朱智勇；翁景清；李岩金；陆群英；李敏红；姚苹苹
多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids,PUFAs)是指含两个以上双键的一类长链脂肪酸.在微生物体内,PUFAs的合成通常是以单不饱和脂肪酸、油酸为底物,合成途径中,有两个主要的反应,即碳链的增长和去饱和作用.
作者：袁成凌；姚建铭；王文生；余增亮 刊期： 2000年第01期
目的了解聚乙二醇6 000对测定Tween-80含量的影响.方法将被检样品加95%乙醇沉淀蛋白后,上清加二氯甲烷,再加铵钴硫氰酸盐溶液,用紫外分光光度计测A620吸收峰.结果PEG-6 000含量>5μg/ml时,干扰Tween-80含量测定.结论一定浓度的PEG-6 000对测定Tween-80含量有干扰.
作者：沈琦；刘大英 刊期： 2000年第01期
目的建立灵敏度高,重复性好的残余宿主菌E.coli菌体蛋白含量的测定方法.方法电泳显示5株大肠杆菌DH52、JM103、JM105、N8430和HB101的蛋白质组分各不相同,但均可被免疫印迹显色,说明免抗E.coli.K12,C600抗体包括了其主要菌体蛋白的抗体,因此,用ELISA检测相应的菌体蛋白含量.结果优化后的ELISA对DHa、JM103、JM105和HB101检测灵敏度均达到10ng/ml.用混合菌体蛋白作为E.coli菌体蛋白通用标准,其灵敏度达到7.8ng/ml,含量在7.8～250ng/ml范围内,一次方程(y＝a+bx)线性良好(r>0.990);在7.8～1 000ng/ml范围内,二次方程(y＝a+bx+c2)线性良好(r>0.990).变异系数小于14%(n=4).应用该法对国内外重组产品进行测定,发现不同厂家不同产品其菌体蛋白含量各不相同.8种细胞因子共57批,菌体蛋白含量大于1%的3批,占5.3%;大于0.1%的9批,占15.8%;大于0.01%的28批占49.1%.说明还有不少厂家其重组产品纯化工艺有待进一步提高.结论本方法灵敏度高,重复性好,可用于重组产品中大肠杆菌残余菌体蛋白的测定.
作者：饶春明；王军志；高凯；郭莹 刊期： 2000年第01期
目的探讨神经节苷脂对脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法采用Pulsinelli的四血管闭塞法制作大鼠急性脑缺血/再灌注模型,利用高压液相色谱法观察脑缺血/再灌注期间谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的变化,通过图象分析仪测定神经元的面数密度及神经节苷脂对以上指标的影响.结果缺血后谷氨酸和γ-氨基丁酸含量明显升高,再灌注后降低,神经节苷脂可降低谷氨酸含量,与盐水对照组相比差异显著(P<0.01),同时增加神经元面数密度.结论神经节苷脂通过抑制谷氨酸释放,可减轻脑缺血再灌注期间脑组织损伤.
作者：刘松岩；于挺敏；赵力；刘淑玲；李秀芝；迟春萍；王妍 刊期： 2000年第01期
目的建立重组天门冬酰胺酶Ⅱ纯化过程质量监控的方法.方法用高效毛细管区带电泳法监测L-天门冬酰胺酶的纯化过程.经优化的电泳条件为:45cm×50μmi.d.石英毛细管(有效长度为37.5cm),检测波长214nm,分离电压12kV,压差进样10s,恒温13℃,分离介质为pH7.0的80mmol/L磷酸钠缓冲液.实测了6批样品的纯度,用于各纯化步骤的质量监控.结果该方法简单、快速,尤其适合于重组蛋白的质量控制.结论毛细管区带电泳法(CZE),可以用于对L-天门冬酰胺酶的纯化过程的质量监控,还可用于半成品和成品的质量控制.
作者：张晓丹；周国华；古卓良；吴敬 刊期： 2000年第01期
在狂犬病疫苗生产过程中,制备出来的疫苗原液一般不能及时检定或分装,需要保存一定时间.为了解保存时间对原液毒力的影响,我们取沈阳安迪生物高科技公司同期生产的狂犬病疫苗原液6批,分装于无菌的青霉素瓶中,分别放-2℃及4℃冰箱中保存,于不同时间取出,按<中国生物制品规程>方法进行毒力测定,结果疫苗原液在-20℃冰箱中保存1周毒力未见改变,保存3、6、10个月毒力下降0.08、0.5和0.89LogLD50/0.03ml.原液在4℃冰箱保存2天毒力未见下降,保存5天和10天毒力分别下降0.68和0.44LogLD50/O.03ml.原液经冻融2次毒力没有下降.冻融4次和6次毒力分别下降0.08和0.12LogLD50/0.03ml.
作者：蒋茨蕾；李慧君；潘丽静 刊期： 2000年第01期
目的评价国产HIV抗体诊断试剂的质量.方法用4 400 份义务献血员的血样,评价国内9个厂家的HIV抗体诊断试剂的特异性;HIV抗体阳性样品3 368份,评价试剂的灵敏度;测定各试剂结果的真实性及相关质量指标.结果国产HIV抗体诊断试剂的特异性、阳性预示值基本在99%以上,但灵敏度仍存在一定差距.结论通过对国内主要生产厂家生产的试剂质量的评价,了解制品质量,有益于进一步提高国产试剂的质量.
作者：尹红章；王兵；宋爱京；陆明；李秀华；孟淑芳；李德富 刊期： 2000年第01期
目的观察本实验室研制的甲型肝炎灭活疫苗的安全性和免疫原性.方法甲型肝炎病毒吕-8株在人胚肺二倍体细胞(KMB17)中增殖,收获的病毒液用福尔马林灭活制成实验性疫苗,接种普通狨猴.结果有特异性抗HAV产生,无血清酶活性升高和肝组织病理学改变.接种疫苗的狨猴均能抵抗甲肝病毒强毒株的攻击,而对照组均出现酶活性升高和肝组织病理学改变.结论该疫苗具有良好的免疫原性和可靠的安全性.
作者：黄小琴；陈统球；谭顺革；金炜翔；阳选祥；钟光六；邵聪文 刊期： 2000年第01期
目的探讨反义c-myc基因质粒对鼠脑胶质瘤细胞C6增殖及凋亡的作用.方法将可在真核细胞表达大鼠反义c-myc基因的质粒pCEP4ASCMR以脂质体FuGENE6为介导,转染到大鼠脑恶性胶质瘤细胞C6株中,经MTF检测,软琼脂集落生长,吖啶橙染色,琼脂糖电泳等方法分析实验结果.结果反义c-myc基因质粒DNA具有抑制瘤细胞增殖的作用,并能引起瘤细胞凋亡;脂质体FuGENE6有助于提高质粒DNA的转染效率.结论反义c-mvc基因质粒可抑制c-myc基因的过度表达,促使肿瘤细胞凋亡,达到治疗脑神经胶质细胞瘤的目的.
作者：朱俊铭；全家妩；陈伟 刊期： 2000年第01期
目的制备b型流感嗜血杆菌结合疫苗,观察免疫学特性.方法通过已二酸二肼(ADH),将纯化的荚膜多糖抗原与破伤风类毒素(TT)蛋白共价结合,制备b型流感嗜血杆菌结合物.以2.5μg多糖或含2.5μg多糖结合物经皮下免疫NIH雌性小鼠,用ELISA法检测小鼠血清PRP抗体及T抗体水平.结果用本实验方法提取的多糖、合成的多糖衍生物、多糖-蛋白结合物都具有b型流感嗜血杆菌的抗原特异性,其化学组成及结构特性与国外文献报道结果基本一致.单独用多糖免疫小鼠未能诱导高水平的血清PRP抗体,而用结合物免疫小鼠却诱导出高水平的血清PRP抗体及TT抗体,并存在免疫记忆性.结论本实验为进一步临床评价结合物的体内保护性效果提供了实验基础.
作者：靳志刚；杨辉；田玉珍；谭小梅；蒲江；张谦 刊期： 2000年第01期
目的获得IL-2绿脓杆菌外毒素A嵌合蛋白,用于相关疾病的治疗.方法用PCR方法扩增分离IL-2和PEA的基因,将IL-2基因的3′端与绿脓杆菌外毒素A基因的5′端连接后克隆至pBV220上,转化大肠杆菌DH5a.挑取菌落培养,快速提取质粒进行酶切,并在温控条件下表达.结果经鉴定,获得重组质粒pBV/IL-2/PEA.温控诱导表达后SDS-PAGE分析表明,在51 000处有蛋白表达带.以鼠抗人IL-2单克隆抗体经免疫印迹验证,该表达蛋白为所设计的嵌合蛋白.结论本研究建立了一种制备IL-2/PEA嵌合蛋白的方法,该方法也可用于表达其他蛋白.
作者：刘柱；周华；姚为民；万里；张雪梅；王志武；石晓丽；郑辉；朱宏伟；盛君；周雪艳；陈宇；贺玉泉；周传开 刊期： 2000年第01期
目的试图从霉菌培养液中分离纯化抗真菌活性蛋白质.方法用离子交换层析法分离,用反向高效液相色谱法进一步纯化,经N-三(羟甲基)甲基甘氨酸凝胶电泳分析确定其相对分子质量.结果从黑曲霉菌培养上清液中分离出一种具有抗真菌活性的蛋白质(AFP).纯化后得到高活性的精制AFP.相对分子质量约为9 000,经MTT法检测5种真菌具有明显抗真菌活性.结论本研究为抗菌药物及防腐剂的开发提供了依据.
作者：金哲洙；蔡英姬；金京玲；金河奎；韩今子；崔华；李东建；任东鲜 刊期： 2000年第01期
CS-3000Plus血细胞分离机由美国百特公司生产.机采血小板所用的耗材都依赖进口,且价格昂贵.单个供者献双份血小板既节约了耗材.又nJ以减少供者,同时也为临床快速提供机采血小板争取了时间,笔者对59例单个供者(手指末梢血手工计数血小板≥200×109/L),进行双份血小板的采集.现将献血员的筛选、血小板采集及单采后献血员血细胞的变化情况报告如下.
作者：赵宏祥 刊期： 2000年第01期
编者按:为满足广大读者了解有关生物技术专利知识的需要,本刊特邀原国家知识产权局专利局高级审查员马昭若教授以问题解答形式做此专题讲座.欢迎诸位就您所关心的问题继续来电来函咨询.
作者：马昭若 刊期： 2000年第01期
目的为提高肾综合征出血热(HFPS)疫苗的免疫效果和减少副反应.方法用ELISA检测HFBS病毒抗原的方法,比较疫苗原液通过不同孔径滤膜的浓缩效果;比较离子交换和凝胶过滤的纯化效果.结果用孔径30万相对分子质量滤膜浓缩时,过滤液中仍有部分病毒抗原检出,经10万相对分子质量滤膜过滤后,过滤液中检测不到病毒抗原;用Sepharose 4FF凝胶柱层析浓缩时,经波长280nm检测到3个吸收峰,其中仅在第1峰中检测到病毒抗原,收集第1峰,几乎回收全部病毒抗原,去除杂蛋白约90%左右.结论本纯化方法适合于HFBS疫苗的规模化生产.
作者：朱智勇；翁景清；李岩金；陆群英；李敏红；姚苹苹 刊期： 2000年第01期
目的应用重组人干扰素α2a栓剂对慢性盆腔结缔组织炎患者进行疗效观察.方法用5×105IUα2a干扰素栓剂,经宫颈局部用药,治疗合并慢性宫颈炎的慢性盆腔结缔组织炎83例,并对部分病例进行了治疗前后宫颈分泌物的HPV-DNA,HCMV-EA检测.结果慢性盆腔结缔组织炎痊愈率、显效率、总显效率、有效率、总有效率依次为59.7%、25.4%、85.1%、9.0%和94.1%,显著优于洗必泰栓的疗效;慢性盆腔结缔组织炎疗效与慢性宫颈炎疗效密切相关,与HPV-DNA、HCMV-DNA阴转密切相关.结论重组人干扰素α2a栓剂经宫颈局部用药,对慢性盆腔结缔组织炎的疗效随着宫颈局部HCMV、HPV感染的有效控制而获得较满意的结果.
作者：陈维佳；隋宝真；郑辉；王冬倩；张岩；马晓艳 刊期： 2000年第01期
作者：颜华；方志正；Clarus H.Schroeder 刊期： 2000年第01期
目的了解腮腺炎疫苗与吸附精制白喉、破伤风二联类毒素(DT)能否同时接种,为制定免疫方案提供依据.方法用冻干流行性腮腺炎减毒活疫苗和吸附精制白、破二联类毒素同时和分别接种8～14岁的寄宿学生,观察其免疫应答.结果两苗同时接种与分别接种临床反应及免疫应答差异均无显著意义.结论两苗是可以同时接种的.
作者：徐福根；孟冬梅；许二萍；陈康凯；黄诚孝；姚怀芳 刊期： 2000年第01期
目的建立高效、快速、简便的表达和纯化HBcAg系统,为进一步研究HBcAg在乙型肝炎发病机理中的作用及HBV C基因变异产生HBcAg特征.方法应用pQE30系统在原核细胞表达和纯化HBcAg.结果目的蛋白表达量占细菌总蛋白的26.2%;500ml诱导表达的菌液可得平均5mg的HBcAg;纯化的HBcAg纯度可达到91.0%;免疫印迹分析,表达的HBcAg具有多克隆抗-HBc结合活性.结论建立了一套高效、快速表达和纯化HBc Ag系统.
作者：周福元；隋礼丽；潘文胜；骆抗先；王海涛 刊期： 2000年第01期
目的为建立一种更为简便、规范、准确的测定IgG含量的方法.方法采用紫外分光光度仪测定抗原抗体反应的光吸收值(A值),利用直线回归方法,根据样品的A值从标准曲线上计算出样品的IgG含量.结果该法重复性好,准确性高,省时简便.结论此法可作为实验室和临床检验的一种常规方法.
作者：王箐舟；程雅琴 刊期： 2000年第01期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
