学术投稿

人AURKA基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其对A549细胞增殖的影响

张林;朱勇;仲宁;吴广洲;沈振亚;施舜缤

关键词:病毒, AURKA基因, 慢病毒载体, RNA干扰, A549细胞, 长春新碱
摘要:目的::针对AURKA基因构建RNA干扰重组慢病毒质粒并进行慢病毒包装,初步探讨AURKA基因的功能。方法:应用pGCLV-GFP慢病毒载体构建针对AURKA的shRNA载体,转染包装293T细胞,收集病毒上清液,转染肺腺癌细胞株A549。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况确定转染效率,应用Western blot技术检测AURKA基因在蛋白水平表达的变化,以明确RNAi的抑制率。应用BrdU法分析干扰AURKA前后A549细胞增殖情况的变化,运用克隆形成实验检测干扰AURKA后A549细胞株对长春新碱敏感性的变化。结果:针对AURKA基因的RNAi慢病毒表达载体构建成功,PCR和DNA测序鉴定实验表明插入位点与干扰片断的碱基序列完全正确。在293T细胞中进行慢病毒包装,获得高滴度病毒上清液。通过重组慢病毒载体将 AURKA shRNA 转导入 A549细胞中,转染效率为100%。 Western blot 检测证实 LV-AURKA 慢病毒显著抑制AURKA的表达,BrdU检测显示AURKA基因表达下调抑制了A549细胞的增殖。克隆形成实验表明AURKA基因表达增强A549细胞对长春新碱的敏感性。结论:慢病毒载体介导的靶向AURKA的RNA干扰可有效抑制AURKA表达,降低肺腺癌A549细胞的增殖能力,并且增强A549细胞对长春新碱的敏感性。
蚌埠医学院学报杂志相关文献
  • 同时性多原发胆囊癌伴胃癌1例及相关文献复习

    多原发癌又称重复癌( multple primary carcinoma,MPC),是指同一机体先后发生2种或2种以上的独立原发性恶性肿瘤,临床少见,而胆囊和胃同时发生极少见。近年来随着相关诊疗技术的提高,第一肿瘤早期癌诊断率已明显提高,同时MPC的早期诊断、早期治疗也成为临床面临的重要挑战。本文报道原发性胆囊癌伴原发性胃癌1例。

    作者:周硕;鲁正;吴华;谷从友;崔培元;马翔 刊期: 2016年第11期

  • 利拉鲁肽对肥胖及正常体质量2型糖尿病患者的降糖效果比较

    目的::探讨利拉鲁肽对肥胖及正常体质量2型糖尿病患者的降糖效果。方法:选取2型糖尿病患者90例,根据体质量指数分为肥胖组39例和正常体质量组(正常组)51例。均使用利拉鲁肽治疗,3个月后比较2组体质量变化及血糖控制效果。结果:2组患者注射利拉鲁肽3个月后,体质量、体质量指数、空腹血糖、餐后2h血糖、C肽和糖化血红蛋白均较治疗前明显改善(P<0.01);且肥胖组患者各项指标改善情况均明显优于正常组(P<0.01)。结论:利拉鲁肽治疗肥胖2型糖尿病患者时疗效更加显著,可有效控制血糖,并减轻体质量,值得临床推广使用。

    作者:王晶;刘哲 刊期: 2016年第11期

  • 电磁导航支气管镜的临床应用进展

    电磁导航支气管镜( electromagnetic navigation bronchoscopy,ENB)是一种以电磁定位技术为基础,结合计算机虚拟支气管镜与高分辨 CT 特点,经支气管镜诊断的新技术。 ENB对肺外周病变的诊断价值已被许多研究证实[1-3]。本文就ENB在临床中的应用进展作一综述。

    作者:张婷(综述);李伟;刘超(审校) 刊期: 2016年第11期

  • 肿瘤科80后孕期护士工作压力体验的质性研究

    目的::探讨肿瘤科80后孕期护士对工作压力的体验和需求,为维护肿瘤科孕期护士身心健康提供参考。方法:采用质性研究中的现象学研究方法,以目的抽样法抽取安徽省某三级甲等医院10名80后肿瘤科孕期护士进行半结构式访谈,并运用Colaizzi分析法进行分析。结果:肿瘤科80后孕期护士工作压力真实体验共提炼4个主题:担心流产及早产、工作压力大、工作环境差、人际关系。结论:肿瘤科80后孕期护士存在较大压力,护理管理者应重视此类护士的真实感受,采取积极有效的措施减轻其身心压力,帮助其适应孕期工作。

    作者:葛婧 刊期: 2016年第11期

  • 永久性心脏起搏器植入280例远期并发症分析

    目的::探讨永久性心脏起搏器植入术后远期并发症类型及处理方法。方法:植入永久起搏器患者280例,术后随访≥2年,统计植入术2年后远期并发症发生情况。结果:280例患者发生远期并发症共17例,总发生率6.07%。其中≥60岁组13例,发生率6.34%;<60岁组4例,发生率5.33%,2组差异无统计学意义(P>0.05)。患者并发症中包括相关静脉血栓6例(2.14%)、起搏导线血栓形成4例(1.43%)、电极脱位3例(1.07%)、囊袋破溃感染2例(0.71%)、起搏综合征及起搏阈值明显升高致起搏不良各1例(0.36%)。结论:血栓、电极脱位和囊袋破溃感染在≥60岁患者中的发生率有升高趋势。应重视起搏器植入术前准备,术中强调规范的无菌操作,术后加强随访,早期发现并发症并积极处理。

    作者:虞春宜 刊期: 2016年第11期

  • 开启后胰岛素注射液污染程度的实验研究

    目的::探讨开启后胰岛素注射液保存期与开瓶时间及抽吸药物频次的关系,确定临床使用开启后胰岛素的安全使用时间。方法:在临床使用胰岛素的条件下,按胰岛素注射液穿刺抽吸频次分5组,第一组2次/天,第二组5次/天,第三组10次/天,第四组20次/天,第五组30次/天,然后采样0.1 mL进行细菌培养,培养连续3 d阳性停止采样。结果:胰岛素注射液在开启后30 d内,抽吸药物次数95次内均无细菌污染。结论:胰岛素注射液在开启后30 d内可安全使用。

    作者:徐贵霞;段缓;陈桂华;高霜 刊期: 2016年第11期

  • 医用水凝胶眼疗贴在全麻俯卧位眼部保护中的应用

    目的::探讨医用水凝胶眼疗贴在全麻俯卧位眼部保护中的临床应用效果。方法:选取需要采用俯卧位并接受全麻手术的患者200例,随机分为对照组和观察组,各100例。对照组采用涂抹红霉素或金霉素软膏,并用3M静脉贴敷贴;观察组采用医用水凝胶眼疗贴敷贴于患者眼部。手术结束后24 h和72 h观察2组患者眼睛不良反应发生情况。结果:观察组患者眼睛不适或异物感、疼痛畏光、结膜红肿、角膜溃疡等并发症发生率以及患者Ⅱ级以上眼睛不适、并发症发生率均低于对照组(P<0.05~P<0.01),且观察组患者眼部不适或并发症消失时间显著短于对照组(P<0.01)。结论:医用水凝胶眼疗贴在全麻俯卧位手术中可较好地保护眼部,具有较好的临床应用价值。

    作者:吴文利 刊期: 2016年第11期

  • 老年人长期照护人力资源的研究进展

    随着人口老龄化社会的到来,疾病谱的改变,老年人慢性病、心血管疾病的发病率越来越高。与此同时,由于计划生育的实施,生活方式、价值观念的转变,家庭结构日趋小型化、核心化[1],导致家庭人力资源不断减少,传统的家庭养老方式受到严重的冲击。老年人希望得到多种形式的照顾支持,因此对长期照护服务需求不断的增长[2]。然而,我国对老年人长期照护的发展尚处于初步阶段,长期照护人力资源相对不足。本文就老年人长期照护人力资源的研究进展作一综述。

    作者:侯培娇;谢晖;陈佩雯 刊期: 2016年第11期

  • 复发性脑实质内出血危险因素研究

    目的::研究复发性脑实质内出血的危险因素。方法:将脑出血患者260例的年龄、性别、高血压、高脂血症、糖尿病及影像学等纳入研究范围,并记录患者第一次脑出血发生年龄及时间、间隔发生的时间、出血量、部位、发病因素和入院时GCS评分。结果:260例中有62例(23.8%)发生再出血,主要为基底核出血(62.9%),时间间隔为3 d至118个月。舒张压>95 mmHg者脑出血复发率为44%,舒张压在临界值以下者为20%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:舒张压控制越好,脑出血复发的危险性越低。

    作者:刘志刚;孙宜芬;孟红旗 刊期: 2016年第11期

  • 肝脏孤立性纤维性肿瘤1例并文献复习

    孤立性纤维性肿瘤( solitary fibrous tumor,SFT)是一种少见的梭形细胞软组织肿瘤,由KLEMPERER等[1]在1931年首次报道。曾被认为起源于间皮细胞,而命名为纤维性间皮瘤、局限性间皮瘤、间皮下纤维瘤等。随病理及免疫组织化学(免疫组化)的发展,人们发现该肿瘤细胞没有间皮细胞的特征,如不表达间皮细胞标记,而显示出间叶细胞的特征[2]。目前认为SFT可能起源于CD34阳性的树突状间叶细胞,且向纤维母细胞、肌纤维母细胞、血管外皮细胞及血管内皮细胞分化[3]。2002年版WHO 软组织肿瘤分类将 SFT 归入纤维母细胞性/肌纤维母细胞性肿瘤类,属于中间性(偶见转移型)。 SFT发病率低,发病部位广泛,人们对该肿瘤的认识也较为局限。本文报道肝脏SFT 1例,并复习相关文献,以进一步提高对该肿瘤的认识。

    作者:李小祺;崔培元 刊期: 2016年第11期

  • 青春期至成年早期铅、镉联合暴露对雄性小鼠肝脏与肾脏功能的影响

    目的::观察青春期至成年早期小鼠经饮水暴露铅和镉对肝脏和肾脏功能的影响。方法:健康4周龄雄性ICR小鼠60只,随机分为对照组、铅组、镉组、铅+镉组,各15只。4组小鼠分别经口饮用纯净水、醋酸铅水溶液、氯化镉水溶液和醋酸铅+氯化镉混合水溶液,暴露40 d后摘眼球取血,处死小鼠后取肝脏和肾脏,称脏器质量,计算脏器系数,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)与碱性磷酸酶(ALP)活力以及血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)含量,用HE染色观察肝脏和肾脏组织形态学改变。结果:对照组、镉组和铅+镉组小鼠的每日饮水量均少于铅组(P<0.05~P<0.01),铅组和镉组小鼠每日进食量均少于对照组和铅+镉组(P<0.05~P<0.01),而4组小鼠4~10周龄体质量差异均无统计学意义(P>0.05)。连续暴露40 d后,均未引起铅、镉组和铅+镉组小鼠体质量、肝脏质量、肝脏系数、血清ALT和ALP活力以及肝脏组织形态学改变。镉+铅组小鼠肾脏质量低于单纯镉组(P<0.05),但铅组、镉组和铅+镉组小鼠肾脏质量、肾脏组织形态学、血清Cr和BUN含量与对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:青春期和成年早期经饮水暴露一定剂量铅与镉均未引起雄性小鼠肝脏和肾脏功能损害。

    作者:胡仁宜;张莉;杨露露;胡永方;王碧伟;王颖;张桂彬;徐德祥;王华 刊期: 2016年第11期

  • 六安市部分留守村民前糖尿病现状及影响因素分析

    目的::了解六安市留守村民患前糖尿病情况,为预防和控制糖尿病提供措施。方法:采用整群抽样法,随机抽取六安市18个行政村的40~70岁留守村民开展问卷调查,并对3546名村民进行血糖、身高及体质量进行测量。结果:前糖尿病患病率为25.61%,其中男性为25.14%,女性为25.86%;糖尿病相关知识知晓率低;经多因素logistic回归分析,1962年之后出生是保护因素,体质量指数大是危险因素(P<0.05~P<0.01)。结论:加强留守村民的健康教育,制定合理预防措施,减少或减缓前糖尿病患者向糖尿病转变。

    作者:张俊青;曹洪娟;李开春;王德斌 刊期: 2016年第11期

  • 小儿呼吸机相关性肺炎合并急性心力衰竭临床分析

    目的::分析小儿机械通气治疗后感染呼吸机相关性肺炎( VAP)的相关危险因素,为临床上VAP伴心力衰竭的预防提供理论依据。方法:选取行机械通气治疗并发生VAP的患儿共98例,分为并发心力衰竭组( A组)40例和未并发心力衰竭组(B组)58例。详细记录2组机械通气时长、呼吸机通气模式、体温、呼吸、血压、脉搏、血常规、肝肾功能、细菌培养、胸部X线片检查、血气分析及心电图,分析感染相关危险因素;采集呼吸道吸出标本检测比较2组病原菌种类及比例;将患儿好转出院和病死作为终点事件,记录好转出院和病死患儿的人数。结果:A组患儿机械通气时长、昏迷、误吸、休克和急性肾衰竭均是发病的可能危险因素(P<0.05~P<0.01);A组患儿常见的病原菌为铜绿假单胞菌等革兰阴性杆菌(40.00%),B组常见的为肺炎克雷伯杆菌(43.00%)等,2组患儿病原菌种类及构成差异无统计学意义(P>0.05);A组患儿病死率为45.00%,高于B组的20.69%(P<0.05)。结论:婴幼儿VAP并发急性心力衰竭,应努力减少机械通气时长,避免昏迷、休克,加强护理;避免窒息,强心、利尿、镇静综合治疗,使用血管活性药物避免发生急性肾衰竭,针对性地运用抗生素,早发现,早诊断,早治疗,才能有效地提高好转出院率,降低病死率。

    作者:朱俊岭;李卫华 刊期: 2016年第11期

  • 微量元素硒对弥漫性毒性甲状腺肿治疗效果的影响

    目的::观察在抗甲状腺药物治疗的同时补充硒酵母胶囊,对弥漫性毒性甲状腺肿( GD)患者甲状腺功能恢复正常所需时间及缓解率的影响。方法:选取初发GD患者64例,随机分为:赛治加硒组,每天服用硒酵母胶囊200μg加甲巯咪唑;赛治组,仅服用甲巯咪唑。治疗前后检测患者游离三碘甲状腺原氨酸( FT3)、游离甲状腺素( FT4)、促甲状腺素、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、谷胱苷肽过氧化物酶-1(GPx-1)活力水平。结果:治疗12个月后赛治加硒组的FT3、FT4、TPOAb及TRAb水平均较治疗前明显下降,促甲状腺素水平和GPx-1酶活力水平均明显升高(P<0.01),且TPOAb、GPx-1酶活力水平与赛治组差异均有统计学意义(P <0.01)。赛治加硒组抗甲药物治疗12个月后的缓解率为90.63%,优于赛治组的68.75%(P<0.01)。结论:硒制剂能降低TPOAb、TRAb的水平,增加GPx-1酶活力水平,缓解自身免疫及抗氧化损伤,从而提高GD患者抗甲药物治疗的缓解率。

    作者:李丽;王鹏远;池莲祥;薛冀苏;郑信华;钟丽娣 刊期: 2016年第11期

  • 生物敷料A联合二期自体中厚皮移植治疗下肢慢性溃疡

    目的::观察生物敷料A联合二期自体中厚皮移植治疗下肢慢性溃疡的临床疗效。方法:将下肢慢性溃疡一期清创后创面不适宜植皮的40例患者随机分为观察组和对照组,各20例。对照组给予凡士林纱布覆盖创面并定期更换,观察组予以生物敷料A覆盖创面,2组均待肉芽生长满意后二期行自体皮移植修复。结果:观察组创面愈合时间明显短于对照组( P<0.01),观察组植皮成活率高于对照组(P<0.05)。结论:生物敷料A联合二期自体皮移植治疗下肢慢性溃疡可以缩短愈合时间,提高治愈率,同时减轻患者痛苦,具有操作简单、风险相对较小的特点,值得临床推广。

    作者:李攀登;张远贵;李之华;段冬;高新宇;吴炜 刊期: 2016年第11期

  • 本科与专科护生评判性思维能力现状及影响因素分析

    目的::调查本科和专科护生评判性思维能力现状,并分析其影响因素。方法:整群抽取本科和专科护生共500名进行问卷调查。调查工具包括一般情况调查表和中文版评判性思维能力测量表。采用非条件 logistic 回归模型分析护生评判性思维能力的影响因素。结果:本科护生评判性思维能力总分为(254.33±9.11)分,专科护生评判性思维能力总分为(227.53±8.88)分,本科护生评判性思维能力的7个维度评分及总分均明显高于专科护生(P<0.01)。护生评判性思维能力的主要影响因素为性格类型、是否参加学校社团活动和教师是否运用仿真模拟教学(P<0.05~P<0.01)。结论:本科和专科护生具备正性评判性思维能力,但总体处于中等偏下水平。

    作者:薛芳;赵静;宋松 刊期: 2016年第11期

  • BCRP在浸润性乳腺癌中的表达及其与上皮间质转化相关蛋白的相关性

    目的::探讨乳腺癌耐药蛋白( BCRP)在浸润性乳腺癌组织中的表达情况及其与上皮间质转化相关蛋白的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测80例浸润性乳腺癌组织、40例癌旁组织、40例乳腺纤维腺瘤组织中BCRP蛋白的表达情况,分析其与临床病理参数的关系,进一步研究BCRP蛋白与上皮性钙黏蛋白、神经性钙黏蛋白的相关性。结果:BCRP蛋白在浸润性乳腺癌中的阳性表达率为57.5%。 BCRP蛋白阳性表达率在组织学分级、淋巴结转移和TNM分期间差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。 BCRP与HER-2、神经性钙黏蛋白表达均呈正相关关系(P<0.01),与上皮性钙黏蛋白呈负相关关系(P<0.01)。结论:在浸润性乳腺癌中,BCRP蛋白可能与乳腺癌的发生、发展密切有关,同时与上皮间质转化存在一定的相关性。

    作者:曾会会;郑荣生 刊期: 2016年第11期

  • 全身化疗联合肝动脉栓塞灌注化疗治疗乳腺癌肝转移的效果

    目的::探讨全身化疗联合肝动脉栓塞灌注化疗( TACE)在乳腺癌肝转移中的临床疗效。方法:对68例乳腺癌肝转移患者分别采用全身化疗(化疗组)32例、TACE(栓塞组)13例及两者联合治疗(联合组)23例,比较3组的疗效、不良反应及患者生存时间。结果:全组总有效率为41.18%,化疗组的有效率为43.75%,栓塞组为7.69%,联合组为56.52%;联合组的疗效优于栓塞组(P<0.01),但与化疗组差异无统计学意义(P>0.05)。全组中位随访时间为18个月。全组总中位生存时间为16个月,其中化疗组与联合组的中位生存时间均为19个月,而栓塞组为13个月,3组生存时间差异有统计学意义( P <0.05)。不良反应主要为胃肠道反应、骨髓抑制、脱发及肝功能损害。结论:全身化疗联合TACE在乳腺癌肝转移中疗效较好,且不良反应较轻,值得临床进一步推广。

    作者:解华;刘宏杰;李凌云;张华满 刊期: 2016年第11期

  • 二甲双胍缓释片治疗抗精神病药物所致代谢紊乱的临床效果

    目的::研究二甲双胍缓释片对抗精神病药所致代谢紊乱的疗效和安全性。方法:76例应用抗精神病药物所致代谢紊乱的精神分裂症患者随机分为2组,观察组给予二甲双胍缓释片,对照组给予安慰剂,连续观察6个月。于治疗1、3、6个月末监测体质量指数( BMI)、空腹血糖及总胆固醇( TC)、三酰甘油( TG)、低密度脂蛋白( LDL)、高密度脂蛋白( HDL)。阳性和阴性症状量表监测病情变化,副反应量表评定不良反应。结果:观察组患者治疗3和6个月末BMI及治疗1、3和6个月末TC、TG与LDL均明显低于治疗前(P<0.01),而对照组治疗6个月末TC和LDL均较治疗前、治疗1和3个月末升高(P<0.05~P<0.01)。2组空腹血糖和HDL治疗前后不同时间差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗6个月末BMI、TC、TG、LDL及HDL差异均有统计学意义(P<0.01);2组治疗前和治疗6个月末阴性症状量表评分差异均无统计学意义(P>0.05)。2组不良反应均轻微。结论:二甲双胍缓释片治疗抗精神病药引起的代谢紊乱安全有效,且不影响患者的精神症状。

    作者:刘亚丽;陈运昭 刊期: 2016年第11期

  • 过氧化氢对人脐静脉内皮细胞白细胞介素-37表达的影响

    目的::研究过氧化氢人脐静脉内皮细胞( H2 O2)对白细胞介素( IL)-37表达的影响。方法:用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测经系列浓度H2 O2作用不同时间的人脐静脉内皮细胞中IL-37 mRNA和蛋白水平的变化。结果:实时荧光定量PCR结果显示:不同浓度H2O2作用人脐静脉内皮细胞后,IL-37 mRNA水平升高,并呈浓度依赖(P<0.01)。 Western blot结果表明,H2O2作用人脐静脉内皮细胞20 h后,IL-37蛋白水平较对照组显著升高(P<0.01)。结论:H2O2能够上调人脐静脉血管内皮细胞IL-37的表达,为进一步研究IL-37在细胞氧化应激状态下的作用奠定了一定基础。

    作者:刘倩;周庆 刊期: 2016年第11期

蚌埠医学院学报杂志

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主管:安徽省教育厅

主办:蚌埠医学院