学术投稿

稳定沉默STAT3的HPV16阳性宫颈癌细胞株的建立

沈青丽;何耀娟;郭凯敏;叶明;林仲秋

关键词:宫颈肿瘤, 癌, DNA结合蛋白质类, 人乳头瘤病毒16, RNA干扰, 逆转录病毒科
摘要:目的:建立针对人信号传导与转录激活因子3(STAT3)的小发夹RNA(shRNA)逆转录病毒表达载体,建立稳定感染的人乳头瘤病毒16(HPV16)阳性宫颈癌细胞系,以进一步探讨STAT3在HPV16阳性宫颈癌发生和发展中的作用。方法:设计合成3条靶向STAT3基因的小干扰RNA(siRNA),从中选择1条具有佳干扰效果的siRNA,构建STAT3-shRNA载体pSUPERretro-puro-STAT3,用293FT细胞包装质粒产生STAT3 shRNA逆转录病毒,感染HPV16阳性的宫颈癌细胞株SiHa和CaSki细胞后,通过嘌呤霉素筛选2周,约3 d传代1次,建立稳定细胞株,稳定沉默STAT3的细胞株命名为SiHa/STAT3-sh和CaSki/STAT3-sh。通过实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)分别从mRNA和蛋白水平检测STAT3的表达量。结果:经RT-PCR和Western blotting实验证实,在SiHa/STAT3-sh和CaSki/STAT3-sh细胞中,STAT3 mRNA的抑制率达99%以上(P<0.01),STAT3总蛋白抑制率达70%以上(P<0.01),磷酸化STAT3蛋白的抑制率达78%以上(P<0.01)。结论:稳定沉默STAT3的HPV16阳性宫颈癌细胞株建立成功。
国际妇产科学杂志相关文献
  • 微小RNA与子宫内膜癌相关性的研究进展

    微小RNA(microRNA,miRNA)是一种通过翻译后、转录和转录后水平调控mRNA的单链非编码RNA,可作为抑癌基因和癌基因参与肿瘤的发生、发展及侵袭。近期研究发现一些miRNA与子宫内膜癌(EC)的癌基因表达有关,例如miRNA-200家族,miRNA-205,miR-129-2,miR-203,miR-302,miR-194,miR-30c,miR-204,miR-34,miR-125, miRNA-152,miRNA-503等,均已证实与EC的癌基因具有相关性。随着对miRNAs研究的不断深入,miRNA有望成为EC的有效新靶点之一应用于临床。现综述近年与EC相关的miRNA研究进展。

    作者:刘麒薇;杨敏;童晓文;王建军;WANG Jian-jun 刊期: 2014年第04期

  • 更年期潮热的外周血管运动和中枢机制

    中年女性突发潮热是伴随更年期变化常见和特异性的症状,而且也是痛苦的症状之一,但其病理生理学机制尚未阐明。近年发现潮热的发生可能是多种因素作用的结果,其中下丘脑体温调定点范围变窄这一学说受到许多专家学者的认可。另外,雌激素降低影响中枢一些神经递质的改变对潮热的产生也有一定影响。有研究表明,潮热时去甲肾上腺素升高、5-羟色胺降低均会影响潮热时的体温调节。还有一些因素,如降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)、内啡肽以及一些社会心理方面的因素也与潮热的发生有关。现将更年期潮热机制的研究进展加以概括总结。

    作者:孙宇;白文佩 刊期: 2014年第04期

  • 瘦素及瘦素受体与子宫内膜异位症关系的研究进展

    子宫内膜异位症(EMs)是一种具有恶性肿瘤生物学行为的妇科良性疾病,以痛经、盆腔包块及不孕为特征,其发病率呈上升趋势,严重影响患者的生活质量,但其发病机制目前尚不清楚。近年大量基础和临床研究发现,瘦素及其受体的表达及调控在EMs发生、发展过程中起重要作用,其参与血管新生、细胞增殖与凋亡、免疫调节、炎症反应以及新陈代谢。研究EMs病程中瘦素和瘦素受体及其上、下游因子的表达及变化规律,可为EMs发病机制的研究、临床治疗和新药的开发应用提供新的切入点。

    作者:张唯一;李亚里 刊期: 2014年第04期

  • 声明

    《国际妇产科学杂志》2014年第3期刊登的《大网膜子宫内膜样囊肿合并浆液性囊腺瘤一例》一文,通信作者为郑桂英,E-mail:lyzzgy99@163.com。

    作者:本刊编辑部 刊期: 2014年第04期

  • 《国际妇产科学杂志》理事单位名单

    山东大学齐鲁医院天津市大港医院天津市兴通医疗器械有限公司天津市第一中心医院

    作者: 刊期: 2014年第04期

  • microRNA调控上皮-间质转化影响卵巢癌侵袭转移的研究进展

    卵巢癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,死亡率居妇科肿瘤之首,卵巢癌的转移是造成患者死亡的重要原因。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮细胞表型向间质细胞表型转变的过程,与肿瘤侵袭、转移及耐药等恶性行为密切相关。 MicroRNA(miRNA)是一类内源性非编码的小分子RNA,能在转录后水平调控编码基因表达,其能调控EMT的过程受到越来越多关注。多种miRNA在卵巢癌中表达存在差异,并参与卵巢癌的发生、发展过程,提示miRNA可能用于卵巢癌早期诊断、治疗、预后评估。现就近年对卵巢癌中miRNA调控EMT机制及其与卵巢癌侵袭转移关系的研究进行综述。

    作者:张越;张殊 刊期: 2014年第04期

  • 本刊部分定稿文章实现数字优先出版

    为了缩短重点文章的报道时差,及时传播信息,本刊2012年已与中国学术期刊(光盘版)电子杂志社签署了数字优先出版协议。凡具有国家级或省市级等基金资助的论文以及本刊编辑部重点约稿文章,待定稿后,经编辑部与作者双方协商可以另签署一份数字优先出版授权协议,在纸质版出版前以数字出版形式优先发表,供读者在中国知网数据库中检索阅读。数字出版等同于正式出版。

    作者: 刊期: 2014年第04期

  • 2008-2012年1466例早产回顾性临床分析

    目的:探讨不同孕周和不同类型早产的变化趋势,及其与早产相关因素、分娩方式、早产儿出生体质量、新生儿窒息的关系。方法:回顾性分析2008年1月-2012年12月在南京医科大学第一附属医院住院分娩的早产病例1466例,对不同孕周早产(妊娠早、中、晚期早产)和不同类型早产(自发性早产、治疗性早产)的变化趋势、早产相关因素、分娩方式、早产儿出生体质量及新生儿窒息率进行统计分析。结果:①2008-2012年早产的年发生率呈逐年升高趋势(χ2=65.69,P<0.001),不同孕周早产发生率和不同类型早产发生率均呈升高趋势。②不同孕周自发性早产主要相关因素为胎膜早破、多胎妊娠、胎位异常、妊娠期糖尿病及不明原因等,不同孕周治疗性早产主要相关因素为妊娠期高血压疾病、胎盘因素、妊娠合并症、多胎妊娠、妊娠期肝内胆汁淤积症和胎儿窘迫等。③不同孕周早产的阴道分娩率和剖宫产率差异无统计学意义(P>0.05),不同类型早产的阴道分娩率和剖宫产率差异有统计学意义(P<0.05),治疗性早产剖宫产率高于自发性早产(P<0.05)。④不同孕周早产的新生儿体质量和新生儿窒息率差异均有统计学意义(P<0.05)。妊娠早期早产的新生儿窒息率(53.01%)高于中期早产(33.46%)和晚期早产(28.61%),差异有统计学意义(均P<0.05),中期早产与晚期早产的新生儿窒息率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应及早识别早产潜在高危因素,加强围生期管理,以减少早产的发生,改善围生儿结局。

    作者:周欣;殷茵;张国英;孙丽洲 刊期: 2014年第04期

  • 稳定沉默STAT3的HPV16阳性宫颈癌细胞株的建立

    目的:建立针对人信号传导与转录激活因子3(STAT3)的小发夹RNA(shRNA)逆转录病毒表达载体,建立稳定感染的人乳头瘤病毒16(HPV16)阳性宫颈癌细胞系,以进一步探讨STAT3在HPV16阳性宫颈癌发生和发展中的作用。方法:设计合成3条靶向STAT3基因的小干扰RNA(siRNA),从中选择1条具有佳干扰效果的siRNA,构建STAT3-shRNA载体pSUPERretro-puro-STAT3,用293FT细胞包装质粒产生STAT3 shRNA逆转录病毒,感染HPV16阳性的宫颈癌细胞株SiHa和CaSki细胞后,通过嘌呤霉素筛选2周,约3 d传代1次,建立稳定细胞株,稳定沉默STAT3的细胞株命名为SiHa/STAT3-sh和CaSki/STAT3-sh。通过实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)分别从mRNA和蛋白水平检测STAT3的表达量。结果:经RT-PCR和Western blotting实验证实,在SiHa/STAT3-sh和CaSki/STAT3-sh细胞中,STAT3 mRNA的抑制率达99%以上(P<0.01),STAT3总蛋白抑制率达70%以上(P<0.01),磷酸化STAT3蛋白的抑制率达78%以上(P<0.01)。结论:稳定沉默STAT3的HPV16阳性宫颈癌细胞株建立成功。

    作者:沈青丽;何耀娟;郭凯敏;叶明;林仲秋 刊期: 2014年第04期

  • 欢迎使用本刊远程稿件处理系统

    《国际妇产科学杂志》现已开通远程稿件处理系统,欢迎广大作者、审稿专家通过此系统进行投稿、查稿、审稿。

    作者: 刊期: 2014年第04期

  • 经阴道剖宫产术后子宫瘢痕妊娠病灶切除病例研究

    目的:探讨经阴道剖宫产术后子宫瘢痕妊娠(cesarean scar pregnancy,CSP)病灶切除手术的临床实用价值。方法:收集我院2012年9月-2013年9月收治的CSP患者6例,采用经阴道手术清除CSP病灶,观察术中出血量、术后血人绒毛膜促性腺激素(hCG)下降情况、住院时间及月经复潮情况。结果:6例手术均成功,无明显并发症,术后恢复良好,术中出血量20~50 mL,平均(28.33±11.25)mL;术后血hCG恢复正常时间为10~22 d,平均(16.83±4.21)d;住院时间为5~8 d,平均(6.50±1.05)d;月经恢复时间为26~58 d,平均(35.00±11.73)d。结论:经阴道CSP病灶切除术是一种安全经济、快速有效的治疗方法。

    作者:范晓东;朱颖军 刊期: 2014年第04期

  • 卡前列素氨丁三醇联合纱条宫腔填塞治疗凶险性前置胎盘的疗效分析

    目的:探讨卡前列素氨丁三醇联合纱条宫腔填塞治疗凶险性前置胎盘(dangerous placenta previa)的临床效果。方法:选取2010年1月-2013年8月就诊于我院的凶险性前置胎盘患者50例,分为对照组(25例)和治疗组(25例)。对照组采用传统催产素注射联合纱条宫腔填塞治疗,治疗组采用卡前列素氨丁三醇联合纱条宫腔填塞治疗,比较2组术中出血量、术后2 h及术后24 h阴道出血量、并发症和不良反应发生情况。结果:2组术中出血量差异无统计学意义。治疗组术后2 h、24 h阴道出血量低于对照组(均P<0.05)。2组恶心、呕吐发生率差异有统计学意义(均P<0.05),但胸闷发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:卡前列素氨丁三醇联合纱条宫腔填塞治疗对凶险性前置胎盘患者的难治性出血具有较好的治疗效果,值得临床推广应用。但使用卡前列素氨丁三醇后,患者的胃肠道不良反应明显,在使用过程中需予以预防。

    作者:曹丽琼;陈海燕;范莉君 刊期: 2014年第04期

  • 《2014 NCCN卵巢癌包括输卵管癌和原发性腹膜癌临床实践指南(第二版)》解读

    近日,美国国立综合癌症网络(NCCN)公布了《2014 NCCN卵巢癌包括输卵管癌和原发性腹膜癌临床实践指南(第2版)》。现对新版指南进行简要解读。

    作者:卢淮武;王丽娟;徐国才;林仲秋 刊期: 2014年第04期

  • 钙蛋白酶10基因多态性与多囊卵巢综合征

    多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)是女性常见的内分泌疾病,其家族聚集现象提示遗传因素的作用。近年研究认为,胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)是PCOS病理生理的中心环节,多数PCOS患者存在IR。钙蛋白酶10(calpain-10,CAPN-10)基因是第1个被定位克隆的与2型糖尿病(type-2 diabetes mellitus,T2DM)有关的基因,该基因的变异与IR的发生有关,并影响T2DM的遗传易感性。因为PCOS与T2DM有共同的IR机制,CAPN-10也成为PCOS的重要候选基因。造成疾病遗传易感性差异的根本原因是基因组序列和修饰上的差异。其中,单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)引起的变异占90%。目前,SNP数据库(data base of SNP,dbSNP)已列出521个人类CAPN-10 SNP位点。综述CAPN-10与PCOS的研究现况,特别是CAPN-10 SNP与PCOS的研究进展。

    作者:邓妙;刘元伟;张红艳;岑加萍;张治芬 刊期: 2014年第04期

  • 新辅助化疗对ⅠB2~ⅡB期宫颈癌的临床疗效观察

    目的:探讨新辅助化疗(NACT)对ⅠB2~ⅡB期宫颈癌术后病理常见高危因素以及对患者总体生存率的影响。方法:对2003年1月-2013年6月同济大学附属第一妇婴保健院收治的196例ⅠB2~ⅡB期宫颈癌患者进行回顾分析,将其中71例在术前接受了以铂类为基础的NACT的患者作为研究组;将125例进行直接手术(PST)的患者作为对照组。2组均广泛全子宫切除+盆腔淋巴结清扫术或腹主动脉旁淋巴结切除术,年龄>45岁者均行双附件切除术。观察NACT组化疗后局部肿瘤体积的变化,对NACT组与PST组术后病理中淋巴结转移、宫颈间质浸润深度、脉管内转移、巨块型、宫旁浸润及阴道切缘肿瘤浸润情况,以及对2组的生存率进行比较。结果:NACT组(统计缺失15例)化疗后肿瘤体积变化:完全缓解(CR)4例(7.1%),部分缓解(PR)27例(48.2%),持续存在(SD)18例(32.1%),肿瘤进展(PD)7例(12.5%)。术后病理分析中,NACT组较PST组,宫体大小及宫颈病灶宽度缩小、淋巴结切除数增多、巨块型宫颈癌中宫颈间质浸润>1/2的发生率减少,差异有统计学意义(P<0.05)。但除宫颈间质浸润>1/2外的其他5个高危因素以及术中出血量、手术时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。 NACT组与PST组生存率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NACT虽然有一定的近期临床疗效,但对于患者的总体生存率没有明显提高,因此在临床应用中需慎重考虑。NACT对控制巨块型宫颈癌术后病理高危因素有一定的效果。巨块型患者经过NACT后再手术是一种比较安全的方法。

    作者:叶磊;朱建龙;冯令达;翁雷;汪希鹏 刊期: 2014年第04期

  • 血管内皮生长因子及相关因子与含铜宫内节育器致子宫异常出血的关系

    宫内节育器(intrauterine device,IUD)是目前广泛使用的长效避孕方法之一。目前中国已普遍使用含铜IUD,但是放置含铜IUD的妇女常出现一些不良反应,如月经过多、不规则出血、白带异常和疼痛等,其中以子宫异常出血发生率高,严重影响了患者对含铜IUD的认可和接受性,这也是一直困扰临床的一个不可忽视的问题。目前已证明人子宫内膜存在多种血管生成因子。其中血管内皮生长因子(VEGF)是子宫内膜血管形成的重要调控因子,并受多种因子调控。对VEGF及相关因子与含铜IUD致子宫异常出血关系的多项研究,为含铜IUD不良反应的靶向治疗开辟了新的前景。

    作者:赵璐;殷震惠;杨华 刊期: 2014年第04期

  • 雌激素跨膜受体GPR30及其在子宫内膜癌和卵巢癌中的研究进展

    子宫内膜癌和卵巢癌均是女性生殖系统的恶性肿瘤,发病率呈逐年升高趋势,但发病机制尚未明了。近年发现,雌激素可介导新型G蛋白偶联受体30(GPR30)通过快速非基因转录途径调控肿瘤细胞增殖与凋亡,参与肿瘤发生发展。肿瘤相关成纤维细胞在肿瘤发展中的作用也不断受到重视。综述GPR30在子宫内膜癌及卵巢癌中的表达,分析探讨GPR30在妇科肿瘤发病机制中细胞增殖、凋亡等相关调控作用,以期为子宫内膜癌及卵巢癌的临床治疗提供新的靶点。

    作者:郑丽华;程忠平 刊期: 2014年第04期

  • 声明

    鉴于近日发现有网站盗用本编辑部编辑出版的《国际妇产科学杂志》和《国际生殖健康/计划生育杂志》名义进行不正当宣传及代发文章业务,特此声明:本编辑部从未授权任何机构或个人负责征稿及论文代发业务,不接受任何形式的代发稿件。如因他人非法代发行为造成任何损失,本编辑部概不承担责任。

    作者:本刊编辑部 刊期: 2014年第04期

  • 卡贝缩宫素预防妊娠期高血压疾病妇女剖宫产产后出血效果分析

    目的:探讨卡贝缩宫素对妊娠期高血压疾病妇女剖宫产宫缩乏力性产后出血的预防效果。方法:选择武警后勤学院附属医院产科32周后单胎剖宫产分娩的妊娠期高血压疾病产妇,随机分为2组进行前瞻性随机对照研究。其中治疗组(卡贝缩宫素组)90例,剖宫产时胎儿娩出后卡贝缩宫素100μg宫底肌内注射;对照组(缩宫素组)90例,胎儿娩出后缩宫素100μg宫底肌内注射,2组均同时予缩宫素20 IU持续静脉点滴。记录产后24 h内出血量、血压、胎儿体质量、评分、妊娠妇女心率的变化及药物不良反应。结果:治疗组产后24 h内出血量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组和对照组产后出血的发生率分别为14.4%和20.0%,差异无统计学意义(P>0.05)。2组新生儿出生体质量、1分钟Apgar评分、新生儿窒息、羊水性状比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组未出现明显恶心呕吐症状。结论:卡贝缩宫素预防妊娠期高血压疾病妇女剖宫产产后出血比单用缩宫素效果更好,无明显不良反应。

    作者:韩凌霄;于芳;侯海燕;史海霞;吴桃;杨维平 刊期: 2014年第04期

  • 宫颈冷刀锥切术联合滚球射频电凝止血治疗宫颈上皮内瘤变观察

    目的:探讨宫颈冷刀锥切术联合射频滚球电凝止血治疗宫颈上皮内瘤变(CIN)的可行性及临床疗效。方法:收集2007年10月-2009年10月在天津市宝坻区人民医院经阴道镜多点活检诊断为CINⅢ的100例患者的临床资料,观察组50例为宫颈冷刀锥切联合射频滚球电凝止血,对照组50例为传统宫颈冷刀锥切术缝扎止血,分别比较2组术中及术后出血量、手术时间及术后并发症等情况。结果:宫颈冷刀锥切术联合滚球电凝止血组术中及术后出血量及术后并发症明显少于传统缝扎止血组(P<0.05)。结论:宫颈冷刀锥切术联合射频滚球电凝止血术中出血少,术后愈合快,术后并发症少,是CINⅢ较为理想的治疗方法。

    作者:苑占娜;陈绍正;程香红;李可君;岳秀英 刊期: 2014年第04期

国际妇产科学杂志

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主管:中华人民共和国卫生部

主办:天津市医学科学技术信息研究所