操小马；赵春晖；梅陵宣
目的 建立稳定表达tau蛋白的稳转细胞系,并观察tau蛋白的过度磷酸化对稳转的非神经源性细胞形态和活性的影响.方法 构建pEGFP-C1-tau真核细胞表达质粒,建立稳转和表达融合蛋白GFP-tau的293T细胞系,并用不同浓度的蛋白磷酸酯酶抑制剂冈田酸(OA)处理细胞以诱导其过度磷酸化,通过荧光显微镜观察细胞形态的变化,用MTT法监测细胞的活性及免疫印迹法检测tau蛋白的表达及磷酸化水平.结果 成功地建立了稳定表达GFP-tau蛋白的非神经源性稳转细胞系,该细胞系在稳转后3～4周,细胞生长状态良好,细胞形态和突起生长基本正常.用OA处理后,细胞突起消失、变圆,贴壁性能差,死亡的细胞数量也增多,这些变化随着OA作用时间的延长或浓度的增加更加明显;MTT法显示细胞的增殖活性明显下降;免疫印迹法提示,100 nmol/L OA作用8 h后,磷酸化tau水平增加.结论 对于稳定表达tau蛋白的非神经源性细胞,OA可降低其增殖活性,该作用可能与OA抑制细胞内去磷酸化过程有关.
作者：冯利杰；李琪；方辉；王海萍；粱燕；沈玉先 刊期： 2007年第02期
目的 筛选细胞极化蛋白PALS1的结合蛋白,进一步探讨PALS1的功能及其分子机制.方法 将PALS1的全长cDNA序列克隆到载体pGBKT7中,重组的pGBKT7-PALS1质粒转入酵母AH 109细胞,细胞置于SD/-Trp培养基上生长,阳性细胞再用Hela细胞的cDNA文库质粒转化,生长于SD/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal,显蓝色的克隆为阳性.阳性克隆细胞中的DNA被抽提后转化细菌细胞,然后抽提DNA进行酶切分型.合适的类型测序后进行BLAST检索分析.结果 筛选到了13个阳性克隆,其中有2个是已知蛋白的基因即ATRAP和GLT28D1.结论 利用酵母双杂交系统成功克隆了PALS1的结合蛋白的基因,为进一步研究PALS1蛋白的功能提供了有益的启示.
作者：高雪敏；刘晓颖；张庆慧；戴寒晶；范礼斌 刊期： 2007年第02期
目的 建立生物组织中顺铂药物浓度的测定方法.方法 采用过氧化氢消解法,组织样品经过消解挥干浓缩,盐酸溶解,石墨炉原子吸收光谱法测定.结果 方法的主要指标如下:线性范围为0.02～2.00 μg/g,检出限为0.018μg/g,回收率为91%～115.0%,RSD为12%以内.结论 该方法完全符合中国药典2005版规定,可用来检测生物组织中顺铂药物浓度.
作者：许媛媛；周晓铁；王竞；叶宏杨；储成顶；姚余有 刊期： 2007年第02期
目的 观察特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后外周血淋巴细胞亚群水平变化,评价其在ITP发病机制研究和治疗中的价值.方法 利用流式细胞术检测ITP患者外周血淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+、CD19+CD5+)水平.结果 ITP组治疗前CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞百分率以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比例减低,CD3+CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率均升高,与对照组相比较,差异有显著性(P＜0.05).ITP组治疗后,27例有效,9例无效.治疗有效组治疗后CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞百分率以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比例升高,CD3+CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率均减低,与治疗前相比,差异有显著性(P＜0.05),与健康对照组相比,差异无显著性(P＞0.05);治疗无效组治疗后淋巴细胞亚群与治疗前相比,差异无显著性(P＞0.05).结论 ITP患者外周血淋巴细胞亚群水平存在异常,可能与ITP患者体内细胞免疫和体液免疫紊乱有关,并在其中发挥重要的作用,治疗前后外周血淋巴细胞亚群水平的变化对于研究ITP发病机制以及观察ITP临床病情转归均起着一定的作用.
作者：鲍静；夏瑞祥；曾庆曙；李嘉嘉 刊期： 2007年第02期
目的 观察盐酸戊乙奎醚对体外循环(CPB)瓣膜置换术患者血浆炎性因子的影响.方法 选择择期体外循环下瓣膜置换术患者20例,随机分为盐酸戊乙奎醚组(A组,n=10)和对照组(B组,n=10).A组于CPB前10 min静注盐酸戊乙奎醚3 mg,对照组给予等量生理盐水.分别于麻醉诱导前(T0)、CPB 30 min(T1)、主动脉开放后10 min(T2)、CPB后3 h(T3)、24h(T4)抽取桡动脉血,测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、和白细胞介素-10(IL-10)浓度.结果 组内比较,B组TNF-α浓度于T3时点高于T0(P＜0.01),而A组T1、T2时点TNF-α浓度较T0显著降低,其余时点与术前比较无明显变化.B组IL-6于T4时点高于A组(P＜0.05),IL-10浓度明显低于A组.组间比较,B组TNF-α浓度于T1～T4各时点均高于A组(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚可部分抑制CPB导致的炎性反应,对CPB术后全身炎性反应综合征有一定的预防作用.
作者：魏昕；高亚利；秦红；方才 刊期： 2007年第02期
目的 转染骨保护素(OPG)基因至Beagle犬骨髓基质细胞(BMSCs)中,并检测其表达能力,为基因工程技术治疗牙周病提供物质基础.方法 穿刺抽取成年Beagle犬骨髓2～3 ml,通过全骨髓贴壁法获取BMSCs.传代至第3代,脂质体瞬时转染经鉴定的重组pSecTag2/B-OPG,并用RT-PCR、Western blot检测OPG的表达水平.结果 重组质粒pSecTag2/B-OPG经Hind Ⅲ单酶切及EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ双酶切,电泳显示切下的片段均与预期大小相符,经测序证实此基因与GenBank中提供的序列[gi:33873056]一致;RTPCR、Western blot结果显示:重组pSecTag2/B-OPG在骨髓基质细胞中有表达.结论 成功建立了OPG基因修饰的骨髓基质细胞瞬时基因表达体系.
作者：操小马；赵春晖；梅陵宣 刊期： 2007年第02期
目的 研究噻唑烷二酮类药物吡格列酮对3T3-L1细胞中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA和蛋白表达的影响.方法 将3T3-L1细胞随机分为3组:对照组3T3-L1细胞进行正常的诱导分化,实验1组在3T3-L1细胞诱导时加入吡格列酮(0.1 mmol/L),实验2组在诱导分化后成熟的3T3-L1脂肪细胞中加入吡格列酮(0.1 mmol/L).提取细胞总RNA和总蛋白做RT-PCR和Western-blot测定GLUt4 mRNA和蛋白的表达情况.结果 与对照组比较实验组GLUT4mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P＜0.05).结论 吡格列酮促进3T3-L1脂肪细胞GLUT4 mRNA和蛋白表达.
作者：曹永红；王长江；贾敬华；代芳；陈明卫；林刚；叶小龙 刊期： 2007年第02期
目的 探讨As2O3对NB4细胞PTTG和c-myc基因表达的影响.方法 用RT-PCR的方法检测As2O3对NB4细胞PTTG和c-myc的表达的影响.结果 0.5、1.0、2.0μmol/L的As2O3作用NB4细胞24、48 h后PTTG基因的表达强度逐渐减弱;与未加As2O3的NB4细胞对照组比较P＜0.05.c-myc基因的表达强度亦逐渐减弱,与未加As2O3干预的NB4对照组比较P＜0.05.结论 PTTG和c-myc在NB4细胞中也有高表达,提示PTTG和c-myc的高表达在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病过程中可能起着重要作用,As2O3能有效地下调NB4细胞PTTG和c-myc的表达.
作者：蒋英俊；夏瑞祥；曾庆曙；程昌斌；黄建尧 刊期： 2007年第02期
目的 探讨豹皮樟总黄酮(TFLC)对大鼠酒精性脂肪性肝炎的防治作用及部分机制.方法 以酒精联合脂肪乳剂灌胃,每天2次,连续6周,制备大鼠酒精性脂肪性肝炎模型.给药组同时灌服相应药物.于实验的第6周末采血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及肝脏TG、TC、SOD、MDA、GSH-PX,并行肝脏病理学检查.结果 TFLC(200、400 mg/kg)组能明显降低酒精性脂肪性肝炎大鼠血清AST、ALT、ALP、γ-GT水平;降低血清和肝匀浆中TC、TG、MDA含量,增强SOD和GSH-PX活性;同时病理组织学显示TFLC能明显改善酒精性脂肪性肝炎大鼠的肝细胞脂肪变性.结论 TFLC对大鼠酒精性脂肪性肝炎具有较好的防治作用.其作用机制与抗氧化和调节脂质代谢有关.
作者：王媛媛；李俊；曹琦；黄艳；邹宇宏；程文明；李浩；贺晓昕；胡向阳 刊期： 2007年第02期
目的 研究芍药苷(PF)对佐剂性关节炎(AA)大鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)吞噬功能及其产生细胞因子的影响.方法 采用弗氏完全佐剂(FCA)诱导AA大鼠模型,无菌取PMφ,吞噬功能采用中性红法测定,PMφ培养上清液中IL-1活性的测定采用小鼠胸腺细胞增殖法,TNF-α和PGE2含量的测定采用放射免疫测定法.结果 PF能抑制关节肿胀,降低AA大鼠PMφ过强的吞噬功能和产生IL-1、TNF-α和PGE2的水平.结论 PF对AA大鼠的抗炎和免疫抑制作用与其降低AA大鼠PMφ过强的吞噬功能和产生IL-1、TNF-α和PGE2的水平有关.
作者：王晓玉；魏伟；唐丽琴；吴虹；杨宇清；陈尹 刊期： 2007年第02期
目的 观察糖皮质激素联合白芍总苷(TGP)对大鼠系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)的治疗作用.方法 采用胃肠道综合免疫方法建立大鼠MsPGN模型,以强的松为对照,观察激素和TGP联合应用对大鼠蛋白尿、血生化指标以及肾组织形态学改变的影响.蛋白尿采用双缩脲法测定,血生化指标由半自动生化分析仪测定,肾组织形态学为普通光镜观察.结果 模型组大鼠出现大量蛋白尿,血肌酐(C阳)、尿素氮(Bun)、转氨酶(ALT)和甘油三酯(TG)升高,血浆总蛋白(TP)和白蛋白(Alb)下降,模型组的肾小球系膜细胞中至重度增生,系膜基质聚积.灌胃给予强的松和TGP(1m∥蚝+100 m∥k)联合治疗4周后,肾小球系膜细胞增生、基质聚积明显减少,大鼠的蛋白尿减轻,Cre、Bun、ALT和TG下降,TP和Alb上升,与单独使用TGP(100 m∥蚝)、强的松(5 m∥蝇)有类似作用.结论 TGP与强的松联用,可降低强的松的用量,对于MsPGN大鼠的肝肾功能有明显改善作用,并能部分逆转受损肾小球的病理改变.
作者：冯静；徐星铭；周登余；戴宏 刊期： 2007年第02期
目的 构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达.方法 将hVEGF121cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定后,转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测.结果 真核双表达载体pIRES-hVEGF121 cDNA/hBMP-4构建成功且hVEGF121 cDNA和hBMP-4在COS-7细胞中得到了有效表达.结论 hVEGF121和hBMP-4在COS-7细胞中成功表达,为进一步研究打下良好基础.
作者：韩雷；汪春兰；赵宇；何金生；王帮河；王兴宇；杨兵；周志林 刊期： 2007年第02期
目的 探讨控制血糖对妊娠期糖尿病母体并发症及围生儿结局的影响.方法 对59例妊娠期糖尿病患者进行总结分析,根据治疗与否及血糖控制是否满意分成治疗组(A组,37例)与未治疗组(B组,22例),观察母儿并发症、分娩方式及新生儿窒息的情况.结果 未治疗组的母儿并发症比治疗组明显增多,两组相比差异有显著意义.结论 重视糖筛查,对妊娠期糖尿病孕妇进行及早诊断及治疗,选择合适的时间和方式终止妊娠可以降低母儿并发症的发生率.
作者：周桂菊；丛林；姚洁；祝艺虹；邱林霞；王红菊 刊期： 2007年第02期
目的 为直视经皮椎弓根螺钉内固定技术提供解剖学基础,并在此基础上分析经皮椎弓根螺钉的可行性及其优点.方法 选用6具经防腐处理的尸体,4具经乳胶灌注.在解剖显微镜下对T11,12及L1～5脊柱后部结构进行解剖观察,观测肌肉血供、神经支配及关节突、横突间的脊神经后支的走向及分布规律.结果 胸腰段脊神经后支于椎间孔外由脊神经发出内侧支,跨过横突根部,绕过小关节突外缘,到乳突与副突间的骨纤维管,呈树状分布,支配同一平面骶棘肌内侧束、小关节、棘突、棘间韧带.外侧支沿横突上缘自骶棘肌深面向下、外、背侧行走,支配骶棘肌的中间份和外侧份.节段动脉静脉的后支在椎间孔的上方绕向后下方,走行于脊神经的下方和下位椎体上关节突的外方,分为内外2支,分布于腰部深层肌肉.选择8例有手术适应证的患者,直视下小切口常规器械植入椎弓根螺钉系统,术中出血少,损伤小.结论 在观察椎弓根进针点解剖基础上,采用C臂X线机定位下,直视下小切口植入椎弓根螺钉,术中避免了损伤支配骶棘肌的脊神经后支和节段动静脉和脊柱后方的结构,术后恢复快、并发症少,是一种易于操作与推广的新技术.
作者：贺瑞；童元 刊期： 2007年第02期
目的 探讨缺氧诱导因子-1α在支气管哮喘大鼠模型支气管肺组织中的表达及意义.方法 采用卵蛋白致敏诱导建立支气管哮喘大鼠模型,采用逆转录半定量PCR及免疫印迹技术检测正常对照组、阴性对照组、哮喘组和地塞米松组支气管肺组织中缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达的水平.结果 与正常对照组比较,哮喘组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著增加,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.05);与正常对照组比较,阴性对照组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平没有明显改变,差异均无显著性(P＞0.05,P＞0.05);与哮喘组比较,地塞米松组中的缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著性降低,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.05),但与正常对照组比较,差异均无显著性(P＞0.05,P＞0.05).结论 缺氧诱导因子-1α可能参与支气管哮喘的发病机制且其表达的水平受地塞米松调节.
作者：许锐；费广鹤 刊期： 2007年第02期
目的 研究血管紧张素转换酶2(ACE2)在大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)上的表达.方法 体外培养大鼠PMVEC,分别采用RT-PCR、Western blot及免疫组化的方法检测ACE2的表达.结果 RT-PCR法从细胞总RNA中检测出ACE2的扩增条带;用Western blot法检测大鼠PMVEC蛋白提取液,可见ACE2的蛋白印迹条带;免疫组化法显示ACE2免疫组化反应产物主要分布于细胞的胞膜和胞浆.结论 从核酸和蛋白水平证实了大鼠PMVEC可以表达ACE2,表达主要位于细胞的胞膜和胞浆部分.
作者：王楠；孙耕耘；张泓 刊期： 2007年第02期
目的 研究间歇性充气加压对骨折愈合的影响.方法 26只新西兰大白兔于右侧胫骨中段造成3 mm缺损,术后长腿管型石膏外固定,随机分成A、B 2组.术后1周拆除管型石膏后予长腿石膏夹板外固定,对A组截骨部位进行间歇性充气加压,每次30 min,每天2次,持续8周;B组带不予充气的气囊作为对照组.术后每2周X线摄片和骨密度(BMD)测试.第10周A、B 2组各随机取3只兔子处死,行组织学检查骨痂面积、成骨细胞数.其余兔处死后取双侧胫骨作机械力学测试.结果 A组的骨痂面积、成骨细胞含量同期均高于B组.治疗后2组间和组内比较差异均有显著性,2组BMD和BMD比率在术后均随时间延长而增加,A组8周时BMD含量已达健侧胫骨同一部位的水平,4、6、8、10周时A组BMD和BMD比率高于B组(P＜0.05,P＜0.01).A组力学测试的4项参数平均化为对侧完整胫骨参数值的百分比后比B组高,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01).结论 间歇性充气加压可促进骨折的愈合,减轻软组织水肿,防止骨缺失,增加骨折愈合后的机械强度.
作者：赵广超；卜海富；桂斌捷；刘云飞 刊期： 2007年第02期
目的 探讨应用显微外科技术修复尿道下裂术后多发尿瘘的方法及临床效果.方法 应用显微外科技术修复尿道下裂术后多发尿瘘32例.对于直径＜2 mm的瘘孔采用单纯三层缝合法,＞2 mm采用局部皮瓣修复,其中Z形皮瓣修复瘘孔10个,Y-V皮瓣15个,旋转皮瓣18个,对于反复手术、瘘孔大或多个彼此邻近的瘘孔且局部瘢痕明显的复杂性尿瘘,则切除瘘孔及瘢痕组织并行尿道重建术,应用阴茎背侧皮瓣尿道成形2例,阴囊皮瓣尿道成形4例.结果 除1例应用局部皮瓣修复、1例应用阴囊皮瓣尿道重建因皮瓣远端坏死再次出现尿瘘外,其余均获满意效果.结论 根据尿瘘大小、部位及局部具体情况,应用显微外科技术、选择血供丰富皮瓣修复尿道下裂术后多发尿瘘成功率高.
作者：丁浩；汪春兰；曹东升；李小静；宁金龙 刊期： 2007年第02期
目的 研究A771726在大鼠体内的药代动力学过程.方法 单剂量口服给药3个剂量的A771726,根据大鼠体内血药浓度经时过程,计算相应的药代动力学参数.结果 A771726(3、6、12 mg/kg)的血药经时过程均符合一级吸收的一房室模型,其主要药动学参数T1/2Ka(h):3.91±3.43、5.63±2.07、6.73±1.67;T1/2Ke(h):17.45±10.79、9.68±4.65、7.63±1.39;AUC(0～tn)(mg/L·h-1):163.83±17.88、447.88±148.60、843.72±175.41;Cmax(mg/L):7.05±1.17、24.00±1.87、39.93±3.90;Tmax(h):8.00±0.00、6.67±2.06、8.00±0.00;MRT(0～tn)(h):19.87±4.25、19.54±1.11、19.29±2.47.结论 单剂量口服A7717263个剂量组的药物代谢均成线性关系,其血药浓度-时间曲线符合一级吸收的一房室模型.
作者：刘骅；金涌；朱熙；宋珏；李俊 刊期： 2007年第02期
目的 明确自噬和自噬性细胞死亡在胃癌SGC-7901及BGC-823细胞紫杉醇处理过程中的存在,探讨其对紫杉醇诱导的凋亡敏感性的作用.方法 流式细胞仪和MTT法分别检测紫杉醇诱导SGC-7901及BGC-823细胞的凋亡率和总死亡率,死细胞DAPI染色荧光显微镜检测非凋亡性细胞死亡,吖啶橙染色流式细胞仪和荧光显微镜分别定量、定性检测自噬和自噬性细胞死亡的存在,自噬特异性阻断剂3-甲基腺嘌呤和紫杉醇共同作用细胞后流式细胞术检测细胞死亡率和凋亡率的变化.结果 紫杉醇处理SGC-7901及BGC-823细胞早期(24 h内)可出现明显的细胞自噬性变化,自噬高峰期出现紫杉醇诱导3～6 h,自噬性细胞死亡存在并可能是紫杉醇诱导的非凋亡性细胞死亡的主要形式,抑制紫杉醇诱导的细胞自噬可以促进紫杉醇诱导细胞凋亡的发生.结论 紫杉醇可以诱导胃癌SGC-7901及BGC-823细胞自噬及自噬性细胞死亡,并且紫杉醇诱导的胃癌细胞自噬会拮抗胃癌细胞凋亡的发生,从而为胃癌化疗耐受提供新的解释,可能为胃癌治疗提供新的途径.
作者：占贞贞；陈思；叶艳；吴萍；张旭东；张林杰 刊期： 2007年第02期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
