王岩;李延忠;王卫之
目的 探讨异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)对儿童重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效.方法 8例接受allo-PBSCT治疗的SAA患儿均为血缘供体移植,男6例,女2例,7-14岁,中位年龄为11岁.4例患儿为急性SAA-I型,其中2例移植前合并重型感染且未能完全控制;另4例患儿为SAA-Ⅱ型,患儿移植前大多经包括环孢菌素A(CSA)在内的多种治疗无效.诊断至移植的时间为1-45个月,中位时间为13个月.预处理方案由低剂量环磷酰胺(CTX)和抗淋巴细胞球蛋白(ALG)或抗胸腺细胞球蛋白(ATC)组成,采用CsA+短程甲氨蝶呤(MTX)方案预防移植物抗宿主病(GVHD).以DNA短串联重复序列多态性分析(STR-PCR)检测学植入依据.结果 患者移植后均获造血重建,中性粒细胞绝对值≥0.5×109/L和血小板计数≥20×10~9/L的中位时间分别为移植后+12.75d(+10~+15d)和+19.88d(+15~+32d).8例患儿均为完全供体型植入,其中1例移植后10个月出现外周血白细胞、红细胞、血小板计数逐渐下降,STR-PCR显示移植排斥,经ATG、CsA等药物治疗逐渐恢复自身造血.1例患儿出现Ⅱ度急性GVHD,1例出现局限性慢性GVHD.随访15~50个月,中位数为29个月,8例SAA惠儿均存活.结论 采用以免疫抑制为主的ATG/ALG+CTX预处理方案进行allo-PBSCT能够有效治疗儿童SAA,移植相关并发症少,值得临床推广应用.
作者:郭鹏;黄宁;葛林阜 刊期: 2009年第12期
目的 构建人高迁移率族蛋白1(HMGBI)表达载体,并探讨其免疫调节作用.方法 从HMGBl克隆载体酶切分离HMGB1基因片段,插入增强型绿色荧光蛋白载体pCITE-EGFP,菌落PCR和酶谱分析鉴定重组载体.重组表达质粒转染人单核细胞系(U937),梯度G418筛选,荧光和Western blot检测HMGB1的表达.结果 茵落PCR和酶谱分析显示目的 基因被正确插入真核表达载体,获得重组质粒pCITE-EGFP-HMGB1,转染U937细胞随培养基中G418浓度的升高而增强,转染细胞中目的 蛋白HMGB1表达量明显升高.结论 成功构建重组栽体 PCITE-EGFP-HMGB1,并获得稳定表达人HMGB1的单核细胞系,为研究HMGB1对单核巨噬细胞的作用及其机制奠定基础.
作者:徐洁;崔彬;焦玉莲;游力;张捷;刘晓雯;曲芸芸;朱敏;孙新平;赵跃然 刊期: 2009年第12期
目的 观察尿毒清对阿霉素(ADR)肾病大鼠肾脏转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)和骨调素(0PN)mRNA表达的影响,探讨尿毒清治疗慢性肾脏疾病的机制.方法 成年雄性SD大鼠24只,采用单侧肾切除加重复尾静脉注射ADR的方法制作ADR肾病模型,随机分为正常组(N组)、模型组(M组)、尿毒清组(Ni组)、贝那普利组(B组)4组,每组6只.用药第4、8周后观察各组大鼠24h尿蛋白定量、血脂、血浆总蛋白(TP)、血浆白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的水平,实时荧光定量PCR测定第8周肾组织中TGF-β_1、TIMP-1、PAI-1及OPN mRNA的表达.结果 尿毒清和贝那普利均能减少ADR肾病大鼠尿蛋白,降低BUN、Scr,升高血浆蛋白,纠正脂代谢紊乱,减少TGF-β_1、TIMP-1、PAI-1及OPN mRNA的表达,与M组相比有显著差异(P<0.01);而Ni组PAI-1 mRNA水平较B组显著降低(P<0.01).结论 尿毒清可下调ADR肾病大鼠肾脏组织TGF-β_1、TIMP-1、PAI-1及OPN mRNA的合成,可能是其治疗慢性肾脏疾病的重要机制之一.
作者:王娜;亓敏;梁素忍;冯进波;彭涛;裴斐;胡昭 刊期: 2009年第12期
目的 建立测定透析液中去铁酮(DFP)浓度的高效液相色谱法(HPLC),观察DFP的大鼠血浆蛋白结合率.方法 以体外方式,采用平衡透析法模拟DFP在大鼠体内与血浆蛋白结合的过程,并用HPLC法测定其透析液中DFP的浓度及血浆蛋白结合率.结果 低、中、高3种浓度下,DFP的大鼠血浆蛋白结合率范围为4.25%~5.31%,不同浓度组血浆蛋白结合率差异无统计学意义(P>0.05).结论 DFP血浆蛋白结合率较低,属于低血浆蛋白结合药物,其主要以游离形式存在而发挥药效.
作者:巩泉泉;刘萍;徐华雷;张雅楠;贾晓静;李玉彩 刊期: 2009年第12期
目的 研究卡托普利(CP)和氯沙坦(LT)及血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)对Wistar大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡相关基因表达的影响.方法 采用流式细胞技术检测CP、LT及Cp与LT联合应用对在Ang Ⅱ不同浓度、不同作用时间下体外培养的大鼠主动脉VSMC凋亡相关基因Bcl-2及Fas的表达量.结果 随着AngⅡ作用浓度的增加和作用时间的延长,Bcl-2基因表达量增加且呈浓度和作用时问依赖(P<0.01);AngⅡ可使Fas的表达量增加(P<0.05),但无明显时间和浓度依赖性;一定浓度的CP(5×10~(-6) mol/L)和LT(5×10~(-6) mol/L)可抑制AngⅡ对2个基因表达的影响.(P均<0.05或P均<0.01).结论 CP和LT可以通过拮抗VSMC凋亡基因Bcl-2和Fas的表达促进异常增殖的VSMC凋亡,且这一作用与作用浓度和作用时间相关.
作者:李劲迈;朱清;岳欣;贺红 刊期: 2009年第12期
目的 评价自酸蚀粘结剂XenoⅢ与激光联合应用对离体牙牙本质小管通透性的影响.方法 将40颗离体牙制备成牙本质暴露模型,随机均分为4组,分别给予自酸蚀粘结剂、激光、自酸蚀粘结剂与激光联合应用、对照组,并用染色法测量染料渗入的大距离.结果 联合应用组的染料渗入距离较自酸蚀粘结剂组或激光组减少(P<0.05),较对照组明显减少(P<0.01).结论 酸蚀粘结剂与激光联合应用较单独使用自酸蚀粘结剂或激光能更好地降低牙本质小管的通透性.
作者:熊伯刚;许伟森;刘智永;熊世江 刊期: 2009年第12期
目的 优选复方中草药免疫活性成分佳的工艺条件.方法 用均匀试验法设计佳提取工艺条件,以复方的提取物得率、巨噬细胞吞噬活性和淋巴细胞增值率为测定指标,研究液料比、温度、提取时间和醇沉比例四个因素提取的免疫活性成分对小白鼠免疫功能的影响.结果 佳提取工艺条件为:液料比20:1(g/mL),温度为100℃,提取时间为170min,醇沉比例为85%.结论 该工艺适合于中草药免疫复方配伍的筛选.
作者:张明 刊期: 2009年第12期
目的 探讨腹膜透析患者盐摄入量与口腔盐敏感度的关系.方法 收集2008年3~12月在北京大学第三医院腹膜透析中心和山东大学齐鲁医院肾内科定期随访的45例腹膜透析患者的24 h透出液及尿液做化验检查.收取患者的饮食记录,按盐排出量和血压将这些患者分为低盐摄入组(21例)和高盐摄入组(24例),检测每位患者口腔对氯化钠的敏感度,按味觉缺失分评价味觉缺失程度.结果 两组患者年龄、性别比例等基本生理资料差异无统计学意义(P>0.05),但两组患者的口腔盐敏感度差异有统计学意义(P<0.05),钠盐摄入多的腹膜透析患者口腔盐敏感度较钠盐摄入少者差.结论 腹膜透析患者盐摄入量与其口腔盐敏感度密切相关.
作者:刘茂静;范晓红;鲁新红;阿拉塔;汪涛;胡昭 刊期: 2009年第12期
目的 探讨梗阻性肾病时血清中Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢ NP)浓度的变化与肾组织纤维化的相关性.方法 将健康雄性新西兰大白兔40只通过手术分为单侧输尿管部分梗阻组、单侧输尿管完全梗阻组、假手术组、正常对照组,每组10只.术前及术后1~8周抽取大白兔静脉血,放射免疫法测定血清中PCⅢ及PⅢ NP含量.术后第8周提取动物肾脏组织,免疫组化SP法染色测定Ⅲ型胶原含量,HE染色测定肾小管肾间质纤维化程度.结果 ①术后1-8周PCⅢ及PⅢ NP值较术前升高(P<0.05).单侧输尿管部分梗阻组、单侧输尿管完全梗阻组PC山及PⅢ NP值较同期对照组、假手术组值升高(P<0.05);②单侧输尿管部分梗阻组、单侧输尿管完全梗阻组肾小管肾间质病变比率较对照组差异有统计学意义(P<0.05);③血清PCⅢ及PⅢNP浓度与病变肾小管肾间质比率呈正相关(P<0.05).结论 血清PCⅢ及PⅢNP与肾积水时肾脏间质纤维化密切相关.在排除其他脏器纤维化的前提下,血清PCⅢ及PⅢNP可以作为早期判断肾积水肾脏纤维化的无创性检查指标.
作者:张亮;刘玉强;李远;殷钢;孟凡伟;柳豪;王传运 刊期: 2009年第12期
目的 了解食管癌变过程中中心体的变化及P53蛋白的表达情况,探讨中心体异常和P53蛋白过表达在食管癌变过程中的作用.方珐选取食管鳞状细胞癌50例,非典型增生22例,正常食管粘膜12例的石蜡包埋组织,采用免疫组织化学染色sP法检测P53蛋白的表达,组织免疫荧光染色法检测中心体的变化.结果 食管癌组织中P53蛋白呈过表达(88%),非典型增生组织中呈弱表达(54%),而正常组织无表达.同样,食管癌组织中有明显中心体异常,非典型增生组织中可见部分中心体异常,而正常组织未见中心体异常.中心体异常和P53蛋白过表达均与肿瘤分化程度及浸润程度呈正相关(P<0.05).食管鳞癌组织中突变的P53蛋白表达与中心体异常显著相关(P<0.05).结论 中心体异常和P53蛋白过表达发生于食管癌变的早期阶段,且与预后相关.P53突变可能参与中心体异常的形成,与之共同参与食管癌的发生.
作者:张楠;孙美丽;李哲;刘杰;王琳琳;孙玉萍 刊期: 2009年第12期
目的 探讨冠心病、糖尿病患者对平板运动试验后心率恢复的影响以及心率恢复异常对无症状的糖尿病患者合并冠心病的诊断价值.方法 对88例拟诊冠心病患者行平板运动试验,以糖尿病史及血糖水平分为非糖尿病组(n=45)、糖尿病组(n=43).根据冠脉造影结果,非糖尿病组分为非冠心病组(A组,n=22)和冠心病组(B组,n=23),糖尿病组分为非冠心病组(C组,n=22)和冠心病组(D组,n=21).计算运动后1、2、3、4和5 min心率恢复值并进行比较.研究心率恢复异常对非糖尿病和糖尿病患者合并冠心痛的诊断价值.结果 平板运动后1、2、3、4和5min心率恢复值由大到小依次为A、C、B和D组.与非糖尿病组相比,心率恢复异常诊断糖尿病所合并冠心病的灵敏性高,特异性和准确性无差别.结论 冠心病对心率恢复的影响大于糖尿病,心率恢复异常可以作为筛选糖尿病患者是否合并冠心病的指标之一.
作者:张玉红;李贵双;李海德 刊期: 2009年第12期
目的 比较改良的Hemi-straw与Cryoleaf法对人卵子和胚胎的玻璃化保存效果.方法 将接受体外受精-胚胎移植周期中剩余的98枚未受精卵和76枚废弃胚胎,分别采用Cryoleaf(A组)与改良的Hemi-straw(B组)为载体进行玻璃化冷冻,复苏后观察并计算两种玻璃化载体的卵子存活率,24 h继续存活率与卵裂率;胚胎存活率,24h继续存活率及囊胚形成率.结果 Cryoleaf与改良的Hemi-straw法保存人未受精卵分别为43、55枚,复苏存活分别为29(67.4%)、31(56.4%)枚,24 h继续存活分别为23(53.5%)、25(45.5%)枚,卵裂分别为3(7.0%)、1(1.8%)枚,两种载体差异不明显(P>0.05).Cryoleaf与改良的Hemi-straw法保存废弃胚胎分别为39、37枚,复苏存活分别为29(74.4%)、33(89.2%)枚,24h继续存活分别为28(71.8%)、33(89.2%)枚,形成囊胚分别为5(12.8%)、1(2.7%)枚,两种载体差异不明显(P>0.05).结论 改良的Hemi-straw与Cryoleaf法具有相似的保存效率,但前者具有材料来源广泛,价格低廉的优越性.
作者:王利红;连方;张宁 刊期: 2009年第12期
目的 采用液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用法(HPLC/MS/MS),以保留时间、结构和分子量信息为指标测定抗风湿、镇痛类中药制剂中可能添加的糖皮质激素类化学药醋酸泼尼松及泼尼松.方法 建立HPLC/MS/MS方法,液相色谱:色谱柱为Agilent C18柱,以0.01 mol/L甲酸铵溶液(甲酸调节pH值至4.0)-甲醇(30:70)为流动相,流速0.4mL/min,柱温30℃,检测波长270nm;质谱:电喷雾离子源正离子检测方式(ESl+),m/z范围50~1000,离子源喷射电压5KV,雾化电压40psi,干燥气温度350℃,干燥气(N2)流速10 L/min,毛细管电压15V.结果 通过与对照品峰的保留时间及一级、二级质谱图谱比较,确定样品中是否添加了化学药.应用该法在供试品溶液中检出了醋酸泼尼松.结论 该方法选择性强,可用于鉴别中药制剂中非法添加糖皮质激素类化学药醋酸泼尼松及泼尼松.
作者:黄萍;凌霄 刊期: 2009年第12期
目的 探讨颈椎病所致吞咽障碍患者的数字化x线吞咽造影录像表现,并评定其应用价值.方法 对175例颈椎病性吞咽障碍患者行数字化X线造影录像检查,应用图像后处理软件对录像逐帧分析,计数颈椎增生以及咽、食管后壁压迹的位置、数量,测量压迹宽度、深度.结果 175例患者椎体前缘唇样、鸟嘴样增生396处,共出现压迹331个,其中单一压迹82例(46.5%),两处压迹30例(17.2%),三处压迹63例(36.3%);压迹位于C3/4椎间隙9个(2.7%)、C4/5椎间隙78个(23.6%),C5/6椎间隙154个(46.5%)、C6/7椎间隙81个(24.5%),C7/T1椎间隙9个(2.7%);其中轻度压迹216个(65.2%),中度压迹75个(22.6%),重度压迹40个(12.2%).结论 数字化X线吞咽造影录像能够直观、精确、详细的分析颈椎病所致吞咽障碍患者颈椎骨质的改变以及咽、食管后壁受压情况,有重要的应用价值.
作者:王光明;杨小庆;燕敦华;杨玉娥;李德春 刊期: 2009年第12期
目的 探讨高温致畸MAPKs中JNK1/2通路蛋白及凋亡基因Caspase-3的表达作用及其机理.方法 孕鼠于受精第8天置42℃水浴,持续20 min后,分别于2、8、16、24、48、72 h经麻醉处死剖腹取胎,并分为高温组(2~72 h,42℃)和对照组(2~72 h,37℃).采用Western blot技术检测JNK1/2、p-JNK1/2及Caspase-3的表达量.结果 高温组JNK1/2的表达量与对照组无明显差异,各组内不同时间的表达量无明显变化;P-JNK1/2在对照组中不表达,高温组8~48 h时的表达量均高于相应的对照组(P<0.05),于16 h时表达增加为显著;Caspase-3在对照组中无表达,在高温组8~48 h时表达增加(P<0.05),于8 h时增加为显著.结论 高温刺激能促使JNK1/2发生磷酸化和凋亡基因Caspase-3的活化,这可能是高温致胚胎先天性畸形的原因之一.
作者:刘雯;马金龙;高彦丽;林万润;郭成浩 刊期: 2009年第12期
目的 探讨沉默信号调控因子(SIRT1)在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)保护神经轴突中的作用.方法 应用长春新碱毁损法制备背根神经节轴突变性细胞模型,应用透射电镜、RT-PCR、Western blot方法,观察正常背根神经节培养组、长春新碱毁损组、NAD保护组神经轴突的生长变化、超微结构变化和SIRTI mRNA及SIRTl蛋白的表达变化.结果 NAD保护组毁损8 h后轴突远端始发生轻微肿胀,断离.透射电镜结果显示,长春新碱毁损组轴突肿胀,大量髓样小体出现,微丝微管排列紊乱,聚集,溶解,被絮状沉淀物和膜性结构所代替.NAD保护组可见较多平行排列的微丝微管,轴突肿胀较轻.RT-PCR结果显示,NAD保护组的SIRT1基因表达较毁损组上调.Western blot结果显示,损伤组可见其蛋白表达量明显降低,NAD保护组中SIRT1蛋白表达较毁损组上调.结论 sIRT1参与NAD对轴突变性的保护作用.
作者:綦晓霞;李振华;张静;房凡;卢静;杨淑华;孙晋浩 刊期: 2009年第12期
目的 研究免疫抑制剂他罗利姆(FK506)对癫痫持续状态(SE)大鼠海马组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响及其脑保护作用.方法 随机将162只Wistar大鼠分为癫痫组、FK506干预组、对照组各54只.采用匹鲁卡品腹腔注射制作SE模型,FK506干预组在注射匹鲁卡品之前24、1h 2次腹腔注射FK506,对照组注射等体积生理盐水;采用比色法和羟胺法分别检测海马组织中NO、MDA含量、NOS、SOD活性;采用免疫组化法检测海马组织神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的表达;采用HE染色观察神经元形态变化.结果 与癫痫组相比,FKS06干预组NO、MDA含量、NOS活性明显降低(P均<0.01),SOD活性在癫痫发作后12h以内降低(P<0.05),在3d之后升高(P<0.01);海马nNOS的表达降低(P<0.01),存活神经元增加.结论 FKS06可能通过抑制NOS/NO途径发挥抗癫痫和脑保护作用.
作者:刘金之;李丽莉;王爱华;郝爱军;黄燕飞;薛萍 刊期: 2009年第12期
目的 探讨滤纸干血片法应用于孕中期妇女唐氏(Down's)综合征产前筛查的可行性.方法 应用自动时间分辨荧光免疫分析(Auto DELFIA)法检测滤纸干血片洗脱液中血清甲胎蛋白(AFP)和游离β-人绒毛膜促腺性激素(游离β-hCG)含量,并对干血片检测方法的精密度、回收率、检测限等进行评估.结果 该方法检测AFP水平的变异度为2.5%~6.8%;回收率为95.1%;检测低限为0.5 u/mL;检测游离β-hCG水平的变异度为4.1%-7.0 %;回收率为97.6%;检测低限为1μg/L;发病风险为1/128,本研究共测定孕妇1320例,筛查出阳性病例85例,筛查阳性率为6.4%,经羊水染色体检查确诊1例Down's综合征胎儿.与国际公认的金标准血清学筛查结果的符合率为98.4%.结论 采用滤纸干血片法替代血清学方法测定孕中期女性血中AFP和游离β-hCG的含量,用血量少,方便快捷可行,不增加筛查成本,筛查结果准确可靠.
作者:刘霞;周玉侠;张莉;范刚;孙萍;沈峰 刊期: 2009年第12期
目的 探讨青岛市结核病发病的时空聚集性.方法 应用时空重排扫描统计量(采用SaTSCan v8.0软件)对青岛市2006年1月1日至2007年12月31日的结核病登记资料进行分析.结果 回顾性时空聚集分析确定了5个可能的结核病发病聚集区域:莱西市日庄镇东庞周围区域的结核病发病在2006年10月1日至2006年12月31日期间具有聚集性(P=0.001),李沧区永安路办事处文安路周围区域的结核病发病在2007年1月1日至2007年6月30日期间具有聚集性(P=0.006),平度市崔家集镇王家庄周围区域的结核病发病在2006年3月1日至2006年3月31日期间具有聚集性(P=0.016),即墨市普东镇后家屯周围区域的结核病发病在2007年7月1日至2007年8月31日期间具有聚集性(P=0.041),胶南市大村镇大石岭周围区域的结核病发病在2006年4月1日至2006年4月30日期间具有聚集性(P=0.066).结论 时空重排扫描统计量是空间流行病学中用于评价疾病时空聚集性的一种有效的方法,可为结核病时空聚集性特征的阐明以及结核病的有效防控提供统计学依据.
作者:刘云霞;李士雪;王忠东;薛付忠 刊期: 2009年第12期
目的 探讨S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(sAMDC)基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭能力的抑制作用.方法 用特异性沉默SAMDC基因表达的RNA干扰真核表达载体SAMDC shRNA表达载体(pGPU6-SAMDC)转染乳腺癌MCF-7细胞,采用RT-PcR和Western-blot技术分别检测SAMDC mRNA和蛋白质表达水平;细胞增殖实验(CCK-8法)和细胞周期分析评价SAMDC基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,肿瘤侵袭实验观察SAMDC基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7侵袭活性的影响.结果 SAMDC shRNA表达载体转染后,MCF-7细胞SAMDC mRNA水平下调43.8%,蛋白表达水平下降66.5%;MCF-7细胞的增殖活性和侵袭能力均受到明显抑制,细胞增殖活性下降37%,细胞周期分析G1期细胞增加.结论 SAMDC基因沉默可通过延长细胞周期的G1期而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并能降低癌细胞侵袭活性,提示SAMDC可作为乳腺癌基因治疗的靶分子.
作者:辛佳璇;陈世敏;王伟;阎云飞;徐春晓;刘斌;刘贤锡 刊期: 2009年第12期