马巍娜;贾雷立;刘雪林;宋宏彬
MicroRNAs是一组21-25 nt长的非编码蛋白质的短序列RNA,能通过碱基配对与mRNA分子的3'非翻译区相结合来降解mRNA或抑制靶基因的翻译.MicroRNAs的主要功能是调控基因的表达,在生物体的生长、发育及疾病发生中扮演着重要的角色.初绝大多数microRNA都是通过大量的克隆和测序发现的,信息学只用来验证克隆的序列是否具有发夹结构,然而这些方法无法检测低丰度或组织特异性的microRNAs.目前依赖计算机的精密的microRNAs预测技术和有效的生物学鉴定技术在microRNAs的识别及其功能的阐明方面起着极其重要的作用.本文主要对microRNAs的生物信息学预测及鉴定技术进行综述.
作者:李广平;邱长春 刊期: 2007年第12期
应用已构建的glmU基因敲除的耻垢分枝杆菌作为实验模型,对细胞壁中的聚糖的组成成份和结构进行分析.气相色谱与高效液相Dionex的结果共同说明了在mc2155 glmU KOT菌株的细胞壁内,当缺失活性GlmU时,阿拉伯糖含量增加,且其增加是来自于具有分支的阿拉伯糖末端的增多.此结果将能更进一步地认识GlmU的功能以及当GlmU功能异常时对细菌造成的影响,这些都将为研究以GlmU为靶位点的药物对细菌的影响提供实验支持.
作者:张文利;辛毅;张健;史丽滨;马郁芳 刊期: 2007年第12期
目的:观察兔海水淹溺型肺水肿组织钠-钾ATP酶(Na+-K+-ATPase)活性变化与动脉血气变化的关系,探讨钠-钾ATP酶在海水淹溺肺水肿形成中的重要作用,为临床治疗提供实验依据.方法:将30只新西兰兔随机分为对照组(5只)及淹溺组(25只),淹溺组根据观察时间段分为10'、30'、60'、90'、120'组(每组5只),采用气管切开插入塑料导管、向气管内灌海水3 mL/kg、双肺自主通气的方法进行兔海水淹溺肺水肿模型复制.于各观察时间点进行血气分析,并采集肺组织标本,对肺组织匀浆钠-钾ATP酶进行测定.结果:兔海水淹溺肺水肿各时间点钠-钾ATP酶活性降低,动脉血气显示低氧和酸中毒,钠-钾ATP酶活性变化与动脉血气主要指标变化具有线性回归关系(P<0.01).结论:海水淹溺型肺水肿组织NKA活性与动脉血气的具有相关性,钠-钾ATP酶在海水淹溺肺水肿发生发展中具有重要作用.
作者:李王平;金发光;楚东岭 刊期: 2007年第12期
颧骨颧弓骨折是常见的面中部骨折之一,迄今为止,在其分类及诊治的选择上仍然存在一定争议,本文对目前颧骨颧弓骨折的分类及诊治的现状和进展作一综述,以期对临床工作提供参考.
作者:张勇;刘磊 刊期: 2007年第12期
目的:探讨大黄牡丹汤对TNBS诱导的小鼠实验性结肠炎的治疗作用及作用机理.方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)法制作实验性结肠炎小鼠模型,给予大黄牡丹汤治疗,观察小鼠的一般状态和DAI评分、结肠组织学变化.采用Luminex液相芯片系统检测血清中白介素1β、白介素4和肿瘤坏死因子α的含量.结果:大黄牡丹汤对TNBS结肠炎小鼠的一般状况及DAI评分有改善作用、并能缓解结肠局部的炎症,可降低血清中白介素1β和肿瘤坏死因子α的含量的水平.结论:大黄牡丹汤具有一定地防治TNBS所诱导的小鼠结肠炎的作用,其机制可能与抑制白介素1β和肿瘤坏死因子α的分泌有关.
作者:王青;周成梅;周联;曹柳英;梁瑞燕;王培训 刊期: 2007年第12期
目的:为了更清晰地显示胰岛的A细胞、B细胞和D细胞.方法:Zenker液固定,分别用苏木精-伊红和改良的Mallory氏法染色.结果:苏木精-伊红染色法,不易区分胰岛内三种细胞,而采用改良的Mallory氏染色方法,能够清晰地显示A细胞、B细胞和D细胞.结论:改良的Mallory氏染色法能够清楚的显示胰岛内三种细胞结构,为实验教学提供了优良的切片标本.
作者:柳洁;张雪梅;李莉 刊期: 2007年第12期
目的:通过检测IVF-ET患者取卵后血清雌激素水平的变化模式,探讨其在预测妊娠中的意义.方法:纳入因输卵管因素或男性因素行IVF-ET的患者62例(75个周期).对行IVF-ET的患者,在取卵后隔日监测血清雌二醇(E2)水平,并比较其在妊娠组与未孕组的差异.结果:取卵后,血E2水平在妊娠组与未孕组均迅速降低,在取卵后2,4,6,8d,两组间无统计学差异.在妊娠周期,血E2平均水平在取卵后10d降至低,之后逐渐上升.妊娠组与未孕组之间E2水平的差异从取卵后10d开始可以检测出(分别为816.4±537.6 pg/ml和189.5±69.3 pg/ml)(P<0.05).在未孕周期,10d的E2水平(189.5±69.3 pg/ml)显著低于8d(989.2±581.5 pg/ml)(P<0.05).结论:在取卵后8d和10d连续测2次血E2水平,有助于早期发现妊娠:妊娠患者的E2水平在10d出现上升预示妊娠,而10d出现剧陡降时,往往预示妊娠失败.
作者:黄仲英;李尚为;马黔红;李蕾;靳松 刊期: 2007年第12期
目的:研究酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对庆大霉素(GM)和顺铂(DDP)引起的体外培养肾小管上皮细胞损害的保护作用.方法:大鼠肾皮质经研磨、过网、胰蛋白酶消化,进行肾小管上皮细胞的体外培养.经Cytokeratin 18抗体进行鉴定后,用GM、DDP建立损伤模型,观察aFGF对损伤的肾小管上皮细胞的保护作用.结果:①经形态学观察、GM或DDP组与对照组比较,CAT、SOD、GSH-Px、Na+-K+-ATP酶活性下降,而NAG活性和NO、MDA升高(P<0.01或P<0.05),提示肾小管上皮细胞的培养和GM、DDP损伤的建模成功.②aFGF+GM或DDP组与GM组或DDP组比较,大多数生化和酶学指标有显著或非常显著性差异(P<0.05或P<0.01);而aFGF+GM或DDP组与对照组比较,CAT、NAG、GSH-Px、Na+-K+-ATP酶活性无显著性差异,但SOD活性下降、NO、MDA升高尚有显著性差异(P<0.05).结论:aFGF对GM、DDP损伤的肾小管上皮细胞有明显的保护作用.
作者:刘华钢;黄巨恩;刘丽敏;王慧杰;胡文娟;李校堃;肖健 刊期: 2007年第12期
目的:了解本地区社区感染支原体的药物敏感情况.方法:对门诊标本培养出的384例支原体进行药敏试验(微量肉汤法).结果:Uu对交沙霉素、克拉霉素及罗红霉素敏感性高,敏感率分别为98%、94%及93%;对环丙沙星、大观霉素耐药性高,敏感率分别为8%及11%.Mh对交沙霉素敏感率为89%、对大观霉素、多西环素、美满霉素的敏感率均为78%;对罗红霉素、红霉素耐药性高,敏感率分别为0%及11%.Uu合并Mh对交沙霉素、多西环素、美满霉素敏感性高,敏感率分别为85%、73%及69%,对红霉素、克拉霉素、大观霉素的敏感性均为0%,对罗红霉素、阿奇霉素、环丙沙星的敏感率均为4%.结论:支原体的敏感性存在时空差异,且不同类型的支原体对抗菌素的敏感性是不同的,应采用实验室结果而非经验指导用药.
作者:吴雄君;窦宇红;童明华;熊远香;梁鸿 刊期: 2007年第12期
目的:研究转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对人胰腺癌细胞系PANC-1增殖的影响.方法:首先利用MTT检测重组TGF-β1、CTGF及anti-CTGF抗体处理PANC-1细胞后,细胞的增殖状态,用流式细胞仪(Flow cytometer,FCM)检测转染pcDNA3.1(-)-CTGF后PANC-1细胞的凋亡情况,后利用RT-PCR检测TGF-β1作用PANC-1细胞后CTGF mRNA的表达.结果:TGF-β1和CTGF均呈浓度依赖性抑制PANC-1细胞增殖,加入anti-CTGF抗体可以取消TGF-β1对PANC-1细胞增殖的抑制作用;FCM结果显示pcDNA3.1(-)-CTGF质粒转染促进PANC-1细胞凋亡;RT-PCR则证明TGF-β1促进PANC-1细胞中CTGFmRNA表达.结论:TGF-β1可能通过促进CTGF表达来发挥抑制胰腺癌细胞PANC-1增殖的作用.
作者:苏燕;李宏伟;崔培林;王春玲;修瑞娟 刊期: 2007年第12期
目的:AMP激活的蛋白激酶(AMPK)在脑内作为多功能能量感受器发挥作用,主要协调代谢和能量的需要.脑神经元中AMPKα2亚基的含量明显高于α1亚基,本研究选择α2亚基作为对象,研究其在大肠杆菌中的表达情况,为以蛋白原核表达为前提的研究技术的应用提供实验依据.方法:大鼠AMPKα2蛋白编码区片段通过PCR方法从重组pcDNA3质粒中扩增后,克隆至带有λcI基因的pBT载体,构建融合表达载体pBT-AMPKα2.通过核苷酸序列测定证实结果正确后,转化pBT-AMPKα2入大肠杆菌XL-1 Blue MR菌株,IPTG诱导目的蛋白表达.结果:Western blotting显示AMPKα2-λcI融合蛋白表达,分子量约为89ku,与预期相符合.结果还表明AMPKα2-λcI融合蛋白以可溶性蛋白和不溶性包涵体两种形式存在,前者不稳定易发生降解,生成AMPKα2和λcI蛋白,分子量分别是62ku和27ku;后者稳定不发生降解.结论:AMPKα2亚基能以AMPKα2-λcI融合蛋白的形式在大肠杆菌中表达,这为今后以pBT-AMPKα2融合表达载体为工具利用大肠杆菌双杂交系统筛选AMPKα2的相互作用蛋白奠定基础.
作者:符庆瑛;高钰琪 刊期: 2007年第12期
目的:通过对营养性缺铁性贫血与注意缺陷多动障碍的病例研究,探讨两者之间的关系.方法:对258例NIDA的病因、临床表现和治疗进行临床分析,包括其中的31例中重度ADHD.结果:本组NIDA患儿病因主要为未及时添加富铁辅食、饮食结构不合理、消化道疾病、鼻衄等,临床主要表现为头晕、乏力、注意力不集中、记忆力减退等,对患者进行病因治疗以及服用生血宁片;ADHD的病因不明,临床表现为注意力不集中、活动过度、行为冲动等,通过综合治疗可以改善症状.NIDA的患儿ADHD的发病率较正常儿童为高.结论:NIDA与ADHD的关系密切.
作者:施卫萍;季加忠 刊期: 2007年第12期
母胎界面生物学与多种细胞形成的复合物及维持妊娠所必需的调节因子有关.目前被公认的调节因子是胎盘中的主要组织相容性复合体蛋白(MHC).MHC抗原在生殖过程中起到双重作用:首先,MHC在一些生物物种中可影响其杂交选择,对父母双方MHC抗原的匹配有一定的影响;其次MHC影响植入前期已经受精的卵子发育情况.MHC抗原表达对于胎儿逃避母体免疫排斥作用从而维持妊娠顺利进行是有利的.本文综述了MHC在母胎界面免疫调控的新研究进展.
作者:李明;史远刚;彭景槝 刊期: 2007年第12期
目的:对人幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H. pylori)36ku(OMP36)外膜蛋白进行基因克隆表达,探索研制H.pylori疫苗的新途径.方法:培养H. pylori菌株NCTC11637,采用酚:氯仿抽提和纯化基因组DNA.设计上下游引物,并以该基因组为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的基因片断.将目的基因和PET32a(+)同时经Hind Ⅲ和Kpn Ⅰ双酶切,纯化,连接后,转化含有目的基因的重组载体,酶切鉴定后进行序列分析.结果:经酶切,测序分析表明,插入的基因片断为987bp,与GenBank公布的H.pylori 26695、ATCC43504及J99序列相比较,同源性高达94%-96%,推测的氨基酸序列同源性为97%-99%,GenBank登录号059968.结论:成功克隆了H.pylori36ku的外膜蛋白的编码基因,其表达产物OMP36有望成为新的Hp疫苗候选分子,为H.pylori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了基础.
作者:郝渭滨;邵世和;王华;鞠小丽 刊期: 2007年第12期
目的:探讨骨保护素(osteoprotegerin OPG)mRNA在牙齿萌出过程中(牙合)方组织内的表达.方法:运用原位杂交方法检测大鼠下颌第一磨牙(牙合)方组织内OPG mRNA的表达.结果:大鼠下颌第一磨牙(牙合)方组织内牙囊成纤维细胞中OPGmRNA在牙齿骨内萌出阶段中期阳性表达,与萌出早、晚期比较差异有统计学意义(P<0.01),其中早期比晚期差异显著(P<0.01);成釉细胞中OPGmRNA在牙齿骨内萌出阶段中期阳性表达,与萌出早、晚期比较差异亦有统计学意义(P<0.01),早期与晚期没有显著性差异(P>0.05).结论:OPG mRNA在大鼠出生后下颌第一磨牙牙囊成纤维细胞、成釉细胞骨内萌出阶段中期表达强,牙齿萌出过程中可能通过OPGmRNA表达量的变化来调节牙齿的萌出.
作者:金星爱;贺佳倩;吕晶;薛欣;刘英群 刊期: 2007年第12期
目的:探讨原发性肠系膜肿瘤的诊断及治疗方法.方法:对各种类型的原发性肠系膜肿瘤的临床表现、术前检查及诊断、治疗等进行对比分析.结果:原发性肠系膜肿瘤临床表现多样、复杂,缺乏特异性诊断依据,但在B超引导下细针穿刺等有助于其诊断.实性肿瘤多为恶性,手术切除率低.囊性肿瘤多为良性,手术切除率高.结论:手术是治疗本病的唯一有效手段.
作者:陈少云;刘世德;向红 刊期: 2007年第12期
采用不同剂量山楂籽油对小鼠进行灌胃试验,研究其对血脂水平的影响.结果表明山楂籽油组小鼠的血清甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和动脉硬化指数(AI)均不同程度(P<0.05或P<0.01)低于高脂模型组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)却明显(P<0.01)高于高脂模型组,说明山楂籽油确具显著(P<0.05)降低小鼠血脂作用.
作者:范学辉;胡柏平;张清安 刊期: 2007年第12期
目的:构建其基因Otos的RNA干扰质粒载体,为研究Otospiralin在内耳的生理功能奠定基础.方法:在GenBank中查到大鼠Otos基因的序列,输入到相应的设计软件中,以此设计引物序列,经过PCR扩增,酶切后,克隆于pAVU6+27载体并行酶切鉴定.结果:构建的鼠Otos shRNA载体经过测序鉴定,所得和预期相符.结论:重组质粒pAVU6+27-Otos的成功构建为下一步研究打下良好的基础.
作者:卓贤露;鲁立;张学渊;姜振东;袁伟 刊期: 2007年第12期
目的:对药用植物和香料植物香紫苏叶片表面结构进行观察,同时对叶片表面的元素种类和含量进行分析.方法:利用Quanta 200扫描电镜对香紫苏叶片表面进行观察,利用EDAX-9l00能谱仪对选定区域进行元素种类和含量的线扫描和面扫描分析.结果:香紫苏叶片表面被覆大量表皮毛,且香紫苏叶片表皮毛中的C、O和K元素含量明显高于其他部位,其他元素分布则比较均匀.结论:电子探针可以快速对叶片表面特定区域以及特殊结构进行元素种类和含量分析.
作者:陈兆波;甘露;朱玉梅;余龙江;栗茂腾 刊期: 2007年第12期
目的:评价从椒目中提取和纯化获得的高纯度α-亚麻酸的抗血栓药理活性.方法:采用小鼠和大鼠在体血栓形成和肺动脉栓塞等模型,分别观察试药对血小板在动-静脉旁路中丝线上的沉积、肺动脉栓塞小鼠的死亡率、体外血小板聚集和出凝血时间等指标.结果:1.50mg/kg,100mg/kg和250mg/kg高纯度α-亚麻酸及混合不饱和脂肪酸(α-亚麻酸/亚油酸=1/1)给小鼠灌胃治疗10天,显著延长出、凝血时间(P<0.01);明显降低胶原蛋白-肾上腺素诱发性肺动脉栓塞小鼠的死亡率(P<0.01).2、35 mg/kg,70 mg/kg和175 mg/kg高纯度α-亚麻酸及混合不饱和脂肪酸给大鼠灌胃治疗10天,明显抑制血小板在动-静脉旁路中丝线上的沉积(P<0.01)和大鼠体外血小板聚集(P<0.01).结论:从椒目中提纯的高纯度α-亚麻酸,作为一种木本油脂新的药用资源和其混合不饱和脂肪酸均具有明显抗血小板聚集和溶栓药理作用,并具有一定量效关系;同时还发现,当α-亚麻酸/亚油酸=1/1时,其抗血栓药理活性优于同剂量高纯度的α-亚麻酸.
作者:杨倩;王四旺;王剑波;谢艳华;孙纪元;缪珊 刊期: 2007年第12期