魏昕；高亚利；秦红；方才
目的 构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选及结构和功能的研究打下基础.方法 应用overlapping PCR制备Protein A的Z结构域.用含随机核苷酸序列的引物,制备对Z结构域的第10、13、27、28、31和32位氨基酸进行随机突变的定点随机突变体库.并在突变体片段两端引入Kpn Ⅰ位点,3'端引入3个氨基酸大小随机连接肽的序列.经Kpn Ⅰ酶切后随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S.克隆产物转化大肠杆菌TG1,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示定点随机突变组合文库.结果 该定点随机突变组合文库的转化子数目为6.4×106个,滴度为1.4×1015 TU/L;文库中含0.72以上的阳性克隆,其中有2个单结构域的阳性克隆占0.15;15个样品的序列分析显示各突变位点和随机连接肽的氨基酸序列呈随机性分布.结论 成功构建了噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,该库库容量在一级结构上具有良好的随机性和多样性,可满足体外分子进化研究的要求.
作者：何俊；周霞；陈璐；陈秋莉；王锦红；蒋少华；陈铭；卢海妹；潘卫；邓松华 刊期： 2007年第02期
目的 探讨血管平滑肌细胞培养和纯化的方法.方法 用胎儿脐带动脉为材料,植块法原代培养人脐带动脉平滑肌细胞,传代过程中差异贴壁法纯化,相差显微镜观察培养细胞的形态,免疫组化染色检测细胞胞浆内α-肌动蛋白(α-actin)的表达.结果 相差显微镜下观察细胞呈长梭形,生长致密时排列成相互平行的束状,未见明显异型细胞,α-actin胞浆染色阳性细胞数占总细胞数的99%以上.结论 用胎儿脐带动脉为材料进行血管平滑肌细胞原代培养,传代过程中同时纯化的方法,简便可靠.
作者：汪圣毅；王玉琦；符伟国；刘康达；刘弋 刊期： 2007年第02期
目的 探讨空气灌肠在诊治小儿急性肠套叠中的应用价值及如何提高整复率.方法 经空气压力灌肠证实肠套叠患儿125例(135例次),所有病例均在透视下采用空气灌肠获得肠套叠的诊断并进行整复治疗.诊断压力6～8kPa,整复压力10～16 kPa.结果 腹部平片86例次肠管生理积气减少.空气灌肠透视130例次见肠管内软组织肿块.共整复成功129例次,其中一次性整复成功109例次,多次间歇性整复成功20例次,其中8例发生复套均整复成功,总成功率为95.56%,6例次未整复成功,无一例穿孔.结论 空气灌肠是小儿急性肠套叠首选的诊治方法,疗效可靠,安全性高;早期诊断及间歇性空气灌肠并辅以局部按摩是提高整复率的关键.
作者：李修奎；余永强；朱赤；刘连城 刊期： 2007年第02期
目的 研究血管紧张素转换酶2(ACE2)在大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)上的表达.方法 体外培养大鼠PMVEC,分别采用RT-PCR、Western blot及免疫组化的方法检测ACE2的表达.结果 RT-PCR法从细胞总RNA中检测出ACE2的扩增条带;用Western blot法检测大鼠PMVEC蛋白提取液,可见ACE2的蛋白印迹条带;免疫组化法显示ACE2免疫组化反应产物主要分布于细胞的胞膜和胞浆.结论 从核酸和蛋白水平证实了大鼠PMVEC可以表达ACE2,表达主要位于细胞的胞膜和胞浆部分.
作者：王楠；孙耕耘；张泓 刊期： 2007年第02期
目的 观察盐酸戊乙奎醚对体外循环(CPB)瓣膜置换术患者血浆炎性因子的影响.方法 选择择期体外循环下瓣膜置换术患者20例,随机分为盐酸戊乙奎醚组(A组,n=10)和对照组(B组,n=10).A组于CPB前10 min静注盐酸戊乙奎醚3 mg,对照组给予等量生理盐水.分别于麻醉诱导前(T0)、CPB 30 min(T1)、主动脉开放后10 min(T2)、CPB后3 h(T3)、24h(T4)抽取桡动脉血,测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、和白细胞介素-10(IL-10)浓度.结果 组内比较,B组TNF-α浓度于T3时点高于T0(P＜0.01),而A组T1、T2时点TNF-α浓度较T0显著降低,其余时点与术前比较无明显变化.B组IL-6于T4时点高于A组(P＜0.05),IL-10浓度明显低于A组.组间比较,B组TNF-α浓度于T1～T4各时点均高于A组(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚可部分抑制CPB导致的炎性反应,对CPB术后全身炎性反应综合征有一定的预防作用.
作者：魏昕；高亚利；秦红；方才 刊期： 2007年第02期
目的 探讨visfatin基因在2型糖尿病(T2DM)患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达情况,及其与胰岛素抵抗的关系.方法 用半定量RT-PCR方法检测糖代谢正常者(对照组20例)和T2DM患者(22例)的大网膜与皮下脂肪组织visfatin mRNA的表达水平,并测量体重、血压、腰围、臀围、血糖、空腹胰岛素、血脂和HOMA-IR.结果 糖尿病组和对照组网膜组织的visfatin mRNA表达量分别高于对应的皮下脂肪组织(P＜0.05).糖尿病组网膜的visfatin mRNA 表达量高于对照组网膜visfatin mRNA表达量(P＜0.05);糖尿病组皮下脂肪visfatin mRNA表达量与对照组皮下脂肪visfatin mRNA表达量之间无统计学差异(P＞0.05).将两组数据合并,网膜visfatin mRNA表达量与HOMA-IR呈正相关(P＜0.05),与其他因素均无相关性(P＞0.05);皮下脂肪visfatin mRNA表达量与所有因素均无相关性(P＞0.05).多元逐步回归分析发现,皮下脂肪visfatin mRNA表达量与所有因素均无相关性(P＞0.05);网膜visfatin mRNA表达量与HOMA-IR相关(P＜0.05).结论 T2DM患者网膜visfatin mRNA表达量较正常组明显升高,可以作为胰岛素抵抗的一个重要参数.
作者：叶小龙；王长江；林刚；曹永红；代芳 刊期： 2007年第02期
目的 研究芍药苷(PF)对佐剂性关节炎(AA)大鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)吞噬功能及其产生细胞因子的影响.方法 采用弗氏完全佐剂(FCA)诱导AA大鼠模型,无菌取PMφ,吞噬功能采用中性红法测定,PMφ培养上清液中IL-1活性的测定采用小鼠胸腺细胞增殖法,TNF-α和PGE2含量的测定采用放射免疫测定法.结果 PF能抑制关节肿胀,降低AA大鼠PMφ过强的吞噬功能和产生IL-1、TNF-α和PGE2的水平.结论 PF对AA大鼠的抗炎和免疫抑制作用与其降低AA大鼠PMφ过强的吞噬功能和产生IL-1、TNF-α和PGE2的水平有关.
作者：王晓玉；魏伟；唐丽琴；吴虹；杨宇清；陈尹 刊期： 2007年第02期
目的 研究间歇性充气加压对骨折愈合的影响.方法 26只新西兰大白兔于右侧胫骨中段造成3 mm缺损,术后长腿管型石膏外固定,随机分成A、B 2组.术后1周拆除管型石膏后予长腿石膏夹板外固定,对A组截骨部位进行间歇性充气加压,每次30 min,每天2次,持续8周;B组带不予充气的气囊作为对照组.术后每2周X线摄片和骨密度(BMD)测试.第10周A、B 2组各随机取3只兔子处死,行组织学检查骨痂面积、成骨细胞数.其余兔处死后取双侧胫骨作机械力学测试.结果 A组的骨痂面积、成骨细胞含量同期均高于B组.治疗后2组间和组内比较差异均有显著性,2组BMD和BMD比率在术后均随时间延长而增加,A组8周时BMD含量已达健侧胫骨同一部位的水平,4、6、8、10周时A组BMD和BMD比率高于B组(P＜0.05,P＜0.01).A组力学测试的4项参数平均化为对侧完整胫骨参数值的百分比后比B组高,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01).结论 间歇性充气加压可促进骨折的愈合,减轻软组织水肿,防止骨缺失,增加骨折愈合后的机械强度.
作者：赵广超；卜海富；桂斌捷；刘云飞 刊期： 2007年第02期
目的 探讨控制血糖对妊娠期糖尿病母体并发症及围生儿结局的影响.方法 对59例妊娠期糖尿病患者进行总结分析,根据治疗与否及血糖控制是否满意分成治疗组(A组,37例)与未治疗组(B组,22例),观察母儿并发症、分娩方式及新生儿窒息的情况.结果 未治疗组的母儿并发症比治疗组明显增多,两组相比差异有显著意义.结论 重视糖筛查,对妊娠期糖尿病孕妇进行及早诊断及治疗,选择合适的时间和方式终止妊娠可以降低母儿并发症的发生率.
作者：周桂菊；丛林；姚洁；祝艺虹；邱林霞；王红菊 刊期： 2007年第02期
目的 探讨缺氧诱导因子-1α在支气管哮喘大鼠模型支气管肺组织中的表达及意义.方法 采用卵蛋白致敏诱导建立支气管哮喘大鼠模型,采用逆转录半定量PCR及免疫印迹技术检测正常对照组、阴性对照组、哮喘组和地塞米松组支气管肺组织中缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达的水平.结果 与正常对照组比较,哮喘组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著增加,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.05);与正常对照组比较,阴性对照组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平没有明显改变,差异均无显著性(P＞0.05,P＞0.05);与哮喘组比较,地塞米松组中的缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著性降低,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.05),但与正常对照组比较,差异均无显著性(P＞0.05,P＞0.05).结论 缺氧诱导因子-1α可能参与支气管哮喘的发病机制且其表达的水平受地塞米松调节.
作者：许锐；费广鹤 刊期： 2007年第02期
目的 建立生物组织中顺铂药物浓度的测定方法.方法 采用过氧化氢消解法,组织样品经过消解挥干浓缩,盐酸溶解,石墨炉原子吸收光谱法测定.结果 方法的主要指标如下:线性范围为0.02～2.00 μg/g,检出限为0.018μg/g,回收率为91%～115.0%,RSD为12%以内.结论 该方法完全符合中国药典2005版规定,可用来检测生物组织中顺铂药物浓度.
作者：许媛媛；周晓铁；王竞；叶宏杨；储成顶；姚余有 刊期： 2007年第02期
目的 探讨应用显微外科技术修复尿道下裂术后多发尿瘘的方法及临床效果.方法 应用显微外科技术修复尿道下裂术后多发尿瘘32例.对于直径＜2 mm的瘘孔采用单纯三层缝合法,＞2 mm采用局部皮瓣修复,其中Z形皮瓣修复瘘孔10个,Y-V皮瓣15个,旋转皮瓣18个,对于反复手术、瘘孔大或多个彼此邻近的瘘孔且局部瘢痕明显的复杂性尿瘘,则切除瘘孔及瘢痕组织并行尿道重建术,应用阴茎背侧皮瓣尿道成形2例,阴囊皮瓣尿道成形4例.结果 除1例应用局部皮瓣修复、1例应用阴囊皮瓣尿道重建因皮瓣远端坏死再次出现尿瘘外,其余均获满意效果.结论 根据尿瘘大小、部位及局部具体情况,应用显微外科技术、选择血供丰富皮瓣修复尿道下裂术后多发尿瘘成功率高.
作者：丁浩；汪春兰；曹东升；李小静；宁金龙 刊期： 2007年第02期
目的 探讨褪黑素(MT)对肝星状细胞(HSC)凋亡和功能的影响.方法 予SD大鼠背部皮下注射CCl4造肝纤维化模型.体内实验:MT组大鼠灌胃给予MT[0.125、0.5、2.0 mg/(kg·d)]8周,HE染色观察病理改变,放免法检测血清透明质酸(HA)与Ⅲ型前胶原(PCⅢ).体外实验:从模型组来源的HSC给予MT(10、0.1 μmol/L和1 nmol/L),从正常组来源的HSC给予生理盐水;48 h后,流式细胞术检测HSC细胞凋亡,放免法检测培养上清中HA、PCⅢ.结果 体内实验中,MT各剂量组均明显改善CCl4引起的肝脏病理改变,降低血清HA、PCⅢ.体外实验中,MT 10 μmol/L显著诱导HSC凋亡,各浓度MT均明显降低HA、PCⅢ的水平.结论 MT可能通过诱导HSC凋亡和抑制其合成或分泌HA与PCⅢ而改善CCl4致大鼠肝纤维化.
作者：叶根深；马勇；魏伟；李瑞麟；陈文笔；严家春；丁体龙 刊期： 2007年第02期
目的 研究噻唑烷二酮类药物吡格列酮对3T3-L1细胞中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA和蛋白表达的影响.方法 将3T3-L1细胞随机分为3组:对照组3T3-L1细胞进行正常的诱导分化,实验1组在3T3-L1细胞诱导时加入吡格列酮(0.1 mmol/L),实验2组在诱导分化后成熟的3T3-L1脂肪细胞中加入吡格列酮(0.1 mmol/L).提取细胞总RNA和总蛋白做RT-PCR和Western-blot测定GLUt4 mRNA和蛋白的表达情况.结果 与对照组比较实验组GLUT4mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P＜0.05).结论 吡格列酮促进3T3-L1脂肪细胞GLUT4 mRNA和蛋白表达.
作者：曹永红；王长江；贾敬华；代芳；陈明卫；林刚；叶小龙 刊期： 2007年第02期
目的 研究A771726在大鼠体内的药代动力学过程.方法 单剂量口服给药3个剂量的A771726,根据大鼠体内血药浓度经时过程,计算相应的药代动力学参数.结果 A771726(3、6、12 mg/kg)的血药经时过程均符合一级吸收的一房室模型,其主要药动学参数T1/2Ka(h):3.91±3.43、5.63±2.07、6.73±1.67;T1/2Ke(h):17.45±10.79、9.68±4.65、7.63±1.39;AUC(0～tn)(mg/L·h-1):163.83±17.88、447.88±148.60、843.72±175.41;Cmax(mg/L):7.05±1.17、24.00±1.87、39.93±3.90;Tmax(h):8.00±0.00、6.67±2.06、8.00±0.00;MRT(0～tn)(h):19.87±4.25、19.54±1.11、19.29±2.47.结论 单剂量口服A7717263个剂量组的药物代谢均成线性关系,其血药浓度-时间曲线符合一级吸收的一房室模型.
作者：刘骅；金涌；朱熙；宋珏；李俊 刊期： 2007年第02期
目的 探讨肝癌肝切除术后并发症的影响因素.方法 运用非条件Logstic回归分析方法、对肝癌肝切除患者进行临床研究.结果 肝癌肝切除术后并发症发生率56.34%(280/497),出血12.07%(60/497)、感染18.71%(93/497)、胆漏2.01%(10/497)、胸腔积液6.64%(33/497)、腹腔积液42.45%(211/497)、肝衰3.42%(17/497)、死亡4.23%(21/497).从全因素的Logistic回归模型的结果可见肝脏血流阻断时间(X10)、手术时间(X11)、失血量(X12)在a=0.05水平上显著,肝癌肝切除并发症的的主要危险因素按其影响的大小顺次为:X10、X11、X12,它们所对应的相对危险度在1.273～1.578之间,且X12为影响肝切除围手术期死亡的主要危险因素.逐步Logistic回归分析进一步肯定了上述结果,且右半肝切除(X3)影响突出,P=0.001 2,标准系数=0.204 301,相对危险度OR=2.489.而半肝血流阻断(X7)能减少肝切除并发症的发生.结论 正确选用肝血流阻断方法有效控制失血量,尽量缩短肝血流阻断时间和手术时间,在保证肝癌根治的前提下、尽可能保留有功能的肝组织是减少肝切除并发症和降低肝切除病死率的关键.
作者：熊奇如；姜海涛 刊期： 2007年第02期
目的 探讨尿红细胞形态诊断肾小球性血尿的一种新标准.方法 对216例已确诊的血尿患儿应用新标准进行尿红细胞形态检查,分析其敏感性和特异性,并与以往报道的其他标准相比较.结果 环状+芽孢＞5%且总变形红细胞＞50%诊断肾小球性血尿的灵敏度98.68%,特异度100%,明显优于其他3种诊断标准.结论 环状+芽孢＞5%且总变形红细胞＞50%这一标准诊断肾小球性血尿敏感性和特异性更好,值得临床推广应用.
作者：夏珣；鹿玲；胡波；李鑫 刊期： 2007年第02期
目的 转染骨保护素(OPG)基因至Beagle犬骨髓基质细胞(BMSCs)中,并检测其表达能力,为基因工程技术治疗牙周病提供物质基础.方法 穿刺抽取成年Beagle犬骨髓2～3 ml,通过全骨髓贴壁法获取BMSCs.传代至第3代,脂质体瞬时转染经鉴定的重组pSecTag2/B-OPG,并用RT-PCR、Western blot检测OPG的表达水平.结果 重组质粒pSecTag2/B-OPG经Hind Ⅲ单酶切及EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ双酶切,电泳显示切下的片段均与预期大小相符,经测序证实此基因与GenBank中提供的序列[gi:33873056]一致;RTPCR、Western blot结果显示:重组pSecTag2/B-OPG在骨髓基质细胞中有表达.结论 成功建立了OPG基因修饰的骨髓基质细胞瞬时基因表达体系.
作者：操小马；赵春晖；梅陵宣 刊期： 2007年第02期
目的 研究全反式维甲酸(ATRA)体外对人肝癌细胞株(HepG2)分化、软琼脂克隆形成的影响及其机制.方法 ATRA处理HepG2,光镜下观察细胞形态,并检测γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、甲胎蛋白(AFP)等分化指标的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析ATRA对HepG2增殖的影响;软琼脂培养法观察HepG2的克隆形成能力;Western blot检测骨桥蛋白(OPN)表达变化.结果 ATRA显著抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞分化,使代表肝细胞恶变的γ-GT比活力、AFP分泌量明显下降.ATRA可降低HepG2软琼脂克隆形成能力并使OPN表达减少.结论 ATRA是HepG2有效的分化诱导剂,并可抑制HepG2增殖,其分子机制可能与OPN表达减少有关,为ATRA诱导分化治疗肝癌提供了实验依据.
作者：谢斌；左莉；江志奎；徐大林；朱华庆；周青；胡若磊；桂淑玉；汪渊 刊期： 2007年第02期
目的 探讨卵巢无性细胞瘤的临床特点、预后影响因素及相关肿瘤学标记物的意义.方法 对40例单纯无性细胞瘤进行手术治疗及术后辅助放/化疗,并长期随访,观察治疗效果.分析临床分期、治疗方法与预后的相关性.结果 无性细胞瘤主要临床症状为腹部包块22例、腹痛19例、腹胀8例和生殖系统发育异常3例.其中39例患者经过综合治疗,Ⅰ～Ⅳ期总生存率为77.5%.其中Ⅰ期治疗效果佳,5年生存率为100%.Ⅱ～Ⅲ期患者,手术后化疗疗程少于4疗程与多于4疗程者相比,5年存活率差异有显著性(P＜0.05).1例Ⅱ期患者术后拒绝辅助治疗,11个月后死亡.无性细胞瘤患者乳酸脱氢酶(LDH)值常见增高,但在不同期别间分析统计无显著性差异.结论 卵巢无性细胞瘤的预后与临床分期、治疗方法密切相关.采用手术为主,化疗为辅的综合治疗,效果满意,且对保留生育能力者的生殖内分泌功能影响不大.血清LDH值可以做为一种肿瘤学标记物,辅助诊断有意义.但尚不能作为一种早期预测指标,也不能代表疾病的严重程度.
作者：范懿隽；周家德 刊期： 2007年第02期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
