学术投稿

TRPV4对高血压小鼠胸主动脉内皮细胞钙离子稳态的调节作用

张卡;毛爱琴;阚昊;张鹏;马鑫

关键词:高血压, 胸主动脉, 内皮细胞, 钙离子
摘要:目的:探讨瞬时受体电位香草素亚型4 (transient receptor potential vanilloid type 4,TRPV4)在高血压小鼠胸主动脉内皮细胞中对于钙离子稳态的调节作用.方法:通过高盐饮食诱导小鼠高血压模型,分别在细胞和组织水平上使用钙离子荧光探针Flou-4/AM标记胸主动脉内皮细胞内钙,测定在TRPV4特异性激动剂GSK1016790A刺激下高盐饮食组和普通饮食组中细胞的钙离子浓度变化.结果:在胸主动脉内皮细胞的细胞和组织水平上通过使用GSK1016790A特异性激活TRPV4通道,普通饮食组和高盐饮食组细胞内钙离子浓度均增高(P<0.05),但和普通饮食组相比较,高盐饮食组在GSK1016790A刺激下钙离子荧光强度增幅低于普通饮食组(P<0.05).结论:TRPV4参与了小鼠胸主动脉内皮细胞钙稳态的调节,通过激活TRPV4,促进内皮细胞外钙离子内流进入胞内,从而维持细胞内钙离子的稳态,而在病理模型,高盐饮食诱导的高血压状态下,TRPV4调节小鼠胸主动脉内皮细胞钙内流的作用受损.
蚌埠医学院学报杂志相关文献
  • Th17/Treg细胞的免疫失衡与病原体的感染

    当前,病原体感染在世界各国仍是严重问题,尤其是在医学不发达的发展中国家.病原体种类繁多,其中寄生虫、细菌、真菌、病毒与人类的健康和安全息息相关.而随着生物、医学等学科的不断发展,人们对病原体感染引起的免疫防御反应及免疫机制有了更深入的认识.T淋巴细胞具有介导细胞免疫和调节免疫应答的作用,主要可分为CD4+、CD8+T细胞两大类.CD4+T细胞又可根据功能不同分成不同亚群,每个亚群具有不同的分化和调节机制,产生不同的细胞因子,发挥不同的功能.研究[1]证明,Th17细胞和Treg细胞在寄生虫、细菌、真菌、病毒感染的免疫应答中至关重要,尤其是Th17/Treg的平衡紊乱与病原体的感染有着密不可分的联系,且在不同环境下可以互相转化.本文就Th17细胞和Treg细胞在病原体感染与免疫中的作用作一综述.

    作者:陈杰;管俊昌 刊期: 2018年第10期

  • 6所高校农村订单定向医学生培养方案的比较

    目的:比较6所高校培养方案的相同点和不同点,为农村订单定向医学生的培养方案改革提供参考依据.方法:选取6所具有代表性的高校作为对象,采用文献分析、电话访谈、现场考察等方法,从培养目标、要求、课程设置等方面对其培养方案进行分析和比较.结果:6所高校在培养目标、培养要求、课程设置、实践教学等方面存在较大差异,部分高校存在着培养目标定位不准确、课程设置不全面、实践教学体系不完善等问题.结论:建议从设置统一的本科教育标准、调整培养目标、修订课程设置、构建实践教学基地联合体等方面进行完善,提高人才培养质量.

    作者:熊春华;姜靓翎;杨秀木 刊期: 2018年第10期

  • 基因测序在肿瘤精准治疗中应用研究进展

    近年来,基因测序技术越来越多地应用在肿瘤的伴随诊断中,通过检测并分析肿瘤标本中特定的基因的点突变、插入、缺失、融合、拷贝数变异等情况,可帮助病人选择获益佳的治疗方案,实现个体化医疗.肿瘤的个性化治疗是精准医疗的重要内容,基因测序则是精准医疗的基础手段.本文对目前基因测序在非小细胞肺癌、消化系统肿瘤、泌尿系统肿瘤,以及泛实体瘤中的治疗指导作用作一综述.

    作者:钱军 刊期: 2018年第10期

  • 醋酸钠林格液联合乌司他丁对失血性休克大鼠肝组织NF-κB p65蛋白表达及其细胞因子的影响

    目的:探讨醋酸钠林格液联合乌司他丁对失血性休克大鼠肝组织NF-κB p65蛋白表达及其细胞因子的影响.方法:将24只SD大鼠随机分为:失血性休克未复苏组(CR组),醋酸钠林格液组(AR组)和醋酸钠林格液联合乌司他丁组(WA组),每组8只.建立失血性休克大鼠模型,利用RT-PCR法检测肝组织中TNF-α mRNA、IL-4 mRNA及IL-10 mRNA相对表达量;利用Western Blot法检测肝组织p65 (Ser536)磷酸化和p65(Lys310)乙酰化蛋白相对表达量;在光镜下进行3组肝组织形态学观察.结果:肝组织病理学结果显示WA组肝组织损伤程度轻于CR组与AR组;在肝组织中,与CR组及AR组比较,WA组TNF-α mRNA表达减少(P<0.01和P<0.05),IL-4 mRNA表达增加(P<0.01和P<0.05),IL-10 mRNA表达增加(P <0.01和P<0.05);与CR组及AR组相比,WA组p65 (Ser536)磷酸化蛋白水平表达降低(P<0.05);与CR组及AR组相比,WA组p65(Lys310)乙酰化蛋白水平表达降低(P<0.05).结论:醋酸钠林格液联合乌司他丁可能通过降低NF-κB p65蛋白活化、降低促炎因子TNF-α水平及提升抗炎因子IL-4和IL-10水平,减轻失血性休克大鼠的肝损伤.

    作者:徐志鹏;陈硬;宋琦;李启梁;朱恒;邱兆磊;纪忠;王振杰 刊期: 2018年第10期

  • 微血管侵犯对肝细胞癌肝移植术后预后的影响

    目的:探讨微血管侵犯(microvascular invasion,MVI)对肝细胞癌(HCC)肝移植术后预后的影响.方法:回顾性分析HCC行原位肝移植手术病人183例的临床和随访资料,其中符合米兰标准76例,USCF标准84例,上海标准102例,杭州标准126例.用Kaplan-Meier法计算4组1年、3年、5年累积生存率,并用Log-Rank检验比较各组生存曲线的差异.将每组分为MVI和无MVI亚组,比较肿瘤复发率、5年无瘤生存率及1年、3年、5年生存率.结果:4组病人的生存时间差异均无统计学意义(P>0.05);随着HCC肝移植标准扩大,MVI率逐渐升高(P<0.05),3年、5年生存率和5年无瘤生存率均逐渐降低(P<0.05).符合上海标准病人中,无MVI亚组肿瘤复发率低于MVI亚组(P<0.05),5年生存率和5年无瘤生存率均高于MVI亚组(P<0.05);符合杭州标准病人中,无MVI亚组肿瘤复发率低于MVI亚组(P<0.05),3年、5年生存率和5年无瘤生存率均高于MVI亚组(P <0.05 ~P<O.01).结论:MVI可预测符合上海标准和杭州标准的HCC肝移植术后复发情况,对肝移植综合治疗具有指导意义.

    作者:刘建勇;杨芳;蔡秋程;翁亮;黄兴华;江艺 刊期: 2018年第10期

  • 农村订单定向医学生职业使命感与学业投入的关系:希望的中介作用

    目的:探讨农村订单定向医学生(定向医学生)职业使命感、希望与学业投入三者之间的关系.方法:采用职业使命感量表、希望量表、学业投入量表,对安徽省3所医学院校的定向医学生493人进行测量.结果:职业使命感、希望与学业投入三者之间呈现正相关关系(P<0.01);职业使命感对学业投入有正向预测作用(P<0.O1);职业使命感对希望有正向预测作用(JP<0.01);引入中介变量希望,职业使命感对学业投入的影响有所降低,但仍然显著(P<0.01),希望在职业使命感和学业投入之间起到部分中介作用.结论:对定向医学生进行职业使命感教育,有助于希望水平的提升,促进学业投入.

    作者:杨秀木;申正付;刘晶晶;刘峰;姚扬;陶仪声 刊期: 2018年第10期

  • 农村订单定向免费医学毕业生履约现状调查分析

    目的:通过调查农村订单定向免费医学毕业生(定向毕业生)的履约现状,了解农村订单定向免费医学生(定向医学生)免费培养政策的实施效果.方法:通过自编问卷对蚌埠医学院2015届、2016届、2017届的定向毕业生进行调查.结果:接受全科医学的系统学习后,75.18%的定向毕业生表示课程设置不够成熟,有待改革.定向毕业生实际履约率为86.13%,政策认同度是影响意愿履约的重要因素.6.57%的人认为政策合理,67.15%认为不太合理,26.28%的认为政策不合理.年级与家庭收入不同学生对政策的认同度差异有统计学意义(P<0.01).政策认同度高的意愿履约率高于认同度低的履约率(P<0.01).而性别、生源地、家庭收入与定向医学生意愿履约差异均无统计学意义(P>0.05).规范化培训结束后,调查者中仅有33.58%愿意履约服务基层.结论:对于定向医学生的培养,高校应完善培养模式,优化课程设置,重视学生思想素质教育;政府应加强政策宣传力度,完善招生、教育、规范化培训、就业等保障、激励政策.

    作者:丁楠楠;刘峰;赵睿;陶仪声 刊期: 2018年第10期

  • TRPV4对高血压小鼠胸主动脉内皮细胞钙离子稳态的调节作用

    目的:探讨瞬时受体电位香草素亚型4 (transient receptor potential vanilloid type 4,TRPV4)在高血压小鼠胸主动脉内皮细胞中对于钙离子稳态的调节作用.方法:通过高盐饮食诱导小鼠高血压模型,分别在细胞和组织水平上使用钙离子荧光探针Flou-4/AM标记胸主动脉内皮细胞内钙,测定在TRPV4特异性激动剂GSK1016790A刺激下高盐饮食组和普通饮食组中细胞的钙离子浓度变化.结果:在胸主动脉内皮细胞的细胞和组织水平上通过使用GSK1016790A特异性激活TRPV4通道,普通饮食组和高盐饮食组细胞内钙离子浓度均增高(P<0.05),但和普通饮食组相比较,高盐饮食组在GSK1016790A刺激下钙离子荧光强度增幅低于普通饮食组(P<0.05).结论:TRPV4参与了小鼠胸主动脉内皮细胞钙稳态的调节,通过激活TRPV4,促进内皮细胞外钙离子内流进入胞内,从而维持细胞内钙离子的稳态,而在病理模型,高盐饮食诱导的高血压状态下,TRPV4调节小鼠胸主动脉内皮细胞钙内流的作用受损.

    作者:张卡;毛爱琴;阚昊;张鹏;马鑫 刊期: 2018年第10期

  • 心肌肥大相关蛋白YAP在大鼠糖尿病心肌病中的表达

    目的:观察Hippo信号通路效应蛋白YAP在糖尿病大鼠心肌肥大中的改变,分析可能的作用机制.方法:健康雄性SD大鼠随机分为2组,每组6只.正常对照组:大鼠正常饮水饮食喂养12周;糖尿病心肌病组:大鼠腹腔注射STZ(55 mg/kg)复制糖尿病模型,以血糖≥16.7 mmol/L,持续1周确定造模成功,继续饲养12周.测定大鼠空腹血糖水平和体质量;心室内插管检测左心室动力学变化,称量心脏质量计算心体比;荧光定量PCR检测心肌肥大相关基因心房钠尿肽和脑利钠肽mRNA表达,Western blot法检测YAP和p-YAP蛋白表达改变.结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠心体比增加,左心室舒张末压增高,左心室发展压、左心室内压大上升和下降速率及左心室做功均降低;心肌肥大相关基因心房钠尿肽和脑利钠肽mRNA表达增加;YAP蛋白表达增加,p-YAP/YAP比值降低(P<0.05~P <0.01).结论:糖尿病可诱导心肌肥大,其机制可能与增加Hippo信号通路效应蛋白YAP的表达,降低其磷酸化水平有关.

    作者:叶红伟;张蔚屏;胡俊锋;于影;方婷婷;杨丽娟;高琴 刊期: 2018年第10期

  • 结直肠癌诊治新进展

    结直肠癌(colorectal cancer,CRC)又称为大肠癌,是世界范围内常见的恶性肿瘤之一.近年来,随着工业化进程的加快、生活环境的改变、膳食结构的变化、人口老龄化加剧,我国CRC的发病率和死亡率逐年增高,并且大部分病人发现时已属于中晚期,因此现阶段CRC已经成为影响国民健康的主要恶性肿瘤之一.随着基础研究的深入探讨、临床科研的广泛开展、诊断技术的不断突破、手术技术的不断提高,以及化疗、靶向、免疫治疗的日益进步,CRC的诊治逐渐开始向规范化、个体化和精准化发展.

    作者:黄陈;戎泽印 刊期: 2018年第10期

  • 中老年人群代谢综合征与脑白质病变发生的相关性

    目的:探讨中老年人群代谢综合征(Metabolic syndrome,MetS)与脑白质病变(white matter lesions,WML)发生的相关性.方法:临床纳入50岁以上MetS病人852例,经MRI影像检查诊断为WML.将病人按照WML部位分为脑室旁白质病变(PVWML)组和深部白质病变(DWML)组,并按照WML程度分为轻、中、重度.结果:MetS与非MetS病人相比,PVWML和DWML病变程度差异均有有统计学意义(P<0.01).调整了年龄和性别后,logistic回归分析显示,MetS与PVWML和DWML的发生风险均有关,而MetS组分个数越多,PVWML和DWML的患病风险也越高(P<0.01).结论:MetS可以增加WML的发生风险.

    作者:郭均涛;陈乐;尹泽钢;周华东 刊期: 2018年第10期

  • 系统性红斑狼疮病人外周血浆细胞样树突状细胞中Toll样受体7的表达及其意义

    目的:检测系统性红斑狼疮(SLE)病人外周血中浆细胞样树突状细胞(pDC)中Toll样受体7(TLR7)的表达,探讨其意义.方法:选取SLE病人52例(SLE组)和正常健康人28名(对照组),利用流式细胞术检测外周血TLR7+的pDC细胞在各组中的比例.结果:SLE病人外周血单核细胞(PBMC)中pDC相对计数显著低于对照组(P<0.01),SLE组和正常对照组髓样树突状细胞水平差异无统计学意义(P>0.05).感染组SLE病人外周血pDC水平显著低于非感染组(P<0.01),初发组SLE病人外周血髓样树突状细胞水平低于复发组(P<0.05),pDC水平与外周血CRP呈负相关关系(P<0.05).SLE病人外周血PBMC内pDC中TLR7+细胞的比例显著高于对照组(P<0.01).血液系统受累组pDC内TLR7+细胞比例高于无血液系统受累组(P<0.05).TLR7+ pDC细胞比例在抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性组及阴性组之间差异均无统计学意义(P> 0.05);TLR7+pDC细胞比例和蛋白尿分级呈显著正相关关系(P<0.01).结论:SLE病人外周血TLR7+的pDC细胞比例显著升高,且与临床病情活动性有一定的相关性.

    作者:刘梦洁;王涛;李柏青;谢长好;唐洁;汪洪涛;李志军 刊期: 2018年第10期

  • 肿瘤坏死因子-α作用下椎间盘退变动物模型的建立

    目的:制作家兔椎间盘退变(IVDD)的动物模型,研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对髓核组织的影响.方法:取健康成年家兔30只,手术暴露L2~L6,L3/4L4/5作为实验组,每个椎间盘髓核注射20 ng/μL TNF-α 15 μL;L5/6作为对照组,每个椎间盘髓核注射15μL磷酸缓冲盐溶液;L2/3作为空白组,不做处理.于术后4周、8周、12周行腰椎X线及磁共振(MRI)检查,每次随机检查10只家兔,检查完后处死并取其髓核组织经行免疫组织化学及原位末端标记检查.结果:术后4~12周,X线见实验组椎间隙高度进行性下降,MRI可见实验组椎间隙T2加权像信号逐渐降低;免疫组织化学及TUNEL显示实验组髓核组织内Ⅰ型胶原及细胞凋亡率随之时间推移逐渐增加,Ⅱ型胶原逐渐减少.对照组和空白组差异无统计学意义(P>0.05).结论:实验成功建立了TNF-α作用下的IVDD动物模型.TNF-α介导的椎间盘术后椎间隙高度丢失,同时TNF-α可诱导椎间盘髓核细胞退变及凋亡.微量注射器的穿刺作用对髓核细胞的退变及凋亡无明显影响.

    作者:张长春;邵晨;许刚;朱坤;叶雨辰;程飞 刊期: 2018年第10期

  • 机器人肝切除治疗肝细胞癌的体会:同济经验

    肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是一种极常见的消化道肿瘤[1],全球发病率第五,但肿瘤致死率排名第二.而这其中,每年超过半数的新发HCC病例发生在中国大陆,而且大多数病人合并慢性乙型肝炎病毒感染[2].统计资料显示[3],2015年全国HCC发病人数46.6万例,因HCC死亡病例数高达42.2万例,HCC综合治疗的5年生存率仅为10.2%.尽管这些年HCC的临床治疗已经取得了巨大的进步,但肝癌的防治形势依然不容乐观.

    作者:朱鹏;张必翔;陈孝平 刊期: 2018年第10期

  • 糖化血红蛋白与冠心病病人心肌外脂肪厚度的相关性研究

    目的:探讨糖化血红蛋白水平与冠心病病人心肌外脂肪厚度(epicardial adipose tissue thickness,EATT)的关系.方法:选择入院诊断为冠心病的住院病人共510例,均行冠脉造影检查,并根据造影结果将入选者分为冠心病组和对照组.对所有入选者进行心脏多层螺旋CT扫描,根据CT图像分别测定前降支、回旋支和右冠脉区域的EATT,并计算三者的厚度之和(Total EATT),同时测定血清糖化血红蛋白等指标.结果:冠心病组平均糖化血红蛋白为(6.2±1.2) mmol/L,高于对照组的(5.8 ±0.8) mmol/L(P<0.01),冠心病组Total EATT(26.33 ±7.8)mm,高于对照组的(22.72 ±6.3) mm(P<0.01).在冠心病病人中,糖化血红蛋白水平与Total EATT呈正相关关系(r=0.207,P<0.01);多元回归分析表明,糖化血红蛋白与TotalEATT呈独立正相关关系(P<0.01).结论:冠心病病人中,EATT增加可能与糖化血红蛋白水平增高有关.

    作者:范益博;幺天保;袁安彩;邵琴;卜军 刊期: 2018年第10期

  • 乳腺癌紫杉醇耐药细胞中lncRNA和mRNA表达谱筛选

    目的:分析紫杉醇诱导的乳腺癌MCF-7耐药细胞(MCF-7/PR)中长链非编码RNA(lncRNA)和信使RNA(mRNA)表达谱的变化,研究筛选出调控乳腺癌紫杉醇耐药的关键lncRNAs,为逆转紫杉醇耐药的分子靶点提供理论依据.方法:利用ArraystarlncRNA芯片技术检测MCF-7/PR细胞中lncRNAs和mRNAs的表达谱;使用Agilent GeneSpring GX v12.1软件筛选差异表达的lncRNAs和mRNAs,对差异mRNAs进行GO和KEGG通路分析,得到mRNA参与的生物学途径;并同时进行lncRNAs与相应mRNAs联合分析推断lncRNAs功能.结果:通过MCF-7/PR细胞和MCF-7亲本细胞相比,共有1 504个lncRNAs和2264个mRNAs存在差异性表达(差异倍数>2.0);通过GO聚类分析表明:上调的mRNAs和下调的mRNAs分别参与多种不同的生物过程;差异性lncRNAs可能通过影响相应mRNAs发挥其生物学功能.结论:乳腺癌紫杉醇耐药细胞中lncRNAs和mRNAs的表达存在差异,差异表达的基因可以为寻找新的化疗敏感靶点或生物标志物提供线索.

    作者:陈天天;王文锐;陈素莲;陈昌杰;杨清玲 刊期: 2018年第10期

  • miRNA-21-5p通过pdcd4靶向调控胃癌细胞对顺铂敏感性的机制研究

    目的:探究微小RNA-21-5p(miRNA-21-5p)通过下调pdcd4基因表达调控胃癌耐药细胞系SGC-7901/DDP对顺铂敏感性机制的研究.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的顺铂(0、1、2、4、8、16、32μmol/L)对胃癌细胞系SGC7901及胃癌耐药细胞系SGC7901/DDP增殖抑制的影响.通过实时荧光定量PCR检测SGC7901/DDP细胞中瞬时转染miRNA-21-5p inhibitors后miRNA-21-5p相对表达量的变化.采用Western blot及实时荧光定量PCR检测转染组、无关序列转染组(NC组)及空白转染组(CON组)分别转染miRNA-21-5p inhibitors及无关序列后对靶基因pdcd4蛋白及mRNA表达量的影响.结果:MTT实验结果显示耐药细胞SGC7901/DDP相对于亲本细胞SGC7901对顺铂不敏感(P<0.05).实时荧光定量PCR结果表明,转染组miRNA-21-5p表达量均明显低于NC组和CON组(P<0.01),转染组pdcd4 mRNA表达量均明显高于NC组和CON组(P<0.01).Western blot检测结果示,转染组pdcd4蛋白表达量均明显高于NC组和CON组(P<0.01).结论:miRNA-21-5p表达水平的升高在一定程度上有利于胃癌细胞增殖,并通过下调pdcd4的表达,降低胃癌细胞对顺铂的敏感性.

    作者:王子安;章海斌;姚露岩;刘玉;陈莹 刊期: 2018年第10期

  • 果糖高脂饮食诱导建立代谢综合征大鼠模型

    目的:建立糖、脂代谢异常的代谢综合征大鼠模型,为进一步研究代谢综合征的发病机制及制订膳食治疗措施提供基础.方法:SD雄性大鼠30只,体质量(210±10)g,随机分为观察组和对照组.观察组采用15%果糖水配合高脂饮食,对照组采用普通饲料,喂养10周,期间检测体质量、体长、腰围、空腹血糖及血清三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)及胰岛素水平.结果:试验8、10周,观察组大鼠体质量、Lee's指数和空腹血糖、TG均明显高于对照组(P<0.01),HDL-C均明显低于对照组(P<0.01);试验4、8、10周,观察组大鼠腰围均大于对照组(P <0.05~P<0.01),空腹胰岛素和稳态模型胰岛素抵抗指数亦均高于对照组(P <0.05~P<0.01).观察组大鼠中12只达到中心性肥胖标准,11只达到高TG标准,11只达到低HDL-C标准,12只大鼠出现高血糖.综合以上指标,4只大鼠分别有两项或三项指标未达到标准,成模率为73.3% (11/15).结论:15%果糖水配合高脂饮食可在较短时间内诱导构建代谢综合征大鼠模型.

    作者:谢丽丽;崔慧娴;陈苏;赵文红 刊期: 2018年第10期

  • 衰老的基础研究现状与干预策略

    我国已进入老龄化社会,老年伴随着疾病增加严重威胁人们的健康,但是目前对于衰老的认识还处于初步阶段.衰老过程中,机体系统层面的紊乱与细胞和分子层面的失真互为因果,使得衰老的机制具有明显的复杂性.本文从系统、细胞和分子三个角度阐述衰老的基础研究的现状,进一步阐述衰老导致疾病过程中的内在联系以及提出潜在干预策略.因此,倡导通过健康的生活方式来控制衰老相关疾病的发生发展,探索从“分病而治”向“异病同防/治”的战略转变.

    作者:陈厚早;刘德培 刊期: 2018年第10期

  • KISS1基因激活ERK1/2磷酸化通路抑制鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力的研究

    目的:探讨KISS1及其受体基因KISS1-R在ERK1/2磷酸化通路中调节鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力的分子机制.方法:采用实时荧光定量PCR以及蛋白免疫印迹技术,检测KISS1、KISS1-R基因、黏着斑激酶(FAK)的表达;验证ERK1/2信号通路的磷酸化激活,EZR蛋白的表达与鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力的关系.构建过表达KISS1及KISS1-R基因载体,通过划痕实验及Transwell实验分析过表达KISS1(SUNE-KISS1)及KISS1-R(SUNE-1R)基因对SUNE-1-5-8F鼻咽癌细胞系的迁移能力的影响.通过蛋白免疫印迹技术,检测在过表达KISS1及KISS1-R基因后,磷酸化FAK(p-FAK)和磷酸化ERK(p-ERK)以及EZR蛋白的表达水平.通过阻断ERK1/2通路的磷酸化激活,验证KISS1及KISS1-R基因对鼻咽癌细胞迁移能力的影响,以及对细胞转移相关蛋白p-FAK、EZR表达量的影响.后,通过siRNA抑制KISS1基因表达,进一步验证KISS1基因对鼻咽癌细胞迁移和侵袭的调控作用.结果:实时荧光定量PCR实验发现,KISS1基因在SUNE-1-6-10B细胞中表达量相对于SUNE-1-5-8F细胞中较高.蛋白免疫印迹分析发现,KISS1及KISS1-R的蛋白表达量,以及p-FAK的表达量与鼻咽癌细胞转移能力呈负相关;EZR与鼻咽癌细胞转移能力呈正相关关系.划痕及Transwell实验分析发现,过表达KISS1及KISS1-R基因均能够有效抑制SUNE-1-5-8F细胞的迁移和侵袭能力.蛋白免疫印迹分析发现,过表达KISS1及KISS1-R基因能增加p-FAK及p-ERK1/2的蛋白表达量,抑制EZR蛋白的表达.加入ERK1/2通路特异性的阻断剂PD98059后,由过表达KISS1及KISS1-R基因引起的细胞迁移和侵袭的抑制状态被阻断.同时,由过表达KISS1及KISS1-R引起的p-FAK与p-ERK1/2的上调,EZR的下调均被恢复.通过siRNA的干扰,抑制了KISS1基因表达,从而引起SUNE-1-5-8F细胞的迁移和侵袭能力的增加.结论:过表达KISS1基因可以显著抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力;同时,通过siRNA干扰KISS1基因的表达,能够增加鼻咽癌细胞的迁移能力.KISS1及KISS1-R基因通过磷酸化激活ERK1/2通路,进一步激活p-FAK并抑制EZR表达,从而抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力.

    作者:李婷婷;江浩 刊期: 2018年第10期

蚌埠医学院学报杂志

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主办:蚌埠医学院