学术投稿

大鼠Otos基因RNA干扰质粒体的构建

卓贤露;鲁立;张学渊;姜振东;袁伟

关键词:RNA干扰, Otos基因, 载体
摘要:目的:构建其基因Otos的RNA干扰质粒载体,为研究Otospiralin在内耳的生理功能奠定基础.方法:在GenBank中查到大鼠Otos基因的序列,输入到相应的设计软件中,以此设计引物序列,经过PCR扩增,酶切后,克隆于pAVU6+27载体并行酶切鉴定.结果:构建的鼠Otos shRNA载体经过测序鉴定,所得和预期相符.结论:重组质粒pAVU6+27-Otos的成功构建为下一步研究打下良好的基础.
现代生物医学进展杂志相关文献
  • 血立停胶囊对早孕大鼠RU486药流后子宫收缩的实验研究

    目的:研究血立停胶囊对早孕大鼠RU486药物流产后对子宫平滑肌收缩频率、收缩幅度及活动力变化的影响,旨在探讨血立停胶囊治疗药物流产后出血的作用机制.方法:选择妊娠Wistar大鼠,随机分为6组,即对照组,米非司酮组,大剂量血立停组,小剂量血立停组,催产素组,止血敏组.于妊娠第7天,开始相应处理,妊娠第14天分别监测以下指标后处死:在体子宫平滑肌收缩力,收缩幅度、收缩频率.结果:大剂量血立停可明显增强大鼠在体子宫平滑肌活动力、提高子宫平滑肌收缩频率、收缩幅度,与对照组比较差异有显著性(p<0.05).结论:血立停胶囊可增强大鼠子宫平滑肌兴奋性,从而起到对药物流产后阴道出血的治疗作用.

    作者:赵旭晔;段水竹;张永洛 刊期: 2007年第12期

  • 原发性肠系膜肿瘤的诊断与治疗

    目的:探讨原发性肠系膜肿瘤的诊断及治疗方法.方法:对各种类型的原发性肠系膜肿瘤的临床表现、术前检查及诊断、治疗等进行对比分析.结果:原发性肠系膜肿瘤临床表现多样、复杂,缺乏特异性诊断依据,但在B超引导下细针穿刺等有助于其诊断.实性肿瘤多为恶性,手术切除率低.囊性肿瘤多为良性,手术切除率高.结论:手术是治疗本病的唯一有效手段.

    作者:陈少云;刘世德;向红 刊期: 2007年第12期

  • 本刊被美国剑桥科学文摘(Proquest-CSA),美国乌利希国际期刊目录指南(U IPD)收录

    作者: 刊期: 2007年第12期

  • 大黄牡丹汤对实验性结肠炎小鼠血清细胞因子的影响

    目的:探讨大黄牡丹汤对TNBS诱导的小鼠实验性结肠炎的治疗作用及作用机理.方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)法制作实验性结肠炎小鼠模型,给予大黄牡丹汤治疗,观察小鼠的一般状态和DAI评分、结肠组织学变化.采用Luminex液相芯片系统检测血清中白介素1β、白介素4和肿瘤坏死因子α的含量.结果:大黄牡丹汤对TNBS结肠炎小鼠的一般状况及DAI评分有改善作用、并能缓解结肠局部的炎症,可降低血清中白介素1β和肿瘤坏死因子α的含量的水平.结论:大黄牡丹汤具有一定地防治TNBS所诱导的小鼠结肠炎的作用,其机制可能与抑制白介素1β和肿瘤坏死因子α的分泌有关.

    作者:王青;周成梅;周联;曹柳英;梁瑞燕;王培训 刊期: 2007年第12期

  • 山楂籽油降血脂作用研究

    采用不同剂量山楂籽油对小鼠进行灌胃试验,研究其对血脂水平的影响.结果表明山楂籽油组小鼠的血清甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和动脉硬化指数(AI)均不同程度(P<0.05或P<0.01)低于高脂模型组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)却明显(P<0.01)高于高脂模型组,说明山楂籽油确具显著(P<0.05)降低小鼠血脂作用.

    作者:范学辉;胡柏平;张清安 刊期: 2007年第12期

  • IVF-ET周期取卵后血清E2的变化模式及对预测妊娠的意义

    目的:通过检测IVF-ET患者取卵后血清雌激素水平的变化模式,探讨其在预测妊娠中的意义.方法:纳入因输卵管因素或男性因素行IVF-ET的患者62例(75个周期).对行IVF-ET的患者,在取卵后隔日监测血清雌二醇(E2)水平,并比较其在妊娠组与未孕组的差异.结果:取卵后,血E2水平在妊娠组与未孕组均迅速降低,在取卵后2,4,6,8d,两组间无统计学差异.在妊娠周期,血E2平均水平在取卵后10d降至低,之后逐渐上升.妊娠组与未孕组之间E2水平的差异从取卵后10d开始可以检测出(分别为816.4±537.6 pg/ml和189.5±69.3 pg/ml)(P<0.05).在未孕周期,10d的E2水平(189.5±69.3 pg/ml)显著低于8d(989.2±581.5 pg/ml)(P<0.05).结论:在取卵后8d和10d连续测2次血E2水平,有助于早期发现妊娠:妊娠患者的E2水平在10d出现上升预示妊娠,而10d出现剧陡降时,往往预示妊娠失败.

    作者:黄仲英;李尚为;马黔红;李蕾;靳松 刊期: 2007年第12期

  • MicroRNAs研究进展

    MicroRNAs是一组21-25 nt长的非编码蛋白质的短序列RNA,能通过碱基配对与mRNA分子的3'非翻译区相结合来降解mRNA或抑制靶基因的翻译.MicroRNAs的主要功能是调控基因的表达,在生物体的生长、发育及疾病发生中扮演着重要的角色.初绝大多数microRNA都是通过大量的克隆和测序发现的,信息学只用来验证克隆的序列是否具有发夹结构,然而这些方法无法检测低丰度或组织特异性的microRNAs.目前依赖计算机的精密的microRNAs预测技术和有效的生物学鉴定技术在microRNAs的识别及其功能的阐明方面起着极其重要的作用.本文主要对microRNAs的生物信息学预测及鉴定技术进行综述.

    作者:李广平;邱长春 刊期: 2007年第12期

  • 尘螨变应原Der p1浓度与哮喘患者血清螨特异性抗体的季节消长

    目的:探讨哮喘患者血清抗体及患者室内尘螨抗原浓度的季节变化规律.方法:2005年9月、2005年12月、2006年3月、2006年6月用ELISA法检测哮喘患者卧室尘样中DerP 1浓度,同步检测患者外周血总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2和s-IgG4.结果:哮喘患者血清总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2和s-IgG4均高于正常对照组,差异均具显著性(P<0.01);比较患者血清总IgE、s-IgE及s-IgG1、s-IgG2、s-IgG4四次检测值,差异均具显著性(P<0.01),患者血清总IgE、s-IgE在12月份检测值高、6月份检测值低,s-IgG1以6月份高、3月份低,s-IgG4在3月份高、6月份低.统计表明,患者卧室DerP1浓度四次检测值差异具有显著性(P<0.01),以2006年3月和2005年12月为高.结论:哮喘患者血清总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2和s-IgG4和卧室尘螨抗原浓度呈季节变化,IgG1的变化与尘螨抗原浓度的变化趋势相反,IgG4的变化与尘螨抗原浓度的变化趋势一致.

    作者:梁海珊;崔玉宝;李瑛强;朱洪 刊期: 2007年第12期

  • 抗金黄色葡萄球菌卵黄抗体的制备及活性研究

    目的:制备金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体并考察其活性.方法:采用灭活的金黄色葡萄球菌免疫产蛋母鸡,通过水稀释法、硫酸铵和硫酸钠盐析及凝胶过滤法分离、纯化抗体.抗体效价测定及体外抑菌试验分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和液体培养基比浊法.结果:纯化所得抗体纯度达95.10%,回收率为20.08%.抗体对金黄色葡萄球菌具有特异性,效价高可达1:6400.体外抑菌试验表明,抗体抑菌活随IgY浓度的增加而增强,当特异性IgY的浓度为10mg/ml时,能完全抑制细菌生长.结论:抗体制备及纯化所述方法简便、可行,所制抗体具有特异性和抑菌活性.

    作者:郭洁;甄宇红;李小宇;王宇;金礼吉;徐永平 刊期: 2007年第12期

  • 香紫苏叶片表面微区元素成分分析研究

    目的:对药用植物和香料植物香紫苏叶片表面结构进行观察,同时对叶片表面的元素种类和含量进行分析.方法:利用Quanta 200扫描电镜对香紫苏叶片表面进行观察,利用EDAX-9l00能谱仪对选定区域进行元素种类和含量的线扫描和面扫描分析.结果:香紫苏叶片表面被覆大量表皮毛,且香紫苏叶片表皮毛中的C、O和K元素含量明显高于其他部位,其他元素分布则比较均匀.结论:电子探针可以快速对叶片表面特定区域以及特殊结构进行元素种类和含量分析.

    作者:陈兆波;甘露;朱玉梅;余龙江;栗茂腾 刊期: 2007年第12期

  • Mallory氏胰岛细胞染色法的改良

    目的:为了更清晰地显示胰岛的A细胞、B细胞和D细胞.方法:Zenker液固定,分别用苏木精-伊红和改良的Mallory氏法染色.结果:苏木精-伊红染色法,不易区分胰岛内三种细胞,而采用改良的Mallory氏染色方法,能够清晰地显示A细胞、B细胞和D细胞.结论:改良的Mallory氏染色法能够清楚的显示胰岛内三种细胞结构,为实验教学提供了优良的切片标本.

    作者:柳洁;张雪梅;李莉 刊期: 2007年第12期

  • 聚合酶链反应

    PCR是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术.它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出的优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定.过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成.PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑.

    作者: 刊期: 2007年第12期

  • 小儿腹腔镜肾上腺切除术对IL-6、内皮素和C反应蛋白水平的影响

    目的:探讨小儿开腹肾上腺切除术与腹腔镜肾上腺切除术两种方法对患儿血IL-6、C反应蛋白水平和内皮素水平的影响,从而比较两种术式对患儿手术应激的影响程度.方法:选择开腹肾上腺切除术患儿25例,腹腔镜肾上腺切除术患儿17例,分别于术前和术后抽取静脉血检测血IL-6、C反应蛋白和内皮素的水平并进行比较.同时比较两组手术时间、术中出血量及术后住院时间.结果:开放手术组患儿术后血IL-6、C反应蛋白和内皮素的水平明显高于腹腔镜手术组,而术前两组间无统计学差异.腹腔镜组患儿手术时间术中出血量及住院时间均小于后者.结论:腹腔镜肾上腺切除术与开腹肾上腺切除术相比,手术刺激小,恢复快.

    作者:周宇;王禾;张更;秦卫军;宋斌;王福利 刊期: 2007年第12期

  • 胰岛素抵抗在前列腺癌治疗前后动态变化的临床观察

    目的:探讨胰岛素抵抗程度在前列腺癌治疗过程中动态变化及胰岛素抵抗程度与前列腺癌预后的关系.方法:选择前列腺癌患者50名,平均年龄72岁.将前列腺癌患者根据治疗方法分为前列腺癌根治术组、手术去势组、药物去势组;根据有无复发转移分为复发转移组、无复发转移组.采用己糖激酶法测定空腹葡萄糖,放免法测定空腹胰岛素(Fasting serum insulin FINS)水平.运用HOMA模型中的胰岛素抵抗计算公式计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index IRI).组间比较采用配对t检验.结果:前列腺癌患者在手术后的胰岛素抵抗指数明显下降,与手术前胰岛素抵抗指数存在统计学差异(P<0.05).前列腺癌根治组的IRI值和手术去势组与药物去势组都存在统计学差异(P<0.05),但手术去势组和药物去势组两组之间不存在统计学差异(P>0.05).前列腺癌治疗后无复发转移组的IRI值明显低于复发转移组,两组间IRI存在统计学差异(P<0.05).结论:前列腺癌患者胰岛素抵抗程度与肿瘤治疗经过、效果有关.胰岛素抵抗指数有助于前列腺癌患者判断治疗效果,判断预后.

    作者:徐强;姚茂银 刊期: 2007年第12期

  • glmU基因敲除后对分枝杆菌细胞壁中聚糖影响的初步分析

    应用已构建的glmU基因敲除的耻垢分枝杆菌作为实验模型,对细胞壁中的聚糖的组成成份和结构进行分析.气相色谱与高效液相Dionex的结果共同说明了在mc2155 glmU KOT菌株的细胞壁内,当缺失活性GlmU时,阿拉伯糖含量增加,且其增加是来自于具有分支的阿拉伯糖末端的增多.此结果将能更进一步地认识GlmU的功能以及当GlmU功能异常时对细菌造成的影响,这些都将为研究以GlmU为靶位点的药物对细菌的影响提供实验支持.

    作者:张文利;辛毅;张健;史丽滨;马郁芳 刊期: 2007年第12期

  • 沙井地区384例支原体药敏试验结果及分析

    目的:了解本地区社区感染支原体的药物敏感情况.方法:对门诊标本培养出的384例支原体进行药敏试验(微量肉汤法).结果:Uu对交沙霉素、克拉霉素及罗红霉素敏感性高,敏感率分别为98%、94%及93%;对环丙沙星、大观霉素耐药性高,敏感率分别为8%及11%.Mh对交沙霉素敏感率为89%、对大观霉素、多西环素、美满霉素的敏感率均为78%;对罗红霉素、红霉素耐药性高,敏感率分别为0%及11%.Uu合并Mh对交沙霉素、多西环素、美满霉素敏感性高,敏感率分别为85%、73%及69%,对红霉素、克拉霉素、大观霉素的敏感性均为0%,对罗红霉素、阿奇霉素、环丙沙星的敏感率均为4%.结论:支原体的敏感性存在时空差异,且不同类型的支原体对抗菌素的敏感性是不同的,应采用实验室结果而非经验指导用药.

    作者:吴雄君;窦宇红;童明华;熊远香;梁鸿 刊期: 2007年第12期

  • 补肾健脾化瘀法增强rHuEPO治疗肿瘤化疗后贫血疗效研究

    目的:观察补肾健脾化瘀法联合基因重组的促红细胞生成素(rHuEPO)治疗中晚期恶性肿瘤化疗相关性贫血的临床疗效,以寻找进一步提高常规剂量的rHuEPO治疗恶性肿瘤贫血疗效的方法.方法:采用前瞻、随机、对照研究,将55例气血两虚型的恶性肿瘤化疗后贫血患者,随机分为研究组(A组)和对照组(B组),研究组给予补肾健脾方联合常规剂量的rHuEPO,对照组仅给予常规剂量的rHuEPO.记录治疗前及治疗后14日、28日、42日、56日时的血红蛋白(Hb)值,观察患者生活质量(QOL)改善情况和不良反应情况.结果:研究组与对照组患者的治疗后Hb、QOL与治疗前相比均有上升,研究组治疗贫血的有效率69.23%,而对照组为41.38%,两组疗效有统计学差异(X2=4.29,p=0.04);发生促红细胞生成素抵抗的比例研究组与对照组有差异(P<0.05),并且在神疲气短、头晕眼花、纳呆消瘦等症状改善方面,研究组与对照组比较,更有优势,差异有统计学意义(P<0.05).结论:健脾补肾化瘀法联合常规剂量的rHuEPO与单用rHuEPO相比,治疗气血两虚血瘀型恶性肿瘤患者化疗后贫血的疗效有进一步提高,发生促红细胞生成素抵抗的比例较低,且贫血症状改善更明显(P<0.05);表现出中医药疗法的优势,为化疗按时进行提供保障.

    作者:陆崇;刘魁凤;曾小烈;温宗秋;舒阳春;莫贤毅;丁颖 刊期: 2007年第12期

  • 骨折电流疗法的改良

    目的:针对电流治疗骨折等疾病时存在的问题,提出相应的改进方法.方法:分析以往使用电流对骨折等疾病进行治疗时存在的电化学副作用、创口易于感染、重复施术不便等问题,提出相应的诸如使用溶液导电、隔离电解物、使电极与创口闭合生长等改进方法;并提出将电流治疗与药物治疗相结合的骨科疾病电流疗法改良方案.结果:将电流与药物相结合治疗骨折等疾病是很有可行性的治疗方法,本法不仅克服了已往疗法存在的一些问题,还为骨伤药物直接进入病患部位提供了有效的平台,使骨折、骨不连等疾病能够快速愈合.今后应加强研究骨折愈合各阶段所需的直接注射药物及其配比,完善电流-药物复合电极使用方法,以便与本法尽快进入临床实践.结论:将电流与药物相结合治疗骨折等疾病是很有可行性的治疗方法.

    作者:谢明念 刊期: 2007年第12期

  • NCTC11637外膜蛋白36ku基因的克隆及序列分析

    目的:对人幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H. pylori)36ku(OMP36)外膜蛋白进行基因克隆表达,探索研制H.pylori疫苗的新途径.方法:培养H. pylori菌株NCTC11637,采用酚:氯仿抽提和纯化基因组DNA.设计上下游引物,并以该基因组为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的基因片断.将目的基因和PET32a(+)同时经Hind Ⅲ和Kpn Ⅰ双酶切,纯化,连接后,转化含有目的基因的重组载体,酶切鉴定后进行序列分析.结果:经酶切,测序分析表明,插入的基因片断为987bp,与GenBank公布的H.pylori 26695、ATCC43504及J99序列相比较,同源性高达94%-96%,推测的氨基酸序列同源性为97%-99%,GenBank登录号059968.结论:成功克隆了H.pylori36ku的外膜蛋白的编码基因,其表达产物OMP36有望成为新的Hp疫苗候选分子,为H.pylori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了基础.

    作者:郝渭滨;邵世和;王华;鞠小丽 刊期: 2007年第12期

  • 绞股蓝对电休克大鼠记忆障碍的改善作用

    绞股蓝又名七叶胆,为葫芦科绞股蓝属植物.它具有多种药理活性,并有实验证明其具有增强学习记忆的功能.本实验主要验证绞股蓝对电休克法造成的SD大鼠记忆障碍的改善作用.实验方法分为四个过程:①建立大鼠的空间分辨学习记忆;②采用电休克的方法破坏大鼠的记忆,建立记忆遗忘的大鼠模型;③把记忆遗忘的大鼠模型随机分成两组,分别用2.5%绞股蓝提取物的溶液和O.9%生理盐水(每天每只8ml/100g)对两组模型大鼠进行灌胃饲养8天;④观察测试大鼠的空间分辨学习记忆的改善情况,用Y型迷宫模型测试出记忆错误次数、正确率、测试总时间和主动回避次数等参考指标.结果表明绞股蓝组与对照组相比,错误次数较少,正确率较高,测试总时间较短,主动回避次数较多.由此证明绞股蓝对SD大鼠记忆障碍有明显的改善作用.

    作者:郑新铃;徐陶;谢丽霞 刊期: 2007年第12期

现代生物医学进展杂志

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主管:黑龙江省卫生厅

主办:黑龙江省森工总医院 哈尔滨医科大学附属第四医院