王立成
生物制品是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备,用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品.包括疫苗、血清、血液制品、细胞因子、单克隆抗体体外免疫诊断制品等.
作者：雷殿良 刊期： 2002年第05期
目的探讨N-乙酰左旋半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)抗辐射损伤作用.方法小鼠预先给予NAC,观察其受不同剂量X线(0、1、3、5Gy)照射后对造血系统(CFU-S,CFU-GM)和免疫系统(胸腺自发增殖能力,IL-2)的影响.结果 NAC不仅可明显提高受不同剂量X线照射小鼠造血系统的耐受能力(P＜0.01),且可显著升高小鼠胸腺细胞自发增殖能力及脾细胞产生IL-2水平.结论 NAC对受照小鼠具有明显的防护作用.
作者：王欣；樊英显；安治国 刊期： 2002年第05期
目的制备特异性抗人心肌肌钙蛋白1(cTnI)多克隆抗体.方法用人cTnI免疫家兔,制备抗人cTnI多克隆抗体,采用膜渗滤亲和层析法吸附掉与骨骼肌肌钙蛋白1(sTnI)有交叉反应的多抗,制备特异性抗cTnI多克隆抗体.结果抗体经槽式对流免疫电泳、酶联免疫吸附试验证明对cTnI具有高度特异性,与sTnI无交叉反应.结论为应用一步夹心酶联免疫吸附法检测cTnI奠定了基础.
作者：魏景艳；钱丽娜；芦杰；马兴刚；罗贵民；赵虹；郑德明；杨绍娟；贾润英；张桂珍；王维忠；董玉杰；严玉清；张莉 刊期： 2002年第05期
目的检测抗感染重组合异种骨(ARBX)产品的生物相容性,确保ARBX产品在临床上安全、有效.方法根据卫生部制定的<生物材料和制品的生物学评价标准>及<相关生物材料和制品的企业标准Q/JGY001-94>,进行了ARBX急性毒性试验、过敏性试验、热原试验、骨内埋植试验、肌内埋植试验、溶血试验及细胞毒性试验.结果 ARBX未引起小鼠急性毒性反应、豚鼠过敏反应及家兔热原反应.在兔骨内和小鼠肌内埋植,既未产生纤维包膜,也未引起淋巴细胞及炎性细胞浸润.对家兔红细胞溶血率为1.2%,无溶血现象.体外细胞毒性反应指标R=0.25/0,无细胞毒性.结论 ARBX的生物相容性符合国家规定的生物材料和制品的生物学标准及企业标准,可试用于临床治疗相关疾病.
作者：袁志；胡蕴玉；赵玉珍；孟国林；孙梁；吕荣；白建萍；王哲 刊期： 2002年第05期
目的观察冻干水痘减毒活疫苗的稳定性.方法将样品分别放37℃、22℃、8℃、-15℃及-70℃,不同时间取出,采用蚀斑形成单位(PFU)分别测定样品毒力滴度.结果 -15℃以下保存5年或8℃保存92周,疫苗滴度仍很稳定,8℃保存100～124周滴度缓慢下降,但仍保持在规程规定的标准以上.22℃保存30周滴度不变.37℃(模拟长期老化试验)保存1周,滴度下降不超过一个对数指数.37℃保存4周,病毒滴度下降缓慢.结论水痘减毒活疫苗稳定性良好.
作者：王连成；李莉；徐秀凤；闫素志；哈秀杰；王文忠；南一范 刊期： 2002年第05期
目的比较规模化与传统法制备培养基在脊髓灰质炎(脊灰)疫苗生产中对细胞产量、细胞使用率和病毒滴度的影响.方法随机抽取5批不同方法制备的培养基,进行细胞产量、使用率、病毒滴度的平行试验.结果规模化制备的培养基可提高细胞产量33%,提高细胞使用率29.8%,提高病毒滴度0.3个常用对数值,并使细胞污染率降低24%;结论规模化制备培养基质量均一,批间差异小,优于传统制备法.
作者：张丽旌；孙明波；李国良；段可谦；徐其武；黄成；沈伟；李卫东 刊期： 2002年第05期
水痘是由水痘-带状疱疹病毒引起的急性传染病,主要发生于儿童,也是严重危害儿童键康的传染病之一.我国是水痘流行较为严重的国家,易感者接触后90%的儿童可发病.水痘的危害性不仅在于发生水痘疱疹,还在于感染后的并发症甚至病毒长期潜伏于脊神经后跟神经节内,多年后发生带状疱疹.
作者：王立成 刊期： 2002年第05期
目的研究丙氨酸氨基转移酶参考品活性浓度的定值.方法用IFCC推荐的方法测定该酶活性浓度,从9个厂家生产的试剂盒中选择3种,首先进行实际K值的测定,然后对该参考品定值. 结果瓶间变异CV小于1.0%.丙氨酸氨基转移酶的催化浓度以95%可信限赋值,复溶的冻干参考品为201±4.9U/L.结论该定值对于本品的试用和认证是有价值的.
作者：李勇；孟泽；史利宁；黄宇烽；张春妮 刊期： 2002年第05期
目的研制基因工程胰高血糖素.方法利用pCYB1表达载体,亚克隆胰高血糖素基因后转化于BL21(DE3)菌种,并对阳性克隆的质粒进行DNA测序.检测不同条件下,IPTG诱导胰高血糖素-intein-几丁质结合结构域(CBD)组成的融合蛋白表达量,确定工程菌表达适条件.利用几丁质结合柱进行亲和层析,在DTT作用下由intein在柱上进行自我切割,纯化胰高血糖素.SDS-PAGE检测融合蛋白表达量,SDS-PAGE在Tris-Tricine缓冲系统中电泳检测纯度,Lowry法检测蛋白质含量,Western blot检测免疫原性,升血糖实验检测活性并进行N-末端测序.结果 DNA测序显示表达产物基因序列正确,纯化胰高血糖素具有免疫原性和生物学活性,N-端15个氨基酸与天然产品相同,电泳呈单一谱带,产率为1.25mg/L.结论获得分泌胰高血糖素基因工程菌,适于快速大规模生产.
作者：母敬郁；母凯平；相世和；陈岚；潘风香；王峤；李俐；杨翰仪；Vettai Ananthanarayanan 刊期： 2002年第05期
目的对11家企业新近研制成功的9批地鼠肾细胞纯化狂犬病疫苗和5批Vero细胞纯化狂犬病疫苗进行临床安全性和有效性考核.方法每家企业研制的疫苗任取1批,按3针和/或5针免疫程序接种,观察接种人群的副反应发生率.通过测定全程免疫后的血清中和抗体确定其免疫效果.结果纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗和Vero细胞狂犬病疫苗的副反应发生率分别为0%～31.5%和0%～39.4%.全程免疫后均能产生很高的中和抗体.无佐剂疫苗第1针免疫后的第7d中和抗体GMT水平已达到0.4IU/ml,阳转率可达45.2%.结论 2种疫苗均具有较好的安全性和免疫原性.
作者：董关木；郑海发；刘增顺；曲小肃；刘景华；吴小红 刊期： 2002年第05期
目的观察和了解重组人干扰素α2b(以下简称rhIFN-α2b)工程菌的生物学性质,保证产品质量稳定. 方法通过对rhIFN-α2b工程菌的微生物学、分子生物学和免疫学检测,全面了解工程菌的性质.结果 rhIFN-α2b工程菌呈现典型的大肠杆菌形态,在甘油中可以贮存1年,在冻干条件下可以保存2年,其生物学特性比较稳定.结论 rhIFN-α2b工程菌生物学特性稳定不变.
作者：郭桥；张春丽；石晓丽；陈云声；郭德本 刊期： 2002年第05期
目的新城疫病毒(NDV)F基因和传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP0基因在鸡痘病毒中表达,以便研制新城疫和传染性法氏囊多价重组疫苗.方法利用鸡痘病毒282E4株非必需区TK基因构建的表达载体PUTA2,在已存在的复合启动子p7.5ATI下游同向插入F基因,反向插入复合启动子P7.5ATI,并在其下游反向插入VP0基因,构建由2个相同的复合启动子在相反方向分别表达F和VP0蛋白的PATI2-F-VP0表达载体.使其与鸡痘病毒282E4株共转染CEF细胞后,用BUDR法筛选重组病毒,通过间接免疫荧光法检测阳性重组病毒.用Western blot法检测F和VP0蛋白.结果在重组病毒株中,用Western blot法可检测到F和VP0蛋白.结论已成功地获得可同时表达F蛋白和VP0蛋白的重组鸡痘病毒.
作者：许凌峰；夏志平；郭志儒；王宏；王兴龙；金宁一 刊期： 2002年第05期
目的从感染HTLV-1的中国患者外周血单核细胞(PBMCs)中扩增编码HTLV-1核心蛋白P24的cDNA,并在大肠杆菌中进行表达.方法提取感染者PBMCs基因组DNA,应用巢式PCR方法扩增出HTLV-1核心蛋白P24的cDNA并测序,与pGEX-20T载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21中表达,采用ELISA和Western blot分析重组蛋白活性.结果 HTLV-1核心蛋白P24基因序列高度保守,构建重组载体后,在大肠杆菌中表达的重组蛋白,经检测具有较强的抗原活性.结论成功地表达了HTLV-1型病毒的核心蛋白P24基因,为国产诊断试剂和疫苗的研发打下了基础.
作者：张春涛；尹红章；李秀华；宋爱京；李德富；夏宁邵；张军 刊期： 2002年第05期
目的研究狂犬病疫苗和干扰素组成的联合制剂的免疫原性和暴露后的治疗作用.方法将人用精制Vero细胞狂犬病疫苗(PVCRV)和基因工程干扰素(rHuIFNs)按一定比例配制成联合制剂,进行安全和效力试验,以PVCRV-HuIFNs和PVCRV分别免疫小鼠,在第1针免疫后9和18d,采用快速免疫荧光灶抑制试验,检测小鼠中和抗体水平,用MTT法检测特异的细胞毒作用(CTLs).一定剂量的狂犬病病毒标准攻击株(CVS)肌肉感染小鼠后,分别用PVCRV-HuIFNs和PVCRV在0、3和7d皮内免疫感染小鼠,分别在末次免疫的第7和21d进行CTLs试验,并在30d内观察小鼠发病和死亡情况.结果联合制剂安全有效,效价高于单一疫苗,在暴露前诱导的中和抗体水平与单一疫苗比较差异有显著意义;在暴露前后激发的CTL,联合制剂均高于单一疫苗,差异有显著意义.结论联合制剂可用于狂犬病暴露后的免疫治疗.
作者：邹勇；宋继萍；吕宏亮；李武平；段招军；侯云德 刊期： 2002年第05期
目的确定感染率高且稳定的幽门螺杆菌感染动物模型预处理方案.方法取蒙古沙鼠200只,随机分为3个实验组及1个对照组.实验组沙鼠在断食、水12h后分别应用pH2盐酸、消炎痛+胃复安和50%乙醇3种不同方案进行预处理,对照组用生理盐水处理.此后继续断食、水12h,再灌喂Hp菌液(109cfu/ml)0.5ml/只.共3次,每次间隔12h.后1次灌喂后2h给食、水.后每隔4周解剖一批动物,每组10只,进行分离培养、ELISA、PCR、快速尿素酶检测和病理切片检查.结果 3组实验动物感染率不同,其中50%乙醇组沙鼠感染率相对较高,达到80%,其病理组织学变化与人体相应病变也极为相似.结论 50%乙醇组沙鼠预处理方案感染效果好,可作为Hp感染动物模型的预处理方法.
作者：王毅超；郭刚；刘开云；解庆华；邹全明 刊期： 2002年第05期
目的以MRC-5人二倍体细胞为基质,建立制备Oka株水痘减毒活疫苗的生产工艺. 方法 Oka株水痘病毒在MRC-5细胞上培养,收获细胞,经冻融,超声波,纯化,澄清, 冻干等工序,生产8批疫苗,按规程要求进行检定. 结果各项指标全部合格,制品质量稳定,37℃ 7d热稳定性良好, 儿童免疫后抗体阳转率为92.7%. 结论工艺流程合理,制品质量符合WHO规程要求, 免疫后副反应甚微, 免疫原性良好.
作者：徐建军；王宪明；殷月娣；沈谊清；张英；王亮；王树巧；陈志慧 刊期： 2002年第05期
目前,人用鼠源单抗的生产方法一般分为体内法和体外法2种.体内法即腹水法.尽管腹水中抗体浓度比较高(2～10mg/ml),但由于所用的BALB/c小鼠必须达到SPF级,繁殖、饲养BALB/c小鼠及生产腹水、纯化抗体的厂房必须符合GMP要求,WHO及我国对体内法生产的人用鼠源单克隆抗体的质检项目繁多,要求严格,因此限制了体内法在人用鼠源单抗生产领域的应用.由于体外法(杂交瘤细胞体外培养法)的产品纯度高,可以避免鼠类病毒的污染,简化质检项目,操作具有可控制性,适用于大规模工业生产,因此是人用鼠源单抗生产方式的主要发展方向.
作者：王祥斌；孔健 刊期： 2002年第05期
目的标定白喉抗体国家标准品.方法使用白喉抗体国际标准品,3个实验室均采用血凝方法协作标定白喉抗体国家标准品.再用此标准品与国家参考品进行比较,测定50批样品.结果各项检测指标均达到国家标准品要求,效价为0.9HAU/支.检测50批样品,38批比国家参考品测定值高2倍,6批高4倍,6批结果相同.结论完成了白喉抗体标准品的升级换代.
作者：侯继锋；卢连玉；程雅琴；朱晓川；何勤 刊期： 2002年第05期
目的构建隐孢子虫CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,观察其在Hela细胞中的表达.方法用Xho I和EcoR I从pMD18-T-15/60中酶切得到CP 15/60基因,将其插入真核表达载体pCR3.1(+)的Xho I和EcoR I位点,构建CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,用脂质体介导法将其转染Hela细胞,并用G418加压筛选,用RT-PCR方法检测外源CP15/60基因的转录,ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性.结果酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-15/60,外源CP15/60基因能在转染细胞中有效转录,经检测表达产物具有良好的生物活性.结论已成功地构建了pcDNA3.1-15/60真核表达载体,并在Hela细胞中具有良好的表达.
作者：何宏轩；张西臣；欧阳红生；尹继刚；李建华；杨举 刊期： 2002年第05期
为观察固体干扰素在不同干燥条件下的水分及活性的变化,将干扰素湿颗粒(2.7×103IU/ml)2000g分4份放入30℃、40℃、50℃和60℃干燥箱内干燥4～6h,再风干2h后测其水分及活性,现将3次试验结果报告如下:
作者：王轶文；任志霞 刊期： 2002年第05期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
