夏珣;鹿玲;胡波;李鑫
目的 探讨大隐静脉曲张与平滑肌细胞(SMC)形态学改变之间的关系.方法 临床术中收集正常及曲张大隐静脉标本,制作石蜡切片进行HE染色观察SMC一般组织学变化;制作超薄切片置透射电镜下观察SMC超微结构变化.结果 光镜下曲张大隐静脉内膜增厚,SMC数量增多;中膜增厚,SMC形态异常,排列紊乱;电镜下SMC形态不规则,胞浆中粗面内质网、核糖体和线粒体丰富,肌丝少.结论 大隐静脉曲张的发生和发展与SMC细胞形态学改变密不可分.
作者:张媛媛;韩卉;黄大可 刊期: 2007年第02期
目的 探讨控制血糖对妊娠期糖尿病母体并发症及围生儿结局的影响.方法 对59例妊娠期糖尿病患者进行总结分析,根据治疗与否及血糖控制是否满意分成治疗组(A组,37例)与未治疗组(B组,22例),观察母儿并发症、分娩方式及新生儿窒息的情况.结果 未治疗组的母儿并发症比治疗组明显增多,两组相比差异有显著意义.结论 重视糖筛查,对妊娠期糖尿病孕妇进行及早诊断及治疗,选择合适的时间和方式终止妊娠可以降低母儿并发症的发生率.
作者:周桂菊;丛林;姚洁;祝艺虹;邱林霞;王红菊 刊期: 2007年第02期
目的 探讨褪黑素(MT)对肝星状细胞(HSC)凋亡和功能的影响.方法 予SD大鼠背部皮下注射CCl4造肝纤维化模型.体内实验:MT组大鼠灌胃给予MT[0.125、0.5、2.0 mg/(kg·d)]8周,HE染色观察病理改变,放免法检测血清透明质酸(HA)与Ⅲ型前胶原(PCⅢ).体外实验:从模型组来源的HSC给予MT(10、0.1 μmol/L和1 nmol/L),从正常组来源的HSC给予生理盐水;48 h后,流式细胞术检测HSC细胞凋亡,放免法检测培养上清中HA、PCⅢ.结果 体内实验中,MT各剂量组均明显改善CCl4引起的肝脏病理改变,降低血清HA、PCⅢ.体外实验中,MT 10 μmol/L显著诱导HSC凋亡,各浓度MT均明显降低HA、PCⅢ的水平.结论 MT可能通过诱导HSC凋亡和抑制其合成或分泌HA与PCⅢ而改善CCl4致大鼠肝纤维化.
作者:叶根深;马勇;魏伟;李瑞麟;陈文笔;严家春;丁体龙 刊期: 2007年第02期
目的 明确自噬和自噬性细胞死亡在胃癌SGC-7901及BGC-823细胞紫杉醇处理过程中的存在,探讨其对紫杉醇诱导的凋亡敏感性的作用.方法 流式细胞仪和MTT法分别检测紫杉醇诱导SGC-7901及BGC-823细胞的凋亡率和总死亡率,死细胞DAPI染色荧光显微镜检测非凋亡性细胞死亡,吖啶橙染色流式细胞仪和荧光显微镜分别定量、定性检测自噬和自噬性细胞死亡的存在,自噬特异性阻断剂3-甲基腺嘌呤和紫杉醇共同作用细胞后流式细胞术检测细胞死亡率和凋亡率的变化.结果 紫杉醇处理SGC-7901及BGC-823细胞早期(24 h内)可出现明显的细胞自噬性变化,自噬高峰期出现紫杉醇诱导3~6 h,自噬性细胞死亡存在并可能是紫杉醇诱导的非凋亡性细胞死亡的主要形式,抑制紫杉醇诱导的细胞自噬可以促进紫杉醇诱导细胞凋亡的发生.结论 紫杉醇可以诱导胃癌SGC-7901及BGC-823细胞自噬及自噬性细胞死亡,并且紫杉醇诱导的胃癌细胞自噬会拮抗胃癌细胞凋亡的发生,从而为胃癌化疗耐受提供新的解释,可能为胃癌治疗提供新的途径.
作者:占贞贞;陈思;叶艳;吴萍;张旭东;张林杰 刊期: 2007年第02期
目的 构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达.方法 将hVEGF121cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定后,转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测.结果 真核双表达载体pIRES-hVEGF121 cDNA/hBMP-4构建成功且hVEGF121 cDNA和hBMP-4在COS-7细胞中得到了有效表达.结论 hVEGF121和hBMP-4在COS-7细胞中成功表达,为进一步研究打下良好基础.
作者:韩雷;汪春兰;赵宇;何金生;王帮河;王兴宇;杨兵;周志林 刊期: 2007年第02期
目的 探讨豹皮樟总黄酮(TFLC)对大鼠酒精性脂肪性肝炎的防治作用及部分机制.方法 以酒精联合脂肪乳剂灌胃,每天2次,连续6周,制备大鼠酒精性脂肪性肝炎模型.给药组同时灌服相应药物.于实验的第6周末采血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及肝脏TG、TC、SOD、MDA、GSH-PX,并行肝脏病理学检查.结果 TFLC(200、400 mg/kg)组能明显降低酒精性脂肪性肝炎大鼠血清AST、ALT、ALP、γ-GT水平;降低血清和肝匀浆中TC、TG、MDA含量,增强SOD和GSH-PX活性;同时病理组织学显示TFLC能明显改善酒精性脂肪性肝炎大鼠的肝细胞脂肪变性.结论 TFLC对大鼠酒精性脂肪性肝炎具有较好的防治作用.其作用机制与抗氧化和调节脂质代谢有关.
作者:王媛媛;李俊;曹琦;黄艳;邹宇宏;程文明;李浩;贺晓昕;胡向阳 刊期: 2007年第02期
目的 探讨卵巢无性细胞瘤的临床特点、预后影响因素及相关肿瘤学标记物的意义.方法 对40例单纯无性细胞瘤进行手术治疗及术后辅助放/化疗,并长期随访,观察治疗效果.分析临床分期、治疗方法与预后的相关性.结果 无性细胞瘤主要临床症状为腹部包块22例、腹痛19例、腹胀8例和生殖系统发育异常3例.其中39例患者经过综合治疗,Ⅰ~Ⅳ期总生存率为77.5%.其中Ⅰ期治疗效果佳,5年生存率为100%.Ⅱ~Ⅲ期患者,手术后化疗疗程少于4疗程与多于4疗程者相比,5年存活率差异有显著性(P<0.05).1例Ⅱ期患者术后拒绝辅助治疗,11个月后死亡.无性细胞瘤患者乳酸脱氢酶(LDH)值常见增高,但在不同期别间分析统计无显著性差异.结论 卵巢无性细胞瘤的预后与临床分期、治疗方法密切相关.采用手术为主,化疗为辅的综合治疗,效果满意,且对保留生育能力者的生殖内分泌功能影响不大.血清LDH值可以做为一种肿瘤学标记物,辅助诊断有意义.但尚不能作为一种早期预测指标,也不能代表疾病的严重程度.
作者:范懿隽;周家德 刊期: 2007年第02期
目的 研究全反式维甲酸(ATRA)体外对人肝癌细胞株(HepG2)分化、软琼脂克隆形成的影响及其机制.方法 ATRA处理HepG2,光镜下观察细胞形态,并检测γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、甲胎蛋白(AFP)等分化指标的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析ATRA对HepG2增殖的影响;软琼脂培养法观察HepG2的克隆形成能力;Western blot检测骨桥蛋白(OPN)表达变化.结果 ATRA显著抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞分化,使代表肝细胞恶变的γ-GT比活力、AFP分泌量明显下降.ATRA可降低HepG2软琼脂克隆形成能力并使OPN表达减少.结论 ATRA是HepG2有效的分化诱导剂,并可抑制HepG2增殖,其分子机制可能与OPN表达减少有关,为ATRA诱导分化治疗肝癌提供了实验依据.
作者:谢斌;左莉;江志奎;徐大林;朱华庆;周青;胡若磊;桂淑玉;汪渊 刊期: 2007年第02期
目的 探讨As2O3对NB4细胞PTTG和c-myc基因表达的影响.方法 用RT-PCR的方法检测As2O3对NB4细胞PTTG和c-myc的表达的影响.结果 0.5、1.0、2.0μmol/L的As2O3作用NB4细胞24、48 h后PTTG基因的表达强度逐渐减弱;与未加As2O3的NB4细胞对照组比较P<0.05.c-myc基因的表达强度亦逐渐减弱,与未加As2O3干预的NB4对照组比较P<0.05.结论 PTTG和c-myc在NB4细胞中也有高表达,提示PTTG和c-myc的高表达在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病过程中可能起着重要作用,As2O3能有效地下调NB4细胞PTTG和c-myc的表达.
作者:蒋英俊;夏瑞祥;曾庆曙;程昌斌;黄建尧 刊期: 2007年第02期
目的 探讨visfatin基因在2型糖尿病(T2DM)患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达情况,及其与胰岛素抵抗的关系.方法 用半定量RT-PCR方法检测糖代谢正常者(对照组20例)和T2DM患者(22例)的大网膜与皮下脂肪组织visfatin mRNA的表达水平,并测量体重、血压、腰围、臀围、血糖、空腹胰岛素、血脂和HOMA-IR.结果 糖尿病组和对照组网膜组织的visfatin mRNA表达量分别高于对应的皮下脂肪组织(P<0.05).糖尿病组网膜的visfatin mRNA 表达量高于对照组网膜visfatin mRNA表达量(P<0.05);糖尿病组皮下脂肪visfatin mRNA表达量与对照组皮下脂肪visfatin mRNA表达量之间无统计学差异(P>0.05).将两组数据合并,网膜visfatin mRNA表达量与HOMA-IR呈正相关(P<0.05),与其他因素均无相关性(P>0.05);皮下脂肪visfatin mRNA表达量与所有因素均无相关性(P>0.05).多元逐步回归分析发现,皮下脂肪visfatin mRNA表达量与所有因素均无相关性(P>0.05);网膜visfatin mRNA表达量与HOMA-IR相关(P<0.05).结论 T2DM患者网膜visfatin mRNA表达量较正常组明显升高,可以作为胰岛素抵抗的一个重要参数.
作者:叶小龙;王长江;林刚;曹永红;代芳 刊期: 2007年第02期
目的 构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选及结构和功能的研究打下基础.方法 应用overlapping PCR制备Protein A的Z结构域.用含随机核苷酸序列的引物,制备对Z结构域的第10、13、27、28、31和32位氨基酸进行随机突变的定点随机突变体库.并在突变体片段两端引入Kpn Ⅰ位点,3'端引入3个氨基酸大小随机连接肽的序列.经Kpn Ⅰ酶切后随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S.克隆产物转化大肠杆菌TG1,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示定点随机突变组合文库.结果 该定点随机突变组合文库的转化子数目为6.4×106个,滴度为1.4×1015 TU/L;文库中含0.72以上的阳性克隆,其中有2个单结构域的阳性克隆占0.15;15个样品的序列分析显示各突变位点和随机连接肽的氨基酸序列呈随机性分布.结论 成功构建了噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,该库库容量在一级结构上具有良好的随机性和多样性,可满足体外分子进化研究的要求.
作者:何俊;周霞;陈璐;陈秋莉;王锦红;蒋少华;陈铭;卢海妹;潘卫;邓松华 刊期: 2007年第02期
目的 探讨空气灌肠在诊治小儿急性肠套叠中的应用价值及如何提高整复率.方法 经空气压力灌肠证实肠套叠患儿125例(135例次),所有病例均在透视下采用空气灌肠获得肠套叠的诊断并进行整复治疗.诊断压力6~8kPa,整复压力10~16 kPa.结果 腹部平片86例次肠管生理积气减少.空气灌肠透视130例次见肠管内软组织肿块.共整复成功129例次,其中一次性整复成功109例次,多次间歇性整复成功20例次,其中8例发生复套均整复成功,总成功率为95.56%,6例次未整复成功,无一例穿孔.结论 空气灌肠是小儿急性肠套叠首选的诊治方法,疗效可靠,安全性高;早期诊断及间歇性空气灌肠并辅以局部按摩是提高整复率的关键.
作者:李修奎;余永强;朱赤;刘连城 刊期: 2007年第02期
目的 研究人外周血干细胞(PBSC)向血管内皮细胞分化.方法 以血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对经重组人粒细胞集落刺激因子刺激后采集的PBSC进行诱导培养,观察细胞形态的变化,运用流式细胞术检测诱导后的细胞表达CD31和vWF情况,并用透射电镜观察细胞的超微结构.结果 经VEGF和bFGF诱导后的细胞形态上表现内皮细胞特征,经流式细胞仪测定表达血管内皮细胞特有表面标志CD31和vWF,透射电镜细胞胞浆内可见特征性Weible-Palade小体.结论 外周血干细胞在VEGF和bFGF诱导下,可分化为内皮细胞.
作者:吴维;胡何节;余继海 刊期: 2007年第02期
目的 研究间歇性充气加压对骨折愈合的影响.方法 26只新西兰大白兔于右侧胫骨中段造成3 mm缺损,术后长腿管型石膏外固定,随机分成A、B 2组.术后1周拆除管型石膏后予长腿石膏夹板外固定,对A组截骨部位进行间歇性充气加压,每次30 min,每天2次,持续8周;B组带不予充气的气囊作为对照组.术后每2周X线摄片和骨密度(BMD)测试.第10周A、B 2组各随机取3只兔子处死,行组织学检查骨痂面积、成骨细胞数.其余兔处死后取双侧胫骨作机械力学测试.结果 A组的骨痂面积、成骨细胞含量同期均高于B组.治疗后2组间和组内比较差异均有显著性,2组BMD和BMD比率在术后均随时间延长而增加,A组8周时BMD含量已达健侧胫骨同一部位的水平,4、6、8、10周时A组BMD和BMD比率高于B组(P<0.05,P<0.01).A组力学测试的4项参数平均化为对侧完整胫骨参数值的百分比后比B组高,差异有显著性(P<0.05,P<0.01).结论 间歇性充气加压可促进骨折的愈合,减轻软组织水肿,防止骨缺失,增加骨折愈合后的机械强度.
作者:赵广超;卜海富;桂斌捷;刘云飞 刊期: 2007年第02期
目的 分析TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)、流式细胞术和透射电镜3种细胞凋亡检测方法的优缺点.方法 在已建立的HCMV先天性感染小鼠中枢神经系统模型基础上,选用鼠龄为24个月模型鼠进行试验.试验分为3组(每组6只):HCMV先天性潜伏感染老年小鼠组(A组)、HCMV先天性潜伏再激活感染老年小鼠组(B组)和正常对照老年小鼠组(C组).采用TUNEL法和流式细胞仪检测各组小鼠大脑皮质细胞凋亡情况,采用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化.结果 TUNEL法和流式细胞术检测发现C组凋亡细胞少,A组凋亡细胞比率较C组有所升高,而B组凋亡细胞多;检测结果经T检验分析发现A组、B组与C组各组间凋亡率差异均有显著性.透射电镜检测发现,同C组比较,A组和B组部分神经元细胞核染色体固缩,核物质碎片化,凋亡小体形成等特征性凋亡改变.结论 HCMV先天性感染可致老年小鼠大脑皮质细胞凋亡.TUNEL法和流式细胞术可用于凋亡的定量检测,但TUNEL法易受主观因素的影响,而透射电镜是凋亡定性检测的可靠方法.
作者:赵俊;王明丽;陈敬贤 刊期: 2007年第02期
目的 对照性分析非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)临床特点,探讨海狗油ω-3多不饱和脂肪酸胶丸(海狗油)对NAFLD的治疗效果.方法 ①收集NAFLD患者和正常健康人资料各76例,以病例对照研究方法分析NAFLD的临床生化指标.②选取18例NAFLD患者,予以海狗油连续治疗12周,动态观察海狗油对NAFLD患者临床生化和影像学检查结果的影响.结果 ①NAFLD组体重指数(BMI)、谷丙转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)、空腹血糖(FPG)显著高于对照组(P<0.01),两组间AST和TCH差异无显著性.②NAFLD组合并肥胖、高血压、血脂紊乱、高血糖中两项或两项以上者和代谢综合征者分别为72.37%(55/76)和46.05%(35/76).③与治疗前比较,海狗油治疗4周末和8周末时,NAFLD患者的血清LP-a显著降低(P<0.01);治疗12周末时,血清Apo-A1明显降低(P<0.05),肝/脾CT值比值的差异无显著性(P>0.05).结论 NAFLD与肥胖、血脂紊乱和高血糖密切相关,海狗油对NAFLD患者的血脂有一定调节作用.
作者:朱振;宋育林;胡乃中;梅俏;许建明 刊期: 2007年第02期
目的 研究血管紧张素转换酶2(ACE2)在大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)上的表达.方法 体外培养大鼠PMVEC,分别采用RT-PCR、Western blot及免疫组化的方法检测ACE2的表达.结果 RT-PCR法从细胞总RNA中检测出ACE2的扩增条带;用Western blot法检测大鼠PMVEC蛋白提取液,可见ACE2的蛋白印迹条带;免疫组化法显示ACE2免疫组化反应产物主要分布于细胞的胞膜和胞浆.结论 从核酸和蛋白水平证实了大鼠PMVEC可以表达ACE2,表达主要位于细胞的胞膜和胞浆部分.
作者:王楠;孙耕耘;张泓 刊期: 2007年第02期
目的 为直视经皮椎弓根螺钉内固定技术提供解剖学基础,并在此基础上分析经皮椎弓根螺钉的可行性及其优点.方法 选用6具经防腐处理的尸体,4具经乳胶灌注.在解剖显微镜下对T11,12及L1~5脊柱后部结构进行解剖观察,观测肌肉血供、神经支配及关节突、横突间的脊神经后支的走向及分布规律.结果 胸腰段脊神经后支于椎间孔外由脊神经发出内侧支,跨过横突根部,绕过小关节突外缘,到乳突与副突间的骨纤维管,呈树状分布,支配同一平面骶棘肌内侧束、小关节、棘突、棘间韧带.外侧支沿横突上缘自骶棘肌深面向下、外、背侧行走,支配骶棘肌的中间份和外侧份.节段动脉静脉的后支在椎间孔的上方绕向后下方,走行于脊神经的下方和下位椎体上关节突的外方,分为内外2支,分布于腰部深层肌肉.选择8例有手术适应证的患者,直视下小切口常规器械植入椎弓根螺钉系统,术中出血少,损伤小.结论 在观察椎弓根进针点解剖基础上,采用C臂X线机定位下,直视下小切口植入椎弓根螺钉,术中避免了损伤支配骶棘肌的脊神经后支和节段动静脉和脊柱后方的结构,术后恢复快、并发症少,是一种易于操作与推广的新技术.
作者:贺瑞;童元 刊期: 2007年第02期
目的 观察糖皮质激素联合白芍总苷(TGP)对大鼠系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)的治疗作用.方法 采用胃肠道综合免疫方法建立大鼠MsPGN模型,以强的松为对照,观察激素和TGP联合应用对大鼠蛋白尿、血生化指标以及肾组织形态学改变的影响.蛋白尿采用双缩脲法测定,血生化指标由半自动生化分析仪测定,肾组织形态学为普通光镜观察.结果 模型组大鼠出现大量蛋白尿,血肌酐(C阳)、尿素氮(Bun)、转氨酶(ALT)和甘油三酯(TG)升高,血浆总蛋白(TP)和白蛋白(Alb)下降,模型组的肾小球系膜细胞中至重度增生,系膜基质聚积.灌胃给予强的松和TGP(1m∥蚝+100 m∥k)联合治疗4周后,肾小球系膜细胞增生、基质聚积明显减少,大鼠的蛋白尿减轻,Cre、Bun、ALT和TG下降,TP和Alb上升,与单独使用TGP(100 m∥蚝)、强的松(5 m∥蝇)有类似作用.结论 TGP与强的松联用,可降低强的松的用量,对于MsPGN大鼠的肝肾功能有明显改善作用,并能部分逆转受损肾小球的病理改变.
作者:冯静;徐星铭;周登余;戴宏 刊期: 2007年第02期
目的 研究噻唑烷二酮类药物吡格列酮对3T3-L1细胞中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA和蛋白表达的影响.方法 将3T3-L1细胞随机分为3组:对照组3T3-L1细胞进行正常的诱导分化,实验1组在3T3-L1细胞诱导时加入吡格列酮(0.1 mmol/L),实验2组在诱导分化后成熟的3T3-L1脂肪细胞中加入吡格列酮(0.1 mmol/L).提取细胞总RNA和总蛋白做RT-PCR和Western-blot测定GLUt4 mRNA和蛋白的表达情况.结果 与对照组比较实验组GLUT4mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P<0.05).结论 吡格列酮促进3T3-L1脂肪细胞GLUT4 mRNA和蛋白表达.
作者:曹永红;王长江;贾敬华;代芳;陈明卫;林刚;叶小龙 刊期: 2007年第02期