郭桥；张春丽；石晓丽；陈云声；郭德本
目的分析甲肝病毒基因型,为确定我国甲肝的分子流行病学及疫苗的安全性和免疫原性奠定基础.方法采用抗原捕获聚合酶链反应(AC/PCR),依据国际上甲肝病毒分型标准,扩增VP1/2A结合处的168个核苷酸(nt2909～3264).结果经生物信息学软件分析,得出L-A-1株病毒属于甲肝病毒基因IB亚型.结论在我国有IA和IB两个亚型甲肝病毒流行.
作者：姜春来；王鹏富；刘景晔；张华远 刊期： 2002年第05期
生物制品是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备,用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品.包括疫苗、血清、血液制品、细胞因子、单克隆抗体体外免疫诊断制品等.
作者：雷殿良 刊期： 2002年第05期
目的观察和了解重组人干扰素α2b(以下简称rhIFN-α2b)工程菌的生物学性质,保证产品质量稳定. 方法通过对rhIFN-α2b工程菌的微生物学、分子生物学和免疫学检测,全面了解工程菌的性质.结果 rhIFN-α2b工程菌呈现典型的大肠杆菌形态,在甘油中可以贮存1年,在冻干条件下可以保存2年,其生物学特性比较稳定.结论 rhIFN-α2b工程菌生物学特性稳定不变.
作者：郭桥；张春丽；石晓丽；陈云声；郭德本 刊期： 2002年第05期
近年来,对鸡抗体研究较多,现已证明用病原体免疫母鸡可诱发机体产生特异性抗体,但用重组酵母乙肝疫苗刺激母鸡诱发免疫应答的研究还未见报道.为此本实验采用重组酵母乙肝疫苗免疫母鸡,观察其血清特异性抗体变化及其诱发体液免疫应答水平及免疫应答持久性.
作者：徐燕萍；湛学军；杨淑华；谢大泽；胡昕 刊期： 2002年第05期
目的增强机体的免疫功能,提高对慢性乙肝的疗效.方法每日肌肉注射乌体林斯,同时口服拉米夫定,每2周测ALT,每月测HBsAg、HBeAg、抗HBs、抗HBc及HBV-DNA.结果在检测肝功能指标(ALT、TBIL)及乙型肝炎病毒标志(HBeAg、HBV-DNA)的项目中,治疗组与对照组差异均有显著意义(P＜0.05).结论两药合用治疗慢性乙肝是安全有效的疗法.
作者：潘宝昌；陈永胜；孙红帆 刊期： 2002年第05期
目的研制基因工程胰高血糖素.方法利用pCYB1表达载体,亚克隆胰高血糖素基因后转化于BL21(DE3)菌种,并对阳性克隆的质粒进行DNA测序.检测不同条件下,IPTG诱导胰高血糖素-intein-几丁质结合结构域(CBD)组成的融合蛋白表达量,确定工程菌表达适条件.利用几丁质结合柱进行亲和层析,在DTT作用下由intein在柱上进行自我切割,纯化胰高血糖素.SDS-PAGE检测融合蛋白表达量,SDS-PAGE在Tris-Tricine缓冲系统中电泳检测纯度,Lowry法检测蛋白质含量,Western blot检测免疫原性,升血糖实验检测活性并进行N-末端测序.结果 DNA测序显示表达产物基因序列正确,纯化胰高血糖素具有免疫原性和生物学活性,N-端15个氨基酸与天然产品相同,电泳呈单一谱带,产率为1.25mg/L.结论获得分泌胰高血糖素基因工程菌,适于快速大规模生产.
作者：母敬郁；母凯平；相世和；陈岚；潘风香；王峤；李俐；杨翰仪；Vettai Ananthanarayanan 刊期： 2002年第05期
水痘是由水痘-带状疱疹病毒引起的急性传染病,主要发生于儿童,也是严重危害儿童键康的传染病之一.我国是水痘流行较为严重的国家,易感者接触后90%的儿童可发病.水痘的危害性不仅在于发生水痘疱疹,还在于感染后的并发症甚至病毒长期潜伏于脊神经后跟神经节内,多年后发生带状疱疹.
作者：王立成 刊期： 2002年第05期
目的分析重组HIV-1-P24抗原,以便研制HIV-抗体诊断试剂.方法以纯化重组P24为包被抗原,应用ELISA检测HIV-Ab国家参比品和正常人血清.结果 20份阳性HIV-Ab检出阳性19份,符合率为95%;20份阴性HIV-Ab检出阴性18份,符合率为90%;50份正常人血清检测结果均为阴性.结论所研制的重组P24抗原具有较高的特异性和敏感性,可用于制备HIV抗体诊断试剂.
作者：陈伟；陈克金；朱华松；余模松 刊期： 2002年第05期
目的构建隐孢子虫CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,观察其在Hela细胞中的表达.方法用Xho I和EcoR I从pMD18-T-15/60中酶切得到CP 15/60基因,将其插入真核表达载体pCR3.1(+)的Xho I和EcoR I位点,构建CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,用脂质体介导法将其转染Hela细胞,并用G418加压筛选,用RT-PCR方法检测外源CP15/60基因的转录,ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性.结果酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-15/60,外源CP15/60基因能在转染细胞中有效转录,经检测表达产物具有良好的生物活性.结论已成功地构建了pcDNA3.1-15/60真核表达载体,并在Hela细胞中具有良好的表达.
作者：何宏轩；张西臣；欧阳红生；尹继刚；李建华；杨举 刊期： 2002年第05期
目的观察冻干水痘减毒活疫苗的稳定性.方法将样品分别放37℃、22℃、8℃、-15℃及-70℃,不同时间取出,采用蚀斑形成单位(PFU)分别测定样品毒力滴度.结果 -15℃以下保存5年或8℃保存92周,疫苗滴度仍很稳定,8℃保存100～124周滴度缓慢下降,但仍保持在规程规定的标准以上.22℃保存30周滴度不变.37℃(模拟长期老化试验)保存1周,滴度下降不超过一个对数指数.37℃保存4周,病毒滴度下降缓慢.结论水痘减毒活疫苗稳定性良好.
作者：王连成；李莉；徐秀凤；闫素志；哈秀杰；王文忠；南一范 刊期： 2002年第05期
目的制备特异性抗人心肌肌钙蛋白1(cTnI)多克隆抗体.方法用人cTnI免疫家兔,制备抗人cTnI多克隆抗体,采用膜渗滤亲和层析法吸附掉与骨骼肌肌钙蛋白1(sTnI)有交叉反应的多抗,制备特异性抗cTnI多克隆抗体.结果抗体经槽式对流免疫电泳、酶联免疫吸附试验证明对cTnI具有高度特异性,与sTnI无交叉反应.结论为应用一步夹心酶联免疫吸附法检测cTnI奠定了基础.
作者：魏景艳；钱丽娜；芦杰；马兴刚；罗贵民；赵虹；郑德明；杨绍娟；贾润英；张桂珍；王维忠；董玉杰；严玉清；张莉 刊期： 2002年第05期
目的研究狂犬病疫苗和干扰素组成的联合制剂的免疫原性和暴露后的治疗作用.方法将人用精制Vero细胞狂犬病疫苗(PVCRV)和基因工程干扰素(rHuIFNs)按一定比例配制成联合制剂,进行安全和效力试验,以PVCRV-HuIFNs和PVCRV分别免疫小鼠,在第1针免疫后9和18d,采用快速免疫荧光灶抑制试验,检测小鼠中和抗体水平,用MTT法检测特异的细胞毒作用(CTLs).一定剂量的狂犬病病毒标准攻击株(CVS)肌肉感染小鼠后,分别用PVCRV-HuIFNs和PVCRV在0、3和7d皮内免疫感染小鼠,分别在末次免疫的第7和21d进行CTLs试验,并在30d内观察小鼠发病和死亡情况.结果联合制剂安全有效,效价高于单一疫苗,在暴露前诱导的中和抗体水平与单一疫苗比较差异有显著意义;在暴露前后激发的CTL,联合制剂均高于单一疫苗,差异有显著意义.结论联合制剂可用于狂犬病暴露后的免疫治疗.
作者：邹勇；宋继萍；吕宏亮；李武平；段招军；侯云德 刊期： 2002年第05期
目的探讨N-乙酰左旋半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)抗辐射损伤作用.方法小鼠预先给予NAC,观察其受不同剂量X线(0、1、3、5Gy)照射后对造血系统(CFU-S,CFU-GM)和免疫系统(胸腺自发增殖能力,IL-2)的影响.结果 NAC不仅可明显提高受不同剂量X线照射小鼠造血系统的耐受能力(P＜0.01),且可显著升高小鼠胸腺细胞自发增殖能力及脾细胞产生IL-2水平.结论 NAC对受照小鼠具有明显的防护作用.
作者：王欣；樊英显；安治国 刊期： 2002年第05期
目的研究不同方法测定人血清与猪心提纯物中ALT结果的互换性,以便用猪心提取的ALT作为参考品.方法采用10种常用的ALT连续监测法(或试剂盒)及2种赖氏法试剂盒测定72份人血清及猪心提纯物中的ALT,以IFCC推荐的方法(不含磷酸吡哆醛)为基准,对其他11种方法测定的结果进行回归分析,并对人血清及猪心提纯物中ALT的反应性进行比较.结果 11种方法与IFCC法间血清ALT测定值的相关性较好,相关系数(r)接近1.0,截距接近0.提纯物在各连续监测法间均与人血清ALT反应性相近,具互换性.结论所提纯的ALT可作为酶制剂的参考品用于临床检测.
作者：史利宁；孟泽；李勇；黄宇峰 刊期： 2002年第05期
目的对11家企业新近研制成功的9批地鼠肾细胞纯化狂犬病疫苗和5批Vero细胞纯化狂犬病疫苗进行临床安全性和有效性考核.方法每家企业研制的疫苗任取1批,按3针和/或5针免疫程序接种,观察接种人群的副反应发生率.通过测定全程免疫后的血清中和抗体确定其免疫效果.结果纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗和Vero细胞狂犬病疫苗的副反应发生率分别为0%～31.5%和0%～39.4%.全程免疫后均能产生很高的中和抗体.无佐剂疫苗第1针免疫后的第7d中和抗体GMT水平已达到0.4IU/ml,阳转率可达45.2%.结论 2种疫苗均具有较好的安全性和免疫原性.
作者：董关木；郑海发；刘增顺；曲小肃；刘景华；吴小红 刊期： 2002年第05期
目的比较规模化与传统法制备培养基在脊髓灰质炎(脊灰)疫苗生产中对细胞产量、细胞使用率和病毒滴度的影响.方法随机抽取5批不同方法制备的培养基,进行细胞产量、使用率、病毒滴度的平行试验.结果规模化制备的培养基可提高细胞产量33%,提高细胞使用率29.8%,提高病毒滴度0.3个常用对数值,并使细胞污染率降低24%;结论规模化制备培养基质量均一,批间差异小,优于传统制备法.
作者：张丽旌；孙明波；李国良；段可谦；徐其武；黄成；沈伟；李卫东 刊期： 2002年第05期
目的构建含HIV-1表面糖蛋白基因的真核表达质粒,并在Hela细胞内表达.方法在核酸疫苗载体质粒pVAX1中插入gp120基因,构建真核表达质粒pVAXGP.在体外用脂质体法将重组质粒转染Hela细胞,并用间接免疫荧光试验、免疫印迹试验和Dot-ELISA对表达产物进行检测.结果间接免疫荧光试验结果显示,转染重组质粒的细胞表面有绿色荧光.免疫印迹试验和Dot-ELISA结果均显示,重组质粒转染细胞的裂解物中存在表达的gp120蛋白.结论已成功地构建了真核表达质粒,且表达的蛋白具有良好的反应原性和特异性.
作者：江文正；金宁一；李子健；金洪涛；王宏；韩文瑜 刊期： 2002年第05期
目的观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对烧伤创面愈合的治疗作用.方法选择浅Ⅱ度和深Ⅱ度烧伤病例共920例,分别用bFGF治疗其烧伤创面,用药剂量为144U/cm2.观察伤后8d(浅Ⅱ度)和15d(深Ⅱ度)创面愈合率,以及创面完全愈合时间.结果 8d愈合率总体治疗组为77.6%±24.4%,对照组为51.7%±26.4%;完全愈合时间总体治疗组为9.6±2.4d,对照组为12.6±2.9d.15d愈合率总体治疗组为75.2%±26.3%,对照组为53.3%±25.4%;完全愈合时间总体治疗组为17.5±4.5d,对照组为21.9±5.5d.结论 bFGF具有明显的促进Ⅱ度烧伤创面愈合的作用.
作者：郭立君；李校堃；许华；姚成灿 刊期： 2002年第05期
为观察固体干扰素在不同干燥条件下的水分及活性的变化,将干扰素湿颗粒(2.7×103IU/ml)2000g分4份放入30℃、40℃、50℃和60℃干燥箱内干燥4～6h,再风干2h后测其水分及活性,现将3次试验结果报告如下:
作者：王轶文；任志霞 刊期： 2002年第05期
目的确定感染率高且稳定的幽门螺杆菌感染动物模型预处理方案.方法取蒙古沙鼠200只,随机分为3个实验组及1个对照组.实验组沙鼠在断食、水12h后分别应用pH2盐酸、消炎痛+胃复安和50%乙醇3种不同方案进行预处理,对照组用生理盐水处理.此后继续断食、水12h,再灌喂Hp菌液(109cfu/ml)0.5ml/只.共3次,每次间隔12h.后1次灌喂后2h给食、水.后每隔4周解剖一批动物,每组10只,进行分离培养、ELISA、PCR、快速尿素酶检测和病理切片检查.结果 3组实验动物感染率不同,其中50%乙醇组沙鼠感染率相对较高,达到80%,其病理组织学变化与人体相应病变也极为相似.结论 50%乙醇组沙鼠预处理方案感染效果好,可作为Hp感染动物模型的预处理方法.
作者：王毅超；郭刚；刘开云；解庆华；邹全明 刊期： 2002年第05期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
