梁蓉;王哲;黄高;乔岩;王爱勤;董宝侠;郭英;王娟红
目的初步研究银杏叶提取物EGb761对重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)诱导HeLa细胞凋亡的影响.方法采用MTT法观察EGb761对HeLa细胞生长的影响;细胞凋亡实验分5组,即空白对照组,rhTNF-α对照组(100 μg/L),EGb761低浓度组[rhTNF-α(100 μg/L)+EGb761(10 mg/L)],EGb761中浓度组[rhTNF-α(100 μg/L)+EGb761(20 mg/L)],EGb761高浓度组[rhTNF-α(100 μg/L)+EGb761(40 mg/L)],采用流式细胞术和Hoechst33258荧光染色检测凋亡.结果 EGb761在5.0~80.0 mg/L终浓度范围内对HeLa细胞生长无明显影响;流式细胞术测定各组亚倍体细胞峰积分百分率(%)为:空白对照组(5.35±2.2),rhTNF-α对照组(37.8±6.1),EGb761低浓度组(19.2±3.4),EGb761中浓度组(16.5±5.7)和EGb761高浓度组(11.3±3.9);荧光染色检测各组凋亡百分率(%):对照组(4.23±2.0)、rhTNF-α对照组(27.8±4.3)、EGb761低浓度组(14.9±3.4)、EGb761中浓度组(12.1±3.7)和EGb761高浓度组(9.61±2.3);结果显示,EGb761在10~40 mg/L终浓度范围内对rhTNF-α诱导的HeLa细胞凋亡均有显著的抑制作用(P<0.01),且呈剂量依赖关系.结论 EGb761能有效抑制rhTNF-α诱导的HeLa细胞凋亡.
作者:黄迪南;侯敢 刊期: 2005年第01期
人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)选择性感染皮肤或黏膜上皮细胞,在感染局部形成良性增生性病变,甚至诱发恶性肿瘤.研究证实反复发作和病程较长的HPV感染者常有细胞免疫功能异常,而感染局部树突状细胞(dendritic cell,DC)数量、功能的改变,可导致免疫监视系统破坏,不能激发有效的免疫应答,使病毒感染细胞难以清除,对病毒感染持续存在及在肿瘤的发生中起着重要的作用.
作者:黄伟峰;施兴江 刊期: 2005年第01期
目的检测细胞黏附分子CD44V6、PCNA在食管癌组织及食管正常黏膜中的表达,探讨CD44V6在食管癌侵袭转移中的作用.方法应用流式细胞免疫荧光技术,分别检测CD44V6、PCNA在食管癌及食管正常黏膜中的表达,分析其表达的临床意义.结果 CD44V6在食管癌组织中的阳性表达率(72.0%)高于食管正常黏膜的阳性表达率(20.0%),有显著性差异.CD44V6蛋白的表达与患者的年龄、性别、病变部位、病变长度,大体病理类型及细胞分化程度无明显关系,但与癌浸润深度及淋巴结转移具有相关性.PCNA蛋白的表达与食管癌分化程度,浸润深度有关,但与食管癌患者淋巴结转移无相关关系.结论 CD44V6、PCNA与食管癌的侵袭转移相关,是判断食管癌侵袭转移的指标.
作者:周正波;刘奇;钟伟;王永胜;杨瑞森;张百江 刊期: 2005年第01期
目的探讨原发性肝细胞肝癌(HCC)对机体细胞免疫机能的影响.方法采用血常规检测,应用荧光标记抗体及三色激光流式细胞仪对51例肝细胞肝癌患者和17例对照样本术前、术后外周血的细胞免疫指标进行检测.检测项目包括:T辅助淋巴细胞(THL),细胞毒T淋巴细胞(CTL),NK细胞,单核细胞,并进行手术前后的对比分析.结果原发性肝细胞肝癌(HCC)术后THL、CTL、NK和单核细胞百分比、单核细胞绝对值的平均值较术前分别增高0.91%,8.58%,8.85%,31.45%,66.55%,手术前后有显著性差异(P<0.05或P<0.01).良性对照组的术前与术后上述各项指标比较,均无显著性差异(P>0.05).结论肝细胞肝癌(HCC)对机体的细胞免疫产生明显抑制作用,在肿瘤切除之后,这种抑制能力随之减弱,细胞免疫得到恢复.而良性对照组对机体细胞免疫的抑制不显著.综合分析细胞免疫的变化情况,对判断HCC的预后及肿瘤复发有重要的意义.
作者:刘尚梅;赵建军;杨晓洁;胡敬群 刊期: 2005年第01期
目的探讨不同乳腺病变组织中微血管密度(MVD)的差异及其与TSP-1,CD44V5,HER4表达情况的关系.方法采用免疫组化SP法,检测乳腺纤维腺瘤、小叶增生和乳腺浸润性导管癌(IDC)组织中TSP-1,CD44V5,HER4的表达情况及MVD.结果在IDC组织中的MVD明显高于其它两种组织(P<0.05);在3种组织中MVD与TSP-1,CD44V5的表达均无关(P>0.05),但在IDC中,MVD值与HER4表达有关(P<0.05),HER4阳性的IDC组织MVD较高.结论 IDC组织的MVD高于良性病变;HER4的表达可促进IDC组织中MVD的增加.
作者:李军;吕新全;李惠翔;阿米娜;陈再蓉;吐尼沙;吉利力 刊期: 2005年第01期
随着分子生物学等学科领域水平的不断发展,发现肿瘤相关蛋白的种类和数量不断增多,它们在肿瘤细胞中的静态分布和动态移动过程,定性和定量,肿瘤细胞周期不同时期的变化,需要通过亚细胞定位技术进行观察,下面将不同定位技术进行分述.
作者:方慧云;王秦秦 刊期: 2005年第01期
目的探讨血管内皮生长因子-C和CCR7在大肠癌中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法采用原位杂交和双重免疫组织化学技术,以41例大肠癌和41例癌旁正常大肠黏膜为研究对象,检测VEGF-C mRNA和CCR7 mRNA的表达情况和微淋巴管密度(LVD).结果 VEGF-C mRNA和CCR7 mRNA在大肠癌组织中阳性表达率分别为34.15%(14/41),58.54%(24/41).VEGF-C mRNA、CCR7 mRNA和LVD均与大肠癌淋巴结转移密切相关(P<0.05).结论 VEGF-C mRNA、CCR7 mRNA和LVD与大肠癌的淋巴结转移密切相关,联合检测其在内镜活检组织中的表达有助于预测淋巴结转移的发生.
作者:帖晓静;史成章;王丽玲;邝胜利;刘岷 刊期: 2005年第01期
目的研究HL-60细胞在体外经细胞因子联合人参皂甙及三氧化二砷(AS2O3)诱导向树突状细胞(DC)分化的情况.方法选用HL-60细胞与重组人粒单核细胞集落刺激因子(rh-GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(INF-γ)、TSPG及AS2O3共培养.根据细胞因子、TSPG及AS2O3不同组合分为12组.在培养后7天及14天以光学和电子显微镜观察细胞的形态学特征,用HLA-DR、CD1a、CD86等五种单克隆抗体标记流式细胞术检测细胞表型,用ELISA法测定HL-60-DC培养上清液中的IL-12及INF-γ的量,培养14天后的细胞再继续以1∶10的比例与HL-60细胞共培养24 h,观察HL-60-DC对白血病细胞的杀伤情况,用流式细胞仪检测凋亡率.结果 HL-60细胞在组合细胞因子并分别加入TSPG及AS2O3后,均可诱生出不同比例的DC.光镜及电镜下均有典型的树突状细胞的形态学特征,细胞表达DC的表面分化抗原,诱生的DC培养上清中可测出不同量的IL-12及INF-γ.细胞凋亡率均明显高于对照组,联合中药各组的凋亡率均高于GM-CSF与IL-4组.结论①GM-CSF、IL-4与HL-60细胞共培养可诱导出HL-60-DC,在此基础上加入适当浓度的TSPG、AS2O3可使树突状细胞的特异性抗原表达加强.②在DC诱生过程中,GM-CSF联合IL-4 组DC特异性抗原表达率高于IL-4联合INF组,证明GM-CSF在DC诱生过程中起重要作用.③单独应用TSPG,也可出现部分DC特异性抗原表达,但表达率明显低于联合用药组.④诱生后的HL-60-DC具有自分泌IL-12及INF-γ的功能.⑤诱生后的DC具有抗白血病细胞作用,与HL-60细胞共培养后可使白血病细胞凋亡明显增强.
作者:方美云;王忠裕;王一 刊期: 2005年第01期
目的探讨蛋白激酶C(PKC)激活剂佛波酯PMA和PKC抑制剂Staurosporine(SP)对大肠癌HT-29细胞黏附作用的影响.方法采用体外细胞培养观察、细胞黏附人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)测定、Western blot分析黏附分子E-Cadherin(E-Cad)、Laminin Receptor(LnR)、α-Catenin和α-Catenin表达等方法,研究PMA和SP对HT-29细胞黏附作用的影响.结果从体外细胞培养观察和黏附HUVECs实验结果发现,100 nmol/L PMA处理后,和培养液对照组相比可见HT-29细胞由圆形变成成纤维细胞样生长,细胞发生游走、扩散,HT-29细胞间黏附减弱,而对HUVECs的黏附增强(P<0.05).而100 nmol/L PMA和100 nmol/L SP联合处理HT-29细胞,可见细胞成片生长,HT-29细胞间黏附增强,而对HUVECs的黏附则降低(P<0.05).Western blot分析结果提示,培养液对照组细胞可较高水平表达E-Cad、LnR,而低水平表达α-Catenin、α-Catenin.100 nmol/L PMA作用细胞可诱导HT-29细胞LnR表达水平增强,而E-Cad表达水平轻度减弱,对α-Catenin、α-Catenin表达水平无作用.而SP可拮抗PMA的作用,使LnR表达水平降低,E-Cad表达水平增强,而对α-Catenin和α-Catenin的表达亦无影响.结论 PKC激活剂佛波酯PMA可促使肿瘤细胞间的同质性黏附能力减弱,与HUVECs间的异质性黏附能力增强;PMA亦可诱导肿瘤细胞中LnR表达水平增强和E-Cad表达减弱,而SP则可拮抗PMA的上述作用.推测E-Cad可能介导了肿瘤细胞间的同质性黏附,而LnR可能介导了肿瘤细胞和HUVECs的异质性黏附,PMA、SP对上述细胞黏附作用的影响可能受到PKC的调节.
作者:陈宏;李荣清;丁云霞;林旭;黄丽春;刘跃;张国桥;张振书 刊期: 2005年第01期
目的本文分析164例卵巢恶性生殖细胞肿瘤的手术疗效,探讨治疗该瘤更合理的手术方式.方法回顾性分析164例卵巢恶性生殖细胞肿瘤患者的临床资料,其中57例采用保留生育功能的术式;107例采用不保留生育功能的传统术式.2组均根据个体状况辅以适当的化疗(和/或放疗).结果保留生育功能组和不保留生育功能组的5年生存率分别为69.01%(39/57)、54.94%(59/107)(P>0.05).2组术后并发症发生率分别为3.51%(2/57)、3.74%(4/107)(P>0.05).多因素分析显示临床分期、病理类型、残留肿瘤体积是影响预后的主要因素(P均<0.05).结论卵巢恶性生殖细胞肿瘤患者可根据需要采用保留生育功能的术式,并辅以适当的化疗和(或)放疗.
作者:黄永文;李孟达;刘富元;李玉洁;李艳芳 刊期: 2005年第01期
目的对比分析阿霉素(ADM)持续静脉点滴与静脉推注治疗恶性肿瘤时的心脏、血液及消化道毒性.方法恶性肿瘤病例共70例,分为阿霉素持续静脉点滴组(CI组)和阿霉素静脉推注组(BL组),CI组应用ADM 60~90 mg/m2持续静脉点滴72~96 h,BL组应用ADM 50~60 mg/m2静脉推注30 min,分别观察用药后的心脏、肝脏、血液及消化道毒性.结果 CI组与BL组比较,ADM累积剂量>400 mg/m2时心脏毒性有显著性差异(P<0.05);在ADM累积剂量>200~300 mg/m2时2组肝脏毒性有显著性差异(P<0.05),>300 mg/m2时有非常显著性差异(P<0.01);血液学毒性无显著性差异(P>0.05);消化道毒性有非常显著性差异(P<0.01).结论 ADM持续静脉点滴与静脉推注比较,持续静脉点滴能减少心脏、肝脏及消化道毒性,不能减轻血液学毒性.
作者:胡欣;任大成 刊期: 2005年第01期
血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)定位于人染色体6p21.3,由8个外显子和7个内含子组成,基因全长28 kb,编码分子量为34~45 kD的反向平行同型二聚体糖蛋白,属于胱氨酸结生长因子超家族[1].由于mRNA剪切方式的不同,VEGF至少可产生7种氨基酸数量不同的蛋白异构体,在胚胎发育、创伤愈合、炎症反应、肿瘤生长与转移等生理病理过程中起重要作用.
作者:沈慧玲;许文林 刊期: 2005年第01期
目的探讨MMP-7表达与食管癌生物学行为的关系.方法采用免疫组化SABC法检测MMP-7在食管鳞癌中的表达.结果在正常食管鳞状细胞MMP-7呈阴性表达;在食管癌组织中主要表达于癌细胞膜和胞质中,间质细胞中无表达,在食管癌中共阳性表达率为43.4%(33/76);MMP-7表达与食管癌淋巴结转移、临床分期、静脉侵犯和浸润深度有关(P<0.05);与性别、年龄、病理类型、病理分化无关(P>0.05).结论 MMP-7在食管鳞癌进展中有重要作用,可能是1个独立预后指标.常规检测其在食管鳞癌中的表达,有助于食管癌治疗和预后的判断.
作者:李永领;杨小龙 刊期: 2005年第01期
目的探讨浆膜腔积液腺癌细胞和间皮细胞中Calretinin、CEA、p53、c-erbB-2的表达及其意义.方法应用细胞块免疫细胞化学方法,检测45例浆膜腔积液腺癌细胞和间皮细胞中Calretinin、CEA、p53、c-erbB-2的表达水平.结果 Calretinin、CEA、p53、c-erbB-2在腺癌细胞中阳性表达率分别为4%(1/26)、54%(14/26)、69%(18/26)和77%(20/26),间皮细胞中分别为79%(15/19)、16%(3/19)、5%(1/19)和21%(4/19).该4种标志物在腺癌细胞中阳性表达率与在间皮细胞中阳性表达率比较均有非常显著性差异(P<0.01).结论 Calretinin、CEA、p53、c-erbB-2抗体联合检测可辅助鉴别腺癌细胞和间皮细胞.
作者:卢善明;邱前程;黄杰雄;林莹 刊期: 2005年第01期
目的探讨复方丹参滴丸对提高中晚期食管癌化疗疗效和不良反应的影响.方法 70例中晚期食管癌患者随机分为A、B 2组,A组(36例)采用复方丹参滴丸加PPF方案治疗,B组(34例)采用单纯PPF方案化疗.对疗效、生活质量及不良反应进行评定.结果 A、B 2组的有效率(CR+PR)分别为52.8%(19/36)和38.2%(13/34)(P>0.05);A、B 2组临床获益率(CR+PR+SD)分别为80.6%(29/36)和52.9%(18/34)(P<0.05).A组中位生存期为36周、B组为30周.A组治疗后T淋巴细胞亚群中的CD4/CD8比值显著提高(P<0.05),B组治疗前后无明显变化(P>0.05).A组生活质量高于B组(P<0.05).B组Ⅱ~Ⅳ度白细胞减少、恶心呕吐反应及黏膜炎发生率高于A组(P<0.05).结论复方丹参滴丸可增强化疗药物的抗肿瘤作用,有助于提高患者治疗的临床获益率、延长中位生存时间、减轻化疗某些不良反应、改善生活质量.
作者:梁启廉;陈小东;李小英;张英;李建文;蔡良真;梁柱;张远起 刊期: 2005年第01期
目的研究鬼臼乙叉甙(Etoposide,又称VP16)影响人星形胶质细胞瘤SHG-44细胞周期过程中,与N-糖链合成有关的β1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ(β-1,4-galactosyltransferase Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)表达变化.方法首先应用流式细胞仪技术分析VP16处理SHG-44细胞过程中细胞增殖情况的变化,再采用Northern Blot方法分析处理过程中的SHG-44细胞中β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ的表达变化.结果流式细胞仪检测表明,细胞培养基加入120 μmol/L VP16 1~6 h后能引起SHG-44细胞的S期阻滞.Northern Blot显示,VP16作用1~6 h过程中,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅴ表达无显著变化.而β-1,4-GalT-Ⅱ表达在此过程中则有升高趋势.结论 VP16能够引起星形胶质细胞瘤细胞SHG-44细胞周期改变过程中,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅴ的表达无变化,而β-1,4-GalT-Ⅱ的表达明显升高.提示VP16引起肿瘤细胞周期改变,可能通过影响β-1,4-GalT-Ⅱ的表达,引起有关蛋白质的糖基修饰而实现的.
作者:严美娟;沈爱国;程纯;邵晓轶;李爱红;顾建新 刊期: 2005年第01期
目的探讨乳腺导管上皮癌变过程中树突状细胞(DC)的表达.方法选取常规石蜡包埋乳腺组织标本147例,分为正常对照组、单纯性增生组、不典型增生组、导管内癌+早期浸润癌组、浸润癌组.应用免疫组化方法分别检测其S100+DC、HLA-DR+DC和CD1a+DC的阳性表达情况.结果浸润癌组S100+DC和CD1a+DC阳性表达率分别为77.61%、56.72%,均显著高于其他组(P均<0.05).导管内癌+早期浸润癌组、浸润癌组HLA-DR+DC阳性表达率分别为100.00%、97.01%,均显著高于其他组(P均<0.05).不同标记阳性DC联合表达率在导管内癌+早期浸润癌组、浸润癌组较高,分别为33.33%、55.22%,且这2组中无不同标记阳性DC均阴性表达病例.结论在乳腺导管上皮癌变过程中均有不同标记阳性DC存在,其阳性表达率随增生性病变进展逐渐增高,进展为浸润癌时则显著增高,DC的阳性表达情况可用于评估乳腺癌患者局部免疫状态.
作者:谷彦军;马鸿达;古强;王健 刊期: 2005年第01期
目的探讨立体定向放射(SRT)结合肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗原发性肝癌的疗效.方法对43例未行手术治疗的原发性肝癌患者,放射治疗前均行肝动脉化疗栓塞(TACE )治疗2~4次,SRT采用15 MV X射线,肿瘤计划靶体积(PTV)≤125 cm3者单次剂量为5~6 Gy,生物等效剂量为DT 56~60 Gy;PTV>125 cm3者单次剂量为4 Gy,生物等效剂量为50~56 Gy,放射治疗每天1次.结果 12例完全缓解(CR),22例部分缓解(PR),4例稳定(NR),5例进展(PD),肿瘤总有效(CR+PR)率为79.1%(34/43).1、2、3年生存率分别为74.4%,53.5%,44.2%,治疗前PTV≤125 cm3者治疗后的3年生存率(55.2%)高于PTV>125 cm3者(21.4%)(χ2=4.36,P<0.05).结论立体定向放射结合肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌有较好的疗效.
作者:姚晖;王芸 刊期: 2005年第01期
目的观察2周期大剂量化疗方案联合自体外周血干细胞移植(D-HDC)治疗转移性乳腺癌的疗效及其安全性.方法将28例转移性乳腺癌患者分为2个组.D-HDC组预处理方案:多西紫杉醇(DXL)110~130 mg/m2+噻替哌(THPA)300~400 mg/m2+卡铂(CBP)650~750 mg/m2,预处理后第2天回输外周血干细胞,间隔3~5周重复,共治疗2个周期;S-HDC组预处理方案:DXL 110~130 mg/m2+THPA 350~450 mg/m2+CBP 750~950 mg/m2,预处理后第2天回输外周血干细胞,治疗1个周期.分别评价2组肿瘤客观缓解率和治疗相关的不良反应.结果 D-HDC组和S-HDC组的客观缓解率分别为66.7%(10/15),54.5%(6/11);2组白细胞毒性相近,但D-HDC组血小板毒性较低,Ⅲ~Ⅳ度发热,恶心呕吐,腹泻和黏膜炎的发生例数较少.结论 D-HDC治疗转移性乳腺癌客观缓解率较高,血小板毒性较轻,Ⅲ~Ⅳ度非血液学毒性发生例数较少,患者耐受性良好.
作者:张燕军;任军;贾军;黄若宇;陈衍;张红梅 刊期: 2005年第01期
目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)和β-连环素(β-catenin)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其相关性.方法应用SABC免疫组化技术检测了53例NSCLC中EGFR和β-catenin的表达情况.结果在53例非小细胞肺癌病理组织中,EGFR和β-catenin阳性表达率分别为67.9%(36/53)和54.7%(29/53).在不同临床分期,有无淋巴结转移的NSCLC比较中EGFR表达有显著差异(P<0.05);在不同分化程度、有无淋巴结转移的NSCLC中β-catenin表达有显著差异(P<0.05),EGFR和β-catenin表达呈负相关(γ=-0.8436,P=0.001).结论在NSCLC中,EGFR及β-catenin的表达与淋巴结转移密切相关,两者表达呈负相关,β-catenin低表达提示预后不良.
作者:柯宏刚;董汉宣;曹飞;陈莉 刊期: 2005年第01期