刘尽国;李昊;张洪福;杨枫
目的 建立人巨细胞病毒(HCMV)原发感染BALB/c小鼠大脑皮质的模型,为进一步研究其发病机制奠定实验基础.方法 分别用2×106、2×105、2×104、2×103、2×102 PFU/ml 的HCMV AD169株腹腔注射6~8周SPF级BALB/c小鼠雌雄各6只作为实验组,同时设立灭活病毒对照组和细胞对照组.1个月后取各组小鼠大脑皮质组织进行病毒分离与鉴定、PCR和RT-PCR分别检测各标本中HCMV UL83基因及UL54的转录、HE染色.结果 2×106、2×105 PFU/ml实验组的雌性小鼠病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性;HE染色可见海马区出现了明显的病理变化.雄性小鼠、低剂量(2×104、2×103、2×102 PFU/ml)实验组、灭活病毒组和HF对照组均为阴性.结论 HCMV AD169株腹腔注射6~8周龄SPF级雌性小鼠1个月可测出大脑皮质发生急性炎症反应,为HCMV所致的原发感染状态,且小鼠性别及病毒的接种量可能与感染发生存在密切关系.
作者:黄维;王明丽;吴喜林;刘倩;陈敬贤 刊期: 2007年第06期
目的 应用荧光原位杂交技术检测食管鳞状细胞癌染色体畸变情况,并分析其与临床病理参数相关性,探讨应用探针组合辅助诊断食管鳞状细胞癌的可行性.方法 用染色体3、4、8、9、10、11、17、20号和Y着丝粒探针,与152例食管鳞状细胞癌细胞间期核进行荧光原位杂交,分析染色体畸变情况及其与临床病理参数的关系,统计染色体畸变组合检测食管鳞状细胞癌的阳性率.结果 3、4、8、9、10、11、17、20号和Y染色体畸变率分别为68.4%、46.7%、73.0%、48.6%、55.3%、48.7%、54.6%、61.8%和55.5%.11、20号染色体多体与分期显著相关(P=0.011、0.005),4、9、20号染色体多体与分级显著相关(P=0.007、0.001、0.002),8、11、17、20号染色体多体与淋巴结转移显著相关(P=0.000、0.000、0.010、0.007).联合应用3、8、10、20号探针检测食管鳞状细胞癌阳性率为57%,3、8、20号和Y探针组合在男性患者的阳性率为69%.结论 食管鳞状细胞癌染色体有很高的畸变率,且与临床病理参数存在相关性,染色体着丝粒探针组合为食管癌的辅助检测提供实验依据.
作者:张天宝;张钰;蔡岩;韩亚铃;徐昕;王明荣;贾雪梅 刊期: 2007年第06期
目的 建立一种可以同时分离大鼠肝星状细胞(HSC)和枯否细胞(KC)的方法.方法 选用SD 大鼠,经胶原酶和蛋白酶灌注肝脏后,用18%Nycodenz密度梯度离心,分离大鼠 HSC和KC,HSC处在界面,KC处在界面下.常规台盼蓝染色行细胞活力鉴定;荧光显微镜下观察自发荧光确定HSC的纯度;KC免疫细胞化学检测.结果 成功分离大鼠肝星状细胞和枯否细胞,HSC得率为2×107/肝,KC得率为(3~6)×106/肝,活性>90%,纯度>90%.结论 该方法建立的HSC和KC同时分离培养的方法,简单、易行、可靠,细胞纯度高,同时获得的细胞可保持良好的生物学性状.
作者:张磊;黄成;李俊;吕雄文;朱鹏里;王建青;李增;贺晓昕 刊期: 2007年第06期
目的 探讨着丝粒蛋白F(CENP-F)在人脑胶质瘤中的表达状况及其与血管内皮生长因子(VEGF)及微血管增生间的关系.方法 采用SP免疫组化技术,检测60例胶质瘤及10例正常脑组织CENP-F、VEGF的表达,同时检测CD34了解微血管密度(MVD),并分析三者之间相关性.结果 CENP-F、VEGF的表达及MVD在正常脑组织及胶质瘤中差异有显著性(P<0.05),CENP-F的表达及MVD在低级别组与高级别组胶质瘤之间存在显著差异(P<0.05),CENP-F、VEGF阳性者其MVD均高于CENP-F、VEGF阴性者,CENP-F胶质瘤中表达阳性者其中65.7%(23/35)VEGF表达阳性(P<0.05,r=0.247).结论 CENP-F、VEGF在胶质瘤中呈正相关性,CENP-F与胶质瘤微血管增生有相关性.
作者:吴长山;肖瑾;万经海;程宏伟;冯春国;徐培坤;李长元 刊期: 2007年第06期
目的 观察硝酸甘油和尼卡地平在颅脑手术控制性降压应用时对脑氧代谢的影响.方法 24例颅脑肿瘤手术患者,随机均分为两组,Ⅰ组为硝酸甘油组,Ⅱ组为尼卡地平组.降压幅度与诱导前基础血压相比较,控制在MAP下降25%~30%,维持60 min.分别于降压前、中、后同步行桡动脉和颈内静脉球部血气分析,计算Da-jO2和CEO2等.结果 两组降压效果差异无显著性(P>0.05),降压期间心率均增快,高于降压前(P<0.05),组间差异无显著性(P>0.05);降压期间SjO2Ⅱ组比Ⅰ组升高更显著(P<0.05,P<0.01),而Da-jO2 、CEO2Ⅱ组低于Ⅰ组,差异有显著性(P<0.05);CaO2和CjvO2在降压前后无明显变化(P>0.05).结论 颅脑手术中尼卡地平控制性降压降低脑氧代谢的作用要优于硝酸甘油.
作者:郑建武;张健;侯炯 刊期: 2007年第06期
目的 探讨人内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)在结直肠癌组织中的表达.方法 原位杂交、免疫组织化学法检测ESM-1在9例正常黏膜、37例腺瘤和88例结直肠癌组织中的表达.结果 原位杂交检测到ESM-1 mRNA在正常黏膜和腺瘤中的表达呈强阳性,表达率分别为67%和94%,而在结直肠癌组织中表达显著低于正常组织,为34%;免疫组化检测到正常黏膜和腺瘤中ESM-1蛋白表达率为67%和81%,而结直肠癌组织中表达率为39%. ESM-1 mRNA和蛋白表达具有较好的一致性.结论 ESM-1在结直肠癌组织中的表达明显降低.
作者:左莉;张素梅;胡若磊;朱华庆;程筱雯;周青;桂淑玉;吴强;汪渊 刊期: 2007年第06期
目的 探讨鸡矢藤提取物(EPS)对酵母膏和氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症的影响及可能的作用机制. 方法采用酵母膏和氧嗪酸钾造成小鼠高尿酸血症模型,观察EPS对模型小鼠血清尿酸水平及体重和肾功能的影响,并进一步观察其对模型小鼠黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶的抑制作用.结果 EPS(6.3、3.15、1.57 g/kg,ig,qd×14 d)在显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的同时,对模型小鼠体重和肾功能均无明显影响;EPS(6.3、3.15、1.57 g/kg,ig,qd×14 d)可显著抑制高尿酸血症小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶的活性,EPS(6.3 g/kg)对模型小鼠血清腺苷脱氨酶的活性也具有一定的抑制作用.结论 EPS可显著降低酵母膏和氧嗪酸钾致高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平,其机制可能与抑制黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶活性有关.
作者:颜海燕;马颖;刘梅;周兰兰 刊期: 2007年第06期
目的 研究S100A4蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学S-P法检测87例结直肠癌组织及癌旁结直肠组织中S100A4蛋白,并分析S100A4表达与结直肠癌临床病理因素及术后5年生存率的关系.结果 在癌旁结直肠组织腺上皮中S100A4蛋白不表达;在结直肠癌组织中S100A4蛋白的表达率为64.4%(56/87);与癌旁结直肠组织比较,差异有显著性(P<0.01);S100A4蛋白在结直肠癌中的表达与临床分期、淋巴结转移及5年生存率有关(P<0.05),与其它临床病理因素无关(P>0.05).结论 S100A4蛋白和结直肠癌的侵袭和转移及预后密切相关;S100A4蛋白可作为判定结直肠癌临床病理特征及判断预后的重要指标.
作者:刘尽国;李昊;张洪福;杨枫 刊期: 2007年第06期
目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)与血脂、血糖的相关性及临床应用.方法 检测正常对照(NC)组、T2DM组空腹状态下血清hs-CRP、血脂、血糖、血清胰岛素水平和餐后2h血糖及血清胰岛素水平.结果 NC组血清hs-CRP[0.40(0.21~1.67)mg/L]显著低于T2DM组[3.6(1.83~8.94) mg/L](P<0.01).T2DM组血清hs-CRP与甘油三脂(TG)、载脂蛋白B(ApoB)、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(PPG)、空腹胰岛素(FINS)、餐后2 h胰岛素(PSI)呈正相关(P<0.05或P<0.01),与高密度脂蛋白(HDL)呈负相关(P<0.01).结论 T2DM患者血清hs-CRP水平显著升高,hs-CRP与TG、ApoB、FPG、PPG、FINS、PSI正相关,与HDL负相关.
作者:杨佰侠;储小宏;丛安丽;吕礼应 刊期: 2007年第06期
目的 研究去甲二氢愈创木酸(NDGA)对小鼠胚泡植入的影响及其作用机制.方法 孕2 d小鼠随机分4组(A、B、C和对照组),A、B、C组分别经皮下注射1.0、3.0、9.0 mg/kg的NDGA,对照组注射等量PBS溶液,孕4 d处死一半,取子宫免疫组化检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达,透射电镜分析子宫内膜结构的变化;另一半于检孕8 d处死,测子宫脏器系数,观察胚胎着床数.结果 与对照组比较:A组子宫脏器系数和妊娠胚胎数无显著差异,B、C组子宫脏器系数显著下降,妊娠胚胎数明显减少;A组子宫内膜MMP-9阳性表达差异无显著性,而B、C组MMP-9阳性表达明显减少;A组子宫内膜细胞超微结构无显著变化,B、C组细胞超微结构均遭受不同程度的损伤.结论 NDGA可能通过对子宫内膜细胞直接毒性作用干扰MMP-9的表达,抑制胚泡植入.
作者:朱坤;陈晓蓉 刊期: 2007年第06期
联合心瓣膜病合并左室舒张末径 (LVEDD)>75 mm是风心病换瓣手术治疗中的高危病例.手术风险大、手术病死率及并发症发生率高.2001年9月~2006年9月,我院对收治的43例联合瓣膜病合并巨大左室的患者施行了双瓣置换术,占同期换瓣手术的6.4%,临床效果满意.
作者:俞经生;葛建军;张士兵;周正春 刊期: 2007年第06期
目的 观察来氟米特(Lef)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠结肠炎的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法 以TNBS诱导大鼠结肠炎模型, 将大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、阳性药物对照组(5-ASA 100 mg/kg,ig,qd×14 d)及Lef低剂量、中剂量和高剂量组(1.0、2.0、4.0 mg/kg,ig,qd×14 d).每天观察疾病活动指数(DAI),2周后处死大鼠,并取出结肠组织进行大体形态及组织学评分.以免疫组化方法检测结肠组织核因子NF-κBp65、TNF-α的表达,Elisa法测外周血IL-10的含量. 结果与TNBS模型组相比,Lef组大鼠的DAI、大体形态、组织学评分及肠黏膜组织内NF-κBp65和TNF-α表达显著降低(P<0.01);大鼠结肠黏膜组织NF-κBp65在模型组以胞核表达为主,相反正常对照组及治疗组NF-κBp65以胞质表达为主;外周血中IL-10含量显著增加(均P<0.01). 结论 Lef对TNBS诱导的大鼠结肠炎有抑制作用,其机制可能是通过提高抗炎细胞因子的水平,抑制NF-κB核结合活性,进而降低致炎细胞因子的表达完成.
作者:姚霞;吴正祥;吴强;杨枫;丁向东;葛相栓;杨彩虹 刊期: 2007年第06期
目的 探讨Pokemon蛋白在胃黏膜不典型增生与胃癌组织中的表达及其意义.方法 应用免疫组化SP法检测43例不典型增生胃黏膜及87例胃癌组织中Pokemon蛋白的表达,以20例正常胃黏膜为对照.并联系临床病理学指标进行相关分析.结果 在正常胃黏膜中Pokemon不表达或弱表达,在不典型增生胃黏膜中,阳性表达率及强度较正常胃黏膜有所增加,并随不典型增生程度的加重而增加,在胃癌组织中表达高,并与胃癌分化程度及有无淋巴转移和肝转移有关.结论 Pokemon蛋白的表达与胃癌的发生密切相关,可能参与了胃黏膜不典型增生及胃癌的发生发展.
作者:张雨;余昌俊;宋海屏 刊期: 2007年第06期
目的 研究TRAIL诱导胃腺癌细胞凋亡的途径.方法 PI染色、流式细胞仪检测细胞凋亡;广谱caspase抑制剂 (z-VAD-fmk)、caspase-8抑制剂(z-IETD-fmk)和caspase-9抑制剂(z-LEHD-fmk)分别与TRAIL共同作用后PI染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;Western blot 检测caspase-3的活化及PARP的裂解;JC-1染色、流式细胞仪分析线粒体膜电位的变化. 结果 TRAIL诱导胃腺癌细胞凋亡具有剂量和时间依赖性,BGC-823较SGC-7901对TRAIL诱导的凋亡更敏感,TRAIL(100 μg/L)作用24 h细胞凋亡率分别是59.9%、24.3%;3种caspase抑制剂都能很大程度上阻止TRAIL诱导胃腺癌细胞凋亡;caspase-3、PARP在TRAIL作用早期即活化、裂解,且BGC-823比SGC-7901发生得更快;线粒体膜电位随TRAIL处理时间延长而不断下降.结论 TRAIL能诱导胃腺癌细胞凋亡,且这种凋亡依赖于caspases;除死亡受体途径外,线粒体途径也参与了凋亡信号通路.
作者:吴萍;陈思;程文晋;江蓓蕾;张旭东;张林杰 刊期: 2007年第06期
目的 构建带GFP标签的PAM14表达载体,将其转染至HEK 293T细胞检测其表达,转染至COS7细胞观察PAM14蛋白在细胞内的定位.方法 以含人PAM14全长cDNA序列的质粒pACT2-PAM14为模板,用PCR方法扩增PAM14全长序列,然后插入带GFP标签的载体pCDGFP中构建表达载体pCDGFP-PAM14,将构建的质粒转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,进行Western-blot检测;转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位.结果 成功构建了表达载体pCDGFP-PAM14,此表达载体在HEK 293T细胞中能够有效表达,转染表明PAM14在COS7细胞主要在核内表达,胞质内也有少量表达.结论 实验结果为进一步了解PAM14的功能提供了一定的基础.
作者:张庆慧;汪云飞;朱恒锐;刘晓颖;范礼斌 刊期: 2007年第06期
目的 了解儿童期发作的进行性脊髓性肌萎缩(SMA)患者的运动神经元存活基因(SMN)的缺失,探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法用于SMA疾病的诊断价值.方法 应用PCR-RFLP方法对3例SMA可疑患儿及其父母5例的SMN1基因外显子7和8进行了检测,并对其进行基因测序.结果 3例SMA可疑患儿中3例均有SMN1基因缺失,为外显子7和8联合缺失.其父母均无SMN1基因缺失.基因测序支持诊断.结论 用PCR-RFLP法对高度可疑儿童型SMA的病例进行诊断,具有较高敏感性和特异性,简便易行.
作者:金岚;尹耕心;吴德;李小燕;唐久来 刊期: 2007年第06期
目的 探讨特布他林对A549细胞吞噬凋亡嗜酸性粒细胞及对A549细胞分泌白介素(IL)-6、IL-8的影响.方法 ①用磁体活化的细胞分离柱分离嗜酸性粒细胞,培养使其老化凋亡;凋亡嗜酸性粒细胞与不同作用条件的特布他林干预的A549细胞共培养,光学显微镜下观察A549细胞吞噬凋亡嗜酸性粒细胞能力的改变.②对A549细胞给予不同浓度的特布他林干预,采用放射免疫检测IL-6、IL-8浓度.结果 ①特布他林以时间和浓度依赖的方式抑制A549细胞吞噬凋亡嗜酸性粒细胞.②特布他林抑制脂多糖诱导的A549细胞分泌IL-6、IL-8且存在浓度依赖性.结论 特布他林(1、10 μmol/L)抑制A549细胞吞噬凋亡嗜酸性粒细胞,低浓度特布他林(0.1 μmol/L)无抑制作用,但不同浓度的特布他林均可以通过抑制脂多糖诱导的A549细胞对IL-6 、IL-8的分泌起到一定的抗炎作用.
作者:高坤;汪诚;刘荣玉 刊期: 2007年第06期
目的 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶15(Aurora-A)在星形细胞瘤中的表达以及与临床病理指标的关系. 方法用免疫组化方法(两步法)检测33例星形细胞瘤和10例非肿瘤脑组织石蜡切片中Aurora-A蛋白的表达情况,用Western Blot进一步检测Aurora-A蛋白在20例星形细胞瘤及20例非肿瘤脑组织新鲜标本中的表达,分析其与星形细胞瘤临床病理指标的关系.结果 Aurora-A蛋白在33例石蜡切片中的表达阳性率为60.6%,10例非肿瘤脑组织石蜡切片中均不表达,两者差异有显著性(P<0.01);在20例星形细胞瘤新鲜标本中的表达阳性率为100%,而在所有非肿瘤脑组织新鲜标本中均不表达,两者差异有显著性(P<0.01).利用t检验分析可知不同级别星形细胞瘤Aurora-A蛋白的表达差异具有显著性(P<0.05),不同年龄、性别之间表达差异无显著性.结论 Aurora-A蛋白表达强度可作为判定星形细胞瘤恶性程度新的指标.
作者:高志波;万经海;冯春国;徐培坤;程宏伟;李长元;李汉杰;沈际佳;吴正升 刊期: 2007年第06期
目的 探讨出生后早期有限次数速灭威染毒对ICR小鼠神经发育的影响,尤其是对空间学习记忆能力的影响;同时探讨其可能的毒作用机制.方法 小鼠出生第3天开始腹腔注射速灭威(0.05、0.5、5 mg/kg),隔天1次,连续6次,DMSO和生理盐水分别为溶剂对照和空白对照.观察一般生理及神经发育情况.末次染毒后24 h剖杀一部分,测定脑组织丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量.剩余小鼠进行旷场、平衡木、Morris水迷宫等神经行为学测试. 结果与溶剂对照比较,高剂量组下牙萌出达标时间略有延迟(约0.5 d),各剂量组开眼达标时间均延迟(P<0.01);各剂量组小鼠悬崖回避反射阳性出现时间均延迟(P<0.05),但至青年期在平衡木测试中,各组间已无差异;在旷场实验中,反映自发性活动和焦虑情绪的指标在各组间均无差异性;在Morris水迷宫空间探索实验中,高剂量组小鼠在原平台象限游泳的时间和穿越原隐匿平台次数均减少(P<0.05);各剂量组脑MDA水平显著高于溶剂对照组(P<0.05).结论 出生后早期有限次数接触速灭威可延迟小鼠下牙萌出和开眼这两项生理发育标志的出现,并影响其早期躯体感觉运动功能的发育,感觉运动功能到青年期得以恢复;值得注意的是,出生后早期接触速灭威,将影响到小鼠成年后的空间记忆能力,且可能与氧化应激有关.
作者:王志刚;王取南;张玉媛;张千;杨叶新;张艳;洪敏 刊期: 2007年第06期
分泌性中耳炎是以中耳积液及听力下降为主要特征的非化脓性中耳炎性疾病,小儿发病率高,是引起小儿听力下降的常见的原因之一.对于该病手术治疗的方式,文献报道[1-4]不一致.为探讨有效的手术治疗方式,我们将2000年1月~2007年1月在安徽医科大学附属医院经保守治疗无效、病程超过3个月、鼓室导抗图为B型或C型的儿童分泌性中耳炎73例,分成两组,分别进行腺样体切除联合鼓膜置管术+药物治疗和药物治疗+单纯腺样体切除术,术后辅以药物治疗,对治疗效果进行随访,现报道如下.
作者:朱永军;邱建新;汪银凤;刘业海;方平 刊期: 2007年第06期