学术投稿

人AURKA基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其对A549细胞增殖的影响

张林;朱勇;仲宁;吴广洲;沈振亚;施舜缤

关键词:病毒, AURKA基因, 慢病毒载体, RNA干扰, A549细胞, 长春新碱
摘要:目的::针对AURKA基因构建RNA干扰重组慢病毒质粒并进行慢病毒包装,初步探讨AURKA基因的功能。方法:应用pGCLV-GFP慢病毒载体构建针对AURKA的shRNA载体,转染包装293T细胞,收集病毒上清液,转染肺腺癌细胞株A549。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况确定转染效率,应用Western blot技术检测AURKA基因在蛋白水平表达的变化,以明确RNAi的抑制率。应用BrdU法分析干扰AURKA前后A549细胞增殖情况的变化,运用克隆形成实验检测干扰AURKA后A549细胞株对长春新碱敏感性的变化。结果:针对AURKA基因的RNAi慢病毒表达载体构建成功,PCR和DNA测序鉴定实验表明插入位点与干扰片断的碱基序列完全正确。在293T细胞中进行慢病毒包装,获得高滴度病毒上清液。通过重组慢病毒载体将 AURKA shRNA 转导入 A549细胞中,转染效率为100%。 Western blot 检测证实 LV-AURKA 慢病毒显著抑制AURKA的表达,BrdU检测显示AURKA基因表达下调抑制了A549细胞的增殖。克隆形成实验表明AURKA基因表达增强A549细胞对长春新碱的敏感性。结论:慢病毒载体介导的靶向AURKA的RNA干扰可有效抑制AURKA表达,降低肺腺癌A549细胞的增殖能力,并且增强A549细胞对长春新碱的敏感性。
蚌埠医学院学报杂志相关文献
  • 生物敷料A联合二期自体中厚皮移植治疗下肢慢性溃疡

    目的::观察生物敷料A联合二期自体中厚皮移植治疗下肢慢性溃疡的临床疗效。方法:将下肢慢性溃疡一期清创后创面不适宜植皮的40例患者随机分为观察组和对照组,各20例。对照组给予凡士林纱布覆盖创面并定期更换,观察组予以生物敷料A覆盖创面,2组均待肉芽生长满意后二期行自体皮移植修复。结果:观察组创面愈合时间明显短于对照组( P<0.01),观察组植皮成活率高于对照组(P<0.05)。结论:生物敷料A联合二期自体皮移植治疗下肢慢性溃疡可以缩短愈合时间,提高治愈率,同时减轻患者痛苦,具有操作简单、风险相对较小的特点,值得临床推广。

    作者:李攀登;张远贵;李之华;段冬;高新宇;吴炜 刊期: 2016年第11期

  • 本科与专科护生评判性思维能力现状及影响因素分析

    目的::调查本科和专科护生评判性思维能力现状,并分析其影响因素。方法:整群抽取本科和专科护生共500名进行问卷调查。调查工具包括一般情况调查表和中文版评判性思维能力测量表。采用非条件 logistic 回归模型分析护生评判性思维能力的影响因素。结果:本科护生评判性思维能力总分为(254.33±9.11)分,专科护生评判性思维能力总分为(227.53±8.88)分,本科护生评判性思维能力的7个维度评分及总分均明显高于专科护生(P<0.01)。护生评判性思维能力的主要影响因素为性格类型、是否参加学校社团活动和教师是否运用仿真模拟教学(P<0.05~P<0.01)。结论:本科和专科护生具备正性评判性思维能力,但总体处于中等偏下水平。

    作者:薛芳;赵静;宋松 刊期: 2016年第11期

  • 老年人长期照护人力资源的研究进展

    随着人口老龄化社会的到来,疾病谱的改变,老年人慢性病、心血管疾病的发病率越来越高。与此同时,由于计划生育的实施,生活方式、价值观念的转变,家庭结构日趋小型化、核心化[1],导致家庭人力资源不断减少,传统的家庭养老方式受到严重的冲击。老年人希望得到多种形式的照顾支持,因此对长期照护服务需求不断的增长[2]。然而,我国对老年人长期照护的发展尚处于初步阶段,长期照护人力资源相对不足。本文就老年人长期照护人力资源的研究进展作一综述。

    作者:侯培娇;谢晖;陈佩雯 刊期: 2016年第11期

  • 全身化疗联合肝动脉栓塞灌注化疗治疗乳腺癌肝转移的效果

    目的::探讨全身化疗联合肝动脉栓塞灌注化疗( TACE)在乳腺癌肝转移中的临床疗效。方法:对68例乳腺癌肝转移患者分别采用全身化疗(化疗组)32例、TACE(栓塞组)13例及两者联合治疗(联合组)23例,比较3组的疗效、不良反应及患者生存时间。结果:全组总有效率为41.18%,化疗组的有效率为43.75%,栓塞组为7.69%,联合组为56.52%;联合组的疗效优于栓塞组(P<0.01),但与化疗组差异无统计学意义(P>0.05)。全组中位随访时间为18个月。全组总中位生存时间为16个月,其中化疗组与联合组的中位生存时间均为19个月,而栓塞组为13个月,3组生存时间差异有统计学意义( P <0.05)。不良反应主要为胃肠道反应、骨髓抑制、脱发及肝功能损害。结论:全身化疗联合TACE在乳腺癌肝转移中疗效较好,且不良反应较轻,值得临床进一步推广。

    作者:解华;刘宏杰;李凌云;张华满 刊期: 2016年第11期

  • 人性化护理对男性精神病患者社会功能的影响

    目的::探讨人性化护理对男性精神病患者社会功能的影响。方法:男性精神病患者129例,其中64例进行常规护理(对照组),65例实施人性化护理干预(观察组)。采用住院精神患者社会功能评定量表( SSPI )和自知力与治疗态度问卷( ITAQ)对2组患者干预前后的社会功能进行评价和比较。结果:干预前2组患者SSPI和ITAQ评分差异均无统计学意义( P>0.05)。干预后2组患者SSPI和ITAQ评分均较干预前明显升高(P<0.01),且观察组患者SSPI总分及各因子评分与ITAQ总分均明显高于对照组(P<0.01)。结论:人性化护理有利于改善男性精神病患者社会功能,值得临床推广。

    作者:吴秀梅;余腊英;鲍丽萍;张必兰;李业平 刊期: 2016年第11期

  • 上颌窦底水囊冲压内提升同期种植修复单牙缺失36例临床观察

    目的::评价水囊冲压技术在上颌窦内提升同期种植修复单牙缺失的临床应用疗效。方法:选择满足适应证的36例上颌后牙单牙缺失患者,其缺牙区牙槽嵴高度在3.0~7.0 mm,采用微创不翻瓣结合水囊冲压技术,共植入种植牙36颗。术后定期复诊、随访,观察种植牙稳定性和牙周组织状况。结果:随访1年未发现种植牙松动或上颌窦炎症,牙周组织健康,种植牙骨结合良好,上颌窦提升骨高度稳定。结论:水囊冲压技术在上颌窦内提升同期种植牙中的应用短期临床效果较为理想。

    作者:宁晔;康林;陆钰;胡芳芳;吴海珍 刊期: 2016年第11期

  • 晚期非小细胞肺癌胸腔积液表皮生长因子受体突变检测对厄洛替尼疗效的预测价值

    目的::探讨非小细胞肺癌( NSCLC)患者胸腔积液(胸液)表皮生长因子受体( EGFR)突变对厄洛替尼疗效的预测价值。方法:应用实时荧光定量PCR-HRM法检测275例NSCLC患者胸液标本EGFR突变,其中有组织标本的52例同时进行HRM法和直接测序法检测,比较胸液与组织EGFR突变状态的一致性和可重复性。胸液EGFR敏感突变患者随机给予厄洛替尼治疗或吉西他滨加顺铂( GP)方案化疗。比较2组客观缓解率( ORR)和中位无进展生存期( mPFS)。结果:275例NSCLC患者胸液EGFR敏感突变率为55.3%。52例配对组织、胸液标本中,EGFR敏感突变检出率为61.5%,高于直接测序法的40.3%(P<0.01);胸液标本中,EGFR敏感突变检出率为55.8%,高于直接测序法的36.5%(P<0.01)。胸液和组织检测EGFR敏感突变的吻合率为82.6%;厄洛替尼组mPFS 11.5个月(95%CI 10.4~12.6),显著高于GP组的4.4个月(95%CI 3.9~4.8)(P<0.01)。厄洛替尼组ORR明显高于GP组(70.0% vs 29.4%,P<0.01)。结论:晚期NSCLC胸液标本可弥补或替代组织标本进行EGFR敏感突变检测,HRM法敏感性优于直接测序法。 EGFR敏感突变NSCLC患者应用厄洛替尼可提高客观缓解率,延长mPFS。

    作者:刘海涛;陈余清;李殿明;李伟;王效静;吴穷;孙耕耘;闵生萍 刊期: 2016年第11期

  • 氧化苦参碱对大肠埃希菌的体外药敏试验

    目的::观察氧化苦参碱对大肠埃希菌标准株的体外药敏情况。方法:采用二倍稀释法,用0.9%氯化钠注射液将苦参碱胶囊分别稀释为8000、4000、2000、1000、500、250、125、62.5 mg/L的药液,按药液:MH琼脂=1:9的比例分别配制含药培养基,每个浓度各3个,并设空白和0.9%氯化钠注射液组为对照。大肠埃希菌复苏后,配制菌液备用,接种环取菌液一环接种于各培养基内,置36℃的培养箱内,培养24 h,观察结果。结果:各个含药培养基大肠埃希菌生长良好,与对照组相比无明显差异。结论:氧化苦参碱对大肠埃希菌的生长无影响。

    作者:田昌荣;董燕;杨林;乔莉 刊期: 2016年第11期

  • 电磁导航支气管镜的临床应用进展

    电磁导航支气管镜( electromagnetic navigation bronchoscopy,ENB)是一种以电磁定位技术为基础,结合计算机虚拟支气管镜与高分辨 CT 特点,经支气管镜诊断的新技术。 ENB对肺外周病变的诊断价值已被许多研究证实[1-3]。本文就ENB在临床中的应用进展作一综述。

    作者:张婷(综述);李伟;刘超(审校) 刊期: 2016年第11期

  • 曲美他嗪治疗脓毒症心肌损伤的临床研究

    目的::探讨曲美他嗪对脓毒症患者心肌损伤的保护作用。方法:将脓毒症伴有心肌损伤的32例患者按照随机数字表法分为观察组和对照组,各16例;对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗基础上加用曲美他嗪,每次20 mg,口服或鼻饲,每天3次,连用7d。观察2组治疗前及治疗第8天的心肌坏死指标、脑钠肽和病情严重程度的变化;并计算治疗前及治疗第8天的急性生理和慢性健康状况Ⅱ( APACHEⅡ)评分。结果:观察组治疗第8天心肌肌钙蛋白I、脑钠肽水平及APACHEⅡ评分与对照组差异均有统计学意义(P<0.01),但肌酸激酶同工酶与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:曲美他嗪能够改善脓毒症患者的心肌损伤,且对患者心功能及病情的改善有益。

    作者:梁鹏;周新华;陈开祥;刘步祥;孙成爱;张黎黎 刊期: 2016年第11期

  • 肝脏孤立性纤维性肿瘤1例并文献复习

    孤立性纤维性肿瘤( solitary fibrous tumor,SFT)是一种少见的梭形细胞软组织肿瘤,由KLEMPERER等[1]在1931年首次报道。曾被认为起源于间皮细胞,而命名为纤维性间皮瘤、局限性间皮瘤、间皮下纤维瘤等。随病理及免疫组织化学(免疫组化)的发展,人们发现该肿瘤细胞没有间皮细胞的特征,如不表达间皮细胞标记,而显示出间叶细胞的特征[2]。目前认为SFT可能起源于CD34阳性的树突状间叶细胞,且向纤维母细胞、肌纤维母细胞、血管外皮细胞及血管内皮细胞分化[3]。2002年版WHO 软组织肿瘤分类将 SFT 归入纤维母细胞性/肌纤维母细胞性肿瘤类,属于中间性(偶见转移型)。 SFT发病率低,发病部位广泛,人们对该肿瘤的认识也较为局限。本文报道肝脏SFT 1例,并复习相关文献,以进一步提高对该肿瘤的认识。

    作者:李小祺;崔培元 刊期: 2016年第11期

  • 二甲双胍缓释片治疗抗精神病药物所致代谢紊乱的临床效果

    目的::研究二甲双胍缓释片对抗精神病药所致代谢紊乱的疗效和安全性。方法:76例应用抗精神病药物所致代谢紊乱的精神分裂症患者随机分为2组,观察组给予二甲双胍缓释片,对照组给予安慰剂,连续观察6个月。于治疗1、3、6个月末监测体质量指数( BMI)、空腹血糖及总胆固醇( TC)、三酰甘油( TG)、低密度脂蛋白( LDL)、高密度脂蛋白( HDL)。阳性和阴性症状量表监测病情变化,副反应量表评定不良反应。结果:观察组患者治疗3和6个月末BMI及治疗1、3和6个月末TC、TG与LDL均明显低于治疗前(P<0.01),而对照组治疗6个月末TC和LDL均较治疗前、治疗1和3个月末升高(P<0.05~P<0.01)。2组空腹血糖和HDL治疗前后不同时间差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗6个月末BMI、TC、TG、LDL及HDL差异均有统计学意义(P<0.01);2组治疗前和治疗6个月末阴性症状量表评分差异均无统计学意义(P>0.05)。2组不良反应均轻微。结论:二甲双胍缓释片治疗抗精神病药引起的代谢紊乱安全有效,且不影响患者的精神症状。

    作者:刘亚丽;陈运昭 刊期: 2016年第11期

  • 补骨脂-肉豆蔻不同溶剂提取物对肠易激综合征内脏高敏感大鼠的治疗作用

    目的::比较补骨脂-肉豆蔻不同溶剂提取物对肠易激综合征( IBS)内脏高敏感大鼠的治疗作用。方法:新生SD大鼠48只,随机分为6组,各8只。除正常组外,其余各组采用母子分离结合乙酸灌肠法复制内脏高敏感大鼠模型,于造模第6周起,给药组分别给予补骨脂-肉豆蔻醇水双提物、醇提物、水提物和匹维溴铵灌胃,1次/天,连续2周。观察各组大鼠结肠组织病理学变化及大鼠内脏高敏感性相关指标,并采用免疫荧光检测大鼠结肠促肾上腺皮质激素释放因子( CRF)和CRF1型受体蛋白表达。结果:补骨脂-肉豆蔻醇水双提物、醇提物、水提物均能够升高内脏高敏感性大鼠腹部回缩反射阈值( P<0.05~P<0.01),降低结肠CRF、CRF1型受体表达。结论:补骨脂-肉豆蔻不同溶剂提取物对内脏高敏感性大鼠均有一定的治疗作用,以补骨脂-肉豆蔻醇提物疗效佳。

    作者:汪庆飞;王婷;高家荣;姜辉;秦秀娟;宋俊梅;徐双枝 刊期: 2016年第11期

  • 路径式护理在神经内镜下单鼻孔经蝶窦入路垂体腺瘤切除术中应用

    目的::探讨路径式护理对神经内镜下经单鼻孔蝶窦入路垂体瘤切除术患者的影响。方法:将神经内镜下经单鼻孔垂体腺瘤切除术治疗的垂体瘤患者80例,按照非同期队列研究方法分为2组,对2012年1月至2013年6月收治的40例患者采用常规护理模式(对照组),对2013年7月至2014年12月收治的40例患者采用路径式护理模式(观察组),比较2组并发症、住院时间和患者满意度。结果:2组患者术后并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者住院时间明显少于对照组(P<0.01);观察组患者满意度为97.5%,对照组为85.0%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:神经内镜辅助下经单鼻孔蝶窦入路手术治疗垂体瘤的护理至关重要,采用路径式护理,可缩短住院时间。

    作者:孙静 刊期: 2016年第11期

  • 股骨近端防旋髓内钉治疗SeinsheimerⅤ型股骨转子下骨折的体会

    目的::探讨股骨近端防旋髓内钉( proximal femoral nail anti-rotation,PFNA)治疗Seinsheimer Ⅴ型股骨转子下骨折的临床疗效。方法:回顾性分析Seinsheimer Ⅴ型股骨转子下骨折患者89例的临床资料,根据术中使用内固定的情况分为2组,观察组48例应用PFNA治疗,对照组41例应用Gamma钉治疗。比较2组患者的手术时间、术中出血量、围手术期出血量、术后下床活动时间、术后髋关节功能评分( Harris评分)及术后并发症发生的情况。结果:随访10~18个月,患者骨折均临床愈合。术前2组患者髋关节Harris评分差异无统计学意义(P>0.05),术后观察组髋关节Harris评分增值明显高于对照组(P<0.01)。观察组手术时间、术中出血量、围手术期出血量、术后下床活动时间均明显少于对照组(P<0.01)。2组患者术后4种并发症的发生率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:PFNA适用于不稳定的Seinsheimer Ⅴ型转子下骨折,是目前较为理想的内固定材料,值得在临床治疗中应用。

    作者:张杰;石兴雷;阮传江;韩玉虎;徐磊;范虎 刊期: 2016年第11期

  • 肿瘤科80后孕期护士工作压力体验的质性研究

    目的::探讨肿瘤科80后孕期护士对工作压力的体验和需求,为维护肿瘤科孕期护士身心健康提供参考。方法:采用质性研究中的现象学研究方法,以目的抽样法抽取安徽省某三级甲等医院10名80后肿瘤科孕期护士进行半结构式访谈,并运用Colaizzi分析法进行分析。结果:肿瘤科80后孕期护士工作压力真实体验共提炼4个主题:担心流产及早产、工作压力大、工作环境差、人际关系。结论:肿瘤科80后孕期护士存在较大压力,护理管理者应重视此类护士的真实感受,采取积极有效的措施减轻其身心压力,帮助其适应孕期工作。

    作者:葛婧 刊期: 2016年第11期

  • 微量元素硒对弥漫性毒性甲状腺肿治疗效果的影响

    目的::观察在抗甲状腺药物治疗的同时补充硒酵母胶囊,对弥漫性毒性甲状腺肿( GD)患者甲状腺功能恢复正常所需时间及缓解率的影响。方法:选取初发GD患者64例,随机分为:赛治加硒组,每天服用硒酵母胶囊200μg加甲巯咪唑;赛治组,仅服用甲巯咪唑。治疗前后检测患者游离三碘甲状腺原氨酸( FT3)、游离甲状腺素( FT4)、促甲状腺素、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、谷胱苷肽过氧化物酶-1(GPx-1)活力水平。结果:治疗12个月后赛治加硒组的FT3、FT4、TPOAb及TRAb水平均较治疗前明显下降,促甲状腺素水平和GPx-1酶活力水平均明显升高(P<0.01),且TPOAb、GPx-1酶活力水平与赛治组差异均有统计学意义(P <0.01)。赛治加硒组抗甲药物治疗12个月后的缓解率为90.63%,优于赛治组的68.75%(P<0.01)。结论:硒制剂能降低TPOAb、TRAb的水平,增加GPx-1酶活力水平,缓解自身免疫及抗氧化损伤,从而提高GD患者抗甲药物治疗的缓解率。

    作者:李丽;王鹏远;池莲祥;薛冀苏;郑信华;钟丽娣 刊期: 2016年第11期

  • 预注帕瑞昔布钠防治小儿七氟烷麻醉苏醒期躁动的临床研究

    目的::观察预注帕瑞昔布钠对小儿七氟烷麻醉苏醒期躁动的影响。方法:选择120例行择期腭裂修补术患儿,七氟烷维持麻醉,采用随机数字表法将患儿分成4组,各30例,分别为:低剂量帕瑞昔布钠组( L组)、中剂量帕瑞昔布钠组( M组)、高剂量帕瑞昔布钠组(H组)和对照组(C组)。 L、M、H和C组分别于麻醉诱导前静脉注射帕瑞昔布钠0.5 mg/kg、帕瑞昔布钠0.75 mg/kg、帕瑞昔布钠1 mg/kg(剂量≤40 mg)及等容量0.9%氯化钠注射液。面罩吸氧(6 L/min)+8%七氟烷诱导,静脉注射咪达唑仑0.05 mg/kg,维库溴铵0.1 mg/kg,芬太尼3μg/kg行气管插管;2%~3%七氟烷维持麻醉直至手术结束,术毕立即停止吸入。记录术中情况、苏醒期躁动情况以及疼痛和镇静程度,并记录术后24 h不良反应。结果:4组患儿麻醉、手术、拔管和麻醉后监测治疗室停留时间差异均无统计学意义(P>0.05);4组患儿苏醒期躁动发生情况比较,M组和H组患儿躁动发生率均低于C组(P<0.05),而L、M、H组小儿麻醉后躁动量表(PAED)评分均明显低于C组(P<0.01);M组和H组PAED评分均低于L组(P<0.05);与M组比较,H组躁动发生率及PAED评分差异均无统计学意义(P>0.05)。4组患儿疼痛评分(FLACC)及Ramsay评分比较,与C组比较,L、M和H组患儿术后各时点FLACC评分均明显降低(P<0.01),而3组患儿术后Ramsay评分均升高(P<0.05~P<0.01);与L组比较,M组和H组T0和T1时点FLACC评分均降低(P<0.05~P<0.01),M组和H组T1和H组T2时点Ramsay评分升高(P<0.05~P<0.01);与M组比较,H组各时点FLACC评分及T0与T1时点Ramsay评分差异均无统计学意义(P>0.05),而H组T2时点Ramsay评分明显高于M组(P<0.01);4组患儿头疼、头晕、呼吸抑制等不良反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论:预注帕瑞昔布钠可安全有效地预防患儿七氟烷麻醉苏醒期躁动的发生,并且无明显不良反应,而预注帕瑞昔布钠0.75 mg/kg是临床预防小儿苏醒期躁动较理想的选择。

    作者:陶静;陈菲菲;周家龙;王宏;梁启胜 刊期: 2016年第11期

  • 膝髋骨关节炎患者术后疼痛程度与疼痛自我管理行为的相关性研究

    目的::研究膝髋骨关节炎患者术后疼痛程度与疼痛自我管理行为及两者之间的相关性。方法:对127例膝髋骨关节炎手术患者于入院时进行基本资料评估;术后24 h、48 h、72 h使用疼痛评估调查表评估患者接受调查时的疼痛强度和过去24 h痛、轻及平均疼痛程度;术后3d使用患者术后疼痛自我管理行为问卷进行调查,并对疼痛程度和疼痛自我管理行为进行相关分析。结果:患者术后接受调查时、痛、轻以及平均疼痛程度达到中度以上分别占29.13%、100.00%、3.94%和59.84%。患者术后疼痛自我管理行为总分为(18.99±3.67)分。男性、城镇居民、文化程度高和有手术史的患者术后疼痛自我管理行为评分均高于女性、农村居民、文化程度低和无手术史患者(P<0.05~P<0.01)。患者术后疼痛程度与疼痛自我管理行为评分呈负相关关系(P<0.01)。结论:膝髋骨关节炎患者术后疼痛控制不佳,疼痛自我管理能力较差。在临床疼痛管理中,应重视患者自身的作用,不断提升患者的疼痛自我管理能力,以达到有效镇痛,提高患者生活质量。

    作者:徐培培;雷婷婷;孙婷;朱宁宁 刊期: 2016年第11期

  • 复发性脑实质内出血危险因素研究

    目的::研究复发性脑实质内出血的危险因素。方法:将脑出血患者260例的年龄、性别、高血压、高脂血症、糖尿病及影像学等纳入研究范围,并记录患者第一次脑出血发生年龄及时间、间隔发生的时间、出血量、部位、发病因素和入院时GCS评分。结果:260例中有62例(23.8%)发生再出血,主要为基底核出血(62.9%),时间间隔为3 d至118个月。舒张压>95 mmHg者脑出血复发率为44%,舒张压在临界值以下者为20%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:舒张压控制越好,脑出血复发的危险性越低。

    作者:刘志刚;孙宜芬;孟红旗 刊期: 2016年第11期

蚌埠医学院学报杂志

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主管:安徽省教育厅

主办:蚌埠医学院