许孝凤;曹云霞;蒋红青
目的探讨p16基因第二外显子纯合性缺失检测对肺癌所致胸腔积液的临床价值.方法用PCR技术检测31例肺癌胸液及21例结核性胸腔积液中p16基因第二外显子纯合性缺失的情况,同时送检胸液脱落细胞学作为对照分析.结果表明所检21例结核性胸液无p16基因第二外显子纯合性缺失,31例肺癌胸液标本中有12例出现第二外显子纯合性缺失,缺失率为38.7%(12/31).同时16例脱落细胞学检测阳性,阳性率为51.62%(16/31).在15例脱落细胞学阴性中,有6例存在p16基因第二外显子纯合性缺失,两者联合检测阳性率提高至70.97%(22/31),明显高于单独检测(P<0.05).另外,p16基因第二外显子纯合性缺失与肿瘤细胞的组织学类型、转移、预后相关.本组研究表明鳞癌出现p16基因第二外显子缺失的机率虽高于腺癌但差异无显著性;而有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P<0.005).同时,在12例p16基因纯合性缺失的患者中有9例已发生一处以上的肺外转移,预后极差.结论检测胸液p16基因第二外显子纯合性缺失对肺癌胸腔积液的诊断有重要价值,且特异性高;与脱落细胞学联合检测,可补充和提高其诊断阳性率,对鉴别癌性和结核性胸腔积液及判断肺癌的预后有一定的参考意义.
作者:桂淑玉;庞玉英;汪渊;周青;刘虎 刊期: 2005年第01期
目的探讨中药川芎嗪对烫伤豚鼠肾脏的保护作用.方法复制30% TBSAⅢ°烫伤豚鼠78只,并随机分成川芎嗪+复苏(治疗组)和复苏(对照组),每组均在烫伤后2、4、8、12、24、48 h 6个时相点,分别采血2~3 ml,用放免法测血浆肾上腺髓质素(ADM)、内皮素(ET)数值;同时在伤后4、12、24、48 h 4个时相点切取肾脏标本,用电镜观察肾脏超微结构改变;另设正常组.结果①血浆ADM:伤后两组各时相点差异均有显著性(P<0.05),8 h达峰值,两组比较对照组低于治疗组,在8、12、48 h各时相点差异有显著性(P<0.05或P<0.01).②血浆ET:两组各时相点均显著升高(P<0.01),治疗组升高明显低于对照组,在8 h内差异有显著性(P<0.05).③肾脏电镜观察:两组伤后4 h即出现明显病理改变,12 h严重,48 h后减轻.治疗组损害明显轻于对照组.结论 ADM与ET含量变化参与了烧伤休克的发病过程,中药川芎嗪可减轻严重烫伤后肾脏的损害,提高ADM与ET的比值,对烫伤动物豚鼠肾脏有保护作用,ADM有协同作用.
作者:郑红;徐庆连;韩之勋;蔡晨;汪思应;陈志武 刊期: 2005年第01期
安徽省爱滋病疫情呈快速上升趋势,截止2004年6月底,全省有16个市54个县(市)共发现HIV/AIDS患者2 256例,其中AIDS患者1 178,死亡398例.专家预计,今后几年将是安徽省HIV感染者发病、死亡的高峰期.虽然目前我国HIV的传播途径以吸毒为主,但异性性行为传播所占比例逐年增加[1],根据国际上HIV传播的规律及目前我国的情况,异性性传播将成为爱滋病的主要传播途径[2].为了解近6年来我院性病门诊初诊者HIV抗体检测情况,为性病患者的艾滋病预防与控制提供信息,我们对1998年7月份~2004年11月期间,我科性病实验室HIV抗体筛查情况进行分析.
作者:张书梅;杨森;杜文辉;梁波 刊期: 2005年第01期
目的克隆并表达小鼠CD4和CD8基因,以期制备其抗体为疫苗研究服务.方法从小鼠脾细胞中提取总RNA,利用RT-PCR技术克隆CD4、CD8α和CD8β膜外区片段的编码cDNA,利用谷光苷肽硫基转移酶(GST)融合表达载体pGEX-CS对其进行表达,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot对重组蛋白进行鉴定.结果以小鼠脾细胞总RNA为模板,分别扩增出小鼠CD4、CD8α和CD8β膜外区片段的编码cDNA,将其插入表达载体pGEX-CS,得到重组质粒pGEX-CSCD4、pGEX-CSCD8α和pGEX-CSCD8β.将所获表达载体转化E.coli BL21,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表明小鼠CD4、CD8α、CD8β片段均得到成功表达,其表达量可占菌体蛋白总量的30%左右,且均可与抗GST抗体反应.结论成功克隆、表达了小鼠CD4、CD8α和CD8β,为进一步制备抗体从而用于免疫学研究打下了基础.
作者:王海萍;赵丽;王健伟;贾友苏;韩金祥;洪涛 刊期: 2005年第01期
目的采用高渗盐-胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质(Acellular dermal matrix,ADM)并进行组织学观察和微生物学检测,探讨这种方法的可行性和机制.方法 SD大鼠4只,分别麻醉后以8%硫化钠溶液脱去躯干部皮毛,常规消毒铺巾,切取大鼠背部全层皮肤制成厚约0.4 mm的中厚皮,1 mol/L NaCl溶液37℃浸泡48 h分离表真皮,以0.25%胰蛋白酶+0.1%乙二酸二乙胺(EDTA)溶液37℃分别热消化60、70、80、90 min脱去细胞成分,并进行冷冻干燥处理.ADM作光镜、电镜观察和微生物学检测并比较分析每只大鼠不同时间消化处理的ADM的差别和不同大鼠经相同处理得到的ADM的差别.结果消化时间不同的ADM均具有柔软、一定的柔韧性和伸展性、弹性好、弯曲不断裂的特点,组织学观察见表皮细胞均完全去除,但是消化90 min,ADM的基底膜(Basement membrane complex,BMC)和胶原纤维的结构与排列有不同程度的破坏;消化60、70 min的ADM虽然基底膜和胶原纤维的结构与排列正常存在,但脱细胞不完全;消化80 min制备的ADM组织学检查基底膜完整连续,胶原纤维、弹力纤维结构及排列完整规则,没有细胞成分存在.不同SD大鼠经同样的处理所得的ADM一般形状和组织学没有明显差别.微生物学检测没有细菌生长.结论采用高渗盐-胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质的方法能达到既完全脱去细胞成分又使基底膜完整连续,胶原纤维和弹力纤维结构及排列正常的双重目标,ADM柔韧性好、不断裂,无细菌生长.
作者:方林森;王春华;胡德林;余又新;刘晟;汪昌荣 刊期: 2005年第01期
内皮素(endothelin,ET)在慢性肝炎的发生、发展过程中,特别是肝硬化门脉高压的形成和维持中起着重要的作用.为此,我们采用放免法检测了78例慢性肝炎、肝硬化患者外周血浆中的ET浓度,并探讨其临床意义.
作者:杨晨;叶君;夏玲玲;许夕海;李旭 刊期: 2005年第01期
目的提供舟月骨间宽度(SLSW)超声测量正常值,评价超声测量正常舟月骨间背侧宽度的准确性;比较超声与X线及MRI测量舟月骨间宽度相关性.方法用超声高频探头探查100例200只正常手腕,与X线及MRI测量30例60只手腕比较.记录超声及X线片上和MRI图像上测量舟月骨间宽度值.结果男性正中位SLSW为5.08 mm±0.47 mm;女性正中位SLSW为4.80 mm±0.46 mm.左右比较:正中位,男性右侧较左侧SLSW平均差值为:+0.026 mm(-1.1~+1.1 mm).女性右侧较左侧SLSW平均差值为:+0.006 mm(-0.6~+1.5 mm).超声与MRI、超声与X线在测量舟月骨间宽度相关性比较,均呈直线相关(P<0.01).结论超声能够准确测量腕舟月骨间宽度,为诊断舟月骨分离等提供了一个简便而可靠的方法.
作者:童清平;韩卉 刊期: 2005年第01期
目的探讨食管鳞状细胞癌Fhit蛋白表达与吸烟的关系.方法采用免疫组化SP法检测83例食管鳞状细胞癌Fhit蛋白表达并分析其与吸烟、组织学分级、临床分期以及淋巴结转移的关系.结果 Fhit蛋白在食管鳞状细胞癌中表达减弱或缺失率为60.2%(50/83),吸烟组中Fhit蛋白表达减弱或缺失率为72.0%(36/50)较非吸烟组(42.4%,14/33)高(P=0.007).Fhit蛋白表达减弱或缺失在高分化鳞状细胞癌、中分化鳞状细胞癌、低分化鳞状细胞癌中分别为60.9%(14/23)、62.8%(27/43)、52.9%(9/17),差异无显著性(P=0.779);在临床分期中的分布Ⅰ期癌33.3%(2/6),Ⅱ期癌57.9%(33/57),Ⅲ期癌75.0%(15/20),差异无显著性(P=0.060),亦与淋巴结转移无关(P=0.258).结论食管鳞状细胞癌Fhit蛋白表达状况与吸烟有关.
作者:江燕;张洪福;曹立宇;李昊 刊期: 2005年第01期
目的探讨房颤患者左房大小(LA)与血管性假血友病因子(vWF)、D-二聚体(D-Dimer)及红细胞压积(Hct)三项血清学指标相关性及其临床意义.方法对我院60例房颤住院患者进行研究.心脏超声心动图测定LA大小,同时检测vWF、D-Dimer及Hct三项血清学指标.结果房颤患者LA≥4.5 cm组较LA<4.5 cm组的vWF、D-Dimer以及Hct指标明显增加(P<0.01),LA大小与vWF、D-Dimer Hct三项血清学指标明显正相关.LA大小与Hct 、vWF的相关性较大(r=0.866,P<0.01;r=0.822,P<0.01),而LA大小与D-Dimer指标相关性较小(r=0.523,P<0.01),两组相比差异均有显著性.结论房颤患者左房越大则血液的凝固性越高,发生血栓的可能性就越大.
作者:宋兵;王邦宁;陈大年;骆志刚 刊期: 2005年第01期
目的探讨纤维支气管镜在治疗支气管内膜结核中的临床应用价值.方法在全身抗结核治疗基础上,经纤维支气管镜将抗结核药物注入支气管内膜结核病灶处.结果在痰菌阴转时间及肺不张疗效方面治疗组均优于对照组.结论经纤维支气管镜引导灌注抗结核药物是治疗支气管内膜结核的有效方法.
作者:李学兵 刊期: 2005年第01期
本实验室用地高辛dUTP随机引物方法标记人内皮细胞特异性分子(human endothelial specific molecular1,hESM1)cDNA探针,并应用于ESM-1基因在肾癌中mRNA转录的检测.现报道如下.
作者:汪渊;张孝林;张素梅;任传利;熊江霞;卜丽佳;周青;桂淑玉 刊期: 2005年第01期
目的探讨老年男性2型糖尿病合并痛风患者胰岛素敏感性指数及血浆ET水平的变化.方法对22例2型糖尿病合并痛风患者、21例无痛风的2型糖尿病患者和16例痛风患者进行空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、餐后2 h血糖、胰岛素、糖化血红蛋白(GHbA1C)、血尿酸(Ua)及空腹血浆ET测定,并计算胰岛素敏感性指数(IAI).结果 2型糖尿病合并痛风患者较无痛风的糖尿病患者具有明显的高胰岛素血症、IAI显著降低(P<0.05),同时血浆ET水平较无痛风的糖尿病患者明显升高(P<0.05).结论 2型糖尿病合并痛风患者具有明显高胰岛素血症和胰岛素抵抗.糖尿病合并痛风患者ET水平升高者较糖尿病无痛风患者更具慢性血管病变的倾向.
作者:李艳;张莉 刊期: 2005年第01期
肝炎后肝硬化门静脉高压症传统的外科治疗方法为脾切除门奇断流术和门腔静脉分流术,前者解决脾功能亢进和上消化道出血,但是术后仍有一定的再出血率.
作者:钱叶本;耿小平 刊期: 2005年第01期
目的评价下肢静脉曲张腔内激光治疗(EVLT)的疗效及并发症.方法对 53例下肢静脉曲张患者计67条肢体施行了EVLT,其中7条肢体因原发性深静脉瓣膜功能不全同时施行了股浅静脉壁环形缩窄术.全部患者手术前后均行光电容积描记(PPG)和彩色多普勒超声检查进行对比.结果经0.5~1年随访,所有患者无疼痛、酸胀感、肢体肿胀、曲张静脉消失,经光电容积描记检查均无返流,彩色多普勒超声检查曲张静脉全部闭塞、无血流信号.其中2例出现术后皮肤轻度灼伤.结论 EVLT治疗下肢静脉曲张具有创伤小、疗效好、恢复快、副作用少、操作简单、无瘢痕等优点.
作者:王华;宋海屏;万圣云;余昌俊 刊期: 2005年第01期
目的研究在不同放射性浓度下,5-125I-2'-脱氧尿嘧啶核苷(125I-UdR)对大鼠C6神经胶质瘤细胞的杀伤效应,并初步探讨其发生机制.方法在大鼠C6神经胶质瘤细胞的培养液中,加入不同放射性浓度125I-UdR培养24 h后,通过细胞形态学变化、细胞存活实验及流式细胞仪检测细胞凋亡率进行观察.结果在加入74 MBq/L放射性浓度的125I-UdR培养24 h后,细胞形态上表现出皱缩、变圆、脱落现象,贴壁细胞数目减少.不同放射性浓度的细胞存活分数(SF)随着浓度升高明显下降,同一浓度下与对照组相比较,存在统计学意义.同时流式细胞仪(FCM)检测随着125I-UdR的升高,细胞凋亡率增加,24 h细胞凋亡率高接近20%.结论 125I-UdR对大鼠C6神经胶质瘤细胞具有明显的杀伤效应,并随着浓度的提高而增强,其发生机制可能是通过诱导细胞凋亡而产生.
作者:金问森;季其仁;姚涌;徐师国;徐生新;肖林林 刊期: 2005年第01期
目的探讨LY333531对大鼠糖尿病模型肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法建立链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,随机分对照组,糖尿病组及LY333531给药组(10 mg/(kg·d),灌胃.8周后观察各组体重、肾重、肾重/体重、24 h尿白蛋白排泄率(AER)及肾组织蛋白激酶C(PKC)活性的变化,行PAS染色肾小球病理形态学观察及CTGF免疫组化.结果 LY333531给药组大鼠体重明显高于模型组(P<0.05),肾重、肾重/体重、AER及肾小球面积(AG) 、肾小球容量(VG) 及系膜区面积(AM) 明显低于糖尿病组(P<0.05,P<0.01);模型组肾组织PKCt活性、PKCc活性、PKCm活性及PKCm/ PKCc明显高于对照组(P<0.05, P<0.01);LY333531给药组PKCt活性、PKCc活性、PKCm活性及PKCm/ PKCc明显低于模型组(P<0.05).模型组肾小球CTGF表达明显高于对照组(P<0.01),LY333531对其有明显抑制作用(P<0.05).结论 LY333531对糖尿病肾脏有明显保护作用,机制可能与抑制肾组织CTGF过度表达有关.
作者:马强;吴永贵;吴国仲;齐向明;林辉 刊期: 2005年第01期
目的观察内镜手术治疗鼻窦炎、鼻息肉的疗效.方法对517例(962侧)慢性鼻窦炎、鼻息肉患者行内镜鼻窦手术,术后随访半年以上.结果治愈343例(66.3%),好转125例(24.2%),无效49例(9.5%),总有效率90.5%.术中、术后并发症主要为眶纸样板损伤及鼻腔粘连.结论鼻内镜手术治疗慢性鼻窦炎鼻息肉有良好的疗效,手术者的良好解剖学基础、术中妥善止血、鼻道窦口复合体的正确处理及术后定期随访是提高疗效、减少并发症的保证.
作者:高潮兵;方平 刊期: 2005年第01期
目的观察卡维地洛(Car)对体外培养的活化的人外周血单个核细胞TNFα mRNA、IL-6 mRNA转录的影响,探讨卡维地洛降低血清TNFα、IL-6的可能机制.方法分离5名健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMC).每名志愿者的PBMC分成对照组,刺激剂组和药物干预组,体外培养后收集细胞,RT-PCR方法检测TNFα mRNA、IL-6 mRNA的转录水平,了解PBMC TNFα mRNA、IL-6-mRNA的转录情况.结果刺激剂组PBMC的TNFα mRNA、IL-6-mRNA转录水平明显高于对照组,Car(10 μmol/L) PBMC的TNF α mRNA、IL-6-mRNA转录水平介于两组之间.结论卡维地洛可以降低体外培养的活化的PBMC TNFα mRNA、IL-6-mRNA转录,这可能是卡维地洛降低血浆TNFα、IL-6的机制之一.
作者:王昌会;徐岩 刊期: 2005年第01期
目的克隆人血管内皮生长因子基因VEGF165片段,构建pcDNA3·1/hVEGF165,观察其在COS-7细胞中的表达,为基因治疗缺血性心脏病奠定基础. 方法从胎儿心肌组织中提取总RNA,应用RT-PCR方法获得hVEGF165基因,将其重组入T载体,PCR法鉴定并测序,双酶切后克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-his-B中,构建pcDNA3.1/hVEGF165重组体.用脂质体介导将其转染COS-7细胞,Western Blotting 方法检测rhVEGF165的表达蛋白. 结果 RT-PCR方法从胎儿心肌组织获得正确的hVEGF165基因序列,成功构建pcDNA3·1/hVEGF165且实现转染COS-7细胞的瞬时表达.结论该实验构建的pcDNA3·1/hVEGF165 转染真核细胞COS-7能够表达rhVEGF蛋白.
作者:周正春;陈兵;张胜权;罗欣;徐从贞;汪思应;葛建军 刊期: 2005年第01期
目的探讨LPS对人脐静脉内皮细胞(ECV304)的生长和内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell-specific molecule-1,ESM-1)表达的影响.方法在体外,用1 ml/L和5 ml/L的LPS在不同时间作用于ECV304,观察细胞形态的变化,用MTT法和免疫细胞化学方法对细胞增殖和ESM-1、ERK、p-ERK在细胞中的表达.结果 LPS作用于ECV304 24 h后,细胞形态发生变化,梭形明显,排列紊乱.短时间内(0.5、1 h)LPS对ECV304有增殖作用.LPS可快速促进ESM-1的表达,在0.5、1 h时表达量较高.LPS作用后,ERK的表达无明显变化,但在一段时间(0.5~4 h)内ERK的磷酸化明显增加.结论 LPS对ECV304中ESM-1的表达有促进作用.推测ESM-1可能作为一种细胞因子与LPS在炎症反应中发挥着作用.
作者:卜丽佳;左莉;任传利;张素梅;周青;桂淑玉;汪渊 刊期: 2005年第01期