王媛媛；李俊；曹琦；黄艳；邹宇宏；程文明；李浩；贺晓昕；胡向阳
目的 探讨大隐静脉曲张与平滑肌细胞(SMC)形态学改变之间的关系.方法 临床术中收集正常及曲张大隐静脉标本,制作石蜡切片进行HE染色观察SMC一般组织学变化;制作超薄切片置透射电镜下观察SMC超微结构变化.结果 光镜下曲张大隐静脉内膜增厚,SMC数量增多;中膜增厚,SMC形态异常,排列紊乱;电镜下SMC形态不规则,胞浆中粗面内质网、核糖体和线粒体丰富,肌丝少.结论 大隐静脉曲张的发生和发展与SMC细胞形态学改变密不可分.
作者：张媛媛；韩卉；黄大可 刊期： 2007年第02期
目的 探讨visfatin基因在2型糖尿病(T2DM)患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达情况,及其与胰岛素抵抗的关系.方法 用半定量RT-PCR方法检测糖代谢正常者(对照组20例)和T2DM患者(22例)的大网膜与皮下脂肪组织visfatin mRNA的表达水平,并测量体重、血压、腰围、臀围、血糖、空腹胰岛素、血脂和HOMA-IR.结果 糖尿病组和对照组网膜组织的visfatin mRNA表达量分别高于对应的皮下脂肪组织(P＜0.05).糖尿病组网膜的visfatin mRNA 表达量高于对照组网膜visfatin mRNA表达量(P＜0.05);糖尿病组皮下脂肪visfatin mRNA表达量与对照组皮下脂肪visfatin mRNA表达量之间无统计学差异(P＞0.05).将两组数据合并,网膜visfatin mRNA表达量与HOMA-IR呈正相关(P＜0.05),与其他因素均无相关性(P＞0.05);皮下脂肪visfatin mRNA表达量与所有因素均无相关性(P＞0.05).多元逐步回归分析发现,皮下脂肪visfatin mRNA表达量与所有因素均无相关性(P＞0.05);网膜visfatin mRNA表达量与HOMA-IR相关(P＜0.05).结论 T2DM患者网膜visfatin mRNA表达量较正常组明显升高,可以作为胰岛素抵抗的一个重要参数.
作者：叶小龙；王长江；林刚；曹永红；代芳 刊期： 2007年第02期
目的 分析TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)、流式细胞术和透射电镜3种细胞凋亡检测方法的优缺点.方法 在已建立的HCMV先天性感染小鼠中枢神经系统模型基础上,选用鼠龄为24个月模型鼠进行试验.试验分为3组(每组6只):HCMV先天性潜伏感染老年小鼠组(A组)、HCMV先天性潜伏再激活感染老年小鼠组(B组)和正常对照老年小鼠组(C组).采用TUNEL法和流式细胞仪检测各组小鼠大脑皮质细胞凋亡情况,采用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化.结果 TUNEL法和流式细胞术检测发现C组凋亡细胞少,A组凋亡细胞比率较C组有所升高,而B组凋亡细胞多;检测结果经T检验分析发现A组、B组与C组各组间凋亡率差异均有显著性.透射电镜检测发现,同C组比较,A组和B组部分神经元细胞核染色体固缩,核物质碎片化,凋亡小体形成等特征性凋亡改变.结论 HCMV先天性感染可致老年小鼠大脑皮质细胞凋亡.TUNEL法和流式细胞术可用于凋亡的定量检测,但TUNEL法易受主观因素的影响,而透射电镜是凋亡定性检测的可靠方法.
作者：赵俊；王明丽；陈敬贤 刊期： 2007年第02期
目的 探讨血管平滑肌细胞培养和纯化的方法.方法 用胎儿脐带动脉为材料,植块法原代培养人脐带动脉平滑肌细胞,传代过程中差异贴壁法纯化,相差显微镜观察培养细胞的形态,免疫组化染色检测细胞胞浆内α-肌动蛋白(α-actin)的表达.结果 相差显微镜下观察细胞呈长梭形,生长致密时排列成相互平行的束状,未见明显异型细胞,α-actin胞浆染色阳性细胞数占总细胞数的99%以上.结论 用胎儿脐带动脉为材料进行血管平滑肌细胞原代培养,传代过程中同时纯化的方法,简便可靠.
作者：汪圣毅；王玉琦；符伟国；刘康达；刘弋 刊期： 2007年第02期
目的 构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达.方法 将hVEGF121cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定后,转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测.结果 真核双表达载体pIRES-hVEGF121 cDNA/hBMP-4构建成功且hVEGF121 cDNA和hBMP-4在COS-7细胞中得到了有效表达.结论 hVEGF121和hBMP-4在COS-7细胞中成功表达,为进一步研究打下良好基础.
作者：韩雷；汪春兰；赵宇；何金生；王帮河；王兴宇；杨兵；周志林 刊期： 2007年第02期
目的 探讨褪黑素(MT)对肝星状细胞(HSC)凋亡和功能的影响.方法 予SD大鼠背部皮下注射CCl4造肝纤维化模型.体内实验:MT组大鼠灌胃给予MT[0.125、0.5、2.0 mg/(kg·d)]8周,HE染色观察病理改变,放免法检测血清透明质酸(HA)与Ⅲ型前胶原(PCⅢ).体外实验:从模型组来源的HSC给予MT(10、0.1 μmol/L和1 nmol/L),从正常组来源的HSC给予生理盐水;48 h后,流式细胞术检测HSC细胞凋亡,放免法检测培养上清中HA、PCⅢ.结果 体内实验中,MT各剂量组均明显改善CCl4引起的肝脏病理改变,降低血清HA、PCⅢ.体外实验中,MT 10 μmol/L显著诱导HSC凋亡,各浓度MT均明显降低HA、PCⅢ的水平.结论 MT可能通过诱导HSC凋亡和抑制其合成或分泌HA与PCⅢ而改善CCl4致大鼠肝纤维化.
作者：叶根深；马勇；魏伟；李瑞麟；陈文笔；严家春；丁体龙 刊期： 2007年第02期
目的 探讨缺氧诱导因子-1α在支气管哮喘大鼠模型支气管肺组织中的表达及意义.方法 采用卵蛋白致敏诱导建立支气管哮喘大鼠模型,采用逆转录半定量PCR及免疫印迹技术检测正常对照组、阴性对照组、哮喘组和地塞米松组支气管肺组织中缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达的水平.结果 与正常对照组比较,哮喘组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著增加,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.05);与正常对照组比较,阴性对照组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平没有明显改变,差异均无显著性(P＞0.05,P＞0.05);与哮喘组比较,地塞米松组中的缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著性降低,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.05),但与正常对照组比较,差异均无显著性(P＞0.05,P＞0.05).结论 缺氧诱导因子-1α可能参与支气管哮喘的发病机制且其表达的水平受地塞米松调节.
作者：许锐；费广鹤 刊期： 2007年第02期
目的 探讨应用显微外科技术修复尿道下裂术后多发尿瘘的方法及临床效果.方法 应用显微外科技术修复尿道下裂术后多发尿瘘32例.对于直径＜2 mm的瘘孔采用单纯三层缝合法,＞2 mm采用局部皮瓣修复,其中Z形皮瓣修复瘘孔10个,Y-V皮瓣15个,旋转皮瓣18个,对于反复手术、瘘孔大或多个彼此邻近的瘘孔且局部瘢痕明显的复杂性尿瘘,则切除瘘孔及瘢痕组织并行尿道重建术,应用阴茎背侧皮瓣尿道成形2例,阴囊皮瓣尿道成形4例.结果 除1例应用局部皮瓣修复、1例应用阴囊皮瓣尿道重建因皮瓣远端坏死再次出现尿瘘外,其余均获满意效果.结论 根据尿瘘大小、部位及局部具体情况,应用显微外科技术、选择血供丰富皮瓣修复尿道下裂术后多发尿瘘成功率高.
作者：丁浩；汪春兰；曹东升；李小静；宁金龙 刊期： 2007年第02期
目的 明确自噬和自噬性细胞死亡在胃癌SGC-7901及BGC-823细胞紫杉醇处理过程中的存在,探讨其对紫杉醇诱导的凋亡敏感性的作用.方法 流式细胞仪和MTT法分别检测紫杉醇诱导SGC-7901及BGC-823细胞的凋亡率和总死亡率,死细胞DAPI染色荧光显微镜检测非凋亡性细胞死亡,吖啶橙染色流式细胞仪和荧光显微镜分别定量、定性检测自噬和自噬性细胞死亡的存在,自噬特异性阻断剂3-甲基腺嘌呤和紫杉醇共同作用细胞后流式细胞术检测细胞死亡率和凋亡率的变化.结果 紫杉醇处理SGC-7901及BGC-823细胞早期(24 h内)可出现明显的细胞自噬性变化,自噬高峰期出现紫杉醇诱导3～6 h,自噬性细胞死亡存在并可能是紫杉醇诱导的非凋亡性细胞死亡的主要形式,抑制紫杉醇诱导的细胞自噬可以促进紫杉醇诱导细胞凋亡的发生.结论 紫杉醇可以诱导胃癌SGC-7901及BGC-823细胞自噬及自噬性细胞死亡,并且紫杉醇诱导的胃癌细胞自噬会拮抗胃癌细胞凋亡的发生,从而为胃癌化疗耐受提供新的解释,可能为胃癌治疗提供新的途径.
作者：占贞贞；陈思；叶艳；吴萍；张旭东；张林杰 刊期： 2007年第02期
目的 研究舌体大小与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)之间的关系.方法 采用多排螺旋CT(MSCT)对正常人和OSAHS患者的舌体大小进行扫描,应用图像工作站测量正常人和OSAHS患者的舌体大小,包括舌体长度、舌体宽处的宽度、中纵切面面积,舌体厚度.通过OSAHS患者与正常人、轻度OSAHS患者与中重度OSAHS患者舌大小的各指标的比较,研究舌体大小与OSAHS之间的相关性.结果 正常个体的舌大小测量参数的测量均值均小于OSAHS患者个体(P＜0.05);轻度OSAHS患者舌体大小的各指标测量均值均小于中重度OSAHS患者(P＜0.05);舌体大小的临床分级与OSAHS严重程度有关.结论 舌大小和OSAHS发病密切相关,特别是中重度OSAHS发病中起着重要作用.
作者：万玉峰；高潮兵；吴兴旺；陶冶；周莉；刘业海 刊期： 2007年第02期
目的 建立稳定表达tau蛋白的稳转细胞系,并观察tau蛋白的过度磷酸化对稳转的非神经源性细胞形态和活性的影响.方法 构建pEGFP-C1-tau真核细胞表达质粒,建立稳转和表达融合蛋白GFP-tau的293T细胞系,并用不同浓度的蛋白磷酸酯酶抑制剂冈田酸(OA)处理细胞以诱导其过度磷酸化,通过荧光显微镜观察细胞形态的变化,用MTT法监测细胞的活性及免疫印迹法检测tau蛋白的表达及磷酸化水平.结果 成功地建立了稳定表达GFP-tau蛋白的非神经源性稳转细胞系,该细胞系在稳转后3～4周,细胞生长状态良好,细胞形态和突起生长基本正常.用OA处理后,细胞突起消失、变圆,贴壁性能差,死亡的细胞数量也增多,这些变化随着OA作用时间的延长或浓度的增加更加明显;MTT法显示细胞的增殖活性明显下降;免疫印迹法提示,100 nmol/L OA作用8 h后,磷酸化tau水平增加.结论 对于稳定表达tau蛋白的非神经源性细胞,OA可降低其增殖活性,该作用可能与OA抑制细胞内去磷酸化过程有关.
作者：冯利杰；李琪；方辉；王海萍；粱燕；沈玉先 刊期： 2007年第02期
目的 转染骨保护素(OPG)基因至Beagle犬骨髓基质细胞(BMSCs)中,并检测其表达能力,为基因工程技术治疗牙周病提供物质基础.方法 穿刺抽取成年Beagle犬骨髓2～3 ml,通过全骨髓贴壁法获取BMSCs.传代至第3代,脂质体瞬时转染经鉴定的重组pSecTag2/B-OPG,并用RT-PCR、Western blot检测OPG的表达水平.结果 重组质粒pSecTag2/B-OPG经Hind Ⅲ单酶切及EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ双酶切,电泳显示切下的片段均与预期大小相符,经测序证实此基因与GenBank中提供的序列[gi:33873056]一致;RTPCR、Western blot结果显示:重组pSecTag2/B-OPG在骨髓基质细胞中有表达.结论 成功建立了OPG基因修饰的骨髓基质细胞瞬时基因表达体系.
作者：操小马；赵春晖；梅陵宣 刊期： 2007年第02期
目的 分析兔饮食性高脂血症形成过程中血清肌酸激酶活性和C反应蛋白含量的动态变化.方法 高胆固醇饮食诱发兔高脂血症,检测高胆固醇饮食7、14、17、21、25、28d兔血清总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)及肌酸激酶(CK)和C反应蛋白(CRP)的变化.结果 成功建立高脂血症兔模型,大耳白兔在喂食高胆固醇饲料7、14、17、21、25、28 d后血液中CHO和TG浓度逐渐升高(P＜0.05),CK活性和CRP含量随着高脂血症的进程而逐渐升高,变化有显著性差异(P＜0.05).结论 提示兔血清CK活性和CRP含量与高脂血症的进程相关.
作者：程筱雯；江志奎；朱华庆；肖林林；谢斌；胡若磊；胡超杰；张素梅；张玲；刘超；陈孝宇；何苇；桂淑玉；周莉；周青；汪渊 刊期： 2007年第02期
目的 观察特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后外周血淋巴细胞亚群水平变化,评价其在ITP发病机制研究和治疗中的价值.方法 利用流式细胞术检测ITP患者外周血淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+、CD19+CD5+)水平.结果 ITP组治疗前CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞百分率以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比例减低,CD3+CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率均升高,与对照组相比较,差异有显著性(P＜0.05).ITP组治疗后,27例有效,9例无效.治疗有效组治疗后CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞百分率以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比例升高,CD3+CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率均减低,与治疗前相比,差异有显著性(P＜0.05),与健康对照组相比,差异无显著性(P＞0.05);治疗无效组治疗后淋巴细胞亚群与治疗前相比,差异无显著性(P＞0.05).结论 ITP患者外周血淋巴细胞亚群水平存在异常,可能与ITP患者体内细胞免疫和体液免疫紊乱有关,并在其中发挥重要的作用,治疗前后外周血淋巴细胞亚群水平的变化对于研究ITP发病机制以及观察ITP临床病情转归均起着一定的作用.
作者：鲍静；夏瑞祥；曾庆曙；李嘉嘉 刊期： 2007年第02期
目的 研究人外周血干细胞(PBSC)向血管内皮细胞分化.方法 以血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对经重组人粒细胞集落刺激因子刺激后采集的PBSC进行诱导培养,观察细胞形态的变化,运用流式细胞术检测诱导后的细胞表达CD31和vWF情况,并用透射电镜观察细胞的超微结构.结果 经VEGF和bFGF诱导后的细胞形态上表现内皮细胞特征,经流式细胞仪测定表达血管内皮细胞特有表面标志CD31和vWF,透射电镜细胞胞浆内可见特征性Weible-Palade小体.结论 外周血干细胞在VEGF和bFGF诱导下,可分化为内皮细胞.
作者：吴维；胡何节；余继海 刊期： 2007年第02期
目的 研究血管紧张素转换酶2(ACE2)在大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)上的表达.方法 体外培养大鼠PMVEC,分别采用RT-PCR、Western blot及免疫组化的方法检测ACE2的表达.结果 RT-PCR法从细胞总RNA中检测出ACE2的扩增条带;用Western blot法检测大鼠PMVEC蛋白提取液,可见ACE2的蛋白印迹条带;免疫组化法显示ACE2免疫组化反应产物主要分布于细胞的胞膜和胞浆.结论 从核酸和蛋白水平证实了大鼠PMVEC可以表达ACE2,表达主要位于细胞的胞膜和胞浆部分.
作者：王楠；孙耕耘；张泓 刊期： 2007年第02期
目的 观察盐酸戊乙奎醚对体外循环(CPB)瓣膜置换术患者血浆炎性因子的影响.方法 选择择期体外循环下瓣膜置换术患者20例,随机分为盐酸戊乙奎醚组(A组,n=10)和对照组(B组,n=10).A组于CPB前10 min静注盐酸戊乙奎醚3 mg,对照组给予等量生理盐水.分别于麻醉诱导前(T0)、CPB 30 min(T1)、主动脉开放后10 min(T2)、CPB后3 h(T3)、24h(T4)抽取桡动脉血,测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、和白细胞介素-10(IL-10)浓度.结果 组内比较,B组TNF-α浓度于T3时点高于T0(P＜0.01),而A组T1、T2时点TNF-α浓度较T0显著降低,其余时点与术前比较无明显变化.B组IL-6于T4时点高于A组(P＜0.05),IL-10浓度明显低于A组.组间比较,B组TNF-α浓度于T1～T4各时点均高于A组(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚可部分抑制CPB导致的炎性反应,对CPB术后全身炎性反应综合征有一定的预防作用.
作者：魏昕；高亚利；秦红；方才 刊期： 2007年第02期
目的 研究噻唑烷二酮类药物吡格列酮对3T3-L1细胞中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA和蛋白表达的影响.方法 将3T3-L1细胞随机分为3组:对照组3T3-L1细胞进行正常的诱导分化,实验1组在3T3-L1细胞诱导时加入吡格列酮(0.1 mmol/L),实验2组在诱导分化后成熟的3T3-L1脂肪细胞中加入吡格列酮(0.1 mmol/L).提取细胞总RNA和总蛋白做RT-PCR和Western-blot测定GLUt4 mRNA和蛋白的表达情况.结果 与对照组比较实验组GLUT4mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P＜0.05).结论 吡格列酮促进3T3-L1脂肪细胞GLUT4 mRNA和蛋白表达.
作者：曹永红；王长江；贾敬华；代芳；陈明卫；林刚；叶小龙 刊期： 2007年第02期
目的 探讨尿红细胞形态诊断肾小球性血尿的一种新标准.方法 对216例已确诊的血尿患儿应用新标准进行尿红细胞形态检查,分析其敏感性和特异性,并与以往报道的其他标准相比较.结果 环状+芽孢＞5%且总变形红细胞＞50%诊断肾小球性血尿的灵敏度98.68%,特异度100%,明显优于其他3种诊断标准.结论 环状+芽孢＞5%且总变形红细胞＞50%这一标准诊断肾小球性血尿敏感性和特异性更好,值得临床推广应用.
作者：夏珣；鹿玲；胡波；李鑫 刊期： 2007年第02期
目的 建立生物组织中顺铂药物浓度的测定方法.方法 采用过氧化氢消解法,组织样品经过消解挥干浓缩,盐酸溶解,石墨炉原子吸收光谱法测定.结果 方法的主要指标如下:线性范围为0.02～2.00 μg/g,检出限为0.018μg/g,回收率为91%～115.0%,RSD为12%以内.结论 该方法完全符合中国药典2005版规定,可用来检测生物组织中顺铂药物浓度.
作者：许媛媛；周晓铁；王竞；叶宏杨；储成顶；姚余有 刊期： 2007年第02期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
