学术投稿

亲和层析纯化精子膜抗原的方法及精子抗体的检测

沈传来;张建琼;贾力敏;林陵;吕海芹;潘宁

关键词:精子膜抗原, 提纯, EIA
摘要:采用超声波粉碎、NP-40提取与两种互补式免疫亲和层析柱相结合的新提纯方案.结果获得了高纯度精子膜抗原,对经两种市售试剂盒检测的阳性标本36份、阴性标本24份进行检测,结果一致,正常人血清标本A值≤0.08.初步临床应用显示不孕症患者中,血清阳性率23.52%,精浆阳性率7.57%,与郑州华美公司试剂盒的阳性符合率达100%.
现代免疫学杂志相关文献
  • 霉酚酸酯联合环孢素A治疗GVHD后T细胞亚群的变化

    为了解霉酚酸酯(MMF)联合环孢素A(CsA)治疗移植物抗宿主病(GVHD)后T淋巴细胞亚群的变化.我们采用免疫荧光标记和流式细胞仪技术,分析了6例GVHD患者的T淋巴细胞亚群以及活化T细胞标志.发现在MMF治疗后患者的CD3+CD4+T细胞明显降低,CD3+CD8+T细胞明显增高,CD4/CD8比值下降;CD25+CD4+和CD69+CD8+T细胞均升高.结果初步显示,MMF可能主要作用于CD3+CD4+T细胞,并与CsA在治疗GVHD方面有协同作用.

    作者:杜欣;张建军;翁建宇;陆泽生;吴穗晶;林伟;黄梓伦 刊期: 2001年第02期

  • 猪苓多糖对巨噬细胞一氧化氮生成和细胞内还原型谷胱甘肽的影响

    本文观察了猪苓多糖(PPS)对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)生成和细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)的影响.结果显示:(1)PPS对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成具有明显的促进作用;(2)细胞内GSH浓度随NO生成增加而减少;(3)这些作用能被NO生成抑制剂L-NMMA所抑制.结果表明PPS能促进小鼠腹腔巨噬细胞NO生成,并同时消耗细胞内GSH.提示细胞内GSH可能起到调节巨噬细胞NO生成和保护宿主细胞免受NO介导的细胞毒作用.

    作者:侯敢;黄迪南;祝其锋 刊期: 2001年第02期

  • 树突状细胞的分离纯化与鉴定

    树突状细胞以其独特的抗原递呈和免疫调控作用越来越引起人们的重视,通过梯度离心、尼龙毛分离、花环沉淀、免疫磁珠等方法可获得大量的高纯度树突状细胞,为其基础与临床研究开辟了广阔的前景.

    作者:陈向荣;石汉平 刊期: 2001年第02期

  • IL-2的真核表达载体对乙肝病毒基因疫苗的免疫佐剂效应

    单以乙肝病毒S区基因疫苗(pCR3.1-S)或联合IL-2真核表达载体(pDOR-IL-2)注射BALB/c小鼠(H-2d)股四头肌,ELISA法检测小鼠血清抗HBs,4 h 51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL活性.免疫8周后,单注射pCR3.1-S及共注射IL-2真核表达载体的小鼠血清450 nm A值分别为1.24±0.1及1.98±0.17.CTL细胞杀伤活性分别为(50.5±6.4)%、(61.9±7.1)%,两组均有明显差异(P<0.01).脾细胞悬液经抗CD4+单克隆抗体处理后CTL细胞杀伤活性分别为(48.3±5.9)%、(56.2±6.1)%,抗CD8+单克隆抗体处理后分别为(10.6±1.4)%、(13.6±1.3)%.结果表明,IL-2的真核表达载体能够提高小鼠对DNA疫苗的免疫应答,CTL细胞杀伤活性主要由CD8+执行.基因疫苗可能用于预防及治疗HBV感染.

    作者:杜德伟;刘清泉;陈红梅;李谨革;连建奇;冯志华;周永兴;姚志强 刊期: 2001年第02期

  • 肺癌患者红细胞免疫分子CR1和IL-8受体的变化

    肺癌是危害人类健康的常见恶性肿瘤之一.肺癌患者免疫功能失衡,机体免疫状态往往低下与紊乱:T淋巴细胞免疫功能下降而血循环中免疫球蛋白和细胞因子异常上升,肺肿瘤局部炎症反应差.肺癌患者免疫监护能力下降的机制相当复杂,至今还不甚了解.

    作者:郭峰;张乐之;许育;钱宝华 刊期: 2001年第02期

  • 抗独特型单抗NP30抗山羊血吸虫病的免疫研究

    观察日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30主动免疫对山羊血吸虫病的抗病免疫作用.山羊随机分为2组.实验组12只,NP30免疫剂量为1 000μG/只/次,后腿肌肉注射,连续免疫3次,后一次免疫后8周进行尾蚴攻击.对照组10只,肌肉注射SP2/0腹水.2组山羊于尾蚴攻击感染后第12周处死.应用NYD-1000型图像分析系统测量肝脏虫卵肉芽肿大小和纤维化程度.实验结果表明,实验组山羊肝脏虫卵肉芽肿的面积、体积减小,数量明显减少,肝纤维化程度减轻,山羊体重增加.本文提示NP30主动免疫对山羊血吸虫病可产生较好的抗病免疫作用,NP30可作为血吸虫病疫苗候选分子.

    作者:冯振卿;李玉华;仇镇宁;李祥瑞;许立新;管晓虹 刊期: 2001年第02期

  • 甲基强的松龙诱导淋巴细胞凋亡特点的探讨

    为探讨甲基强的松龙(MP)抗排斥作用机制,使用MP诱导人外周血淋巴细胞凋亡,经电镜、DNA电泳证实细胞发生典型凋亡.流式细胞仪TUNEL凋亡定量检测证实MP处理组凋亡发生率58.2%,显著高于对照组10.2%(P<0.01).流式细胞双标记检测发现CD3+细胞凋亡率87.6%、CD3细胞凋亡率23.0%,均显著高于对照组(P<0.01).CD3+细胞及CD4+/CD8+比值亦显著减少.淋巴细胞CD95表达无显著变化.表明非CD95途径诱导淋巴细胞凋亡,特别是CD3+CD4+细胞凋亡,是MP抗排斥作用机制之一.

    作者:郑骏年;谢叔良;孙晓青;陈家存 刊期: 2001年第02期

  • 淫羊藿对血液透析HCV感染者细胞免疫功能的作用

    为探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染对维持性血液透析(血透)患者细胞免疫功能的影响和淫羊藿对其免疫调节作用,应用ELISA和RT-PCR检测62例血透患者抗HCV和HCV RNA,ELISA法检测患者血清sIL-2R、IL-6和TNF-α水平,同时观察应用中药淫羊藿治疗同一血透患者3个月前后上述指标的变化.结果表明,62例血透患者中抗HCV IgM阳性27例(43.6%),抗HCV IgG阳性29例(46.8%),HCV RNA阳性34例(54.8%),至少一项阳性37例(59.7%);与血透患者HCV标志阴性组相比,阳性组血清sIL-2R、IL-6和TNF-α水平显著增高;淫羊藿治疗后不论HCV阳性与否此三项指标均显著降低.结果提示,血透患者均存在明显的细胞免疫功能紊乱,感染HCV后免疫功能更低下,淫羊藿有显著调节血透患者细胞免疫功能的作用.

    作者:汪年松;唐令诠;竺艳娟;廖履坦 刊期: 2001年第02期

  • SCID小鼠接种人白血病细胞HL-60的流式细胞术分析

    腹腔及静脉注入人白血病细胞HL-60建立人白血病异种移植模型,采用流式细胞仪检测HL-60细胞表面标志CD33、DNA含量及周期分布,及病理组织学检查观察其生长特性.结果显示,实验接种的HL-60细胞在放射线处理或未处理的SCID小鼠体内均能生长,发生全身性白血病.3周时外周血即可见白血病细胞浸润,受累肝、脾增生期细胞比例增加,iv接种5 × 106 HL-60细胞,在发病晚期,骨髓细胞中CD33+细胞占3.79%和2.97%;ip接种1.0 ×107的SCID小鼠,其骨髓细胞中CD33+率为12.32%.提示HL-60/SCID小鼠模型为良好的肿瘤体内研究模型,以CD33阳性率判断模型中肿瘤细胞浸润指标能快速、客观地判断病情.

    作者:周剑芳;杨锡强;王宇泓;李欣;张远维;王莉佳 刊期: 2001年第02期

  • γ干扰素增强阿霉素对HeLa细胞的杀伤作用

    肿瘤的化疗是肿瘤治疗中的重要手段之一,如何减少化疗药物的用量,增加疗效,减少副反应是人们所期望的.本研究旨在探讨γ干扰素对化疗药物杀伤肿瘤细胞株时的影响.

    作者:张意仲 刊期: 2001年第02期

  • 哮喘青春期缓解者外周血可溶性血管细胞粘附分子-1的测定

    血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)主要表达于活化的内皮细胞,它介导了炎症细胞与血管内皮细胞的粘附和跨内皮转移,在气道粘膜的嗜酸粒细胞,淋巴细胞的选择性聚集、浸润中起重要作用[1].可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)是存在于血清中的从血管内皮细胞上自然脱落的VCAM-1分子,是反映体内VCAM-1表达水平的可溶性标志物.

    作者:倪磊;许以平 刊期: 2001年第02期

  • 器官移植进展:2000年国际器官移植会议述评

    由于移植免疫学的进展及新型免疫抑制剂的不断问世,近年来器官移植获得了长足进步.至1999年底全世界已施行器官移植720 099例次.其中以肾移植多,达473 597例次.

    作者:唐孝达 刊期: 2001年第02期

  • 三色流式细胞术检测全血中血小板活化

    三色流式细胞术检测全血中活化血小板P-选择素的表达.采用双注射器筒采外周静脉血,枸橼酸钠抗凝.取5μl全血,加入5μl CD42a-FITC、5μl 62P-PE、5μl CD45-CY,室温避光20min,1%多聚甲醛固定10 min,PBS洗后,上机分析.结果显示,全血三色法测定全血中血小板P-选择素表达阳性率明显低于富血小板血浆(P<0.05).全血三色法测定全血中血小板P-选择素表达客观、特异、更接近人体生理情况.

    作者:史桂英;石学耕;龚艳春;郭冀珍 刊期: 2001年第02期

  • 糖尿病肾病患者血清可溶性白细胞介素6受体检测

    糖尿病肾病(DN)的发病机制尚不明确,有报道IL-6可引起肾小球系膜及血管平滑肌细胞增生,而IL-6发挥作用须先与其血清中的sIL-6R结合[1,2].本文通过检测DN患者血清sIL-6R水平,探讨其临床价值.

    作者:王玉新;李大启;李公宝;徐琴君 刊期: 2001年第02期

  • 小鼠轻度病毒性心肌炎急性期心肌组织MHC Ⅱ类抗原的表达

    为研究小鼠急性病毒性心肌炎心肌MHCⅡ类抗原的表达规律,探索急性期轻度病毒性心肌炎的发病机制,以适量柯萨奇B3病毒感染BALB/c小鼠制成小鼠轻度病毒性心肌炎模型,对病鼠的心肌进行MHCⅡ类抗原的LSAB免疫组化研究.结果发现,急性期各病程中,心肌炎鼠心肌组织内MHCⅡ类抗原呈增强性异常表达;MHCⅡ类抗原表达强度的半定量记分(MS)与心肌病变积分(PS)无相关.实验提示,心肌MHCⅡ类抗原的异常表达是轻度病毒性心肌炎急性期的发病机制之一;自身免疫反应在病毒性心肌炎急性期与心肌病变的严重程度无相关.

    作者:成建定;陈玉川;胡丙杰;黄旭平 刊期: 2001年第02期

  • 高活力人降钙素类似物vhCT的免疫原性研究

    本研究用固相多肽合成法合成人降钙素类似物vhCT,产物纯度达到等电聚焦均一,质谱测定分子量精确.生物活性为天然人降钙素的20~25倍.用放射免疫法测定vhCT能与识别天然人降钙素的抗体起反应,产生IgG抗体的免疫原性随偶联的不同载体而有差异.但在BALB/C57小鼠体内不引起IgE增高.提示vhCT不产生IgG介导的过敏反应,具有药物应用前景.

    作者:张念一;俞超;周国明;李伯良;吴祥甫;张惠展;崔大敷 刊期: 2001年第02期

  • IFN-γ对人胃癌细胞侵袭力及转移力的调节作用

    用IFN-γ处理胃癌细胞,采用流式细胞仪分析胃癌细胞表面抗原分子的表达水平,用附壁试验检测胃癌细胞对细胞外基质的亲和力,用细胞聚集试验检测胃癌细胞的聚集能力以研究IFN-γ对胃癌细胞侵袭力及转移力相关因素的调节作用.结果表明,经高浓度和低浓度IFN-γ处理后,胃癌细胞表面ICAM-1及HLAⅠ表达均显著增加,CD44表达显著减少,胃癌细胞对细胞外基质的亲和力及胃癌细胞聚集程度均降低.提示IFN-γ可增加胃癌细胞ICAM-1及HLA Ⅰ的表达,抑制CD44表达,抑制胃癌细胞对细胞外基质的亲和力及胃癌细胞的聚集作用,因此可抑制胃癌细胞的侵袭力和转移力.

    作者:彭贵勇;庞政 刊期: 2001年第02期

  • 慢性肾小球肾炎患者血清抗心磷脂抗体的变化

    了解抗心磷脂抗体(ACA)与肾小球肾炎的关系,本文测定了68例慢性肾小球肾炎患者血清ACA,并加初步分析.1 检测对象和方法1.1 受检者临床确诊的慢性肾小球肾炎68例,按内生肌酐清除率及治疗方法分为肾功能正常组、尿毒症未透析组和尿毒症血透组,具体病例数见表l,另以正常健康人22例作为对照组.

    作者:张怡玲;姜鼎鼎;冯永利 刊期: 2001年第02期

  • 肝硬化患者血清中一氧化氮和sIL-2R水平的变化

    为了解肝硬化患者血清中NO和sIL-2R的水平变化与肝硬化病情演变过程的相互关系,本文检测了43例肝硬化患者血清中NO和sIL-2R的水平,并对两者作直线相关分析.

    作者:刘兴祥;董翠英;潘林梅;梅秀珍 刊期: 2001年第02期

  • 博莱霉素致肺纤维化中TGF-β1表达

    25只大鼠随机分为正常对照组和灌注博莱霉素实验组.在3 d,7 d,14 d,30 d分别取肺组织,以免疫组织化学技术测定TGF-β1蛋白表达.结果显示未经博莱霉素处理正常对照组大鼠的少数细支气管粘膜上皮细胞的胞浆有TGF-β1蛋白弱表达;博莱霉素处理大鼠的支气管、细支气管粘膜上皮细胞则TGF-β1表达更明显和范围更广;特别是在3~7 d肺泡腔和间质中出现大量的TGF-β1强阳性的肺泡巨噬细胞,14~30 d时在肺泡腔和间质中只有少量TGF-β1阳性的肺泡巨噬细胞.提示TGF-β1蛋白表达阳性的肺泡巨噬细胞在急性肺泡炎期明显增加,对肺纤维化的发生和发展可能起重要的作用.

    作者:蔡后荣;戴令娟;郑培德;孟凡青 刊期: 2001年第02期

现代免疫学杂志

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