刘健；王法刚；曹永倩；徐倩；徐荣建
目的 探讨正、反义血管内皮生长因子(VEGF)基因对人增生性瘢痕成纤维细胞(HHSFb)增殖行为的影响.方法 采用组织块法获取HHSFb,行细胞免疫化学鉴定.构建靶向VEGF基因pcDNA3.1(+)/hVEGF165(正义组)、pcDNA3.1(一)/hVEGF165(反义组)和空质粒pcDNA3.1(+)(空载体组)转染人成纤维细胞,以及未行转染处理的人成纤维细胞(对照组),共设为4组.经G418筛选获得阳性转染细胞克隆.逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)显示VEGF基因在细胞内的表达,上清行酶联免疫吸附反应(ELISA)检测VEGF蛋白表达水平,MTT测定细胞体外生长情况.结果 成功构建正、反义VEGF基因表达载体.经统计学分析,与对照组和空载体相比,正义组VEGF mRNA表达增强,蛋白表达增强;反义组VEGF mRNA表达明显减弱,蛋白表达明显降低.MTT结果显示,转染前后细胞体外生长速度基本一致.结论 正义VEGF基因重组质粒对HHSFb内源性VEGF的表迭有促进作用,反义VEGF基因重组质粒可有效抑制HHSFb内源性VEGF的表达.
作者：刘健；王法刚；曹永倩；徐倩；徐荣建 刊期： 2011年第05期
目的 检测肺结核患者血清中肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)的表达,探讨其在肺结核诊断中的意义.方法 采用ELISA方法检测101例肺结核患者、30例慢性阻塞性肺疾病患者(C0PD)、85例健康人血清中SP-D的水平并测定血清结核抗体,沉降法检测血沉,电阻法测定白细胞计数、中性粒细胞比例、淋巴细胞比例,芒图试验法进行结核菌素试验(PPD试验),抗酸染色检测痰中结核茵数量.结果 肺结核患者血清中SP-D的水平明显高于健康人、低于C0PD患者(P<0.05);ROC曲线显示肺结核患者血清SP-D的Cutoff值为0.26,在肺结核病诊断中敏感性为72.30%,特异性91.00%,诊断准确率为80.65%;PPD试验及结核抗体与血清SP-D具有相关性(x2分别为8.44、17.08,P均<0.01).结论 血清SP-D与肺结核疾病具有重要的相关性,有望成为肺结核诊断的一种辅助检测指标.
作者：徐勇；胡华；迟晶宇；杨燕；鞠云飞；侯宝青；李学政 刊期： 2011年第05期
目的 观察京尼平作为一种新型固定生物瓣膜组织交联剂的可行性.方法 牛心包经脱细胞处理,分别用戊二醛和京尼平进行鞣制,光镜下观察脱细胞效果,电镜下观察胶原纤维排列;测试收缩温度;拉伸试验测定大载荷;Wistar大鼠臀大肌皮下埋藏牛心包片,于4周及8周后取出,分别测试京尼平与戊二醛鞣制的牛心包的钙、磷含量.结果 经脱细胞处理后,光镜下可见脱细胞处理的牛心包几乎没有细胞核,而未经脱细胞处理的牛心包可见弥漫存在的细胞核.电镜下可见京尼平鞣制的牛心包胶原纤维呈环状交联,戊二醛鞣制的牛心包胶原纤维呈网状交联,京尼平鞣制的牛心包胶原纤维排列较戊二醛鞣制的牛心包略为疏松,收缩温度略低于戊二醛鞣制的牛心包(P<0.05).大载荷无统计学差异(P>0.05).但京尼平鞣制牛心包的钙、磷含量显著低于戊二醛鞣制的牛心包(P<0.05).京尼平鞣制的牛心包8周的钙含量显著低于4周的钙含量(P<0.05).结论 京尼平鞣制的牛心包具有较高的强度和极低的钙、磷含量,且随时间延长京尼平鞣制的牛心包的钙含量有减少趋势,提示京尼平是一种很有前景的生物组织交联试剂.
作者：王建光；刘天起；王雪梅；许莉；刘羽曦；王东；厉泉 刊期： 2011年第05期
目的 研究果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)和结缔组织生长因子(CTGF)基因在肺腺癌中的表达和意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色法分别检测60例肺腺癌标本及相应的癌旁正常肺组织中EZH2和CTGF基因的mRNA和蛋白表达,分析EZH2和CTGF表达与肺腺癌临床参数之间的关系.结果 与CTGF的表达相反,EZH2基因的mRNA和蛋白水平在肺腺癌癌组织中的表达明显高于癌旁正常肺组织(P<0.01),在低分化肺腺癌标本中的表达高于高分化腺癌(P<0.05),在晚期肺癌中的表达高于早期肺癌(P<0.05).EZH2和CTGF的表达均与患者的性别、年龄无关(P>0.05),与吸烟有关(P<0.05).结论 EZH2和CTGF可能分别作为癌基因和抑癌基因参与肺腺癌的发生、发展.
作者：吕怡静；任敏；王博；葛汝青；张继东 刊期： 2011年第05期
目的 将核主成分分析(KPCA)与logistic回归模型相结合,提出一种核主成分logistic(KPCA-based logis-tic)回归模型,用于复杂疾病基因定位的非线性关联分析.方法 针对病例对照研究设计的关联分析,对候选基因区域内的单核苷酸多肽性(SNPs)进行核主成分分析,以核主成分为自变量构建logistic回归模型,并对GAW16类风湿关节炎数据中PTPN22和RNF186两个基因区域进行分析,以验证KPCA-based logistic回归模型的有效性和实用性.结果 对PTPN22和RNF186两个基因区域的分析结果显示,KPCA-based logistic回归模型既能够检测出单点检验所能发现的区域(PTPN22),也能检测出单点检验所不能发现的区域(RNF186).结论 KPCA-based 1ogistic回归模型是一种有效的非线性关联分析方法,能够发现更多的易感区域.
作者：高青松；薛付忠 刊期： 2011年第05期
目的 通过建立1型单纯疱疹病毒(Hsv-1)致小鼠面瘫模型,探讨糖皮质激素受体(GR)在面瘫小鼠面部运动皮层及面神经核团中的表达变化规律.方法 选取89只4周龄Balb/c雌性小鼠随机分为空白对照组(n=8只)和实验组(n=81只),实验组用26G针头在右耳廓背面近耳根处皮肤连续搔刮后,将25μL HSV-1接种创面上,空白对照组不做处理.分别于面瘫后6、12、24、48、72 h及7 d取组织,采用蛋白质印迹法(western blot)、RT-PCR法、免疫组织化学技术方法检测小鼠中枢神经系统中糖皮质激素受体的表达变化规律.结果 实验组接种HSV-1后,其中44只出现面瘫,面瘫率为54.32%.GR mRNA在面瘫早期小鼠的大脑面部运动皮层及面神经核团中表达逐渐降低,6 h达低值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).之后逐渐升高,于48 h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).之后又逐渐降低,7 d时已接近对照组,但其差异无统计学意义(P>0.05).GR mRNA表达变化规律与GR蛋白表达变化相一致.免疫组织化学显示在面神经核团中可见糖皮质激素受体阳性细胞表达,并且也存在先降低后升高的变化规律.结论 病毒性面瘫后糖皮质激素受体表达水平呈动态变化,提示糖皮质激素受体表达水平与面神经损伤的进展密切相关,对于临床上合理应用糖皮质激素治疗贝尔面瘫,防止激素抵抗现象具有指导意义.
作者：姜振；王海波；李建峰；韩月臣；徐磊；刘闻闻；毛彦妍 刊期： 2011年第05期
目的 利用弱阳离子交换型(WCX)纳米磁珠联合表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析子宫内膜癌患者血清蛋白质谱,筛选潜在的特异性肿瘤标志物,探讨其临床意义.方法 应用WCX纳米磁珠联合SELDI-TOF-MS对24例子宫内膜癌患者及28例正常人血清标本进行蛋白质质谱分析,用Biomark Wizard软件分析差异蛋白峰,并在Swiss蛋白数据库中搜索鉴定差异蛋白,受试者工作特征(ROC)曲线评价该技术的应用价值.结果 在质荷比(m/z)2000-20000范围内,子宫内膜癌患者血清中筛选出与正常人血清有统计学意义的差异蛋白11个(P<0.05),其中6个高表达:m/z分别为4 175、5 315、7 970、8 047、15 930、16074;5个低表达:m/z分别为4 592、4675、7 019、9188、9 358.m/z为7 970的差异蛋白与子宫珠蛋白(UG)相符.应用ROC曲线分析,确定11个差异蛋白对子宫内膜癌有中等诊断价值,灵敏度为70.5%～96.4%,特异度为89.3%～100%.结论 WCX纳米磁珠联合SELDI-TOF-MS能在子宫内膜癌患者血清中筛选出灵敏度和特异度较好的差异表达蛋白,其有助于子宫内膜癌的筛查、早期诊断及预后监测.
作者：栾力；管尚慧；杨圣思；程欢欢；王娜娜；董召刚；程玉峰 刊期： 2011年第05期
目的 观察奥扎格雷钠与低分子肝素联合治疗进展性脑梗死的疗效及安全性.方法 随机将急性进展性脑梗死患者12例分为治疗组和对照组各56例.对照组在临床常规治疗的基础上加用奥扎格雷钠80mg,静脉滴注,2次/d,连用14 d;治疗组在对照组治疗方案的基础上再加用低分子肝素钠0.4mL皮下注射,2次/d,连用14 d;治疗前、后依据美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分及日常生活能力(BI)评分评定神经功能缺损程度,并监测肝肾功能、血尿常规、凝血4项及心电图.结果 与对照组相比,治疗组NIHSS、BI评分在治疗后1、2周时差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).血小板、凝血酶原时间均在正常范围内;两组均未见明显不良反应.结论 奥扎格雷钠与低分子肝素联合治疗进展性脑梗死疗效较好,使用安全.
作者：李红军；陈春富 刊期： 2011年第05期
目的 测定济南市售常见淡水鱼和海水鱼中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)的含量,并进行污染状况评价.方法 利用石墨炉原子吸收法测定Pb、Cd含量,原子荧光法测定As的含量,采用单因子污染指数法和尼梅罗综合污染指数法对不同鱼类的污染状况进行评价.结果 淡水鱼与海水鱼的Pb、Cd、As的平均含量分别为0.154 8、0.013 5、0.1093μg/g,Pb、Cd单因子污染指数和尼梅罗综合污染指数均小于1,海水鱼中鲈鱼、鲅鱼、黄花鱼As的两种指数均大于或接近1,带鱼和鲳鱼在1.883 6～3.181 0之间.结论 所采集鱼类Pb、Cd污染未超标,但As污染较严重.
作者：汪晓静；刁飞燕；张静；郭冬梅；崔晞 刊期： 2011年第05期
目的 探讨白细胞介素-17(IL-17)及其抗体对哮喘小鼠肺中嗜酸性粒细胞(E0S)的影响.方法 随机将60只Balb/c雌性小鼠分为健康组(A)、对照组(B)、哮喘组(c)、IL-17抗体组(D)及IL-17组(E)各12只.A组不做特殊处理,B、C、D、E组采用卵蛋白致敏和激发的方法,建立哮喘模型并给予相应干预;采用HE染色肺组织病理切片观察炎性细胞浸润,采用ELISA法检测小鼠肺组织匀浆上清液中嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin-1).结果 C、D、E组小鼠气道炎症以EOS和中性粒细胞浸润为主,B组变化较轻,A组正常;Eotaxin-1浓度从高到低依次为C、D、E、B、A组(P<0.05),其差异有统计学意义.结论 外源性IL-17能够减少激发状态下哮喘小鼠肺中EOS的浸润.
作者：王兆辉；姚慧 刊期： 2011年第05期
目的 观察双歧杆菌(Bf)活制剂对大鼠溃疡性结肠炎(UC)肠黏膜上皮细胞(IECs)TLR2、TLR4、NF-κB基因表达的影响.方法 60只SPF级SD大鼠随机分3组:空白对照组、模型组、Bf组.模型组和Bf组大鼠建立TNBS诱导的UC模型.造模成功后,Bf组予双歧杆菌活茵制刺灌服,空白对照组及模型组不予任何处理.3周后处死全部大鼠,观察一般情况的变化,分离、提取IECs中的总RNA,RT-PCR法检测TLR2、TLR4的表达,免疫组化法检测TLR4、NF-κB表达.结果 ①Bf组症状、组织损害均较模型组明显减轻.②模型组TLR2、TLR4、NF-κB表达显著高于Bf组与空白对照组(P<0.01).结论 UC组大鼠结肠上皮细胞TLR2、TLR4及NF-κB基因高表达,Bf组表达明显降低,推测Bf可通过抑制大鼠肠黏膜细胞TLR2、TLR4、NF-κB的表达而缓解肠道的炎症反应.
作者：王志强；于振海；袁方曙 刊期： 2011年第05期
目的 观察培美曲塞单药或联合奈达铂治疗对卡铂及紫杉醇耐药的复发晚期上皮性卵巢癌的疗效和不良反应.方法 将对卡铂及紫杉醇耐药的复发晚期上皮性卵巢癌50例随机分为A、B两组,A组第1天给予培美曲塞500mg/m2,每21天重复;B组第1天给予培美曲塞500mg/m2、奈达铂80mg/m2,每21天重复;直到疾病恶化为止.结果 两组均无完全缓解病例,部分缓解A组4例、B组11例,稳定A组15例、B组11例,病情恶化A组6例、B组3例,总有效率A组16.0%、B组44.0%,差异有统计学意义(x2=4.667,P=0.031).中位肿瘤恶化时间A组2.4个月,B组3.6个月(P=0.046).中位生存期A组6.0个月,B组7.5个月(Log-rank,P=0.048).不良反应主要是骨髓抑制.结论 培美曲塞单药或联合奈达铂治疗对卡铂及紫杉醇耐药的复发晚期上皮性卵巢癌均有效,培美曲塞联合奈达铂总有效率、中位肿瘤恶化时间及中位生存期均明显好于培美曲塞单药,骨髓抑制较明显,但可以耐受.
作者：康马飞；卜庆；刘瑛；骆梅青；廖漓漓；涂江江 刊期： 2011年第05期
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对过氧化氢(H2O2)诱导胰岛β细胞凋亡的影响.方法 以H2O2作用于大鼠胰岛瘤细胞INS-1细胞构建凋亡模型,通过Transwell装置实现INS-1细胞与BMSCs共培养.实验分为4组:单独INS-1细胞培养组(A组);INS-1+H2O2处理组(B组);BMSC+INS-1 Transwell共培养组(C组);BMSC+INS-1+H2O2Transwell共培养组(D组).MTT法检测细胞存活率,Annexin-V/PI染色流式细胞技术检测细胞凋亡水平.结果 H2O2显著降低INS-1细胞存活率,引起INS-1细胞凋亡,且呈剂量依赖性,通过Tran-swell与BMSCs共培养后,由H2O2诱导的INS-1凋亡细胞比例下降,与单独H2O2刺激组相比,细胞凋亡率下降了约26.3%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 BMSCs通过Transwell共培养显著抑制H2O2诱导的INS-1细胞凋亡,其作用机制可能与BMSCs旁分泌作用有关,为进一步利用BMSCs防治糖尿病提供了理论依据.
作者：孙慧环；刘福强；龚蕾；肖芳；侯新国；孙宇；宋君；陈丽；王旭平 刊期： 2011年第05期
目的 研究肝细胞癌EGF和c-myc表达及其临床意义.方法 利用组织芯片技术结合免疫组化法检测60例肝癌组织、15例正常肝组织中EGF和c-myc的表达.结果 肝细胞癌组织中EGF和c-myc阳性表达率明显高于正常肝组织(P<0.05,P<0.01);EGF在肝癌中的表达强度与肿瘤大小及分化程度有关(P<0.05);c-myc在肝癌中的表达强度与肿瘤组织分化、大小及转移有关(P<0.05);Edmondson Ⅱ和Ⅲ级肝癌组织EGF、c-myc阳性表达率明显高于Edmondson Ⅰ级(均P<0.05);EGF与c-myc在肝癌组织中表达强度呈正相关性(r=0.391,P<0.01).结论 EGF通过上调c-myc表达共同促进肝癌发生.
作者：相玉芬；王文奇；田虎；王义国；闫明先；刘长虹；李双玲 刊期： 2011年第05期
目的 观察丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate,EP)对人胰腺癌细胞PANC-1和AsPC-1增殖、凋亡及高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)mRNA表达水平的影响.方法 采用MTT和FCM法分别检测EP与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)单独及联合作用(EP组,E组;5-FU组,F组;联合组,EF组)对PANC-1和AsPC-1细胞增殖和凋亡的作用;通过Real Time-PCR(RT-PCR)观察各用药组对PANC-1和AsPC-1细胞HMGBl mRNA表达水平的影响.结果 随着药物浓度的增加,各用药组细胞增殖活性及HMGBl mRNA表达水平逐渐降低,凋亡率逐渐增高.E0.5225F10、E1.0450F20、E20900F40、E3.1350F80组的胰腺癌细胞抑制率均比相应E组高(P<0.05),EF组的胰腺癌细胞凋亡率均比相应E组高(P<0.05),E3.1350F80、E41800F160组均比相应E组的胰腺癌细胞HMGB1 mRNA表达水平高(P<0.05).结论 EP可能通过对HMGBl表达的影响,抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,从而起到抗胰腺癌作用,但是其具体机制及在体内的作用有待进一步深入研究.
作者：梁旭阳；程宝泉；贾俊英；王旭；任洪波 刊期： 2011年第05期
目的 建立新生大鼠前扣带皮层(ACC)神经元的体外培养方法,并进行纯度和生长状态检测.方法 从新生鼠ACC分离出神经元,采用低浓度胰酶长时间消化、阿糖胞苷处理、差速培养等方法进行体外原代培养.在培养的第7天,应用兔抗大鼠微管相关蛋白2(MAP2)对培养的神经元进行纯度鉴定,利用微量滴定(MTT)法测定培养第7-12天ACC神经元的生长状态.结果 从新生大鼠ACC分离的神经元,培养至第5天,可见多数细胞长出2个以上突起且呈多极形态并交织成网;第7天神经元有多种形式的接触,互相迁移靠拢,部分神经元聚集成团.MAP2细胞免疫荧光染色结果表明,ACC神经元阳性率大于80%,MTT结果显示,培养第7-9天的ACC神经元可保持较好的生长状态,之后细胞活性降低.结论 新生大鼠ACC神经元可进行体外原代培养,纯度和活力检测表明,培养第7～9天的神经元可作为ACC神经元相关研究的体外细胞模型.
作者：李芸；王红；王波；许永广；张孟元；王公明 刊期： 2011年第05期
目的 中脑内向纹状体投射的mesostriatal多巴胺能细胞亚群是导致帕金森病的关键神经元,本实验拟寻找该亚群投射神经元的分布及有效分离方法.方法 利用立体定位技术将绿色荧光逆行示踪剂注射到新生鼠纹状体内,24h后灌注取脑做冰冻切片;应用免疫荧光组织化学染色方法行酪氨酸羟化酶(TH)染色,采用激光显微切割技术将荧光示踪剂标记且呈TH染色阳性的神经元精确切割并收集.结果 荧光示踪的神经元呈TH阳性者即属于mesostriatal亚群神经元,主要分布于中脑黑质,应用激光显微切割技术可精确分离这些逆行示踪且TH染色阳性的神经元.结论 应用逆行荧光示踪和激光显微切割技术可精确分离mesostriatal亚群神经元.
作者：杨淑华；高青；李春晓；王超；张静；李贵宝；李振华；孙晋浩 刊期： 2011年第05期
骨质疏松椎体压缩性骨折(osteoporotic vertebral compressin fracture,OVCF)在老年人中的发病率逐年上升,主要的临床症状是腰背疼痛[1-3].近年,经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty,PVP)在欧美等国得到广泛应用,被认为是治疗压缩性骨折、骨肿瘤、椎体骨质疏松症等疾病的有效方法.该法作为一种微侵人手术,其基本原理是把液态的骨水泥注入椎体内,以达到迅速止痛和恢复椎体强度的目的,具有创伤小、并发症少、疗效稳定等优点[4-6],PVP治疗OVCF临床疗效显著[7].我院2006年4月～2009年6月采用PVP技术治疗OVCF患者82例,取得了较显著的临床疗效,现报道如下.
作者：艾尔肯·肉孜；王鑫 刊期： 2011年第05期
目的 利用血管内超声(IVUS)探讨冠状动脉易损斑块与血中单核细胞趋化活性的相关性.方法 对40例稳定型心绞痛(sAP)和40例不稳定型心绞痛(UAP)患者分别进行冠脉造影(CAG)和血管内超声(IVUS)检查.应用IVUS分别观察比较冠状动脉内斑块的性质,同时测量冠脉病变部位及其参考部位的血管外弹力膜面积(EEMA)、管腔面积(LA)、斑块面积(PA)及斑块负荷(PB%),并计算斑块的偏心指数(EI)及血管的重构指数(RI).应用Transwell小室检测两组患者血液中单核细胞的趋化活性.相关性分析ⅣUS检测指标与单核细胞活性的相关性.结果 IVUS检测显示,UAP组主要为脂质性斑块,约占50%(46/92),而SAP组主要为纤维性斑块,约占55%(46/83),脂质斑块仅占17%(14/83).与SAP组比较,UAP组斑块负荷和血管重构指数显著增高(P均<0.01).与SAP组的斑块相比较,UAP组的斑块具有较大的偏心,性(P<0.05),不稳定斑块呈明显的正性重构,约占68%(27/40),而稳定斑块主要表现为负性重构,约占75%(30/40).UAP组单核细胞趋化活性明显增强,单核细胞移动数量明显多于SAP组,差异有统计学意义(P<0.01).相关性分析显示,IVUS测值PB与单核细胞趋化活性呈显著正相关(γ=0.52,P<0.01).结论 IVUS能够准确地识别AS易损斑块.单核细胞趋化活性反映了粥样斑块的稳定性.
作者：齐天军；陈文强；姜翠玲；杨天豪；翟梅青；李大庆；由倍安；李继福 刊期： 2011年第05期
目的 观察七氟烷对维库溴铵肌松效应的影响.方法 择期全麻下行乳腺癌根治术患者60例,ASA Ⅰ～Ⅱ级,40～55岁,体质量45～80kg.随机分为七氟烷组(S组)和异丙酚组(P组),每组30例.S组吸入8%的七氟烷,氧气流量为6L/min,采用肺活量吸入法诱导,P组静脉推注异丙酚2mg/kg诱导.两组患者入睡后,均给予维库溴铵0.1mg/kg、芬太尼4μg/kg,行气管插管.S组吸入2%～3%七氟烷维持麻醉,P组微量泵泵注异丙酚4～8mg/(kg·h)维持麻醉,间断静注芬太尼.用TOF-WarchSX进行全程肌松监测.记录心率、平均动脉压变化,患者入睡时间、清醒时间、维库溴铵起效时间、作用时间、维库溴铵的平均用量、诱导期和苏醒期不良反应.结果 P组入睡时间、维库溴铵作用时间明显短于S组(P<0.01).S组清醒时间、维库溴铵起效时间明显快于P组(P<0.01),维库溴铵平均用量少于P组(P<0.01).插管前即刻S组心率下降明显(P<0.05),P组平均动脉压下降更明显(P<0.05),两组术中、术毕心率、平均动脉压均维持稳定.两组诱导时均无呛咳、屏气、喉痉挛、呼吸抑制,拔管时均无恶心、呕吐、躁动,均能正确回答问题,无任何不适.结论 七氟烷能增强维库溴铵的肌松效应,减少维库溴铵用量.
作者：吴慧；张丽 刊期： 2011年第05期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
