李修奎；余永强；朱赤；刘连城
目的 转染骨保护素(OPG)基因至Beagle犬骨髓基质细胞(BMSCs)中,并检测其表达能力,为基因工程技术治疗牙周病提供物质基础.方法 穿刺抽取成年Beagle犬骨髓2～3 ml,通过全骨髓贴壁法获取BMSCs.传代至第3代,脂质体瞬时转染经鉴定的重组pSecTag2/B-OPG,并用RT-PCR、Western blot检测OPG的表达水平.结果 重组质粒pSecTag2/B-OPG经Hind Ⅲ单酶切及EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ双酶切,电泳显示切下的片段均与预期大小相符,经测序证实此基因与GenBank中提供的序列[gi:33873056]一致;RTPCR、Western blot结果显示:重组pSecTag2/B-OPG在骨髓基质细胞中有表达.结论 成功建立了OPG基因修饰的骨髓基质细胞瞬时基因表达体系.
作者：操小马；赵春晖；梅陵宣 刊期： 2007年第02期
目的 筛选细胞极化蛋白PALS1的结合蛋白,进一步探讨PALS1的功能及其分子机制.方法 将PALS1的全长cDNA序列克隆到载体pGBKT7中,重组的pGBKT7-PALS1质粒转入酵母AH 109细胞,细胞置于SD/-Trp培养基上生长,阳性细胞再用Hela细胞的cDNA文库质粒转化,生长于SD/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal,显蓝色的克隆为阳性.阳性克隆细胞中的DNA被抽提后转化细菌细胞,然后抽提DNA进行酶切分型.合适的类型测序后进行BLAST检索分析.结果 筛选到了13个阳性克隆,其中有2个是已知蛋白的基因即ATRAP和GLT28D1.结论 利用酵母双杂交系统成功克隆了PALS1的结合蛋白的基因,为进一步研究PALS1蛋白的功能提供了有益的启示.
作者：高雪敏；刘晓颖；张庆慧；戴寒晶；范礼斌 刊期： 2007年第02期
目的 分析兔饮食性高脂血症形成过程中血清肌酸激酶活性和C反应蛋白含量的动态变化.方法 高胆固醇饮食诱发兔高脂血症,检测高胆固醇饮食7、14、17、21、25、28d兔血清总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)及肌酸激酶(CK)和C反应蛋白(CRP)的变化.结果 成功建立高脂血症兔模型,大耳白兔在喂食高胆固醇饲料7、14、17、21、25、28 d后血液中CHO和TG浓度逐渐升高(P＜0.05),CK活性和CRP含量随着高脂血症的进程而逐渐升高,变化有显著性差异(P＜0.05).结论 提示兔血清CK活性和CRP含量与高脂血症的进程相关.
作者：程筱雯；江志奎；朱华庆；肖林林；谢斌；胡若磊；胡超杰；张素梅；张玲；刘超；陈孝宇；何苇；桂淑玉；周莉；周青；汪渊 刊期： 2007年第02期
目的 研究枇杷叶三萜酸(TAL)对急、慢性炎症的抑制作用.方法 采用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、冰醋酸诱导的小鼠腹腔毛细血管通透性实验、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿和福氏完全佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎模型,观察TAL的抗炎作用.结果 TAL(75、225、675 mg/kg)ig给药对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀和冰醋酸引起的腹腔毛细血管渗出有明显的抑制作用;TAL(50、150、450 mg/kg)ig给药可明显减轻角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿和AA大鼠的原发性、继发性炎症病变.进一步研究表明,TAL(0.05、0.5、5、50 mg/L)体外给药可增加ConA、LPS诱导的AA大鼠脾淋巴细胞增殖反应和IL-2的产生,同时抑制AA大鼠PMφ产生过高的IL-1.结论 TAL具有良好的抗炎作用.
作者：葛金芳；李俊；姚宏伟；胡成穆；彭磊；金涌；吕雄文；张磊；余世春 刊期： 2007年第02期
目的 观察糖皮质激素联合白芍总苷(TGP)对大鼠系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)的治疗作用.方法 采用胃肠道综合免疫方法建立大鼠MsPGN模型,以强的松为对照,观察激素和TGP联合应用对大鼠蛋白尿、血生化指标以及肾组织形态学改变的影响.蛋白尿采用双缩脲法测定,血生化指标由半自动生化分析仪测定,肾组织形态学为普通光镜观察.结果 模型组大鼠出现大量蛋白尿,血肌酐(C阳)、尿素氮(Bun)、转氨酶(ALT)和甘油三酯(TG)升高,血浆总蛋白(TP)和白蛋白(Alb)下降,模型组的肾小球系膜细胞中至重度增生,系膜基质聚积.灌胃给予强的松和TGP(1m∥蚝+100 m∥k)联合治疗4周后,肾小球系膜细胞增生、基质聚积明显减少,大鼠的蛋白尿减轻,Cre、Bun、ALT和TG下降,TP和Alb上升,与单独使用TGP(100 m∥蚝)、强的松(5 m∥蝇)有类似作用.结论 TGP与强的松联用,可降低强的松的用量,对于MsPGN大鼠的肝肾功能有明显改善作用,并能部分逆转受损肾小球的病理改变.
作者：冯静；徐星铭；周登余；戴宏 刊期： 2007年第02期
目的 研究芍药苷(PF)对佐剂性关节炎(AA)大鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)吞噬功能及其产生细胞因子的影响.方法 采用弗氏完全佐剂(FCA)诱导AA大鼠模型,无菌取PMφ,吞噬功能采用中性红法测定,PMφ培养上清液中IL-1活性的测定采用小鼠胸腺细胞增殖法,TNF-α和PGE2含量的测定采用放射免疫测定法.结果 PF能抑制关节肿胀,降低AA大鼠PMφ过强的吞噬功能和产生IL-1、TNF-α和PGE2的水平.结论 PF对AA大鼠的抗炎和免疫抑制作用与其降低AA大鼠PMφ过强的吞噬功能和产生IL-1、TNF-α和PGE2的水平有关.
作者：王晓玉；魏伟；唐丽琴；吴虹；杨宇清；陈尹 刊期： 2007年第02期
目的 探讨visfatin基因在2型糖尿病(T2DM)患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达情况,及其与胰岛素抵抗的关系.方法 用半定量RT-PCR方法检测糖代谢正常者(对照组20例)和T2DM患者(22例)的大网膜与皮下脂肪组织visfatin mRNA的表达水平,并测量体重、血压、腰围、臀围、血糖、空腹胰岛素、血脂和HOMA-IR.结果 糖尿病组和对照组网膜组织的visfatin mRNA表达量分别高于对应的皮下脂肪组织(P＜0.05).糖尿病组网膜的visfatin mRNA 表达量高于对照组网膜visfatin mRNA表达量(P＜0.05);糖尿病组皮下脂肪visfatin mRNA表达量与对照组皮下脂肪visfatin mRNA表达量之间无统计学差异(P＞0.05).将两组数据合并,网膜visfatin mRNA表达量与HOMA-IR呈正相关(P＜0.05),与其他因素均无相关性(P＞0.05);皮下脂肪visfatin mRNA表达量与所有因素均无相关性(P＞0.05).多元逐步回归分析发现,皮下脂肪visfatin mRNA表达量与所有因素均无相关性(P＞0.05);网膜visfatin mRNA表达量与HOMA-IR相关(P＜0.05).结论 T2DM患者网膜visfatin mRNA表达量较正常组明显升高,可以作为胰岛素抵抗的一个重要参数.
作者：叶小龙；王长江；林刚；曹永红；代芳 刊期： 2007年第02期
目的 构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达.方法 将hVEGF121cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定后,转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测.结果 真核双表达载体pIRES-hVEGF121 cDNA/hBMP-4构建成功且hVEGF121 cDNA和hBMP-4在COS-7细胞中得到了有效表达.结论 hVEGF121和hBMP-4在COS-7细胞中成功表达,为进一步研究打下良好基础.
作者：韩雷；汪春兰；赵宇；何金生；王帮河；王兴宇；杨兵；周志林 刊期： 2007年第02期
目的 探讨尿红细胞形态诊断肾小球性血尿的一种新标准.方法 对216例已确诊的血尿患儿应用新标准进行尿红细胞形态检查,分析其敏感性和特异性,并与以往报道的其他标准相比较.结果 环状+芽孢＞5%且总变形红细胞＞50%诊断肾小球性血尿的灵敏度98.68%,特异度100%,明显优于其他3种诊断标准.结论 环状+芽孢＞5%且总变形红细胞＞50%这一标准诊断肾小球性血尿敏感性和特异性更好,值得临床推广应用.
作者：夏珣；鹿玲；胡波；李鑫 刊期： 2007年第02期
目的 探讨缺氧诱导因子-1α在支气管哮喘大鼠模型支气管肺组织中的表达及意义.方法 采用卵蛋白致敏诱导建立支气管哮喘大鼠模型,采用逆转录半定量PCR及免疫印迹技术检测正常对照组、阴性对照组、哮喘组和地塞米松组支气管肺组织中缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达的水平.结果 与正常对照组比较,哮喘组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著增加,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.05);与正常对照组比较,阴性对照组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平没有明显改变,差异均无显著性(P＞0.05,P＞0.05);与哮喘组比较,地塞米松组中的缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著性降低,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.05),但与正常对照组比较,差异均无显著性(P＞0.05,P＞0.05).结论 缺氧诱导因子-1α可能参与支气管哮喘的发病机制且其表达的水平受地塞米松调节.
作者：许锐；费广鹤 刊期： 2007年第02期
目的 研究人外周血干细胞(PBSC)向血管内皮细胞分化.方法 以血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对经重组人粒细胞集落刺激因子刺激后采集的PBSC进行诱导培养,观察细胞形态的变化,运用流式细胞术检测诱导后的细胞表达CD31和vWF情况,并用透射电镜观察细胞的超微结构.结果 经VEGF和bFGF诱导后的细胞形态上表现内皮细胞特征,经流式细胞仪测定表达血管内皮细胞特有表面标志CD31和vWF,透射电镜细胞胞浆内可见特征性Weible-Palade小体.结论 外周血干细胞在VEGF和bFGF诱导下,可分化为内皮细胞.
作者：吴维；胡何节；余继海 刊期： 2007年第02期
目的 探讨肝癌肝切除术后并发症的影响因素.方法 运用非条件Logstic回归分析方法、对肝癌肝切除患者进行临床研究.结果 肝癌肝切除术后并发症发生率56.34%(280/497),出血12.07%(60/497)、感染18.71%(93/497)、胆漏2.01%(10/497)、胸腔积液6.64%(33/497)、腹腔积液42.45%(211/497)、肝衰3.42%(17/497)、死亡4.23%(21/497).从全因素的Logistic回归模型的结果可见肝脏血流阻断时间(X10)、手术时间(X11)、失血量(X12)在a=0.05水平上显著,肝癌肝切除并发症的的主要危险因素按其影响的大小顺次为:X10、X11、X12,它们所对应的相对危险度在1.273～1.578之间,且X12为影响肝切除围手术期死亡的主要危险因素.逐步Logistic回归分析进一步肯定了上述结果,且右半肝切除(X3)影响突出,P=0.001 2,标准系数=0.204 301,相对危险度OR=2.489.而半肝血流阻断(X7)能减少肝切除并发症的发生.结论 正确选用肝血流阻断方法有效控制失血量,尽量缩短肝血流阻断时间和手术时间,在保证肝癌根治的前提下、尽可能保留有功能的肝组织是减少肝切除并发症和降低肝切除病死率的关键.
作者：熊奇如；姜海涛 刊期： 2007年第02期
目的 探讨As2O3对NB4细胞PTTG和c-myc基因表达的影响.方法 用RT-PCR的方法检测As2O3对NB4细胞PTTG和c-myc的表达的影响.结果 0.5、1.0、2.0μmol/L的As2O3作用NB4细胞24、48 h后PTTG基因的表达强度逐渐减弱;与未加As2O3的NB4细胞对照组比较P＜0.05.c-myc基因的表达强度亦逐渐减弱,与未加As2O3干预的NB4对照组比较P＜0.05.结论 PTTG和c-myc在NB4细胞中也有高表达,提示PTTG和c-myc的高表达在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病过程中可能起着重要作用,As2O3能有效地下调NB4细胞PTTG和c-myc的表达.
作者：蒋英俊；夏瑞祥；曾庆曙；程昌斌；黄建尧 刊期： 2007年第02期
目的 探讨应用显微外科技术修复尿道下裂术后多发尿瘘的方法及临床效果.方法 应用显微外科技术修复尿道下裂术后多发尿瘘32例.对于直径＜2 mm的瘘孔采用单纯三层缝合法,＞2 mm采用局部皮瓣修复,其中Z形皮瓣修复瘘孔10个,Y-V皮瓣15个,旋转皮瓣18个,对于反复手术、瘘孔大或多个彼此邻近的瘘孔且局部瘢痕明显的复杂性尿瘘,则切除瘘孔及瘢痕组织并行尿道重建术,应用阴茎背侧皮瓣尿道成形2例,阴囊皮瓣尿道成形4例.结果 除1例应用局部皮瓣修复、1例应用阴囊皮瓣尿道重建因皮瓣远端坏死再次出现尿瘘外,其余均获满意效果.结论 根据尿瘘大小、部位及局部具体情况,应用显微外科技术、选择血供丰富皮瓣修复尿道下裂术后多发尿瘘成功率高.
作者：丁浩；汪春兰；曹东升；李小静；宁金龙 刊期： 2007年第02期
目的 研究全反式维甲酸(ATRA)体外对人肝癌细胞株(HepG2)分化、软琼脂克隆形成的影响及其机制.方法 ATRA处理HepG2,光镜下观察细胞形态,并检测γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、甲胎蛋白(AFP)等分化指标的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析ATRA对HepG2增殖的影响;软琼脂培养法观察HepG2的克隆形成能力;Western blot检测骨桥蛋白(OPN)表达变化.结果 ATRA显著抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞分化,使代表肝细胞恶变的γ-GT比活力、AFP分泌量明显下降.ATRA可降低HepG2软琼脂克隆形成能力并使OPN表达减少.结论 ATRA是HepG2有效的分化诱导剂,并可抑制HepG2增殖,其分子机制可能与OPN表达减少有关,为ATRA诱导分化治疗肝癌提供了实验依据.
作者：谢斌；左莉；江志奎；徐大林；朱华庆；周青；胡若磊；桂淑玉；汪渊 刊期： 2007年第02期
目的 观察盐酸戊乙奎醚对体外循环(CPB)瓣膜置换术患者血浆炎性因子的影响.方法 选择择期体外循环下瓣膜置换术患者20例,随机分为盐酸戊乙奎醚组(A组,n=10)和对照组(B组,n=10).A组于CPB前10 min静注盐酸戊乙奎醚3 mg,对照组给予等量生理盐水.分别于麻醉诱导前(T0)、CPB 30 min(T1)、主动脉开放后10 min(T2)、CPB后3 h(T3)、24h(T4)抽取桡动脉血,测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、和白细胞介素-10(IL-10)浓度.结果 组内比较,B组TNF-α浓度于T3时点高于T0(P＜0.01),而A组T1、T2时点TNF-α浓度较T0显著降低,其余时点与术前比较无明显变化.B组IL-6于T4时点高于A组(P＜0.05),IL-10浓度明显低于A组.组间比较,B组TNF-α浓度于T1～T4各时点均高于A组(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚可部分抑制CPB导致的炎性反应,对CPB术后全身炎性反应综合征有一定的预防作用.
作者：魏昕；高亚利；秦红；方才 刊期： 2007年第02期
目的 分析TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)、流式细胞术和透射电镜3种细胞凋亡检测方法的优缺点.方法 在已建立的HCMV先天性感染小鼠中枢神经系统模型基础上,选用鼠龄为24个月模型鼠进行试验.试验分为3组(每组6只):HCMV先天性潜伏感染老年小鼠组(A组)、HCMV先天性潜伏再激活感染老年小鼠组(B组)和正常对照老年小鼠组(C组).采用TUNEL法和流式细胞仪检测各组小鼠大脑皮质细胞凋亡情况,采用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化.结果 TUNEL法和流式细胞术检测发现C组凋亡细胞少,A组凋亡细胞比率较C组有所升高,而B组凋亡细胞多;检测结果经T检验分析发现A组、B组与C组各组间凋亡率差异均有显著性.透射电镜检测发现,同C组比较,A组和B组部分神经元细胞核染色体固缩,核物质碎片化,凋亡小体形成等特征性凋亡改变.结论 HCMV先天性感染可致老年小鼠大脑皮质细胞凋亡.TUNEL法和流式细胞术可用于凋亡的定量检测,但TUNEL法易受主观因素的影响,而透射电镜是凋亡定性检测的可靠方法.
作者：赵俊；王明丽；陈敬贤 刊期： 2007年第02期
目的 为直视经皮椎弓根螺钉内固定技术提供解剖学基础,并在此基础上分析经皮椎弓根螺钉的可行性及其优点.方法 选用6具经防腐处理的尸体,4具经乳胶灌注.在解剖显微镜下对T11,12及L1～5脊柱后部结构进行解剖观察,观测肌肉血供、神经支配及关节突、横突间的脊神经后支的走向及分布规律.结果 胸腰段脊神经后支于椎间孔外由脊神经发出内侧支,跨过横突根部,绕过小关节突外缘,到乳突与副突间的骨纤维管,呈树状分布,支配同一平面骶棘肌内侧束、小关节、棘突、棘间韧带.外侧支沿横突上缘自骶棘肌深面向下、外、背侧行走,支配骶棘肌的中间份和外侧份.节段动脉静脉的后支在椎间孔的上方绕向后下方,走行于脊神经的下方和下位椎体上关节突的外方,分为内外2支,分布于腰部深层肌肉.选择8例有手术适应证的患者,直视下小切口常规器械植入椎弓根螺钉系统,术中出血少,损伤小.结论 在观察椎弓根进针点解剖基础上,采用C臂X线机定位下,直视下小切口植入椎弓根螺钉,术中避免了损伤支配骶棘肌的脊神经后支和节段动静脉和脊柱后方的结构,术后恢复快、并发症少,是一种易于操作与推广的新技术.
作者：贺瑞；童元 刊期： 2007年第02期
目的 研究噻唑烷二酮类药物吡格列酮对3T3-L1细胞中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA和蛋白表达的影响.方法 将3T3-L1细胞随机分为3组:对照组3T3-L1细胞进行正常的诱导分化,实验1组在3T3-L1细胞诱导时加入吡格列酮(0.1 mmol/L),实验2组在诱导分化后成熟的3T3-L1脂肪细胞中加入吡格列酮(0.1 mmol/L).提取细胞总RNA和总蛋白做RT-PCR和Western-blot测定GLUt4 mRNA和蛋白的表达情况.结果 与对照组比较实验组GLUT4mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P＜0.05).结论 吡格列酮促进3T3-L1脂肪细胞GLUT4 mRNA和蛋白表达.
作者：曹永红；王长江；贾敬华；代芳；陈明卫；林刚；叶小龙 刊期： 2007年第02期
目的 探讨豹皮樟总黄酮(TFLC)对大鼠酒精性脂肪性肝炎的防治作用及部分机制.方法 以酒精联合脂肪乳剂灌胃,每天2次,连续6周,制备大鼠酒精性脂肪性肝炎模型.给药组同时灌服相应药物.于实验的第6周末采血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及肝脏TG、TC、SOD、MDA、GSH-PX,并行肝脏病理学检查.结果 TFLC(200、400 mg/kg)组能明显降低酒精性脂肪性肝炎大鼠血清AST、ALT、ALP、γ-GT水平;降低血清和肝匀浆中TC、TG、MDA含量,增强SOD和GSH-PX活性;同时病理组织学显示TFLC能明显改善酒精性脂肪性肝炎大鼠的肝细胞脂肪变性.结论 TFLC对大鼠酒精性脂肪性肝炎具有较好的防治作用.其作用机制与抗氧化和调节脂质代谢有关.
作者：王媛媛；李俊；曹琦；黄艳；邹宇宏；程文明；李浩；贺晓昕；胡向阳 刊期： 2007年第02期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
