辛佳璇;陈世敏;王伟;阎云飞;徐春晓;刘斌;刘贤锡
目的 探讨滤纸干血片法应用于孕中期妇女唐氏(Down's)综合征产前筛查的可行性.方法 应用自动时间分辨荧光免疫分析(Auto DELFIA)法检测滤纸干血片洗脱液中血清甲胎蛋白(AFP)和游离β-人绒毛膜促腺性激素(游离β-hCG)含量,并对干血片检测方法的精密度、回收率、检测限等进行评估.结果 该方法检测AFP水平的变异度为2.5%~6.8%;回收率为95.1%;检测低限为0.5 u/mL;检测游离β-hCG水平的变异度为4.1%-7.0 %;回收率为97.6%;检测低限为1μg/L;发病风险为1/128,本研究共测定孕妇1320例,筛查出阳性病例85例,筛查阳性率为6.4%,经羊水染色体检查确诊1例Down's综合征胎儿.与国际公认的金标准血清学筛查结果的符合率为98.4%.结论 采用滤纸干血片法替代血清学方法测定孕中期女性血中AFP和游离β-hCG的含量,用血量少,方便快捷可行,不增加筛查成本,筛查结果准确可靠.
作者:刘霞;周玉侠;张莉;范刚;孙萍;沈峰 刊期: 2009年第12期
目的 观察低频超声辅助尿激酶静脉溶栓治疗大鼠急性脑梗塞后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的变化,探讨其在低频超声助溶脑缺血再灌注损伤及出血性转化中的作用.方法 应用血栓栓塞法制备Wistar大鼠脑梗塞模型,分别给予尿激酶、低频超声照射,采用NSS评价治疗前后神经功能,采用红四氮唑染色法测定脑梗塞体积,采用免疫组化法监测MMP-9的表达.结果 梗塞组用药前后NSS评分差异不明显(t=0.85,P>0.05);尿激酶组、低频超声加尿激酶组给药后24h NSS评分明显低于溶栓前(t=12.59,t=15.31,P均<0.01).3组梗塞灶体积有显著性差异(F=125.99,P<0.01),尿激酶组、低频超声加尿激酶组梗塞灶体积显著小于梗塞组(q=18.02,P<0.01;q=20.62,P<0.01),两组之间差异不显著(q=2.59,P>0.05).尿激酶组和低频超声加尿激酶组MMP-9表达阳性率及光密度值均显著高于梗塞组(F=78.92,F=209.14,P<0.01),两组之间差异不明显(q=2.86,2.47,P>0.05).结论 尿激酶在脑梗死超早期有显著溶栓作用,低频超声波具有显著的协助尿激酶溶栓作用,可以减少尿激酶用量,MMP-9可能在脑梗塞后溶栓的出血转化中起着重要作用.
作者:宋玉强;毕建忠 刊期: 2009年第12期
目的 探讨高温致畸MAPKs中JNK1/2通路蛋白及凋亡基因Caspase-3的表达作用及其机理.方法 孕鼠于受精第8天置42℃水浴,持续20 min后,分别于2、8、16、24、48、72 h经麻醉处死剖腹取胎,并分为高温组(2~72 h,42℃)和对照组(2~72 h,37℃).采用Western blot技术检测JNK1/2、p-JNK1/2及Caspase-3的表达量.结果 高温组JNK1/2的表达量与对照组无明显差异,各组内不同时间的表达量无明显变化;P-JNK1/2在对照组中不表达,高温组8~48 h时的表达量均高于相应的对照组(P<0.05),于16 h时表达增加为显著;Caspase-3在对照组中无表达,在高温组8~48 h时表达增加(P<0.05),于8 h时增加为显著.结论 高温刺激能促使JNK1/2发生磷酸化和凋亡基因Caspase-3的活化,这可能是高温致胚胎先天性畸形的原因之一.
作者:刘雯;马金龙;高彦丽;林万润;郭成浩 刊期: 2009年第12期
目的 探讨颈椎病所致吞咽障碍患者的数字化x线吞咽造影录像表现,并评定其应用价值.方法 对175例颈椎病性吞咽障碍患者行数字化X线造影录像检查,应用图像后处理软件对录像逐帧分析,计数颈椎增生以及咽、食管后壁压迹的位置、数量,测量压迹宽度、深度.结果 175例患者椎体前缘唇样、鸟嘴样增生396处,共出现压迹331个,其中单一压迹82例(46.5%),两处压迹30例(17.2%),三处压迹63例(36.3%);压迹位于C3/4椎间隙9个(2.7%)、C4/5椎间隙78个(23.6%),C5/6椎间隙154个(46.5%)、C6/7椎间隙81个(24.5%),C7/T1椎间隙9个(2.7%);其中轻度压迹216个(65.2%),中度压迹75个(22.6%),重度压迹40个(12.2%).结论 数字化X线吞咽造影录像能够直观、精确、详细的分析颈椎病所致吞咽障碍患者颈椎骨质的改变以及咽、食管后壁受压情况,有重要的应用价值.
作者:王光明;杨小庆;燕敦华;杨玉娥;李德春 刊期: 2009年第12期
目的 探讨血脂异常患者膳食掇入情况及相关危险因素.方法 选取217例血脂异常患者和163例健康人群进行病例对照研究,比较两组的膳食摄入情况,并分别与平衡膳食宝塔建议量比较;进行非条件多因素Logistic回归分析寻找危险因素.结果 病例组谷薯杂豆类、畜禽肉类、鱼虾类、植物油每天摄入量高于健康组(P<0.05);两组均存在严重的蔬菜、水果、乳类摄入不足,而植物油、食盐摄入过多现象;谷薯杂豆类、畜禽肉类、甜食、动物内脏、咸菜、植物油摄入过多,腰臀比(WHR)和脉压大、经常吃夜宵和零食、睡前<4h晚餐、经常接受他人食品是血脂异常的危险因素,饮茶、适量进食畜禽肉类是其保护因素.结论 两组均存在某些食物摄入过多和不足的情况;血脂异常存在严重的膳食依赖性,对危险因素的探讨有助于确定血脂异常高危人群和采取针对性的防治措施.
作者:张凤凤;王淑娥;李心河;王惠敏;赵长峰 刊期: 2009年第12期
目的 探讨蜕膜组织杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)与不明原因早期复发性流产(URSA)易感性的关系.方法 留取URSA妇女(病例组,36例)及正常早孕妇女(对照组,34例)的蜕膜组织,采用酚-氯仿法抽提基因组DNA,序列特异性引物聚合酶链反应检测蜕膜组织14种KIR基因的表达;Trizol一步法提取总RNA,逆转录聚合酶链反应分析KIR mRNA的表达率,荧光实时定量聚合酶链反应分析KIR2DL1、2DL3 mRNA的相对表达量.结果 ①14种KIR基因均以不同频率表达;KIR2DS1基因的表达率在病例组与对照组中分别为60.27%、41.18%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);②6种抑制性KIR mRNA在蜕膜组织中均以不同频率表达,两组的表达率无统计学差异;抑制性KIR mRNA的表达率与KIR基因的表达率并不完全一致;③ KIR2DL1 mRNA及KIR2DL3 mRNA在病例组与对照组中的相对表达量分别为699.37±259.78、11302.96±476.98和625.93±234.81,1216.12±425.96,两组比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 蜕膜组织活化性KIR2DSI基因的表达率增加,抑制性、活化性KIR基因失衡,可能与URSA的发生有关.
作者:徐金娥;王珊;赵跃然;陈子江 刊期: 2009年第12期
目的 探讨异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)对儿童重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效.方法 8例接受allo-PBSCT治疗的SAA患儿均为血缘供体移植,男6例,女2例,7-14岁,中位年龄为11岁.4例患儿为急性SAA-I型,其中2例移植前合并重型感染且未能完全控制;另4例患儿为SAA-Ⅱ型,患儿移植前大多经包括环孢菌素A(CSA)在内的多种治疗无效.诊断至移植的时间为1-45个月,中位时间为13个月.预处理方案由低剂量环磷酰胺(CTX)和抗淋巴细胞球蛋白(ALG)或抗胸腺细胞球蛋白(ATC)组成,采用CsA+短程甲氨蝶呤(MTX)方案预防移植物抗宿主病(GVHD).以DNA短串联重复序列多态性分析(STR-PCR)检测学植入依据.结果 患者移植后均获造血重建,中性粒细胞绝对值≥0.5×109/L和血小板计数≥20×10~9/L的中位时间分别为移植后+12.75d(+10~+15d)和+19.88d(+15~+32d).8例患儿均为完全供体型植入,其中1例移植后10个月出现外周血白细胞、红细胞、血小板计数逐渐下降,STR-PCR显示移植排斥,经ATG、CsA等药物治疗逐渐恢复自身造血.1例患儿出现Ⅱ度急性GVHD,1例出现局限性慢性GVHD.随访15~50个月,中位数为29个月,8例SAA惠儿均存活.结论 采用以免疫抑制为主的ATG/ALG+CTX预处理方案进行allo-PBSCT能够有效治疗儿童SAA,移植相关并发症少,值得临床推广应用.
作者:郭鹏;黄宁;葛林阜 刊期: 2009年第12期
目的 评价自酸蚀粘结剂XenoⅢ与激光联合应用对离体牙牙本质小管通透性的影响.方法 将40颗离体牙制备成牙本质暴露模型,随机均分为4组,分别给予自酸蚀粘结剂、激光、自酸蚀粘结剂与激光联合应用、对照组,并用染色法测量染料渗入的大距离.结果 联合应用组的染料渗入距离较自酸蚀粘结剂组或激光组减少(P<0.05),较对照组明显减少(P<0.01).结论 酸蚀粘结剂与激光联合应用较单独使用自酸蚀粘结剂或激光能更好地降低牙本质小管的通透性.
作者:熊伯刚;许伟森;刘智永;熊世江 刊期: 2009年第12期
目的 探讨青岛市结核病发病的时空聚集性.方法 应用时空重排扫描统计量(采用SaTSCan v8.0软件)对青岛市2006年1月1日至2007年12月31日的结核病登记资料进行分析.结果 回顾性时空聚集分析确定了5个可能的结核病发病聚集区域:莱西市日庄镇东庞周围区域的结核病发病在2006年10月1日至2006年12月31日期间具有聚集性(P=0.001),李沧区永安路办事处文安路周围区域的结核病发病在2007年1月1日至2007年6月30日期间具有聚集性(P=0.006),平度市崔家集镇王家庄周围区域的结核病发病在2006年3月1日至2006年3月31日期间具有聚集性(P=0.016),即墨市普东镇后家屯周围区域的结核病发病在2007年7月1日至2007年8月31日期间具有聚集性(P=0.041),胶南市大村镇大石岭周围区域的结核病发病在2006年4月1日至2006年4月30日期间具有聚集性(P=0.066).结论 时空重排扫描统计量是空间流行病学中用于评价疾病时空聚集性的一种有效的方法,可为结核病时空聚集性特征的阐明以及结核病的有效防控提供统计学依据.
作者:刘云霞;李士雪;王忠东;薛付忠 刊期: 2009年第12期
目的 探讨血清内脂素(visfatin)在2型糖尿病(T2DM)及其合并冠心病(CHD)患者中的表达情况及其影响因素.方法 用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测单纯T2DM组(n=30)、T2DM合并CHD组(n=34)及正常对照组(n=30)的血清内脂素水平和胰岛素(FINS)含量,用日立全自动生化分析仪测定空腹血糖(FPG)、血脂,计算所有观察对象的体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR).结果 单纯T2DM组、T2DM合并CHD组内脂素水平均高于正常对照组(P<0.01),T2DM合并CHD组显著高于单纯T2DM组(P<0.01);内脂素水平与胰岛素抵抗指数(Homa-IR)、WHR具有显著相关性(P<0.01).冠脉病变支数与内脂素表达呈显著正相关(P<0.01).结论 T2DM合并CHD患者血清内脂素表达与Homa-IR、WHR及冠脉病变支数存在密切的相关性,在T2 DM及合并CHD的发生发展中起着重要作用.
作者:唱丽荣;周桂霞;毕锡娟 刊期: 2009年第12期
目的 研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者支气管黏膜中过氧化物酶增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及与气流阻塞的关系.方法 根据吸烟史及肺功能检查将其受试者分为3组:吸烟伴COPD患者18例;吸烟肺功能正常组15例;不吸烟肺功能正常组15例.全部受试者经电子支气管镜取支气管黏膜标本,采用免疫组织化学法检测支气管黏膜中核转录因子PPAR-γ、MMP-9和iNOS的表达,并进行相关性分析.结果 ①免疫组织化学染色结果:核转录因子PPAR-γ在吸烟伴COPD组和吸烟肺功能正常组表达明显减少,MMP-9和iNOS在两组表达明显增多,与不吸烟肺功能正常组比较差异均有统计学意义(P<0.01);②相关性分析:核转录因子PPAR-γ的表达与FEV1%、FEV1/FVC%呈直线正相关(P<0.01);MMP-9和iNOS的表达与肺功能指标呈直线负相关(P<0.01).COPD患者支气管黏膜中核转录因子PPAR-γ的表达与MMP-9和iNOS的表达均呈直线负相关(P<0.05).结论 COPD患者支气管黏膜中核转录因子PPAR-γ表达减少导致气道的抗炎能力下降,气道内炎症细胞及炎症介质增多,导致肺组织损伤及重构,引起和加重COPD患者的气流阻塞.
作者:李巧荣;吴大玮;杨蕾;韩进 刊期: 2009年第12期
目的 研究Graves病(GD)不同阶段患者外周血叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FOXP3)、糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体(GITR)及IL-2受体α链(CD25)基因的表达变化,探讨其在GD发病机制中的作用.方法 收集GD患者90例,按病情分为GD初诊组30例(男13例,女17例);GD缓解组30例(男10例,女20例);GD复发组30例(男11例,女19例).健康查体者30例(男14例,女16例)作为健康对照组.应用实时荧光定量PCR法检测各组外周血单个核细胞中FOXP3、GITR及CIY25 mRNA含量,同时利用电化学发光的方法测定各组血清甲状腺激素水平及甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)的水平.结果 GD各组患者外周血FOXP3mRNA表达均较健康对照组显著降低(P<0.05),GD缓解组FOXP3 mRNA水平较GD初诊组显著升高(P<0.05),复发组FOXP3 mRNA水平虽低于缓解组(P<0.05),但明显高于GD初诊组(P<0.05);GD各组女性患者FOXP3mRNA表达水平显著高于男性患者(P<0.05);Graves初诊及复发组GITR mRNA、CD25mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05).结论 FOXP3、GITR及CD35可能参与了Graves的发生、发展及复发过程.
作者:王宏伟;张莹;陈福琴 刊期: 2009年第12期
目的 采用液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用法(HPLC/MS/MS),以保留时间、结构和分子量信息为指标测定抗风湿、镇痛类中药制剂中可能添加的糖皮质激素类化学药醋酸泼尼松及泼尼松.方法 建立HPLC/MS/MS方法,液相色谱:色谱柱为Agilent C18柱,以0.01 mol/L甲酸铵溶液(甲酸调节pH值至4.0)-甲醇(30:70)为流动相,流速0.4mL/min,柱温30℃,检测波长270nm;质谱:电喷雾离子源正离子检测方式(ESl+),m/z范围50~1000,离子源喷射电压5KV,雾化电压40psi,干燥气温度350℃,干燥气(N2)流速10 L/min,毛细管电压15V.结果 通过与对照品峰的保留时间及一级、二级质谱图谱比较,确定样品中是否添加了化学药.应用该法在供试品溶液中检出了醋酸泼尼松.结论 该方法选择性强,可用于鉴别中药制剂中非法添加糖皮质激素类化学药醋酸泼尼松及泼尼松.
作者:黄萍;凌霄 刊期: 2009年第12期
目的 探讨P物质及血管活性肠肽在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)舌根平面阻塞中的意义.方法 通过免疫组织化学染色对49例OSAHS患者的舌根组织的P物质及血管活性肠肽的表达进行分析.结果 OSAHS患者舌根组织中的粘膜下层、小血管周围、腺泡及腺导管周围均有多量P物质及血管活性肠肽表达.P物质在有舌根肥厚组阳性表达率为80.6%(25/31),在无舌根肥厚组的阳性表达率为33.3%(6/18),经统计学处理χ~2=10.97,P=0.0009;血管活性肠肽在有舌根肥厚组的阳性表达率为90.3%(28/31),在无舌根肥厚组的阳性表达率为55.6%(10/18),χ~2=12.2969,P=0.0005,差异有统计学意义.结论 OSAHS患者舌根组织中有多量P物质及血管活性肠肽表达,它们可引起局部组织肿胀并参与神经源性炎症,进而引起舌根肥厚和塌陷.
作者:王岩;李延忠;王卫之 刊期: 2009年第12期
目的 探讨重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者心脏结构的改变及左心室收缩及舒张功能的影响.方法 对经多导睡眠图监测确诊的87例重度OSAHS患者及30例正常对照组采用多普勒超声检测仪对心脏结构,左心室舒张功能,左心室收缩功能等指标进行比较.结果 OSAHS组与正常对照组比较室间隔厚度,左室后壁厚度,左室质量及质量指数等主要反映心脏结构的超声指标比较差异均有统计学意义.组织多普勒显像室间隔舒张早期峰值运动速度/舒张晚期峰值运动速度(Em/Am)、二尖瓣环Em/Am及左室后壁Em OSAHS组与正常对照组之间比较差异有统计学意义.室间隔、二尖瓣环及左室后壁收缩期峰值运动速度在OSAHS组与正常对照组之间比较差异有统计学意义.结论 重度OSAHS患者心脏结构发生明显的改变,呈向心性肥厚;同时左室舒张功能及收缩功能也存在明显的减退.
作者:王岩;李延忠;李春敏;祝希敏 刊期: 2009年第12期
目的 探讨人乳头瘤病毒58型(HPV58)早期基因E2作为DNA疫苗候选抗原的可行性.方法 构建HPV58E2真核重组表达载体pcDNA3/58E2,转染SiHa细胞,利用RT-PCR检测HPV58E2 mRNA的转录.pcDNA3/58E2 DNA肌肉注射免疫BALB/C小鼠,EusA检测小鼠血清中特异性anti-HPV58E2 IgG水平.结果 RT-PCR结果表明,pcD-NA3/58E2能够在真核细胞中有效转录HPV58E2rnRNA.动物实验表明,质粒pcDNA3/58E2肌肉接种可诱导免疫小鼠产生抗E2特异性抗体.结论 本研究成功构建了重组真核表达载体pcDNA3/58E2,并初步证明HPV58 E2 DNA疫苗有良好的免疫原性.
作者:张晓丽;李潇;王鑫;郑琳;赵蔚明;齐眉 刊期: 2009年第12期
目的 研究他莫昔芬(TAM)对人肝癌HepG2细胞增殖的影响,探讨其作用机制.方法 将他莫昔芬配制为0、7.5、15、30μmol/L,与人肝癌HepG2细胞培养24、48、72 h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定人肝癌HepG2细胞的抑制率;免疫组化染色观察人肝癌HepG2细胞Smad 7蛋白的阳性表达.结果 人肝癌HepG2细胞增殖随他莫昔芬浓度增加和处理时间的延长,细胞抑制率明显增加,细胞浆内Smad 7蛋白阳性表达率明显降低,与时间和浓度呈负相关.结论 他莫昔芬可抑制肝癌细胞增殖,可能与下调Smad7蛋白的表达有关.
作者:范宜锋;王文奇;白文坤;时昌文 刊期: 2009年第12期
目的 了解食管癌变过程中中心体的变化及P53蛋白的表达情况,探讨中心体异常和P53蛋白过表达在食管癌变过程中的作用.方珐选取食管鳞状细胞癌50例,非典型增生22例,正常食管粘膜12例的石蜡包埋组织,采用免疫组织化学染色sP法检测P53蛋白的表达,组织免疫荧光染色法检测中心体的变化.结果 食管癌组织中P53蛋白呈过表达(88%),非典型增生组织中呈弱表达(54%),而正常组织无表达.同样,食管癌组织中有明显中心体异常,非典型增生组织中可见部分中心体异常,而正常组织未见中心体异常.中心体异常和P53蛋白过表达均与肿瘤分化程度及浸润程度呈正相关(P<0.05).食管鳞癌组织中突变的P53蛋白表达与中心体异常显著相关(P<0.05).结论 中心体异常和P53蛋白过表达发生于食管癌变的早期阶段,且与预后相关.P53突变可能参与中心体异常的形成,与之共同参与食管癌的发生.
作者:张楠;孙美丽;李哲;刘杰;王琳琳;孙玉萍 刊期: 2009年第12期
目的 构建人高迁移率族蛋白1(HMGBI)表达载体,并探讨其免疫调节作用.方法 从HMGBl克隆载体酶切分离HMGB1基因片段,插入增强型绿色荧光蛋白载体pCITE-EGFP,菌落PCR和酶谱分析鉴定重组载体.重组表达质粒转染人单核细胞系(U937),梯度G418筛选,荧光和Western blot检测HMGB1的表达.结果 茵落PCR和酶谱分析显示目的 基因被正确插入真核表达载体,获得重组质粒pCITE-EGFP-HMGB1,转染U937细胞随培养基中G418浓度的升高而增强,转染细胞中目的 蛋白HMGB1表达量明显升高.结论 成功构建重组栽体 PCITE-EGFP-HMGB1,并获得稳定表达人HMGB1的单核细胞系,为研究HMGB1对单核巨噬细胞的作用及其机制奠定基础.
作者:徐洁;崔彬;焦玉莲;游力;张捷;刘晓雯;曲芸芸;朱敏;孙新平;赵跃然 刊期: 2009年第12期
目的 探讨外源性激活素A(ACT A)对高胆红素血症(简称高胆)新生大鼠脑细胞凋亡的保护作用.方珐将96只新生7日龄Wistar大鼠随机分为正常对照组、高胆对照组、ACT A治疗I、Ⅱ组,每组24只.采用腹腔注射胆红素溶液的方法建立高胆标准动物模型,ACT A治疗I、Ⅱ组于造模后分别给予高(0.025 mg/L)、低(0.001 mg/L)剂量ACT A灌胃.采用重氮反应法检测各组血清和脑组织中胆红素含量,电镜下观察脑组织超微结构,采用流式细胞仪进行脑组织细胞凋亡分析.结果 治疗I、Ⅱ组神经行为异常较高胆对照组明显减轻;高胆对照组、治疗I、Ⅱ组血清、脑组织胆红素含量均高于正常对照组(P均<0.01);治疗I、Ⅱ组血清、脑组织胆红素含量均低于高胆对照组(P均<0.05);治疗I组血清、脑组织胆红素含量均低于治疗Ⅱ组(P均<0.01).镜下观察可见,高胆对照组神经元损伤明显,各治疗组均有不同程度的修复;流式细胞术结果表明,在造模后12 h,高胆对照组、治疗I、Ⅱ组脑组织凋亡细胞数均值高于正常对照组(P均<0.001),治疗I、Ⅱ组脑组织凋亡细胞数均值低于高胆对照组(P均<0.05),治疗I组脑组织凋亡细胞数低于治疗Ⅱ组(P<0.001).结论 外源性ACTA可明显减少高胆模型鼠体内胆红素的蓄积,有效抑制高胆模型鼠脑细胞凋亡,对高胆所致脑损伤具有保护作用.
作者:李瑞英;安丽;赵东;王平 刊期: 2009年第12期