朱超男;王平;杨慧;周建宏;彭浩
目的 寻找贲门癌肿瘤标记物并建立诊断模型.筛选提示发生淋巴转移的差异蛋白,为临床早期诊断贲门癌及判断预后提供新方法.方法 CM10蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测101例贲门癌患者及118例正常对照者血清蛋白,Biomarker Wizard 软件和Biomarker Patterns System(BPS)分析得差异蛋白并建立贲门癌诊断分类树,双盲法验证其准确性.进一步分析对比有、无淋巴转移的贲门癌患者血清蛋白指纹图谱,得到差异蛋白.结果 对照分析贲门癌患者和正常对照组的血清蛋白指纹图谱得56个差异蛋白(P<0.05),经BPS软件筛选,以质荷比为5 480.49(P<10-8)的蛋白为主根结点建立贲门癌诊断模型,其灵敏度为95.05%,特异度为95.76%.得到可提示淋巴转移的差异蛋白3 820.87(P<0.05),其灵敏度为84.4%,特异度为82.1%.结论 SELDI-TOF-MS技术可建立有较高灵敏度和特异度的贲门癌诊断模型,筛选出能够提示发生淋巴转移的差异蛋白,有助于贲门癌的早期筛查、诊断和预后判断.
作者:靳小可;杨瑞红;郭素堂;张旭东;胡春松 刊期: 2012年第09期
分别采用传统组织块法、传统酶消化法和优化组织块法进行新生SD大鼠原代成骨细胞体外分离和培养,并对培养出的细胞予以鉴定和比较.优化组织块法可短期内培养出大量纯度高的成骨细胞,具有典型的形态特征和成骨能力,碱性磷酸酶(ALP)染色、Ⅰ型胶原免疫荧光均呈阳性,ALP检测活性可达92%.该法优于其他两种方法,提供了一种切实可行、操作简单的体外原代成骨细胞培养方法.
作者:陈强;夏天;叶哲伟;宋谋珂 刊期: 2012年第09期
目的 探讨肿瘤神经侵犯(PNI)在Ⅱ期直肠癌中预后指导意义.方法 调取194例行直肠癌根治术的Ⅱ期直肠癌患者病理HE染色切片,重新读片,根据HE染色判断PNI情况,并分析其在临床5年无瘤生存率及总生存率的意义.结果 PNI 36(18.5%)例,PNI仅与肿瘤分化程度(P<0.01)及脉管浸润(P=0.02)相关,与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、浸润深度、活检淋巴结数无关.单因素分析显示,浸润深度(P=0.149)、活检淋巴结数(P=0.052)、脉管浸润(P=0.013)、PNI(P<0.001)是5年无瘤生存率的危险预后因素,年龄(P=0.029)、性别(P=0.063)、肿瘤部位(P=0.063)、活检淋巴结数(P=0.028)是5年总生存率的危险预后因素;多因素分析发现活检淋巴结数(P=0.001)是5年总生存率的独立预后因素,PNI(P=0.001)是5年无瘤生存率的独立预后因素.结论 PNI是Ⅱ期直肠癌的无瘤生存时间独立预后因素,PNI可作为Ⅱ期直肠癌预后判断的重要参考.
作者:付大鹏;龚旭晨;孔长青 刊期: 2012年第09期
目的 对樟科植物老鹰茶叶醇提取物中正丁醇部分的化学成分进行研究.方法 老鹰茶经70%乙醇提取,再经石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,正丁醇部分用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20以及制备高效液相色谱法等进行分离纯化,通过1H-NMR、13C-NMR、MS等方法鉴定化合物的结构.结果 从老鹰茶叶的正丁醇部分分离得到7个化合物,分别鉴定为原儿茶酸、山奈酚-3-O-β-D-(6-O-trans-p-香豆酰基) 吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-(6-O-trans-p-香豆酰基) 吡喃甘露糖苷、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷、反式香豆酸、邻苯二甲酸二正丁酯、水杨酸.结论 这7种化合物均为首次从该植物中分离得到.
作者:张义龙;汤文建;唐敏芳;吕雄文;余世春;李俊 刊期: 2012年第09期
目的 制备肠出血性大肠埃希菌 O157:H7细菌菌影,在细胞及动物水平对其生物学活性进行初步评价.方法 将包含噬菌体phiX174裂解基因E的重组质粒pLSE转化肠出血性大肠埃希菌O157:H7 EDL933及大肠埃希菌DH5α,42℃诱导制备菌影.利用间接免疫荧光实验观察菌影主要抗原结构,并利用电镜观察菌影对Hep-2细胞的黏附.将菌影免疫小鼠后,采用间接ELISA法检测小鼠特异性抗体,并通过小鼠攻毒实验考察菌影的保护效果.结果 成功构建了重组质粒pLSE,制备出O157:H7及DH5α菌影.O157:H7菌影保留了病原菌的主要外膜抗原,能紧密黏附细胞Hep-2但并不侵入细胞.O157:H7菌影免疫雄性BALB/c小鼠诱导特异性IgG抗体的产生.攻击试验结果显示小鼠对致死剂量O157:H7 EDL933强毒株的保护率达到80%.结论 O157:H7菌影的成功制备及生物学活性的初步析为研制O157:H7菌影疫苗奠定了基础.
作者:黄春艳;蔡昆;王兴;王博;丁晓;裴秀英 刊期: 2012年第09期
采用气相色谱法(火焰光度检测器)检测血浆中有机磷农药的含硫代谢产物.经过相关的前处理及检测方法的优化后,血浆中有机磷的含硫代谢产物二乙基硫代磷酸酯和二乙基二硫代磷酸酯线性良好,杂质干扰少,回收率分别为92.46%和98.10%,日内精密度分别为0.37%和0.23%.检出限分别为5.0 μg/L和1.0 μg/L.经实际样品分析,证明该分析方法操作简便、准确可靠、灵敏度较高.
作者:金忠秀;许媛媛;储成顶 刊期: 2012年第09期
探讨选择性剖宫产产后出血量与缩宫素受体及宫颈评分等的相关性.方法 选择因社会因素进行剖宫产病例100例,记录基本资料,进行宫颈评分,计算术中及术后24 h出血量,并采集子宫肌层组织标本,进行缩宫素受体含量分析.结果 观察的11个因素中,与产后出血直接相关的因素有宫颈评分、新生儿体重以及缩宫素受体含量,与产后出血间接相关的因素有孕妇体重、孕妇体重指数及胎先露的高低.结论 选择适当手术时机,控制孕妇及新生儿体重,降低剖宫产率等对降低产后出血具有重要意义.
作者:刘治春;毕爱华;李慧蓉;金艳 刊期: 2012年第09期
目的 探讨内质网应激(ERS)相关蛋白在大鼠肝纤维化形成与自发逆转过程中的作用.方法 建立CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,免疫组化法检测各组ERS标志性蛋白CHOP、GRP78的表达;RT-PCR法检测CHOP、GRP78 mRNA的表达;Western blot检测CHOP蛋白表达变化.结果 与正常组大鼠相比,模型组大鼠CHOP、GRP78的表达显著升高(P<0.05).与模型组相比,停止CCl4诱导4周和8周后CHOP、GRP78表达降低(P<0.05).结论 ERS存在于大鼠肝纤维化进程中,可能与肝纤维化的发生、发展和逆转存在密切联系.
作者:谢加力;李俊;黄艳;黄成;章圣朋;林珍;季俊虬 刊期: 2012年第09期
分别以HC-Ⅱ法及荧光原位杂交(FISH) 法检测109例不同级别宫颈病变患者宫颈脱落细胞中高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及c-myc基因扩增情况,结果显示宫颈脱落细胞中c-myc基因的扩增率、高危型HPV的感染率与宫颈病变程度密切相关,高危型HPV感染和c-myc基因扩增在宫颈癌的发生发展中可能起着协同作用.
作者:丁玉兰;赵卫东;冯定庆;朱园园;金夏;宣恒华;周虎;桂云 刊期: 2012年第09期
目的 观察单用胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)抑制剂鬼臼苦素(PPP)或联合表皮生长因子受体抑制剂厄洛替尼对卵巢上皮性癌HO-8910细胞的影响.方法 使用PPP处理HO-8910细胞后,采用SRB法检测细胞的增殖情况;PI染色法检测细胞周期;Annexin-V和PI双染检测细胞凋亡;依据中效原理,使用CombiDrug 软件分析PPP与厄洛替尼的协同作用.结果 PPP可抑制HO-8910细胞增殖,呈现时间剂量依赖性,其抑制作用与诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡相关;PPP联合厄洛替尼较单用PPP或厄洛替尼能显著抑制HO-8910细胞增殖,两者联合具有协同作用.结论 特异性抑制IGF-1R可以抑制卵巢癌细胞生长,诱导其凋亡;在卵巢癌的治疗中,IGF-1R和EGFR可能具有联合靶向治疗价值.
作者:卫爱宁;许荣华;庄雅丽;高萍;任梅;王晓华 刊期: 2012年第09期
白藜芦醇具有抗氧化、抗心血管疾病、抗癌、抗菌等多种生物活性.白藜芦醇通过影响凋亡通路、核转录因子(NF-κB)通路,以及磷脂酰肌醇-3激酶/苏氨酸激酶(PI3K/AKT) 或丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路中一些蛋白质或者基因的表达,从而发挥抗肿瘤作用.
作者:金元宝 刊期: 2012年第09期
目的 探讨肿瘤相关基因RAN多态性与广西人群乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)遗传易感性的相关性.方法 选取位于RAN启动子区rs7132224 和3′非翻译区rs14035两个单核苷酸多态性(SNP)为遗传标记;采用SNPstream对340例HBV相关的HCC和361例对照个体进行基因分型;Logistic 回归分析计算OR和95%CI.结果 ①rs7132224、rs14035和HBV相关HCC遗传易感性相关性评价结果分别为OR=1.43,95%CI=1.04~1.98,P=0.02;OR=1.43,95%CI=0.57~4.11,P=0.40;②对人群进行性别、年龄、吸烟、饮酒状态、一级生物学亲属HCC家族史分层分析,发现rs7132224、rs14035和各亚人群HBV HCC发生均无明显相关性.结论 rs7132224和HBV相关HCC遗传易感性显著相关,而rs14035与HBV相关HCC遗传易感性无显著相关性.rs7132224、rs14035与性别、年龄、饮酒状态、吸烟状态、一级生物学亲属HCC家族史在HBV相关HCC发生风险中无交互作用.
作者:孟金凤;李佩尧;张红星;虞立霞;蔡觅;王志富;夏夏;崔英;谢伟敏;周钢桥 刊期: 2012年第09期
目的 分析2型糖尿病(T2DM)患者骨钙素(OC)与胰岛素抵抗、胰岛β细胞功能的相关性.方法 测定60例T2DM患者(病例组)及20例正常人(正常对照组)的空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(P2hBG)、空腹胰岛素(FINS)、空腹C肽(FCP)、糖化血红蛋白(HbA1c)、OC、脂联素(APN),用稳态模式胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评估胰岛素抵抗,用稳态模式胰岛素分泌指数(HOMA-B)及FCP评估胰岛β细胞功能状态.根据OC水平将病例患者分为两组,比较低骨钙素(OL)组与高骨钙素(OH)组上述指标的变化.结果 病例组FINS、FCP、HOMA-B、OC、APN明显低于正常对照组,HOMA-IR、甘油三脂(TG)高于正常对照组(P<0.05).OL组FBG、HbA1c、胆固醇(TC)、TG及HOMA-IR均高于OH组,但仅FBG、HbA1c差异有统计学意义(P<0.05);FINS、FCP、OC、APN及HOMA-B低于OH组,仅FCP、OC及APN差异有统计学意义(P<0.05).相关回归分析显示,OC与FBG、HbA1c、HOMA-IR呈负相关,与FCP、FINS、APN及HOMA-B呈正相关(P<0.05).多元线性回归分析显示,OC与FCP呈独立正相关(P<0.05).结论 T2DM患者血清OC水平的变化与胰岛素抵抗指数及胰岛β细胞功能指数的变化明显相关.
作者:王计艳;祝捷;陈若平;陈超;吴玉洁;陈燕;邢学农;任安;叶山东 刊期: 2012年第09期
回顾性分析我院行心脏再同步化治疗(CRT)前后心力衰竭患者血清N端脑钠肽(NT-pro-BNP)、基质金属蛋白酶2、9 (MMP- 2、9)水平变化对评价CRT疗效的可行性.采用酶联免疫法(ELISA)检测血清MMP-2、9和NT-pro-BNP水平.结果 表明,CRT组术后3、6个月血清MMP-2、9和NT-pro-BNP水平显著低于术前及对照组(P<0.05).血清MMP-2、9和NT-pro-BNP可以作为评价CRT疗效的生化指标.
作者:李镇;徐健;苏浩;程久佩;邵名亮;方存明 刊期: 2012年第09期
目的 观察白介素-15(IL-15)对人皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖的影响及其可能机制.方法 培养HaCaT细胞,不同剂量IL-15刺激不同时间后,MTT法分析IL-15对HaCaT细胞增殖的影响.Western blot分析IL-15在HaCaT细胞中激活的信号通路:丝裂原蛋白活化激酶-胞外信号调节激酶(MAPKs-ERK1/2)和磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT).在IL-15刺激HaCaT细胞前1 h,分别加入MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT信号传导特异性抑制剂(PD98059和LY294002)以阻断IL-15激活的相关信号通路,分析阻断剂对IL-15调控HaCaT细胞增殖的影响.结果 MTT分析结果显示:IL-15显著促进HaCaT细胞增殖,且具有时间及剂量依赖性;信号通路分析揭示IL-15能够增加pERK1/2及pAKT的水平;使用阻断剂的研究显示IL-15部分依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径发挥其促进增殖作用.结论 IL-15部分依赖MAPKs-ERK1/2 和PI3K-AKT信号途径促进HaCaT细胞增殖.
作者:吴德全;罗欣;贾波;程丰伟;张胜权;邓松华 刊期: 2012年第09期
目的 观察一种新合成的磷酸二酯酶Ⅲ(PDEⅢ)抑制剂CPUHY002对大鼠心肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响.方法 采用全细胞膜片钳技术考察CPUHY002对急性分离大鼠心肌细胞和H9c2细胞系Ito的作用.结果 在+50 mV下,CPUHY002对急性分离细胞和H9c2细胞系的Ito呈浓度依赖性抑制,其半数有效抑制浓度(IC50)分别为0.98 μmol/L和0.91 μmol/L;1 μmol/L CPUHY002可使I-V曲线明显下移,Ito 峰值分别下降(39.10±2.30)% 和(47.32±2.06)%,激活曲线右移,失活曲线左移(未见于H9c2),恢复曲线无显著变化.结论 CPUHY002可浓度依赖性地抑制大鼠心肌细胞Ito.
作者:周婕;谭树华;张善春;高署 刊期: 2012年第09期
目的 探讨白细胞介素-10(IL-10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人肝星状细胞(HSC)激活的抑制作用.方法 使用10 ng/ml TNF-α刺激体外培养的HSC,建立HSC激活模型,给予HSC激活模型不同浓度IL-10(2、10、20 ng/ml)作用不同时间(1、2、24、48、72、96 h)后,油红O染色观察细胞脂肪含量,分别用Western blot和RT-PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平.结果 TNF-α刺激后,HSC脂肪含量显著减少,α-SMA和MCP-1表达量水平均随时间延长而升高(P<0.05).联合使用IL-10,α-SMA水平显著下降(P<0.05),且具有浓度依赖性(P<0.05),MCP-1水平亦下降(P<0.05).结论 IL-10可以抑制由TNF-α诱导的HSC激活,在肝脏早期炎症和肝纤维化进程中起保护作用.
作者:夏阳;戴夫;彭琼 刊期: 2012年第09期
选择肝硬化门静脉高压行断流术患者40例,随机均分为对照组和研究组.对照组术后1~7 d行常规肠外营养(PN),研究组在常规PN的基础上加用丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln).检测两组术前及术后第1、3、5、7天营养状况、肝功能、免疫指标及术后并发症.结果 显示两组患者体重、上臂围、蛋白质、T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、免疫球蛋白IgG、IgM和C反应蛋白差异有统计学意义(P<0.05).肝硬化门静脉高压断流术后行添加Ala-Gln的PN较常规PN更有利于提高机体免疫力,改善营养状况,减轻炎症反应,减少术后并发症,其临床应用是安全有效的.
作者:杨先芬;荚卫东;许戈良;李建生;马金良;葛勇胜;余继海 刊期: 2012年第09期
过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子1α(PGC-1α)是一种介导多种细胞能量代谢和核激素受体的重要因子.PGC-1α可能影响葡萄糖转运体4(GLUT-4)的表达,调节骨骼肌葡萄糖的代谢;PGC-1α调节糖异生关键酶的表达,可导致葡萄糖输出的增加以及维持空腹血糖的稳定;肝糖的输出与胰岛素抵抗的发生、发展过程中也与PGC-1α的表达密不可分;PGC-1α可调节脂质代谢,诱导脂肪细胞分化.通过对PGC-1α与葡萄糖代谢、脂代谢及脂肪细胞分化关系的描述,揭示PGC-1α在代谢性疾病研究和药物研制中的重要意义.
作者:唐芸 刊期: 2012年第09期
目的 探讨白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及其联合检测在细菌性血流感染中的诊断价值.方法 采用化学发光方法检测144例细菌性血流感染患者和32例正常健康者的血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平.结果 革兰阴性菌和革兰阳性菌感染组的阳性率显著高于正常对照组(P<0.01);IL-6的敏感性和特异性均高于其他3项指标;4项指标的联合检测率高于单项指标的检测率.结论 IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α是参与细菌性血流感染的重要细胞因子;IL-6的诊断价值高于IL-1β、IL-8、TNF-α;联合检测有助于细菌性血流感染的检测.
作者:张洲;徐元宏;李涛;梁珺 刊期: 2012年第09期