成立
重组疫苗抗原结构以及生产工艺的复杂性,对重组疫苗的质量控制提出了更高的要求.重组疫苗抗原保持天然构象的程度直接决定其诱导免疫应答的程度,从而终影响疫苗的有效性.对抗原开展多角度、多尺度、多方位的结构研究不仅能够完成抗原的结构确证,还有助于了解产品的关键质量属性,从而建立有效的质量控制体系.此文综述了三维结构测定、抗原表位鉴定及颗粒性分析等多种结构分析技术,以及结构分析在重组疫苗质量研究中的应用.
作者：徐颖之；张静飞 刊期： 2019年第01期
目的 对疫苗生产车间半成品配制区域的悬浮粒子进行动态监测和数据分析.方法 采用便携式悬浮粒子采样仪,于2016和2017年对乙型脑炎减毒活疫苗生产洁净车间进行日常悬浮粒子检测,其中A、B级洁净区域为每班次检测,C级洁净区域为每周检测.对2年的检测数据制作单值-移动极差控制图,并进行t检验比较.结果 3个级别洁净区域的悬浮粒子数或均值如下,A级区≥0.5 μm的粒子数均＜1,≥5.0μm的粒子数均为0.B级区≥0.5 μm的粒子数均值:2016年为46.82(0～143.21),2017年为38.83(0～125.33);≥5.0μm的粒子数均值:2016年为2.52(0～7.83),2017年为2.41(0～7.15).C级区≥0.5 μm的粒子数均值:2016年为214.64(0～679.16),2017年为209.81(0～619.31);≥5.0 μm的粒子数均值:2016年为15.04(0～47.13),2017年为14.16(0～39.24).3个洁净区域的悬浮粒子数均小于95％置信上限且均符合GMP范围要求.2016和2017年检测数据的差异无统计学意义(t值为0.14～1.02,P值均＞0.05).结论 疫苗生产车间半成品配制区的悬浮粒子动态监测结果符合GMP标准.
作者：陈佩；李毅；户美玲；彭兴梅；刘竞鸥；唐溯；任文洲；罗辉艳；皮儒亮；刘菊 刊期： 2019年第01期
IFN-α/β是机体对抗外来病原体的第一道防线,其产生和后续激活的细胞信号转导可诱导具有抑制病毒感染和复制作用的IFN刺激基因的表达.然而,大多数病毒可通过表达一种或多种蛋白抵抗宿主细胞的抗病毒反应.流感病毒非结构蛋白1 (nonstructural protein 1,NS1)作为多功能毒力因子,在流感病毒感染过程中起重要作用.此文概述了NS1的结构与功能及抑制IFN-α/β产生和抗病毒效应作用的机制,为研究流感病毒致病机制提供参考.
作者：茅倩怡 刊期： 2019年第01期
随着现代生物技术的发展,重组蛋白疫苗、合成肽疫苗等新型疫苗不断涌现,迫切需要安全有效的佐剂来增强其免疫原性.水包油型乳剂是新型佐剂中的一个研发热点,如MF59和AS03已在欧盟和美国获批用于人用疫苗,且均被证实具有良好的效果和可靠的安全性.此文就水包油型佐剂的研究进展做一综述,以期为开发高效、低毒的新型佐剂提供参考.
作者：张转 刊期： 2019年第01期
国际生物标准化联盟于2017年9月28-30日在美国马里兰州罗克维尔市举办了第二届人体挑战试验研讨会,旨在审查并促进人体挑战试验或受控人体感染的应用,重点推进受控人体感染在新疫苗和疫苗改进研发中的应用.在会议中,与会者讨论了有关人体挑战试验的多方面内容,达成一项共识:在合乎伦理、保证安全且知情同意前提下,可通过实施人体挑战试验以促进和加速疫苗研发.
作者：陈质斌 刊期： 2019年第01期
目的 建立麻疹、腮腺炎、风疹、水痘联合减毒活疫苗(combined live attenuated measles,mumps,rubella and varicella vaccine,MMRV)的生产工艺.方法 根据现有疫苗原液生产工艺,将麻疹病毒沪-191纯化株、腮腺炎病毒S79株、风疹病毒BRD-Ⅱ株和水痘-带状疱疹病毒Oka株在原代鸡胚成纤维细胞或人二倍体细胞MRC-5株中制备高滴度病毒原液,并超低温保存.筛选无明胶冻干稳定剂配方.按国外已上市同类产品的病毒配比,研究MMRV中4种病毒的原液配制滴度及成品配制比例,建立佳冻干工艺.结果 用筛选出的适于MMRV的无明胶冻干稳定剂配方进行试验,确定病毒的原液配制滴度为,麻疹4.6 lg半数细胞培养感染量(50％ cell culture infective dose,CCID50)/ml、腮腺炎5.8 lgCCID50/ml、风疹4.3 lgCCID50/ml、水痘4.8 lg噬斑形成单位(plaque forming unit,PFU)/ml.使成品中腮腺炎病毒滴度至少达到麻疹和风疹病毒的10倍,水痘病毒滴度高于现有单价水痘疫苗.连续制备3批MMRV,经检测平均病毒滴度为,麻疹4.5 lgCCID50/ml、腮腺炎5.1 lgCCID50/ml、风疹4.3 lgCCID50/ml、水痘4.6 lgPFU/ml;平均水分为1.2％.其他项目检定均合格.结论 建立了MMRV的生产工艺,可以稳定生产出达到国外同类产品质量标准并符合我国4种单价减毒活疫苗国家标准的产品.
作者：杨文震；张芹；丁文正；王亮；赵毅；许乐燕；沈坚；郁佳俊；徐闻青 刊期： 2019年第01期
轮状病毒(rotavirus,RV)是全球范围内导致婴幼儿腹泻的主要病原体之一.研究表明干净的水源和良好的卫生环境不足以阻断RV传播,且目前尚无特异性治疗RV性腹泻的药物,使用RV疫苗是唯一有效的防控手段.此文对RV疫苗的使用现状、研发进展及面临的挑战做一综述.
作者：成立 刊期： 2019年第01期
目的 建立定量黑猩猩腺病毒68型(chimpanzee adenovirus type 68,AdC68)含量的双抗体夹心ELISA,并验证其可行性.方法 用表达绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的非复制型AdC68(AdC68GFP)感染HEK293细胞,收获病变细胞并进行超速离心纯化AdC68GFP.用纯化AdC68GFP免疫家兔制备抗AdC68GFP抗体.以抗AdC68GFP抗体为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的抗腺病毒HEXON IgG为酶标抗体,建立双抗体夹心ELISA,确定该法的线性范围,并验证该法的准确度、精密度、专属性和适用性.结果 纯化AdC68GFP的蛋白浓度为38.8 μg/ml,其中HEK293细胞蛋白浓度低于0.3 μg/ml.双抗体夹心ELISA的适包被抗体和酶标抗体浓度分别为1∶50和1∶500.该法的线性范围为0.06～3.88 μg/ml,线性相关系数为0.999 6.高、低浓度AdC68GFP样品的回收率分别为93.17％和94.33％,变异系数分别为6.72％和3.44％.该法可特异性检测AdC68GFP抗原,未发现与HEK293细胞蛋白发生交叉反应.应用该法检测AdC68GFP纯化过程中的样品可反映病毒的纯化效果.结论 建立的双抗体夹心ELISA具有良好的准确度、精密度和专属性,可用于AdC68纯化工艺过程中对病毒蛋白含量的快速检测.
作者：王宁；吴冠军；李小唤；徐灿；康丽；李洪艳；石慧颖 刊期： 2019年第01期
目的 研究0.5％硫代硫酸钠、10％胰蛋白胨大豆肉汤(tryptic soy broth,TSB)培养基、10％ Letheen肉汤培养基对实验室常用的4种消毒剂的中和效果,为疫苗生产和检定中科学选择中和剂提供依据.方法 取生长良好的Vero细胞接种于96孔培养板,每组8个复孔,置于37℃、5％ CO2培养箱培养过夜.将3种中和剂分别与杀孢子剂、0.5％“84”消毒液、酸性苯酚盐、碱性苯酚盐4种消毒剂中和后,接种于单层生长的Vero细胞,显微镜下观察细胞生长情况.结果 0.5％硫代硫酸钠分别与杀孢子剂、0.5％“84”消毒液中和后接种细胞,8孔细胞全部存活;而0.5％硫代硫酸钠分别与酸性苯酚盐和碱性苯酚盐的中和产物接种细胞后,细胞全部死亡.10％ TSB培养基分别与酸性苯酚盐、碱性苯酚盐中和后接种细胞,8孔细胞全部存活;而10％ TSB培养基分别与杀孢子剂和0.5％“84”消毒液的中和产物接种细胞后,细胞全部死亡.10％ Letheen肉汤培养基接种细胞后,8个孔细胞全部死亡.结论 0.5％硫代硫酸钠可中和杀孢子剂和0.5％“84”消毒液的消毒作用,10％ TSB培养基可中和酸性苯酚盐和碱性苯酚盐的消毒作用.10％ Letheen肉汤培养对Vero细胞有毒性作用.
作者：律苗；杜雪娜；杨杨；吕晓枫；李拓；李娜 刊期： 2019年第01期
目的 确立纳米膜过滤的佳实验条件,构建静注人免疫球蛋白的纳米膜过滤工艺模型.方法 分析影响纳米膜过滤效率的因素,利用正交实验对纳米膜预过滤系统、制品蛋白质量浓度、pH值、保护剂等相关实验参数进行优化.结果 选择过滤载量更高的预过滤器.pH值对纳米膜过滤载量影响显著;低蛋白质量浓度条件下,蛋白浓度对过滤载量影响不显著;保护剂对过滤载量影响不显著.预过滤器与纳米膜的佳面积比为1∶1.优化条件下,纳米膜的大过滤载量达13.6 kg/m2.结论 通过优化工艺组成条件和预过滤可以提高静注人免疫球蛋白过滤载量,进而降低生产过程中纳米膜过滤成本.
作者：李冠军；张剑涛；刘亚芳；梁雪爽；张学成 刊期： 2019年第01期
人二倍体细胞是WHO认可的更安全的疫苗生产用细胞基质,已成为全世界疫苗生产首选的细胞基质.我国自主研制的二倍体细胞2BS株和KMB17株来源于人胚肺细胞,因其无致癌性、无外源因子污染,且细胞性状比较稳定,越来越多地在人用疫苗研发与生产中使用.由于2BS和KMB17细胞对多种病毒具有敏感性,因此也作为细胞基质被应用于许多病毒性疫苗的研究开发.目前,用这两种人二倍体细胞生产的疫苗,包括甲型肝炎疫苗、脊髓灰质炎疫苗和肠道病毒71型灭活疫苗等,已在我国广泛上市.
作者：叶华跃；杨二霞 刊期： 2019年第01期
国际生物制品学杂志
主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
主办：中华医学会 上海生物制品研究所有限责任公司
