王尊文；祁自柏；谷金莲；于洋；杨振；张华远；李河民
目的采用含梅毒螺旋体(Tp)不同优势表位抗原连接嵌合表达,筛选用于ELISA试剂检测梅毒抗体的多表位抗原.方法筛选Tp优势抗原表位,进行不同的连接嵌合表达,用于ELISA试剂检测30份国家参考品血清.结果不同抗原组合连接(Tp15-47、Tp42-15-47、Tp17-42-15-47)对血清的反应性不同.结论含有多个抗原表位的嵌合抗原,能提高检测灵敏度.
作者：陈坤；张贺秋；宋晓国；王国华；朱翠侠；刘荷中；邱艳；凌世淦 刊期： 2003年第02期
目的比较进口与国产流感疫苗接种后反应及效果.方法在接种进口苗和国产苗的人群中,分别选出2 200人进行反应观察,选出9491人进行预防效果观察,选出160人进行抗体水平监测.结果2种疫苗接种后的反应率差异无显著意义,且均未见严重的异常反应,接种后的抗体水平、抗体阳转率、抗体保护率及预防效果差异均无显著意义,均有良好的免疫原性.结论国产疫苗价格低廉,更易于大规模推广应用.
作者：唐伟；李峰光；王锋；高洪彩；刘传红 刊期： 2003年第02期
目的采用甲型副伤寒杆菌鞭毛抗原单克隆抗体,建立检测甲型副伤寒杆菌鞭毛抗原ELISA双抗体夹心法.方法采用纯化的甲型副伤寒杆菌鞭毛抗原,制备3株鞭毛抗原单克隆抗体细胞(2C8、2E6和5D7).应用免疫印迹试验、交叉反应试验及表位分析进行特异性鉴定.结果3株单抗细胞与甲型副伤寒杆菌鞭毛抗原及甲型副伤寒杆菌发生免疫反应,与伤寒、乙、丙型副伤寒杆菌及部分沙门氏菌、大肠杆菌无交叉反应.选用其中2株单抗细胞建立了ELISA双抗体夹心法.检测163份献血员和65份发热待查患者血清标本均为阴性,15份血培养阳性的甲型副伤寒患者血清标本有14份为阳性.结论可直接用单克隆抗体进行检测,具有简便、快速等特点.
作者：彭志刚；田素娟；朱国珍；杨艳艳；王伟；谢媛媛 刊期： 2003年第02期
目的构建表达有特异细胞毒性融合蛋白的工程质粒.方法利用PCR扩增出PE35KDEL基因片段,经酶切后插入EGF-PET28A载体,并转化至BL21(DE3)中.采用Western blot对重组毒素进行鉴定.结果EGF-PE35KDEL重组毒素占菌体总蛋白的20%,分子量约为41 000.结论EGF-PE35KDEL的成功构建和表达为开发靶向抗癌药物奠定了基础.
作者：李树民；李丽萍；岳玉环；李铁征；邱业峰；朱平 刊期： 2003年第02期
目的观察风疹BRDⅡ-30、31和32代次毒种的免疫原性和反应原性.方法选择风疹血清HI抗体阴性儿童277名和女青年141名,各随机分3组,分别接种由30、31和32代毒种制备的风疹疫苗,观察接种反应及血清学效果.结果儿童组的血清中HI抗体阳转率分别为97.8%、98.9%和98.9%;GMT分别为278.7、237.1和292.9,女青年组HI抗体阳转率分别为94.8%、97.5%和100.0%;GMT分别为101.5、132.9和96.6.3批疫苗间免后HI抗体阳转率和GMT差异无显著意义.结论风疹毒种从30～32代间的生物学特性是稳定的,均可用于疫苗的生产.
作者：陈海平；宋立志；杜桂芝；董春明；王长银；王文庆；郭绍红；迮文远 刊期： 2003年第02期
WHO细胞基质安全性问题工作组于2002年6月6-7日在日内瓦WHO总部召开,参加会议的有来自美国FDA的CBER、英国NIBSC、比利时公共卫生研究所、意大利卫生研究所、瑞士生物制品研究所、德国PEI、韩国KFDA、中国药品生物制品检定所等药品管理部门和俄国脊灰和病毒性脑炎研究所、瑞士苏黎士大学等以及巴斯德、史克、默克、BioPhar-ma、Q-One Bioteck公司、Berna Boitech公司、Chrion公司等,参加会议的还有来自IABS、欧洲药典会等部门的代表共30多人.
作者：雷殿良 刊期： 2003年第02期
目的为改进HCV试剂的质量克隆1b型丙型肝炎病毒(HCV)全长NS3基因并在原核细胞中表达.方法用RT-PCR方法从中国人血清中扩增全长NS3片段,进行序列分析,并克隆到pET30a(+)原核表达载体中,构建的原核表达载体pET-NS3-1 800在大肠杆菌BI21(DE3)中表达,用Western blot方法进行验证.结果扩增到1b型HCV全长NS3片段,经Western blot实验表明该片段具有抗原活性.结论构建的质粒可在大肠杆菌中表达完整的NS3蛋白.
作者：王尊文；祁自柏；谷金莲；于洋；杨振；张华远；李河民 刊期： 2003年第02期
一、引言在基因工程药物的研制中,为了生产出高纯度、高活性的蛋白药物,研究经费的30%需花费在分离纯化工艺的研究上;在商业生产中,分离纯化阶段的平均生产费用占产品总生产成本的60%～70%,即使这样仍然很多生物技术药物找不到经济可行的纯化工艺[1].
作者：李世崇；陈昭烈 刊期： 2003年第02期
目的建立静注丙球(IVIG)激活补体活性的测定方法,并对国内不同工艺生产的IVIG制品Fc段的生物学功能进行分析.方法采用补体经典激活途径激活补体的方法.结果应用该方法检测不同工艺生产的制品活性均有差别.该方法操作简便,重复性好.结论将检测Fc段的生物学活性列为IVIG常规检测质控指标是可行的.
作者：王箐舟；程雅琴 刊期： 2003年第02期
目的合成有生物活性的胸腺五肽并研究其免疫增强作用.方法用Fmoc固相肽合成法合成胸腺五肽,用E玫瑰花实验检测生物活性.合成的胸腺五肽经小鼠腹腔注射后进行淋巴细胞转化实验、溶血空斑实验及IL-2活性实验,研究其免疫增强作用.结果合成2批胸腺五肽,精肽产量分别为27mg和34mg,具有生物活性,实验组动物脾淋巴细胞的转化率、空斑形成细胞及IL-2活性皆明显高于空白对照组.结论用Fmoc固相肽合成法可以成功地合成有生物活性的胸腺五肽,且具有免疫增强作用.
作者：张春莉；刘照惠；王妍；石玉华；霍洪霞；李惟 刊期： 2003年第02期
目的了解丙型肝炎病毒(HCV)抗体酶联免疫诊断试剂反应时间与灵敏度及特异性的关系.方法用丙型肝炎病毒抗体酶联免疫诊断试剂对阴、阳性血清进行检测,在加入样品后的不同反应时间分别进行显色终止,波长492nm下测A值.结果加入样品后的反应时间影响丙型肝炎病毒抗体酶联免疫诊断试剂灵敏度,对特异性没有影响.加入样品后的20～30min,反应时间对灵敏度影响变化大.结论延长反应时间,可提高阳性样品特别是弱阳性样品的检出率,对阴性样品无明显影响.
作者：于洋；周诚；祁自柏；张华远；李河民 刊期： 2003年第02期
目的观察重组人粒细胞集落刺激因子预防恶性肿瘤患者化疗期感染的效果.方法分析67例(112例次)小细胞肺癌、非小细胞肺癌和肠癌患者化疗期辅用或不辅用重组人粒细胞集落刺激因子的感染情况.结果2组患者化疗期感染40例次(感染率35.7%),其中非重组人粒细胞集落刺激因子组(50.0%)是重组人粒细胞集落刺激因子组(26.5%)的近两倍,在不同性别、年龄和临床分期方面,重组人粒细胞集落刺激因子组患者感染率只有男性组明显低于非重组人粒细胞集落刺激因子组.但2组感染后治疗效果差异无显著性意义.结论重组人粒细胞集落刺激因子可明显减少恶性肿瘤患者化疗期感染的机会,从而使其所导致的死亡率降低.同时可缩短患者住院时间,减少住院费用,提高患者的生活质量.
作者：董梅；肖艳 刊期： 2003年第02期
目的克隆人乙酰胆碱酯酶(AchE)cDNA并构建真核表达载体.方法根据Gene Bank中hAchE核苷酸序列,设计并合成1对特异性扩增hAchE的引物,从18周龄引产的胎儿大脑组织中提取RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增出hAchEcDNA片段,并与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌DHSα中,经IPTG/X-gal诱导培养,筛选白斑提取重组载体,经酶切和PCR鉴定及序列测定与分析,并构建hAchE真核表达载体pcDNA3.1(+)-hAchE.结果已克隆的hAchE cDNA片段全长约1.9kb,其测序结果与基因文库中的人乙酰胆碱酯酶cDNA序列相符.结论在国内首次利用RT-PCR成功地克隆了hAchE cDNA全长,并构建了hAchE真核表达载体pcDNA3.1(+)-hAchE,为进行hAchE的结构与相关功能研究和基因工程生产奠定了基础.
作者：马兴元；谭建华；李阳芳；万忠海；朱平；姜力；孙曼霁 刊期： 2003年第02期
一般认为抗-HBs是HBV感染后产生免疫力的标志,而肝功反复异常者在临床上偶见抗-HBs阳性,为了明确诊断,我们对58例抗-HBs阳性患者血清进行HBV DNA检测,并对其中14例进行了肝组织免疫组化双标志检测,现将结果报告如下.
作者：李修范；徐丽；郑丽 刊期： 2003年第02期
目的从大肠杆菌中大规模纯化aFGF.方法建立aFGF发酵和纯化工艺,连续大量纯化9批,并对纯品进行全面鉴定.结果建立了稳定的发酵和纯化工艺流程,采用IPTG诱导表达的haFGF,其表达量为208mg/L,经离子交换及肝素亲合层析后得到的aFGF纯品,SDS-PAGE纯度达98.8%.比活性为2.5×105U/mg,所有检测指标均符合2000版<中国生物制品规程>,适宜产业化生产.结论成功纯化符合规程要求的aFGF纯品.
作者：冯秀萍；杨洪存；曲红艳；李效堃 刊期： 2003年第02期
目的探讨卡介苗(BCG)加α-干扰素(α-IFN)膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的疗效.方法对66例经病理证实为膀胱癌的患者分为BCG组与BCG加α-IFN组,分别进行疗效对比观察.结果BCG组复发率为26.7%,BCG加α-IFN组复发率为8.3%,两组比较差异有显著性意义,(x2=3.96,P＜0.05).结论BCG加α-IFN联合用药能明显降低膀胱癌的复发率.
作者：史明；那万里 刊期： 2003年第02期
目的以碱性磷酸酯为发光底物,应用化学发光法定量测定人血清中游离雌三醇.方法采用碱性磷酸酶标记雌三醇,包被雌三醇单抗,以竞争抑制法为基础进行测定.结果检测敏感度为0.1ng/ml,检测范围为0.1～100ng/ml,反应准确率在90%～110%,变异系数小于10%,与RIA法测定的相关系数在96.3%,与雌二醇、雌酮的交叉反应小于0.1%.结论化学发光法定量测定雌三醇的灵敏度高,特异性强,稳定性好,具有广阔的应用前景.
作者：郭兰英；刘均生；李振勇 刊期： 2003年第02期
百日咳疫苗是预防和控制百日咳经济有效手段之一.自20世纪30年代制成百日咳菌体疫苗开始,百日咳即成为疫苗可预防疾病.
作者：杨晓明 刊期： 2003年第02期
目的研究去氧胆酸钠对流感病毒佳的裂解条件.方法流感病毒在不同浓度的去氧胆酸钠作用一定时间后,经蔗糖梯度密度离心纯化,制备出流感裂解疫苗样品.以电镜观察病毒裂解情况和血液凝集反应,测定病毒效价作为评价指标,确定佳裂解条件.结果裂解纯化后的样品经电镜、SDS-PAGE检测表明病毒颗粒完全裂解,裂解后的血凝效价收率约为80%.结论0.8%的去氧胆酸钠作用120min可使流感病毒达到佳裂解效果.
作者：戚凤春；王敏文；薄洪；郭桥；范宇红；王志刚；张玉辉；阎长太；盛军 刊期： 2003年第02期
目的分析中国部分地区甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)的基因型.方法采自辽宁(LI1、LN2、IN3)、上海(Lu38)和云南(YN)甲型肝炎病人的粪便标本共5份,从中分离纯化HAV并提取病毒RNA,以逆转录-半嵌套聚合酶链式反应(RT-hnPCR)合成VPI/2A交接区及VP1氨基端,经克隆筛选后进行测序分析.结果所分离到的5株HAV野毒株VPI/2A交接区168个核苷酸(nt)的片段与IB亚型的野毒株HM175比较,核苷酸差异＞7.5%;与IA亚型的日本野毒株AH1、AH2、AH3、FH1、FH2和FH3比较差异＜7.5%,因而均属IA基因亚型.但与IB亚型的野毒株MBB比较,LN1、LN3和Lu38在该区域的核苷酸差异＜7.5%.进一步将LN1的VP1/2A交接区339nt的片段、LN3和Lu38的VP1氨基端的核苷酸序列与MBB进行比较,核苷酸差异＞7.5%,表明这3株HAV仍属IA基因亚型.结论所分离到的HAV野毒株LN1、LN2、LN3、Lu38和YN均属IA基因亚型.
作者：刘国栋；胡凝珠；梁燕；瞿素；施海晶；邵聪文；胡云章 刊期： 2003年第02期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
