瘤存在相关性，基于凝集素芯片检测结果建立的判别函数方程对于临床血清样本的诊断判别具有一定的参考价值。
作者：裴丽丽；肖超强；何为 刊期： 2013年第11期
研究结果表明糖尿病(DM)对于外科手术中常见的术后并发症心肌缺血再灌注损伤(I/R)存在一定的影响，它可以在一定程度上减轻或者加重心肌I/R损伤，同时，许多学者对这一产生不同影响作用现象的机制也进行了一系列的研究。近年来，氢气作为治疗心肌I/R损伤的一种新的有效方法，被越来越多的学者认识和了解。现简要综述了糖尿病对心肌I/R的影响与氢气相关治疗的研究进展。
作者：卫然(综述)；谭永星(审校) 刊期： 2013年第11期
目的构建能够表达HBx蛋白的绿色增强荧光蛋白-HBx(pEGFP-N1-HBx)真核表达质粒,并探讨HBx蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法以HBV Dimer为模板,PCR法扩增HBx基因,PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,命名为pEGFP-N1-HBx。将该质粒转染肝胚瘤细胞株HepG2,以RT-PCR法及荧光显微镜观察其表达情况,再通过基因共转染等技术研究 HBx 蛋白对HBV复制的影响。结果酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含HBx基因,RT-PCR法检测和荧光显微镜观察表明构建的pEGFP-N1-HBx 质粒在 HepG2细胞中能够表达；质粒pEGFP-N1-HBx与pHBV48-X0共转染后,HepG2细胞上清液HBV-DNA、HBsAg和HBeAg分泌显著增多。结论HBx基因克隆及其真核表达载体pEGFP-N1-HBx构建成功；HBx蛋白能够促进HBV复制及抗原分泌。
作者：杨凯；管世鹤；孙蓓蓓；潘颖；吴园园；王爱华 刊期： 2013年第11期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
