学术投稿

THAP11转基因线虫载体的构建及转基因线虫的制备

杨帆;李长燕;任长虹;赵娜;杨晓明;汪思应

关键词:动物, 基因修饰, 遗传载体, 新小杆线虫, 漂亮
摘要:目的 构建带有线虫组织特异启动子的含不同ployQ的THAP11转基因线虫载体,并制备转基因线虫,为进一步研究THAP11基因的功能提供基础.方法 设计引物,以THAP11-pcDNA3.1 his/mycB真核表达载体为模板,PCR法扩增含不同ployQ的THAP11基因,将其克隆至带有线虫组织特异性启动子的pFx-unc119(Gene Marker dsRed)载体.酶切及测序鉴定正确后,用显微注射的方法 制备THAP11转基因线虫,用荧光显微镜观察载体荧光表达并提取转基因线虫基因组DNA、RNA,PCR、RT-PCR方法 检测其整合及表达情况.结果 PcR扩增出含不同ployQ的THAP11-HIS片段,长度约1000 bp,测序正确并构建pFx-uncll9(THAP11)载体THAP11转基因线虫的载体在线虫体内稳定表达红色荧光,转基因线虫基因组内有相应的THAP11插入及转录.结论 成功构建的THAP11转基因线虫的载体能稳定转染线虫,将有助于THAP11功能的进一步研究.
安徽医科大学学报杂志相关文献
  • 中段食管癌常规放疗与三维适形、调强放疗对危及器官影响的比较

    目的 比较中段食管癌常规三野放疗与三维适形(3DCRT)、调强放疗对危及器官(OAR)剂量学的影响.方法 40例胸中段食管鳞癌患者行模拟定位,T扫描成像传输到治疗计划系统(TPS),进行三维重建并勾画肿瘤体积(GTV)、临床靶体积(CTV)和OAR.40例均做常规放疗(前垂直野、后两等中心野)、3DCRT和调强计划.评估、优化后比较3种计划对OAR剂量学的影响.结果常规三野放疗和3DCRT、调强放疗分别为:脊髓Dmax和心脏V50检验差异有统计学意义(P<0.001);三组之间V5~V10的比较,除了V10在3D和IMRT两组之间差异无统计学意义外(P>0.05),其他指标在不同组间差异均有统计学意义.结论 胸中段食管鳞癌长度4~7 cm放射治疗,常规三野放疗与3DCRT、调强放疗对OAR剂量学的影响是很明显的,在相同的野同等的剂量照射情况下,调强放疗对OAR的影响明显比常规3DCRT放疗方式小.

    作者:杨林;洪浩;唐虹;汪志;叶冬青 刊期: 2009年第06期

  • 高脂饮食对大鼠肝脏组织AMPK表达及其活性的影响

    目的 研究不同饮食模式对大鼠肝脏组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达及其活性的影响.方法 28只雄性sD大鼠适应性喂养1周后随机分为2组:普通对照组(NC组,n=15),高脂饮食组(HF组,n=13).NC组给予普通饲料,HF组给予高脂饲料.16周后分别测定体重(BW)、血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标.采用Westernblot方法检测两组大鼠肝脏组织中AMPKa和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α亚基(p-AMPKa)蛋白的水平.结果与NC组相比.HF组大鼠的体重、FFA、TG、FPG、FINS增高(均P<0.05).两组肝脏组织中AMPKα的蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),但HF组肝脏组织中P-AMPKα的蛋白表达水平及AMPK活性降低(均P<0.05).结论 长期高脂饮食减少肝脏组织AMPKα蛋白的磷酸化和AMPK的活性.

    作者:丁晓洁;王佑民;王丽萍 刊期: 2009年第06期

  • 哺乳期母鼠氯氰菊酯暴露对成年雄性子代精子质量的影响

    目的 探讨哺乳期母鼠氯氰菊酯暴露对子代雄鼠成年后精子质量和生育力的影响.方法 21只孕鼠被随机分为对照组、低剂组和高剂量组,于分娩后第1天分别经口灌胃给予母鼠氯氰菊酯[0、6.25、25 mg/(kg·d)]处理,染毒至母鼠产后21 d,断乳后仔鼠正常喂养至出生后70 d,分别评价成年雄性仔鼠精子质和生育力,TUNEL法检测睾丸细胞凋亡,观察睾丸组织病理学改变.结果与对照组相比,高剂量组附睾精子数明显减少(P<0.05);生育力指标以及睾丸生精细胞凋亡数各组间差异均无统计学意义;组织病理学结果显示,处理组成年雄性后代睾丸生精细胞层减少、管腔内径增大、细胞相对稀疏且排列较紊乱.结论 哺乳期母鼠氯氰菊酯暴露对雄性子代成年后精子质量有明显影响.

    作者:马兴好;宁萑;王华;万艳梅;王素芳;徐德祥 刊期: 2009年第06期

  • THAP11转基因线虫载体的构建及转基因线虫的制备

    目的 构建带有线虫组织特异启动子的含不同ployQ的THAP11转基因线虫载体,并制备转基因线虫,为进一步研究THAP11基因的功能提供基础.方法 设计引物,以THAP11-pcDNA3.1 his/mycB真核表达载体为模板,PCR法扩增含不同ployQ的THAP11基因,将其克隆至带有线虫组织特异性启动子的pFx-unc119(Gene Marker dsRed)载体.酶切及测序鉴定正确后,用显微注射的方法 制备THAP11转基因线虫,用荧光显微镜观察载体荧光表达并提取转基因线虫基因组DNA、RNA,PCR、RT-PCR方法 检测其整合及表达情况.结果 PcR扩增出含不同ployQ的THAP11-HIS片段,长度约1000 bp,测序正确并构建pFx-uncll9(THAP11)载体THAP11转基因线虫的载体在线虫体内稳定表达红色荧光,转基因线虫基因组内有相应的THAP11插入及转录.结论 成功构建的THAP11转基因线虫的载体能稳定转染线虫,将有助于THAP11功能的进一步研究.

    作者:杨帆;李长燕;任长虹;赵娜;杨晓明;汪思应 刊期: 2009年第06期

  • 荧光原位杂交技术检测多发性骨髓瘤细胞遗传学异常及其意义

    目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)常见染色体异常.方法 结合1q21/RB1、D13S319/p53、IGH一组DNA特异性探针和荧光原位杂交(FISH)技术检测MM患者13q14缺失、+1、p53缺失以及IgH基因重排的发生率.结果22例MM患者中,3q14缺失7例(31.8%),其中D13S319、RB1探针同时检出4例13号染色体异常;IgH基因重排6例(27.2%);+113例(59.1%);p53基因缺失4例(18.1%).不同免疫球蛋白类型的D13S319缺失率差异有统计学意义(P<0.05).结论 13q14缺失、IgH基因重排及+1在MM中发生率较高,ISH技术检测分子遗传学异常敏感度高,应作为MM的常规检查方法 .

    作者:王风云;夏瑞祥;吴炜 刊期: 2009年第06期

  • 白细胞介素-1B-511和白细胞介素-1RN基因多态性与消化性溃疡的关系

    目的 研究白细胞介素-1B-511(IL-1B-511)和白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RN)基因多态性是否与消化性溃疡的易感性有关.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测217例消化性溃疡患者(十二指肠溃疡患者115例、胃溃疡患者102例)和110例正常对照组基因多态性.结果十二指肠溃疡患者IL-lRN*2基因频率明显高于正常对照组(18.7% vs 9.5%,=0.005),L-1RN L/2和2/2基因型的OR为1.93,5%CI为1.04~3.58,在幽门螺旋杆菌(H.pylori)感染阳性的人群中,这种基因多态性的影响表现更为明显,R为2.18(95%CI=1.01~4.68).十二指肠溃疡组和胃溃疡组IL-lB-511基因频率及基因型和正常对照组比较均无统计学意义(P>0.05).Logistic回归分析显示IL-lRN *2等位基因及H.pylori感染是十二指肠溃疡发生的独立危险因素,其OR分别为3.04(95%CI=1.44~6.40)和15.27(95%CI=5.42~43.00).结论 IL-1RN *2等位基因与十二指肠溃疡的易感性有关,IL-lRN *2与H.pylori感染是十二指肠溃疡发生的独立危险因素,并发挥着协同作用.

    作者:李球森;张磊;梅俏;胡咏梅;许建明 刊期: 2009年第06期

  • 儿童哮喘控制测试在儿童哮喘管理中的可行性

    目的 研究儿童哮喘控制测试(C-ACT)在儿童哮喘管理中应用的可行性.方法 对哮喘患儿采用问卷调查、哮喘专家评估及简易肺功能(PEF%)测定,进行C-ACT可靠性评估;C.ACT与专家评估及PEF%与C-ACT评估之间的相关性;C-ACT得分在不同PEF%之间以及C-ACT得分在专家评估水平之间的比较;检测C-ACT的效标效度.结果整个样本C-ACT的7个项目Cronbach's(克隆巴赫)a系数为0.800 8;c-ACT与专家评估、PEF%的Spearman相关系数分别为0.739、0.776 8;C-ACT得分在不同PEF%、专家评估水平的患儿之间差异有统计学意义(P<0.000 1);c-ACT的效标效度测量结果显示出:按病情分为缓解、间歇、轻度、中度、重度5组,各组之间C-ACT及PEF%之间差异均有统计学意义.结论 C-ACT具有良好的可靠性,能较准确地反映病情的严重程度,与肺功能具有高度相关性.C-ACT可在中国推广应用,可作为儿科哮喘专科医师的一个有效评估工具.

    作者:江文胜;宋文辉;詹三华 刊期: 2009年第06期

  • 螺内酯对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞PAI-1表达的抑制作用

    目的 观察醛固酮拮抗剂--螺内酯对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响.方法 采用正常糖(NG)、高糖(HG)及HG+不同浓度螺内酯体外培养大鼠系膜细胞.以RT-PCR检测PAI-1、醛固酮受体(MR)和保护其配体特异性的11β-羟类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)的mRNA表达,采用ELISA检测培养细胞上清中PAI-1蛋白的浓度.结果肾小球系膜细胞表达MR和11β-HSD2 mRNA;高糖刺激系膜细胞后PAI-1 mRNA表达明显升高,培养上清液蛋白浓度增加,加入螺内酯干预后系膜细胞PAI-1 mRNA和蛋白表达明显下降,且随螺内酯浓度增大,作用更明显.结论 螺内酯可能通过降低高糖对系膜细胞PAI-1表达的刺激作用而发挥其肾脏保护作用.

    作者:董崇周;叶山东;徐将;陈燕;王明丽;赵俐丽;吴凤珍 刊期: 2009年第06期

  • 中晚期非小细胞肺癌放射治疗剂量学研究

    目的 探讨应用常规放疗、三维适形放疗(3DCRT)和调强适形放疗(IMRT)治疗中晚期非小细胞肺癌(NSCLC),靶区适形度和危及器官的受量情况.方法 对经病理证实的10例中晚期NSCLC(Ⅲ~Ⅳ期)患者行回顾性研究,计划靶区处方剂量66 Gy,利用TPS对每个患者分别设计常规、3DCRT、IMRT三种放疗计?通过剂量体积直方图,比较三种计划对肿瘤靶区和正常组织器官的剂量分布.结果IMRT与3DCRT、常规放疗比较:肿瘤靶区有更好的剂量分布;明显减少了肺V30、V40值;心脏V35及食管V45亦减少;肺V5值提高;脊髓受量较3DCRT有所加大.结论 IMRT在靶区剂量分布上明显优于常规放疗和3DCRT,同时能更好的保护正常组织.

    作者:张丽;王凡;汪志;王教成 刊期: 2009年第06期

  • 体外受精-胚胎移植353周期临床分析

    体外受精-胚胎移植(IVF-ET)已成不孕不育治疗的常规手段,但其治疗结局常受多种因素影响,笔者对2005年10月~2008年12月间在我院实施的353个完整IVF-ET周期进行回顾性分析,总结IVF-ET过程中影响妊娠结局的主要临床因素.

    作者:丁玉芹;姜宏;裴红;汪存利;何瑞冰;张文香 刊期: 2009年第06期

  • 血浆Obestatin在非肥胖人群不同糖耐量状态下的水平变化

    目的 探讨血浆Obestatin在不同糖耐量状态下的水平变化以及与代谢指标的相关性.方法 将80例非肥胖人群根据口服葡萄糖耐量实验(OGTT)结果分为正常糖耐量组(NGT)、糖耐量异常组(IGT)和2型糖尿病组(DM),比较不同组间各代谢指标及空腹血浆Obestatin的差异.结果Obestatin在NGT组(3.55±0.57)μg/L与IGT组(3.17±0.24)μg/L及DM组(2.85±0.53)μg/L内呈递减趋势(P<0.01);Obestatin为胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的独立相关因素(P<0.01).结论 Obestatin可能参与胰岛素抵抗,与糖代谢密切相关.

    作者:顾朋颖;康冬梅;郑辉;杨娟;夏媛;梅涛 刊期: 2009年第06期

  • 5周岁以下儿童轻度持续性哮喘临床疗效观察

    目的 比较轻度持续性哮喘儿童的治疗中各方案间的疗效差异.方法 将105名5周岁以下轻度持续性哮喘患儿随机分为两组,分别给予抗白三烯(LTRA)、吸入激素(ICS)治疗并监测呼气峰流速(PEF).经过1个月的治疗后比较各治疗方案控制等级、PEF及肺功能(达峰时间比、达峰容积比)改善情况;1个月后,将LTRA组未达到控制的患儿升级至ICS继续治疗1个月,将ICS组未达到控制的患儿升级至ICS+LTRA继续治疗1个月.经过第2个月的治疗后各治疗组自身前后比较控制等级情况并将未控制患儿再次升级治疗(按照上述方法 )1个月并再次比较各组控制水平.结果经过第1个月的治疗,CS组控制等级和PEF改善情况优于LTRA组,差异有统计学意义(P<0.05);达峰时间比、达峰容积比较治疗前改善明显,差异有统计学意义(P<0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05);经过第2、3个月的治疗,升级治疗后的患儿得到控制.结论 对于5周岁以下轻度持续性哮喘患儿:ICS疗效优于单一LTRA;单一LTRA治疗具有一定局限性;ICS疗效欠佳时可加用LTRA.

    作者:张旭中;倪陈;潘家华;陈云龙;廖承琳;刘利梅 刊期: 2009年第06期

  • 浅表淋巴结转移癌组织C12蛋白芯片检测的意义

    目的 探讨C12蛋白芯片检测在浅表淋巴结转移癌诊断中的意义.方法 对已知细胞学诊断的浅表淋巴结组织细胞悬液进行C12检测,并同时对入选标本患者进行血C12检测,以病理诊断为终标准,对以上两种结果进行对照分析.结果在35例浅表淋巴结转移癌中,细胞学的正确诊断率为57.1%(20/35),淋巴结组织细胞悬液C12检测阳性率为74.3%(26/35),两者相比差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤组肿瘤标记物(TM)指标CA199、CEA、BetaHCG、f-PSA、PSA、CA125、HGH、CA153在血和淋巴结组织细胞悬液中含量的比值具有统计学意义(P<0.05).结论 淋巴结组织细胞悬液C12检测对浅表淋巴结转移癌细胞学检查有一定的辅助诊断价值,但对淋巴结转移癌的组织学分类灵敏度不高.

    作者:孟嘉;李俊;陈振东;孙昕 刊期: 2009年第06期

  • Synaptotagmin 1在成年期甲减大鼠海马内表达变化及甲状腺素治疗效应

    目的 研究成年期甲状腺功能减退症(甲减)大鼠海马突触小体内突触结合蛋白1(syt 1)的表达量及甲状腺素替代治疗后的恢复状况,探讨甲减脑损伤及恢复的分子基础.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减模型,采用Western blot方法 分析甲减组、小剂量甲状腺素替代治疗组、大剂量甲状腺素替代治疗组、正常对照组大鼠海马内syt 1的表达情况.结果甲减组大鼠血清T3、T4水平显著低于正常对照组(P<0.05);背侧海马突触小体内syt 1的蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.05).小剂量甲状腺素替代治疗后,血清T3、T4恢复至正常水平;syt1蛋白表达水平与甲减组比较未见明显改变(P>0.05).经大剂量替代治疗后血清T3、T4高于正常;syt1的蛋白表达恢复到正常水平(P<0.05).结论 成年期甲减大鼠海马内syt1蛋白表达降低,甲状腺素治疗能使其恢复,且恢复的程度与甲状腺素的治疗剂量有关,大剂量替代治疗较小剂量效果好.

    作者:徐永霞;王迅;沈玉先;朱德发 刊期: 2009年第06期

  • FISH技术和染色体核型分析联合检测体外受精-移植后胎儿与葡萄胎共同妊娠1例

    目的 探讨胎儿和葡萄胎共同妊娠病例的诊断方法 .方法 结合超声、临床检查、病理检查、染色体核型分析和荧光原位杂交技术(fISH技术)诊断1例体外受精-移植后胎儿和葡萄胎共同妊娠的病例,并随访患者的预后情况.结果孕妇因阴道流血较多而行钳刮术终止妊娠.刮出物送病理和遗传学分析,病理结果符合葡萄胎的诊断,染色体核型分析和FISH技术的结果相符,均显示胎儿和葡萄胎的染色体均为二倍体,结合病理结果、超声显示和血HCG水平,诊断为完全性葡萄胎与胎儿共存.结论 葡萄胎是一种少见的妊娠滋养细胞疾病.可用染色体核型分析和FISH技术检测胎儿是否整倍体,并结合临床特点等决定临床治疗方案.FISH技术所需时间短,便于临床及时诊治.

    作者:付娟娟;丛林;袁静;叶四云;方慧琴 刊期: 2009年第06期

  • 第三磨牙伸长对颞下颌关节结构和功能的影响

    目的 探讨单侧第三磨牙伸长对颞下颌关节(TMJ)结构与功能的影响.方法 收集单侧上、下颌第三磨牙伸长以及无第三磨牙伸长的患者各50例,拍摄牙尖交错位时双侧TMJ薛氏位片,定点测量双侧TMJ间隙,并计算髁突在关节窝中的位置,运用统计学方法 对结果进行分析.结果实验1组两侧间隙除30°和150°外,其他差异均有统计学意义(P<0.05);实验2组仅90°和120°差异有统计学意义(P<0.05).实验1组未伸长侧髁突在水平方向上位于后位的比例与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).两实验组出现(牙合)干扰的比例及实验1组出现咀嚼肌及关节区疼痛、TMJ弹响、开口型异常等的比例与对照组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 单侧第三磨牙伸长可改变TMJ间隙,致使髁突移位,引起关节疼痛、弹响等功能障碍.

    作者:陈丽娟;侯爱兵 刊期: 2009年第06期

  • 二甲双胍及游泳运动对肥胖大鼠血清Ghrelin水平的影响

    目的 研究二甲双胍、游泳运动及联合干预对肥胖大鼠血清Ghrelin水平的影响,探讨Ghrelin与肥胖、代谢紊乱之间的关系.方法 SD大鼠70只随机分为普食(ND,n=10)组和高脂(HD,n=60)组,16周HD组成功建立肥胖模型后(n=40)随机分为:肥胖对照(OB)组,二甲双胍(MET)组,游泳(SWI)组,二甲双胍+游泳(MAS)组,各10只.MET组予二甲双胍灌胃200 mg/(kg·d),SWI组进行游泳运动,MAS组予二甲双胍灌胃200 mg/(kg·d)联合游泳运动,SWI组、OB组及ND组等剂量蒸馏水灌胃,共6周.分别测定干预前及干预6周后各组体重(BW)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及Ghrelin.结果①干预前,肥胖模型各组较ND组BW、FPG、TG、TCH、FINS、HOMA-IR升高,Ghrelin降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),肥胖模型各组间各指标差异无统计学意义(P>0.05).②干预后,MET组、SWI组、MAS组较OB组BW、TG、TCH、FPG、FINS、HOMA-IR降低,Ghrelin水平升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),但各干预组间差异无统计学意义(P>0.05).③相关性分析显示FINS与Ghrelin呈负相关(r=-0.817,P<0.05).结论 二甲双胍及游泳运动可显著升高肥胖大鼠血清Ghrelin水平,并可改善代谢紊乱.Ghrelin可能是肥胖发生发展过程及机体长期能量调控的重要因素.

    作者:高雅;王长江;代芳;罗莉 刊期: 2009年第06期

  • 全反式维甲酸对实验性动脉粥样硬化兔动脉平滑肌细胞骨桥蛋白表达的影响

    目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对动脉粥样硬化(AS)模型兔动脉骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 复制AS兔模型,采用免疫组化和Western blot分析主动脉OPN的表达.结果成功建立As兔模型,高脂组兔主动脉OPN蛋白表达水平增加,经ATRA治疗后OPN蛋白表达下降,AS斑块减少.结论 ATRA可能通过降低动脉OPN的表达抑制AS的形成.

    作者:江志奎;朱华庆;程筱雯;肖林林;左莉;周青;汪渊 刊期: 2009年第06期

  • 急性白血病1185例次住院患者血流感染特点及危险因素分析

    目的 分析急性白血病(AL)并发血流感染的临床特征、危险因素及病原菌株特点.方法 对1185例次AL住院患者进行回顾性研究,统计分析其发生血流感染的临床特点及危险因素.结果 AL 合并血流感染的发生率为5.06%,病死率为0.68%.老年组(≥60岁)和非老年组(<60岁)血流感染发生率分别为10.53%和4.14%(P<0.01).中性粒细胞缺乏组及中性粒细胞非缺乏组两组血流感染发生率分别为10.65%和0.88%(P<0.01).AL初发组、复发及未缓解组和缓解组血流感染的发生率分别为8.07%、6.81%和1.57%(P<0.01).高肿瘤负荷组15.38%、低血红蛋白组6.79%、低血清蛋白血症组14.78%高于对比组(P<0.01).经验性治疗正确与否的病死率分别为8.8%和28.7%.病原体以G-菌为主,头孢三代耐药多见.结论 AL合并血流感染发生率高.高龄、治疗前高肿瘤负荷、初治及复发状态、中性粒细胞缺乏、低血红蛋白及血清白蛋白血症等是血流感染的易感因素.根据血流感染病原特点经验性正确选择初始抗生素有助于改善疾病.

    作者:秦慧;杨明珍;宋万灯;武琳琳;缪华伟;程歆;吴炜;刘沁华;王永庆 刊期: 2009年第06期

  • ARMET的原核表达及其单克隆抗体的制备

    目的 制备抗人ARMET(arginine-rich,mutated in early stage of tumors)的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性.方法 将pET28a-ARMET转化到大肠杆菌BL21中,然后用IPTG诱导表达,用预装好的Ni-beads柱进行纯化,通过SDS-PAGE电泳及考玛斯亮蓝染色方法 判断融合蛋白的表达量及纯度.将纯化的ARMET免疫雌性BALB/c小鼠后采用淋巴细胞杂交瘤技术,获取分泌抗ARMET杂交瘤细胞株.体内诱生腹水法制备mAb,间接ELISA法测定其效价及抗体亚型,辛酸-硫酸铵沉淀法及亲和层析法纯化mAb.用免疫荧光双标及Western blot法对抗体的特异性进行了鉴定.结果获得了纯度较高、浓度较高的融合蛋白;建立了7株稳定分泌特异性抗ARMET mAb的杂交瘤细胞株,诱生腹水法获得的抗体效价在1×10-5~1×10-7之间.且均有较好的特异性.结论 已成功制备出抗ARMET mAb,为进一步用于临床诊断和实验研究奠定了基础.

    作者:王法财;王海萍;李琪;方圣云;沈玉先 刊期: 2009年第06期

安徽医科大学学报杂志

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