俞经生;葛建军;张士兵;周正春
目的 建立逆转录-环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因.方法 快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增转移相关基因Serpine1,扩增条件为63 ℃保温30 min,扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定.结果 RT-LAMP能特异性快速的扩增目的基因.结论 RT-LAMP能因其特异,快速,高效的优点可以广泛运用于肿瘤转移相关基因的检测,对临床早期诊断提供标准.
作者:徐凌;殷建华;朱秀;唐毕锋;曹广文;邓松华 刊期: 2007年第06期
目的 建立人巨细胞病毒(HCMV)原发感染BALB/c小鼠大脑皮质的模型,为进一步研究其发病机制奠定实验基础.方法 分别用2×106、2×105、2×104、2×103、2×102 PFU/ml 的HCMV AD169株腹腔注射6~8周SPF级BALB/c小鼠雌雄各6只作为实验组,同时设立灭活病毒对照组和细胞对照组.1个月后取各组小鼠大脑皮质组织进行病毒分离与鉴定、PCR和RT-PCR分别检测各标本中HCMV UL83基因及UL54的转录、HE染色.结果 2×106、2×105 PFU/ml实验组的雌性小鼠病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性;HE染色可见海马区出现了明显的病理变化.雄性小鼠、低剂量(2×104、2×103、2×102 PFU/ml)实验组、灭活病毒组和HF对照组均为阴性.结论 HCMV AD169株腹腔注射6~8周龄SPF级雌性小鼠1个月可测出大脑皮质发生急性炎症反应,为HCMV所致的原发感染状态,且小鼠性别及病毒的接种量可能与感染发生存在密切关系.
作者:黄维;王明丽;吴喜林;刘倩;陈敬贤 刊期: 2007年第06期
目的 探讨Pokemon蛋白在胃黏膜不典型增生与胃癌组织中的表达及其意义.方法 应用免疫组化SP法检测43例不典型增生胃黏膜及87例胃癌组织中Pokemon蛋白的表达,以20例正常胃黏膜为对照.并联系临床病理学指标进行相关分析.结果 在正常胃黏膜中Pokemon不表达或弱表达,在不典型增生胃黏膜中,阳性表达率及强度较正常胃黏膜有所增加,并随不典型增生程度的加重而增加,在胃癌组织中表达高,并与胃癌分化程度及有无淋巴转移和肝转移有关.结论 Pokemon蛋白的表达与胃癌的发生密切相关,可能参与了胃黏膜不典型增生及胃癌的发生发展.
作者:张雨;余昌俊;宋海屏 刊期: 2007年第06期
目的 观察植入前小鼠子宫内膜整合素α4的表达分布状况及超微结构.方法 用免疫化SP法检测妊娠1~4 d小鼠子宫内膜整合素α4的表达;用透射电镜观察植入前小鼠子宫内膜的超微结构.结果 整合素α4主要表达于子宫内膜腔上皮及腺上皮,表达强弱不等,于妊娠第4天表达强.透射电镜观察妊娠第4天子宫内膜腔上皮和腺上皮内线粒体、粗面内质网、分泌颗粒等丰富,内膜间质水肿,基质细胞肥大变圆,胞质内富含糖原、脂滴.结论 妊娠1~4 d小鼠子宫内膜持续表达整合素α4;妊娠第4天子宫内膜腔上皮、腺上皮和基质细胞处于植入前分泌功能旺盛阶段.提示整合素α4可能参与小鼠胚泡植入过程,其表达强弱与植入前子宫内膜的发育同步化.
作者:谢芬芬;陈晓蓉 刊期: 2007年第06期
目的 观察硝酸甘油和尼卡地平在颅脑手术控制性降压应用时对脑氧代谢的影响.方法 24例颅脑肿瘤手术患者,随机均分为两组,Ⅰ组为硝酸甘油组,Ⅱ组为尼卡地平组.降压幅度与诱导前基础血压相比较,控制在MAP下降25%~30%,维持60 min.分别于降压前、中、后同步行桡动脉和颈内静脉球部血气分析,计算Da-jO2和CEO2等.结果 两组降压效果差异无显著性(P>0.05),降压期间心率均增快,高于降压前(P<0.05),组间差异无显著性(P>0.05);降压期间SjO2Ⅱ组比Ⅰ组升高更显著(P<0.05,P<0.01),而Da-jO2 、CEO2Ⅱ组低于Ⅰ组,差异有显著性(P<0.05);CaO2和CjvO2在降压前后无明显变化(P>0.05).结论 颅脑手术中尼卡地平控制性降压降低脑氧代谢的作用要优于硝酸甘油.
作者:郑建武;张健;侯炯 刊期: 2007年第06期
瑞芬太尼是一种新型超短效阿片类药物,被广泛应用于全身麻醉.但瑞芬太尼停止输注后,会出现剧烈的疼痛甚至痛觉过敏,导致术后镇痛药需求增加,对患者的术后安全和恢复不利.氟比洛芬脂为非甾体类抗炎药,镇痛效果良好,本研究拟观察手术结束前静脉给予氟比洛芬酯对瑞芬太尼麻醉后急性疼痛的防治作用.
作者:康芳;王瑞婷;方才 刊期: 2007年第06期
目的 探讨人内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)在结直肠癌组织中的表达.方法 原位杂交、免疫组织化学法检测ESM-1在9例正常黏膜、37例腺瘤和88例结直肠癌组织中的表达.结果 原位杂交检测到ESM-1 mRNA在正常黏膜和腺瘤中的表达呈强阳性,表达率分别为67%和94%,而在结直肠癌组织中表达显著低于正常组织,为34%;免疫组化检测到正常黏膜和腺瘤中ESM-1蛋白表达率为67%和81%,而结直肠癌组织中表达率为39%. ESM-1 mRNA和蛋白表达具有较好的一致性.结论 ESM-1在结直肠癌组织中的表达明显降低.
作者:左莉;张素梅;胡若磊;朱华庆;程筱雯;周青;桂淑玉;吴强;汪渊 刊期: 2007年第06期
目的 研究4-HPR对肺腺癌细胞A549体外生长的影响及机制的初步探讨.方法 MTT法观察4-HPR对肺腺癌细胞株A549的生长抑制作用,流式细胞术观察4-HPR诱导A549细胞凋亡作用和对细胞周期的影响,Western blot分析凋亡相关蛋白表达.结果 4-HPR抑制A549的增殖呈剂量依赖性;4-HPR诱导A549细胞凋亡,凋亡过程伴随Bcl-2、Bcl-xS/L表达下降,而Caspase-3、Caspase-9的表达无明显变化.结论 4-HPR可明显抑制肺腺癌细胞的增殖,通过降低Bcl-2和Bcl-xS/L促进A549细胞凋亡,为进一步探讨4-HPR治疗肺腺癌的机制提供实验依据.
作者:张玲;桂淑玉;李庆;谢斌;何苇;左莉;周青;陈飞虎;汪渊 刊期: 2007年第06期
目的 了解儿童期发作的进行性脊髓性肌萎缩(SMA)患者的运动神经元存活基因(SMN)的缺失,探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法用于SMA疾病的诊断价值.方法 应用PCR-RFLP方法对3例SMA可疑患儿及其父母5例的SMN1基因外显子7和8进行了检测,并对其进行基因测序.结果 3例SMA可疑患儿中3例均有SMN1基因缺失,为外显子7和8联合缺失.其父母均无SMN1基因缺失.基因测序支持诊断.结论 用PCR-RFLP法对高度可疑儿童型SMA的病例进行诊断,具有较高敏感性和特异性,简便易行.
作者:金岚;尹耕心;吴德;李小燕;唐久来 刊期: 2007年第06期
目的 构建带GFP标签的PAM14表达载体,将其转染至HEK 293T细胞检测其表达,转染至COS7细胞观察PAM14蛋白在细胞内的定位.方法 以含人PAM14全长cDNA序列的质粒pACT2-PAM14为模板,用PCR方法扩增PAM14全长序列,然后插入带GFP标签的载体pCDGFP中构建表达载体pCDGFP-PAM14,将构建的质粒转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,进行Western-blot检测;转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位.结果 成功构建了表达载体pCDGFP-PAM14,此表达载体在HEK 293T细胞中能够有效表达,转染表明PAM14在COS7细胞主要在核内表达,胞质内也有少量表达.结论 实验结果为进一步了解PAM14的功能提供了一定的基础.
作者:张庆慧;汪云飞;朱恒锐;刘晓颖;范礼斌 刊期: 2007年第06期
目的 探讨鸡矢藤提取物(EPS)对酵母膏和氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症的影响及可能的作用机制. 方法采用酵母膏和氧嗪酸钾造成小鼠高尿酸血症模型,观察EPS对模型小鼠血清尿酸水平及体重和肾功能的影响,并进一步观察其对模型小鼠黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶的抑制作用.结果 EPS(6.3、3.15、1.57 g/kg,ig,qd×14 d)在显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的同时,对模型小鼠体重和肾功能均无明显影响;EPS(6.3、3.15、1.57 g/kg,ig,qd×14 d)可显著抑制高尿酸血症小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶的活性,EPS(6.3 g/kg)对模型小鼠血清腺苷脱氨酶的活性也具有一定的抑制作用.结论 EPS可显著降低酵母膏和氧嗪酸钾致高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平,其机制可能与抑制黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶活性有关.
作者:颜海燕;马颖;刘梅;周兰兰 刊期: 2007年第06期
目的 建立一种可以同时分离大鼠肝星状细胞(HSC)和枯否细胞(KC)的方法.方法 选用SD 大鼠,经胶原酶和蛋白酶灌注肝脏后,用18%Nycodenz密度梯度离心,分离大鼠 HSC和KC,HSC处在界面,KC处在界面下.常规台盼蓝染色行细胞活力鉴定;荧光显微镜下观察自发荧光确定HSC的纯度;KC免疫细胞化学检测.结果 成功分离大鼠肝星状细胞和枯否细胞,HSC得率为2×107/肝,KC得率为(3~6)×106/肝,活性>90%,纯度>90%.结论 该方法建立的HSC和KC同时分离培养的方法,简单、易行、可靠,细胞纯度高,同时获得的细胞可保持良好的生物学性状.
作者:张磊;黄成;李俊;吕雄文;朱鹏里;王建青;李增;贺晓昕 刊期: 2007年第06期
目的 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶15(Aurora-A)在星形细胞瘤中的表达以及与临床病理指标的关系. 方法用免疫组化方法(两步法)检测33例星形细胞瘤和10例非肿瘤脑组织石蜡切片中Aurora-A蛋白的表达情况,用Western Blot进一步检测Aurora-A蛋白在20例星形细胞瘤及20例非肿瘤脑组织新鲜标本中的表达,分析其与星形细胞瘤临床病理指标的关系.结果 Aurora-A蛋白在33例石蜡切片中的表达阳性率为60.6%,10例非肿瘤脑组织石蜡切片中均不表达,两者差异有显著性(P<0.01);在20例星形细胞瘤新鲜标本中的表达阳性率为100%,而在所有非肿瘤脑组织新鲜标本中均不表达,两者差异有显著性(P<0.01).利用t检验分析可知不同级别星形细胞瘤Aurora-A蛋白的表达差异具有显著性(P<0.05),不同年龄、性别之间表达差异无显著性.结论 Aurora-A蛋白表达强度可作为判定星形细胞瘤恶性程度新的指标.
作者:高志波;万经海;冯春国;徐培坤;程宏伟;李长元;李汉杰;沈际佳;吴正升 刊期: 2007年第06期
目的 研究S100A4蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学S-P法检测87例结直肠癌组织及癌旁结直肠组织中S100A4蛋白,并分析S100A4表达与结直肠癌临床病理因素及术后5年生存率的关系.结果 在癌旁结直肠组织腺上皮中S100A4蛋白不表达;在结直肠癌组织中S100A4蛋白的表达率为64.4%(56/87);与癌旁结直肠组织比较,差异有显著性(P<0.01);S100A4蛋白在结直肠癌中的表达与临床分期、淋巴结转移及5年生存率有关(P<0.05),与其它临床病理因素无关(P>0.05).结论 S100A4蛋白和结直肠癌的侵袭和转移及预后密切相关;S100A4蛋白可作为判定结直肠癌临床病理特征及判断预后的重要指标.
作者:刘尽国;李昊;张洪福;杨枫 刊期: 2007年第06期
目的 观察来氟米特(Lef)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠结肠炎的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法 以TNBS诱导大鼠结肠炎模型, 将大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、阳性药物对照组(5-ASA 100 mg/kg,ig,qd×14 d)及Lef低剂量、中剂量和高剂量组(1.0、2.0、4.0 mg/kg,ig,qd×14 d).每天观察疾病活动指数(DAI),2周后处死大鼠,并取出结肠组织进行大体形态及组织学评分.以免疫组化方法检测结肠组织核因子NF-κBp65、TNF-α的表达,Elisa法测外周血IL-10的含量. 结果与TNBS模型组相比,Lef组大鼠的DAI、大体形态、组织学评分及肠黏膜组织内NF-κBp65和TNF-α表达显著降低(P<0.01);大鼠结肠黏膜组织NF-κBp65在模型组以胞核表达为主,相反正常对照组及治疗组NF-κBp65以胞质表达为主;外周血中IL-10含量显著增加(均P<0.01). 结论 Lef对TNBS诱导的大鼠结肠炎有抑制作用,其机制可能是通过提高抗炎细胞因子的水平,抑制NF-κB核结合活性,进而降低致炎细胞因子的表达完成.
作者:姚霞;吴正祥;吴强;杨枫;丁向东;葛相栓;杨彩虹 刊期: 2007年第06期
目的 探讨经尿道超脉冲等离子体双极汽化术治疗良性前列腺增生(BPH)的安全性和疗效.方法 采用经尿道前列腺超脉冲等离子体双极汽化切除术(TUSP-PKVP)治疗BPH患者192例.结果 手术时间35~180(56±28) min,术中出血30~350 ml,切除腺体12~85(28.3±17.1) g.无尿失禁,无电切综合症及闭孔神经反射发生.术后随访1~6个月,Qmax由术前(8.8±4.5)ml/s升至术后(20.1±7.3)ml/s,IPSS由术前(23.1±5.6)分降至术后(7.9±4.8)分,QOL由术前(4.2±0.7)分降至术后(1.2±1.1)分,剩余尿由术前(84±80)ml减少至术后(24±19)ml.结论 经尿道前列腺超脉冲等离子体双极汽化术具有安全性高,并发症少,疗效确切等优点.
作者:戴宇红;朱劲松;杨凯;裴有恩 刊期: 2007年第06期
双表型急性白血病(biphenotypic acute leukemia,BAL)指急性白血病(acute leukemia,AL)中髓系和淋巴系均受累的一个亚型.常分为双表型、双系列、双克隆型,其中双表型、双系列较为常见.双表型指同一白血病细胞群同时表达髓系和淋巴系标记,双系列指存在两种或两种以上的细胞亚群,分别表达淋系和髓系标记.多数学者认为无必要区分双表型和双系列型,统称为双表型细胞即可.由于BAL发病率低,国内尚缺乏系统研究BAL的报道,笔者对26例BAL患者,利用流式细胞术进行了全面的免疫分型,现报道如下.
作者:宣柳;沈佐君;李筱青 刊期: 2007年第06期
目的 对少牙畸形患者进行临床检查和系谱分析,总结先天缺牙的遗传方式和临床特征.方法 收集少牙畸形病例,对患者及家系成员进行口腔检查,摄曲面断层片;了解家族史,绘系谱图;进行分析总结.结果 先天性少牙畸形有家族性的,也有散发的,患者常伴有余留牙的形态异常、前牙间散在间隙.家族性缺牙患者多为常染色体显性遗传,仅有1例为常染色体隐性遗传.结论 先天缺牙家系多为常染色体显性遗传;遗传表现包括缺牙牙位、牙冠形态等;先天缺牙严重影响患者的口腔健康及咬合关系,危害患者身心危害.
作者:崔娟娟;梅陵宣;李午丽 刊期: 2007年第06期
目的 研究舌癌患者外周血CIK细胞的增殖能力、细胞表型和细胞毒作用,寻求对舌癌过继免疫治疗的新途径.方法 提取20例舌癌患者和20例健康人外周血单核细胞用IFN-γ、抗CD3mAb、IL-2和IL-1β共同培养诱导CIK细胞,流式细胞仪检测细胞表型特征,用MTT法检测细胞对Tca8113的杀伤活性;同时培养舌癌患者LAK细胞、CD3AK细胞和舌癌患者CIK细胞在增殖和杀瘤活性上作比较.结果 舌癌患者20 ml外周血经过一个周期培养平均获得的CIK细胞数低于健康对照组(P<0.05),但舌癌患者CIK细胞经过周期培养也较培养前的数量明显增高,于12~21 d达高峰.舌癌患者CIK细胞与LAK相比,增殖倍数和杀伤活性均明显提高(P<0.05);舌癌患者CIK增殖倍数与CD3AK相比,早期差异无显著性,但后期增殖倍数及杀伤活性有显著提高(P<0.05).结论 舌癌患者CIK细胞体外增殖倍数和杀瘤活性明显优于LAK和CD3AK细胞,低于正常人CIK的增殖能力,而舌癌患者CIK细胞杀伤活性与正常人来源CIK细胞差异无显著性(P>0.05),有望作为自体过继免疫治疗舌癌的一种新方法.
作者:曹发明;周健;薛绍礼;谢红军 刊期: 2007年第06期
目的 研究去甲二氢愈创木酸(NDGA)对小鼠胚泡植入的影响及其作用机制.方法 孕2 d小鼠随机分4组(A、B、C和对照组),A、B、C组分别经皮下注射1.0、3.0、9.0 mg/kg的NDGA,对照组注射等量PBS溶液,孕4 d处死一半,取子宫免疫组化检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达,透射电镜分析子宫内膜结构的变化;另一半于检孕8 d处死,测子宫脏器系数,观察胚胎着床数.结果 与对照组比较:A组子宫脏器系数和妊娠胚胎数无显著差异,B、C组子宫脏器系数显著下降,妊娠胚胎数明显减少;A组子宫内膜MMP-9阳性表达差异无显著性,而B、C组MMP-9阳性表达明显减少;A组子宫内膜细胞超微结构无显著变化,B、C组细胞超微结构均遭受不同程度的损伤.结论 NDGA可能通过对子宫内膜细胞直接毒性作用干扰MMP-9的表达,抑制胚泡植入.
作者:朱坤;陈晓蓉 刊期: 2007年第06期