学术投稿

噬菌体随机肽库技术在细胞特异性多肽筛选中的研究进展

周玉琴(综述);吴明月(审校)

关键词:噬菌体, 随机肽库技术, 细胞筛选
摘要:噬菌体展示肽库可筛选出与靶向细胞特异性结合的多肽,具有较好的特异性与靶向性。全细胞筛选的应用推进了噬菌体随机肽库技术的发展并拓宽了其研究应用领域,现针对噬菌体随机肽库技术的发展和在细胞特异性结合多肽筛选中的研究进展及应用进行概述。
安徽医科大学学报杂志相关文献
  • 可弯曲喉罩与气管导管在儿童腺样体扁桃体切除术中应用的对比研究

    目的比较可弯曲喉罩(FLMA)与气管导管(ETT)在儿童腺样体扁桃体切除术中应用的可行性和安全性。方法选择静吸复合全身麻醉下择期行小儿鼾症腺样体扁桃体切除手术的患儿40例,随机均分为FLMA组和ETT组。麻醉诱导后分别置入FLMA/ETT。记录诱导前(T0)、置入后1(T1)、3(T2)、5 min (T3)、拔出后1(T4)、3 min (T5)的心率(HR)、脉搏氧饱和度(SpO2)、平均动脉压(MAP);记录置入FLMA/ETT后5 min( T6),置入开口器后10( T7)、20 min (T8),移除开口器后5 min(T9)的呼吸动力学指标:气道峰压( Ppeak )、平均气道压( Pmean )、呼末二氧化碳分压( Pet-CO2),记录1次置入成功率,返流和误吸发生率,拔管时和拔管后呛咳、喉痉挛、喘鸣、躁动的发生情况;观察术后24 h内不良反应发生率。结果ETT组T1、T2、T3、T4、T5时MAP, HR均高于T0及FLMA组(P<0.05)。 FLMA组T1、T2、T3、T4、T5时MAP,HR较T0时略有升高,但差异无统计学意义。Ppeak、Pmean在ETT组高于FLMA组(P<0.05)。 ETT组拔管时间较FLMA组明显延长且较多术后并发症( P <0.05)。结论与传统的 ETT 相比,在不影响外科操作的前提下, FLMA通气体现出诱导及麻醉过程中血流动力学及呼吸动力学平稳,苏醒期血流动力学平稳,无明显呛咳躁动,出血少;气道损伤少,术后咽痛率低,舒适度提高。

    作者:侯媛媛;张野;翁立军;王斌 刊期: 2013年第12期

  • 泼尼松治疗肾病综合征骨吸收的变化及α-D3的干预作用

    目的探讨泼尼松(Pred)治疗原发性肾病综合征(PNS)患者骨吸收的变化及α-D3的干预效果。方法①选择确诊为PNS的患者30例作为研究对象,在Pred治疗前(PNS治疗前组)、治疗6周后(PNS治疗6周后组)分别留取血、尿标本检测血全段甲状旁腺素(iPTH)、血钙及尿脱氧吡啶啉(DPD),并与年龄、性别匹配的健康体检者(健康组)28例对照。②30例PNS患者在Pred治疗6周后随机分为Pred组和Pred+α-D3组,2周后两组分别留取血、尿标本检测上述各项指标。结果① PNS治疗前组,尿DPD排泄率明显高②健康组(P<0.05),血iPTH浓度明显高②健康组(P<0.01);血钙浓度与健康组相比,差异无统计学意义。② PNS治疗6周后组尿DPD排泄率明显高②PNS治疗前组(P<0.01),血 iPTH 浓度明显高② PNS 治疗前组( P <0.01);血钙浓度无明显变化。③ Pred+α-D3组与Pred组比较,尿DPD排泄率明显降低(P<0.01),血iPTH浓度明显降低(P<0.05),差异有统计学意义;血钙浓度无明显变化。结论α-D3能有效减少PNS患者的骨吸收,从而有效防治骨质疏松症。

    作者:吴雪平;郝丽;刘桂凌 刊期: 2013年第12期

  • 第48卷目次索引

    作者: 刊期: 2013年第12期

  • 流式细胞仪分选外周血CD3+ CD4+ T淋巴细胞方法的建立

    首先用Percoll连续密度梯度离心法制备外周血单个核细胞,采用流式细胞仪分选CD3+CD4+T淋巴细胞。分选后的细胞通过细胞存活率、细胞纯度鉴定和形态观察对分选方法进行评价。结果显示,Percoll连续密度梯度离心法能很好的制备外周血单个核细胞,分选前CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(51.9±9.6)%,分选后CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(95.9±0.8)%,差异有统计学意义( P<0.01)。分选后的细胞存活率为(95.8±1.2)%,细胞的形态保持完整。

    作者:康伟芳;蒋就喜;王雪雯;洪雪;容桂红 刊期: 2013年第12期

  • 中晚孕胎肺生长规律的超声评价

    目的监测正常妊娠中晚孕胎肺生长规律。方法599例18~40周正常单胎,按每两周分组,测量右肺在矢状面、横断面径线,描绘生长曲线。计算不同孕龄右肺面积(RLa)与头围(Hc)、胸围(Tc)及胸腔面积(Ta)的比值。应用统计分析得出相关系数。结果RLa/Hc及RLa/Tc与孕龄的增长呈直线关系,回归方程为:(RLa/Hc:姚Y=0.948X-1.221,r2=0.898,RLa/Tc:姚Y=0.944X-1.800,r2=0.894),不同孕龄胎儿RLa/Ta在恒定范围内(0.42~0.55)。胎肺在矢状面及横断面上的径线随孕龄增加,且生长速度前后径(横断面)>上下径(矢状面)>左右径(横断面)。结论产前超声能评价正常胎肺的生长规律,为胎肺成熟的评估提供依据。

    作者:张洁;姜凡;罗平;解翔 刊期: 2013年第12期

  • 日本血吸虫无机焦磷酸酶的克隆表达及蛋白特征分析

    目的克隆并原核表达日本血吸虫无机焦磷酸酶(SjIPP),分析SjIPP的蛋白特征。方法以日本血吸虫成虫cDNA为模板,克隆SjIPP,重组入pET28a质粒,并将重组质粒转化入E. coli BL21,用SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组蛋白的表达和特异性,进一步分析SjIPP的蛋白特征和同源性。结果克隆和表达出的SjIPP均与预测的分子量大小一致,Western blot法结果显示,重组蛋白可被小鼠抗His-tag单克隆抗体特异性识别。生物信息学分析表明,SjIPP为胞内蛋白,含有多个磷酸化位点,B细胞表位丰富,且与人和小鼠的IPP高度同源。结论成功克隆表达出SjIPP,为进一步利用SjIPP奠定基础。

    作者:曹红荣;徐云侠;丁淑琴;钟政荣;罗庆礼;沈继龙 刊期: 2013年第12期

  • 中晚孕胎肺动脉搏动指数变化规律的实验研究

    目的探讨正常胎儿肺动脉主要分支血管搏动指数(PIPA )变化规律在胎肺成熟度预测中的应用价值。方法217例不同孕周正常发育胎儿,应用彩色多普勒检测每例胎儿的左、右PIPA ,分析其与孕龄的关系。结果正常胎儿左、右肺PIPA在37孕周前有逐渐上升的趋势,孕周与左、右肺动脉PIPA显示呈正相关性(左肺动脉r=0.521,P<0.01;右肺动脉r=0.292,P<0.01);37周后孕周与左、右肺动脉PIPA无相关性(左肺动脉 r =-0.110,P =0.492;右肺动脉 r =-0.005,P=0.977)。结论中晚孕胎儿肺动脉搏动指数变化有一定规律性,可能成为无创性评估胎肺成熟度的指标。

    作者:方凌峰;姜凡;彭梅;罗平;顾莉莉;张志华 刊期: 2013年第12期

  • 羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸复合材料对兔桡骨骨缺损的修复作用

    目的了解羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸(HA/CS/PL-LA)骨修复材料的生物相容性,初步探讨其作为骨替代材料的可行性。方法3月龄新西兰大白兔18只,每只兔子的左右前肢按随机法分为实验组和对照组。在双侧桡骨制备长约15 mm的完全性骨缺损,实验组植入HA/CS/PLLA骨修复材料,对照组为空白对照,骨缺损部位不植入任何材料。术后4、8、12周取标本,采用大体标本、X线和组织学方法检测缺损部位的成骨情况。结果18只兔子均纳入分析,复合材料植入区未见明显排斥反应。术后12周时实验组骨缺损区修复完整;对照组骨仍有缺损未修复。 X线片结果显示:4周时实验组桡骨缺损区可见均匀分布的云雾状骨生成影像,随时间的延长,至12周时,植入体已与缺损处断端骨性愈合,皮质骨连续性较好;对照组12周时显示骨缺损区部分修复。组织学结果表明,4周时实验材料内部可见大量骨形成细胞集中,并开始相互连接成片,到12周时,材料内骨小梁成熟,新生骨小梁相互连接成板状。结论HA/CS/PL-LA复合材料具有良好的生物相容性和成骨能力。

    作者:王云;董洲;张彩云;赵宇 刊期: 2013年第12期

  • ATRA对肺腺癌A549细胞RXRα及CAV1表达和分布的影响

    目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对肺腺癌A549细胞维甲类X受体α(RXRα)、小窝蛋白1(CAV1)表达和分布的影响。方法MTT法检测ATRA对 A549细胞增殖的影响;免疫荧光法检测RXRα、CAV1在A549细胞中的表达和分布;Western blot法检测ATRA处理A549细胞后对RXRα、CAV1表达的影响。结果ATRA可抑制A549细胞增殖并呈剂量依赖性;ATRA处理A549细胞3 d后,RXRα表达降低并有向细胞核集中的现象,CAV1表达量降低且在胞膜分布增加。结论ATRA可抑制A549细胞增殖并影响RXRα和CAV1的表达和分布,下调RXRα和CAV1在A549细胞中的表达并分别使其向核内和胞膜转移,从而可能参与调控细胞增殖。

    作者:王浩;桂淑玉;周青;陈飞虎;汪渊 刊期: 2013年第12期

  • 无结式连续缝合术在后腹腔镜下肾部分切除术中的应用

    对20例肾脏肿瘤患者(肿瘤直径<4 cm)行后腹腔镜下肾部分切除术,术中使用V-LocTM缝合线进行无结式连续肾实质贯穿缝合术。结果显示20例患者手术均获得成功,无中转开放手术者,缝合过程中无需打结操作,平均热缺血时间仅21 min(17~23 min)。后腹腔镜肾部分切除术中使用V-LocTM缝合线行无结式连续肾实质贯穿缝合术安全可靠,有效地缩短了热缺血时间,具有临床推广意义。

    作者:唐亮;方卫华;廖贵益;施浩强;江山;梁朝朝 刊期: 2013年第12期

  • CD34+急性髓细胞白血病细胞对柔红霉素耐药机制的初步研究

    目的探讨CD34+急性髓细胞白血病(AML)细胞对柔红霉素的耐药性及其可能机制。方法以CD34+AML细胞株KG1a 和 Kasumi-1为研究对象, CD34- AML 细胞株U937作为对照,采用 Western blot 法检测 Bax、Bcl-2在CD34+AML、CD34-AML 细胞株的蛋白表达;采用 Western blot法检测柔红霉素作用后Bcl-2、Bax蛋白表达变化,比较CD34+AML 和 CD34-AML 对柔红霉素敏感性差异。采用RNA干扰沉默Bcl-2基因,MTT法观察Bcl-2蛋白表达水平下降后KG1a和Kasumi-1细胞对柔红霉素敏感性变化。结果CD34+AML细胞KG1a和Kasumi-1 Bcl-2表达显著高于CD34-AML细胞U937,0.4μg/ml柔红霉素作用48 h可显著抑制KG1a和Kasumi-1细胞Bcl-2蛋白表达,而对U937细胞株无此影响。 Bcl-2 siRNA显著增加CD34+KG1a和Kasu-mi-1细胞对柔红霉素的敏感性。结论CD34+AML 细胞KG1a和Kasumi-1高表达抗凋亡蛋白Bcl-2,对柔红霉素诱导凋亡作用不敏感,而降低CD34+AML细胞KG1a和Kasumi-1的Bcl-2蛋白表达可恢复其对柔红霉素敏感性。 CD34+AML细胞对柔红霉素耐药机制与CD34+AML细胞高表达Bcl-2有关。

    作者:饶佳;黄仁魏;陈国安;张荣艳 刊期: 2013年第12期

  • 中老年男性不同糖耐量状态下骨钙素水平变化及与糖脂代谢的关系

    目的探讨血清骨钙素(OC)在中老年男性不同糖耐量状态下的水平变化以及与糖脂代谢相关性。方法将80例受试者根据口服葡萄糖耐量实验结果分为正常糖耐量(NGT)组、糖耐量受损(IGT)组和2型糖尿病(T2DM)组,比较不同组间各代谢指标及空腹血清OC的差异。结果OC在NGT组与IGT组及T2DM组内呈递减趋势(P<0.01);OC与体质量指数、腰臀比(WHR)、空腹血糖、餐后2小时血糖(2hPG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胆固醇、三酰甘油(TG)及收缩压呈负相关,与脂联素呈正相关(P<0.05,P<0.01);WHR、HOMA-IR、2hPG、TG为 OC的独立相关因素(P<0.05)。结论OC可能参与胰岛素抵抗,与糖脂代谢密切相关。

    作者:顾朋颖;叶山东;康冬梅;陈燕;王卫东;郑辉;汪兰兰;赵卫刚 刊期: 2013年第12期

  • Twist在胃癌中的表达与上皮间质转化的关系

    Twist是一个高度保守的转录因子,在人体多种实体肿瘤中过度表达和上皮间质转化(EMT)、肿瘤生长、侵袭和转移有关。现就Twist的结构、功能及在恶性肿瘤中的作用,特别是其在胃癌中的表达与上皮间质转化的关系作一综述。

    作者:张磊(综述);吴继锋;孙景洲(审校) 刊期: 2013年第12期

  • 共培养下内皮祖细胞对神经干细胞增殖及分化的影响

    目的探讨体外共培养下血管内皮祖细胞(EPCs)对神经干细胞(NSCs)增殖及分化的影响。方法运用成熟的分离、培养及鉴定方法获得SD大鼠的脊髓NSCs及外周血EPCs,再将二者置于Transwell小室进行体外共培养,以单纯的NSCs培养为对照,于第4天对神经球的数目、直径进行测算,测算后将载有EPCs的Transwell小室上层移去,对下层的NSCs进行诱导分化培养,第7天行微管相关蛋白2(MAP-2)免疫荧光染色,荧光显微镜下观察抗原表达并计算NSCs分化神经元百分率,后将实验组与对照组数据进行统计学分析。结果共培养的NSCs球数目实验组明显多于对照组,其平均数目为(10.3±2.2)个,直径也呈现出大于对照组的趋势,平均直径可达(48.0±5.3)μm;共培养的NSCs神经元分化率明显高于对照组,平均百分率为(32.2±1.9)%。结论EPCs在体外能促进NSCs增殖并诱导其向神经元分化。

    作者:杜公文;杜怡斌;张辉;尹宗生 刊期: 2013年第12期

  • 二维超声联合STIC技术在胎儿先天性心脏病筛查中的应用

    目的探讨二维超声心动图联合时间-空间关联成像(STIC)技术在胎儿先天性心脏病(CHD)筛查中的应用价值。方法采用多切面顺序扫查法对11036例胎儿进行心脏检查,部分胎儿进行STIC技术容积数据库采集及脱机分析,CHD胎儿引产后进行尸体解剖或出生后随访结果对照。结果单纯二维超声心动图筛查出176例胎儿先天性心脏大血管结构异常(不包括心律失常),其中97例在二维超声基础上进行 STIC 技术检查,92例两种方法检查结果一致(其中1例合并心内畸形漏诊);检出的CHD胎儿中,87例记录二维筛查时间,平均每个胎儿心脏用时(9.68±2.13) min,79例记录STIC技术扫描时间,平均每次STIC扫描用时(7.76±2.42)min;不同孕周二维超声心动图与STIC技术各重要切面显示合格率差异无统计学意义。结论STIC技术可作为二维超声心动图的有效补充手段,二者联合可进一步提高胎儿CHD的产前诊断率。

    作者:肖蕾;王玲;闻小林;崔亚云 刊期: 2013年第12期

  • 慢性复合应激致老年小鼠学习记忆损伤及机制研究

    目的探讨慢性复合应激对老年小鼠学习记忆能力的影响及可能机制。方法以老年小鼠为研究对象,实验分成应激组和对照组。采用Morris水迷宫试验观察慢性应激对老年小鼠学习记忆的影响;通过HE染色观察海马CA3区神经元病理组织形态;采用Western blot法检测小鼠海马β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)和β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)的表达量;运用ELISA法检测血清皮质酮(CORT)含量。结果与对照组相比,实验组老年小鼠逃避潜伏期和游泳距离延长(P<0.01);CA3区海马神经元数目明显减少(P<0.01),排列疏松紊乱,脱失现象明显,核固缩,浓染;海马Aβ1-42和 BACE1蛋白的表达量升高( P <0.01);血清CORT浓度升高(P<0.01)。结论慢性应激可导致老年小鼠学习记忆能力下降和海马组织损伤,其机制可能与慢性应激引起老年小鼠BACE1升高,促进Aβ1-42生成有关。

    作者:程娟;王涛涛;唐伟;姚余有 刊期: 2013年第12期

  • 食管癌循环肿瘤细胞的研究进展

    食管癌是我国常见的恶性肿瘤,其早期诊断和监测复发与转移,对提高食管癌5年生存率尤为重要。循环肿瘤细胞(CTCs)是自发或因诊疗操作由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的一类肿瘤细胞。目前富集CTCs应用广泛的方法是免疫磁珠富集技术,再通过形态学方法或分子检测法对其进行检测。目前尚无 CTCs 标准化的检测方案。将CTCs检测与TNM分期结合,在治疗前后动态检测CTCs水平,可反映治疗效果和预后,对临床医师评估治疗手段疗效及更改治疗方案提供重要依据。

    作者:康宁宁(综述);张仁泉(审校) 刊期: 2013年第12期

  • LMW-PTP在子宫颈鳞癌中的表达及其临床意义

    目的探讨低分子量酪氨酸磷酸酶(LMW-PTP)在子宫颈鳞癌中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR及免疫组化法分析HaCaT、C33A、SiHa和CaSki细胞系中LMW-PTP的表达情况。免疫组织化学法检测正常宫颈患者19例,宫颈上皮内瘤变(CIN)I期患者18例、CIN II~Ⅲ患者46例和宫颈鳞癌患者76例的组织切片中 LMW-PTP的表达。结果LMW-PTP mRNA及蛋白在 C33A、SiHa及 CaSki宫颈癌细胞系中表达明显高于人永生化正常表皮细胞系HaCaT;临床组织样本中,正常宫颈上皮LMW-PTP几乎不表达,在正常宫颈上皮到CIN继而发展成宫颈癌的进展过程中LMW-PTP的表达逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);低分化宫颈癌组织中LMW-PTP表达高于中分化组织(P=0.025),中分化宫颈癌组织中LMW-PTP的表达高于高分化组织(P=0.045);宫颈癌组织中LMW-PTP蛋白的表达与组织学分级程度和是否有淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论LMW-PTP在宫颈癌的进展过程中起重要作用,且与组织分化程度和是否有淋巴转移密切相关,提示LMW-PTP的表达有助于判断宫颈癌患者的预后。

    作者:徐汉杰;周颖;桂云;周虎;李晓妍;赵卫东 刊期: 2013年第12期

  • 多西环素对重度吸入性损伤患者的肺功能改善作用

    目的观察多西环素对吸入性损伤患者的肺功能改善作用并探讨其机制。方法将22例重度吸入性损伤患者随机分为治疗组(n=12)和对照组(n=10)。两组均采取入住烧伤重症监护室,液体复苏,早期气管切开并应用呼吸机辅助呼吸,应用广谱抗生素防治感染,于气管切开前、切开后每1~2 d应用纤维支气管镜行局部灌洗等方法治疗,于住院后0、24、72、120 h测两组患者静脉血清中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、白介素-1β(IL-1β)含量;每12 h测动脉血气分析,计算两组的氧合指数(OI)=血氧分压(PaO2)/吸氧浓度(FiO2),记录乳酸值(LAC)。另治疗组常规经胃管注入多西环素片[第1天每12 h 1次2 mg/(kg·d),以后24 h 1次2 mg/(kg·d),共服用3 d],对照组经胃管注入安慰剂。比较两组的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发生率和死亡率,以及OI、LAC、MMP-2、IL-1β值。对计量资料采用t检验,计数资料用字2检验。结果两组患者7 d内ARDS发生率、死亡率差异无统计学意义(P>0.05),伤后72 h起治疗组较对照组OI值高(P<0.05), LAC值低(P<0.05),MMP-2、IL-1β低(P<0.05)。结论多西环素可改善吸入性损伤患者的呼吸功能,机制可能为发挥基质金属蛋白酶抑制剂和拮抗细胞因子作用。

    作者:苏卫国;王平丽;牛希华;娄季鹤;李永林;周一平;王丽敏 刊期: 2013年第12期

  • Fas配体对椎间盘细胞经典凋亡通路中关键因子的影响

    目的明确Fas配体(FasL)介导的大鼠椎间盘细胞的确切凋亡途径。方法分离、培养大鼠腰椎间盘髓核细胞,分别与含不同浓度FasL (0、5、10、20、50 ng/ml)的1%胎牛血清(FBS)培养基共培养24 h,分别检测Fas,Caspase-8、9、3及Bid mRNA的表达水平,Caspase-8、9、3的酶活性以及线粒体膜电势的变化。结果髓核细胞与不同浓度FasL共培养24 h后,经Hoechst 33258染色均可观察到细胞凋亡, Caspase-8、3及Bid mRNA的表达水平,Caspase-8、3的酶活性均随FasL浓度的升高而升高;50 ng/ml的FasL可明显增强Caspase-9 mRNA的表达、Caspase-9的酶活性和线粒体膜电势。结论FasL所诱发的椎间盘细胞凋亡主要通过膜途径进行,大剂量时可以激活线粒体途径。

    作者:韩敦富;解立俊;吴海燕;胡法梅;尹荷珊 刊期: 2013年第12期

安徽医科大学学报杂志

安徽医科大学学报杂志

主管:安徽省教育厅

主办:安徽医科大学