学术投稿

病理石蜡标本基因检测中DNA提取(离心柱型)的几点体会

陈顺平;苏海燕;吴文乔

关键词:DNA提取, 基因, 病理, 石蜡标本
摘要:随着分子生物技术在临床中开展,其所覆盖的检测疾病的范围越来越广,不仅在常规医学检验中,近年来随着临床靶向治疗的普及,病理肿瘤标本的相关基因检测也得到发展。然而,什么样的病理标本适合做基因检测?怎么才能够得到更多更好的DNA呢?是目前我们病理科开展此项目所面对的问题。经过我们不断实践,现将几点体会介绍如下。
实验与检验医学杂志相关文献
  • 实验与检验医学开设稿件处理“绿色通道”

    所有来稿经本刊确认已正式办理投稿手续,本刊即刻启动审稿程序。本刊所有稿件均需三审:编辑初审、专家二审、主编终审。只有三审均通过的稿件才可刊用。本刊审稿周期约为3个月,对于可以刊用的稿件,本刊于3个月内通知文章第一作者办理用稿手续;对各类基金资助课题论文,硕士、博士研究生论文,实行绿色审稿通道,快可于投稿后30天内正式刊发。作者在接到修稿通知后,请及时将修改后电子文本发至本刊电子信箱(应注明稿号)。根据本刊与作者签署的版权协议,本刊对稿件拥有协议中的权利和义务。对不用稿件,我刊不予退稿。

    作者:《实验与检验医学》编辑部 刊期: 2015年第03期

  • 4690株医院感染病原菌分布特征调查

    目的:了解各类临床标本中常见病原菌的分布特征,指导临床医师经验性用药,为临床抗感染争取时间。方法收集夷陵医院2012年1月至2013年12月各科送检的标本,采用法国梅里埃ATB微生物鉴定分析系统和API板条结合手工方法进行菌株鉴定,所得的数据用 WHONET5.4软件完成统计分析。结果两年间我院共分离出病原菌4690株,其中革兰阴性菌2711株,占57.80%,革兰阳性菌1979株,占42.20%。大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌、凝固酶阴性葡萄球菌居前5位,分别为19.66%、14.97%、13.48%、11.07%和7.38%。呼吸道分泌物中肺炎链球菌和卡他莫拉菌检出率较高,伤口分泌物及脓液中大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌较多,血培养检出的主要是大肠埃希菌和凝固酶阴性葡萄球菌,尿液中大肠埃希菌多,胸腹水等无菌体液中以大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌多见。结论我院医院感染病原菌分布有其自身的特征,实验室应及时准确地回报检验结果,定期通报感染病原菌的菌种分布、变迁规律及药敏结果,为临床抗感染治疗提供有效的理论依据。

    作者:邹晓艳;杨德远;孔昌盛;朱琳娜 刊期: 2015年第03期

  • 宫颈癌患者腔内放疗合并局部真菌阴道感染分析

    目的:了解我院宫颈癌患者腔内放疗合并局部真菌阴道感染菌种分布及其耐药特征,以便指导临床合理用药。方法对本院2009年1月-2014年12月妇科宫颈癌患者实施腔内后装放疗期间出现局部感染的病例695例,采集阴道分泌物进行真菌培养和药敏试验并进行统计分析。结果共分离获得真菌89株,真菌分离率为12.8%。以白念珠菌为主(62株,69.7%),其次是光滑念珠菌(12株,13.5%)及热带念珠菌(9株,10.1%)。分离的真菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、制霉菌素耐药率较低,而对咪康唑、益康唑、氟康唑、伊曲康唑均有不同程度的耐药。结论宫颈癌患者腔内放疗后阴道分泌物真菌分离率较高,应引起临床医务人员高度重视;主要分离真菌对临床常用抗真菌药物有一定的耐药性,临床应依据药敏试验合理使用抗真菌药物。

    作者:王冰;郎梅春;雷红梅 刊期: 2015年第03期

  • 美罗培南致严重血小板减少症1例

    1病例介绍患者,男性,90岁,因慢性阻塞性肺疾病、高血压长期住院。于2014年9月6日夜间始出现咳嗽、咳黄痰,第3日出现发热。查体:体温37.8℃,脉搏110次/min,呼吸30次/min,血压130/70mmHg,急性面容,两肺呼吸粗,两肺可闻及散在干湿性啰音;心率110次/min,律齐。辅助检查:血象:白细胞计数11.2×109/L,中性0.82,淋巴0.146,血小板112×109/L。 CRP 78.2mg/L。床边胸片提示:两肺感染(两肺可见散在斑片影)。依据上述诊断肺部感染,患者既往慢性阻塞性肺病,根据经验性治疗,给予0.9%氯化钠注射液100ml+注射用美罗培南1g(美平,产品批号:2134c)静滴3次/d,经抗感染后患者咳嗽、咳痰明显改善,体温正常。患者于2014年9月9日无明显诱因下出现双上肢散在瘀斑,急查凝血功能正常,复查血象:白细胞计数3.1×109/L,血小板32×109/L。立即停用美罗培南,因考虑患者呼吸道明显改善更换头孢他啶降阶梯治疗,予以粒细胞刺激因子100μg 皮下注射、维生素K 110mg静滴1次/d。每日检测血象,第2日白细胞恢复正常,血小板为38×109/L,经予以利可君及多次输注机采血小板(共输40单位)血小板逐渐上升,2014年9月25日血小板升至104×109/L,肢体瘀斑消失。

    作者:吴莹;肖明生 刊期: 2015年第03期

  • PDCA循环在缩短冰冻切片病理报告时间中的应用

    目的:探讨PDCA循环在缩短冰冻切片病理报告中的应用效果。方法收集282例冰冻切片检查病例,成立质量控制小组,实行PDCA循环管理,分析原因,采取改进措施,通过计划、实施、检查、处理4个阶段进行实施,与PDCA循环实施后290例冰冻切片检查病例进行对比。结果通过PDCA循环的质量管理,使冰冻切片制片时间及报告时间得到明显的改进。结论 PDCA循环应用到缩短冰冻切片病理报告时间的实施过程中,不仅缩短了冰冻切片病理报告的时间,同时也使整个过程和环节得到控制,优化了整个流程,取得了良好的成绩,值得推广。

    作者:黄金长;张功亮;郭广秀;王建;彭芳 刊期: 2015年第03期

  • 河源地区孕中期唐氏综合症血清筛查结果分析

    目的:探索河源地区孕妇唐氏综合症的风险状况,分析孕中期唐氏综合症筛查在预防出生缺陷中的临床价值。方法用时间分辨法检测5297例孕中期(14~20+6)母体血清的甲胎蛋白(AFP),游离绒毛膜促性腺激素(Free-βHCG)和游离雌三醇(uE3)浓度,结合孕周、年龄和体重,运用专业的产筛软件进行胎儿风险评估。结果筛查的5297例孕妇中,唐氏综合症高危362例,阳性率为6.83%;神经管缺陷(NTD)高危24例,阳性率为0.45%;18-三体综合症高危23例,阳性率为0.43%;35岁以上者总阳性率高于35岁以下者(P<0.05)。结论孕中期血清学“三联法”(AFP+Free-βHCG+uE3)筛查胎儿唐氏综合症是一种无创性手段,普遍开展唐氏综合症筛查可预防出生缺陷,提高出生人口素质。

    作者:刘运华 刊期: 2015年第03期

  • 早期肾脏损害尿液检测指标的研究近况

    肾脏损害是指由于肾脏小动脉痉挛、硬化、退化、退变导致肾脏缺血、缺氧、肾实质纤维化,出现蛋白尿,因而肾功能出现进行性减退,导致尿毒症等病的发生。早期肾病往往没有明显的症状和体征,临床体征与常规检测指标多不典型,给早期诊断带来困难,导致很多慢性肾病患者就医时已经到达终末期肾病,失去了治疗的佳时机。因此,早期肾脏损害尿液指标的检测对于肾脏病的早发现、早预防、早治疗起着重要的作用。近年来,多种肾损害标志物被发现,相关检测手段和评价方法不断改进,现对早期肾脏损害尿液检测指标的发展近况作一综述。

    作者:戴芳(综述);唐亚平(审校) 刊期: 2015年第03期

  • 上海浦东地区成年人血清前白蛋白参考范围的建立

    目的:建立上海浦东地区健康成年人血清前白蛋白(PA)的正常参考值范围。方法采用免疫透射比浊法测定1869例健康成人PA的浓度,并按年龄、性别进行分组统计。结果 PA参考值男女之间差异有统计学意义(P<0.05)。男性≤60岁组为263.6~371.6mg/L,>60岁组为239.4~357.4 mg/L。女性≤50岁组为214.7~304.7mg/L,>50岁组为224.7~324.7。男性组除>60岁组(P<0.05)外,其他各组之间差异无统计学意义;女性组除>50岁组(P<0.05)外,其他各组之间差异无统计学意义。结论上海浦东地区健康成年男女PA正常参考值范围不同。各实验室应根据不同的生理条件和不同的检测系统和方法建立合理的参考值范围。

    作者:顾峰;汪瑞忠 刊期: 2015年第03期

  • 维生素D临床应用的研究进展

    维生素D是人体必需的脂溶性维生素,它具有调节钙磷的基础功能,全国健康与营养调查研究(NHANES)的新统计数据表明,美国90%以上的有色人种(黑人、西班牙裔和亚裔)和近3/4的白人均缺乏维生素D[25(OH)D<30ng/m1];其患病率接近10年前相同人群的2倍。近年来的研究发现维生素D缺乏与很多疾病如心血管疾病、免疫系统性疾病、肿瘤、糖尿病等有着密切的关系,通过补充维生素D,可以干预这些疾病的发生发展。

    作者:张慧(综述);王玉明(审校) 刊期: 2015年第03期

  • 1例疑难血型和疑难配血分析

    在临床工作中,我们会遇到ABO血型正反定型不合而导致血型鉴定和交叉配血困难的情况。那么,我们如何做到正确定型,及时配血呢?现就一例典型病例分析如下。

    作者:张勇;刘剑荣;陈华良;蔡丽娟 刊期: 2015年第03期

  • 2114例泌尿生殖道支原体培养结果及其药敏分析

    目的:了解本地区泌尿生殖道支原体感染及14种抗生素药敏情况。方法采集2114例疑似泌尿生殖道感染患者的标本进行解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)液体培养及药敏试验。结果2114例疑似泌尿生殖道感染患者中有905例检出支原体,总检出率为43.55%,其中男性189例,女性716例。感染Uu为640例,占71.0%,感染Mh 22例,占2.2%、Uu+Mh混合感染243例,占26.8%。敏感率较高的前三种抗生素为强力霉素92.9%、美罗霉素91.5%、交沙霉素68.7%。结论女性检出率明显高于男性;感染模式以Uu为主,混合Uu+Mh也不能忽视,各种属支原体对抗生素敏感性存在差异,临床应根据检出类型及药敏情况进行治疗。

    作者:林城;梁坤铃;何晓明 刊期: 2015年第03期

  • S基因进化树分析证实乙型肝炎病毒存在性传播途径

    目的:从分子水平证实乙型肝炎病毒(HBV)存在性传播途径。方法本研究共收集36对婚检时女方乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性而男方HBsAg阴性的夫妻,随访4年后其中10对夫妻中男方HBsAg变为阳性,此10对夫妻作为病例组,随机选择10名无关男性HBV感染者与病例组中女方组成对照组。提取所有实验对象血清中的HBV-DNA,应用巢式PCR扩增HBV S基因,并用高通量测法对HBV S基因进行测序。分别对病例组、对照组中男、女性双方HBV S基因进行序列比对,对所有30个HBV S基因序列进行基因进化树分析。结果病例组S基因序列相似性高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。 S基因进化树分析显示10对夫妻中,5对夫妻间进化距离明显短于女方与无关男性HBV感染者间进化距离。2对夫妻间进化距离和女方与无关男性HBV感染者间进化距离基本相同,3对夫妻间进化距离长于女方与无关男性HBV感染者间进化距离。结论 HBV存在性传播途径,可经性途径由女性传染给男性。

    作者:李康;颜和芳;赵蔚;罗艺;徐文莉;廖长征;张洪德 刊期: 2015年第03期

  • 乙型肝炎肝硬化患者血清糖类抗原-125水平变化及其临床应用价值

    目的:探讨乙型肝炎肝硬化患者血清糖类抗原-125(CA-125)与Child-Pugh分级、腹水量的关系。方法选择100例乙型肝炎肝硬化患者和30例健康体检者作为研究对象,采用电化学发光法检测所有研究对象血清CA-125水平。结果(1)乙型肝炎肝硬化组血清CA-125水平显著高于健康体检组,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)不同Child-Pugh分级患者血清CA-125差异有统计学意义(P<0.01),C级患者血清CA-125显著高于B级患者(P<0.05),B级患者血清CA-125显著高于A级患者(P<0.05)。⑶不同腹水量患者血清CA-125差异有统计学意义(P<0.01),大量腹水组血清CA-125显著高于中量腹水组、少量腹水组(P<0.05),中量腹水组与少量腹水组血清CA-125显著高于无腹水组(P<0.05),中量腹水组与少量腹水组血清CA-125差异无统计学意义(P>0.05)。(4)乙型肝炎肝硬化组血清CA-125水平与ALB呈明显正相关(P<0.01),与ALT、TBi和PT无相关(P>0.05)。结论乙型肝炎肝硬化患者血清CA-125水平存在不同程度的升高,可作为反映乙型肝炎肝硬化患者肝功能损害程度指标之一,同时血清CA-125水平也可作为乙型肝炎肝硬化患者腹水定量的一种指标。

    作者:黄书明;吴玉兰 刊期: 2015年第03期

  • 抗-M致献血者ABO血型鉴定正反定型不符分析

    抗-M是MN血型系统常见抗体,大多属IgM型,在室温盐水介质下可发生肉眼可见凝集,能引起ABO血型鉴定正反定型不符,造成血型鉴定和交叉配血试验困难。我们于2013年1月至2014年3月对本中心检验科ABO血型鉴定正反定不符的送检样本进行不规则抗体筛查与鉴定,发现IgM型抗-M阳性15例,现报告如下。

    作者:何华庆;李国良;韩玲;黄丽红;熊莉;周小英 刊期: 2015年第03期

  • 阿托伐他汀对糖尿病肾病合并高胆固醇患者血同型半胱氨酸、纤维蛋白原水平的影响

    目的:研究阿托伐他汀对糖尿病肾病合并高胆固醇患者血同型半胱氨酸(Hcy)、纤维蛋白原(Fg)水平的影响。方法选择150例诊断明确的糖尿病肾病合并高胆固醇患者,随机分为两组:A组75例,给予糖尿病基础治疗;B组75例,在糖尿病基础治疗上增加口服阿托伐他汀10mg/d,连续服用12周。分别于治疗前、后检测患者血Hcy、Fg、空腹葡萄糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、尿微量白蛋白(U-MA)、尿肌酐(U-CR),并计算尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)。结果治疗前,两组患者Hcy、Fg、FPG、HbA1C、TC、TG、HDL-C、LDL-C、U-MA、UACR相比差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前相比,B组患者FPG、HbA1C、Hcy、Fg、TC、TG、LDL-C、U-MA、UACR在治疗后显著下降,HDL-C则显著上升(P<0.05)。与治疗前相比,A组患者FPG、HbA1C、U-MA、UACR在治疗后均显著下降(P<0.05),其余6个指标治疗前后相比差异无统计学意义(P>0.05)。 B组患者治疗前后上述10个指标的变化幅度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病肾病合并高胆固醇患者使用阿托伐他汀后,不仅能降低血脂,还能降低血Hcy、Fg水平,发挥调脂以外的血管保护作用,延缓糖尿病肾病进展。

    作者:陈贤;李珍宇;孙秀雯;古伟奇 刊期: 2015年第03期

  • 传染性单核细胞增多症患儿细胞免疫功能变化及意义

    目的:研究儿童传染性单核细胞增多症(IM)不同时期外周血CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞(DNT)与T细胞亚群CD3+、CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+细胞的变化及规律,并分析其临床意义。方法应用流式细胞仪检测63例IM患儿急性期及恢复期外周血DNT细胞与T淋巴细胞CD3+、CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+细胞百分率,并与30例健康对照组儿童比较。结果急性期患儿DNT细胞、CD3+T细胞、CD3+CD4-CD8+T细胞百分比均显著高于对照组(P<0.01),CD3+CD4+CD8-T细胞百分比显著低于对照组(P<0.01)。恢复期患儿DNT细胞、CD3+T细胞、CD3+CD4+CD8-T细胞、CD3+CD4-CD8+T细胞与健康对照组相比无显著意义(P>0.05)。结论 IM患儿存在细胞免疫功能异常,为IM患儿临床免疫治疗提供理论依据。

    作者:刘志强;段荣;柯江维 刊期: 2015年第03期

  • 江西省表观健康猪群携带猪链球菌状况分析

    目的:了解江西省表观健康猪群携带猪链球菌的情况,为有效防控猪链球菌病提供科学依据。方法选取景德镇市、崇仁县为采样点,采集表观健康猪群鼻咽拭子和扁桃体进行猪链球菌病原分离鉴定。结果共采集表观健康猪群鼻咽拭子和扁桃体样本301份,检出2株猪链球菌2型,其毒力基因mrp、sly、ef均为阴性。结论本次调查中江西省表观健康猪携带猪链球菌的带菌率为0.66%。

    作者:陈福辉;程慧健;杨梦;潘欢弘;熊长辉;郑翰 刊期: 2015年第03期

  • 冠心病患者血清同型半胱氨酸水平分析

    目的:探讨冠心病(CHD)患者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平与CHD病变程度、病变支数的相关性。方法根据病变程度将CHD患者分为稳定性心绞痛(SAP)、不稳定性心绞痛(UAP)、急性心肌梗死(AMI)组;根据病变支数分为单支病变、双支病变、3支病变组,测定CHD各组和健康对照者血清Hcy水平,进行比较分析。结果 SAP、UAP、AMI各组和单支病变、双支病变、3支病变各组的血清Hcy水平逐渐升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),并且各组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Hcy水平高低与CHD的病变程度、病变支数密切相关,定期监测血清Hcy水平更有助于CHD的预防、诊断及预后。

    作者:姜振伟;黄方 刊期: 2015年第03期

  • 285例老年低尿酸血症患者病因分析

    目的:对老年低尿酸血症患者进行分析,探讨其降低的可能原因。方法采用尿酸酶-过氧化物酶偶联法检测285例患者血清尿酸浓度。结果285例老年患者血尿酸浓度均低于健康对照组,各疾病组血尿酸浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论老年低尿酸血症多见于恶性肿瘤、肝肾疾病、颅脑疾病、糖尿病等,临床上应引起重视。

    作者:朱圣军 刊期: 2015年第03期

  • 东莞地区2960例女性宫颈脱落细胞HPV基因分型结果分析

    目的:了解东莞地区女性人乳头状瘤病毒(HPV)感染情况及21分型分布特点。方法采用基因扩增及导流杂交技术,对2960例患者的宫颈脱落细胞进行了HPV-DNA基因分型检测,并对其感染率、亚型分布及其与年龄相关性进行统计学分析。结果2960例标本中总阳性率为28.04%(830/2960),其中感染前五位亚型分别为16、52、58、Cp8304、11;830例HPV阳性标本中共检出1090株HPV病毒,其中高危型占88.17%(961/1090),分别以16、52、58为主,低危型占11.83%(129/1090),以11、6为主;单一亚型感染率为78.80%(654/830),多重感染率为21.20%(176/830),且以二重感染、三重感染为主;不同年龄段HPV感染率不同,其中20~30岁、>50岁年龄段阳性率较高,同其它年龄段相比有统计学意义(P<0.01)。结论东莞地区HPV感染率较高,其亚型分布及感染年龄段有明显特征性,为当地制订HPV防治制度提供理论依据。

    作者:张七二;钟锦开;蒲荣;邝树华;王占科 刊期: 2015年第03期

实验与检验医学杂志

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主管:江西省卫生厅

主办:江西省医学会