巩泉泉;刘萍;徐华雷;张雅楠;贾晓静;李玉彩
目的 探讨高温致畸MAPKs中JNK1/2通路蛋白及凋亡基因Caspase-3的表达作用及其机理.方法 孕鼠于受精第8天置42℃水浴,持续20 min后,分别于2、8、16、24、48、72 h经麻醉处死剖腹取胎,并分为高温组(2~72 h,42℃)和对照组(2~72 h,37℃).采用Western blot技术检测JNK1/2、p-JNK1/2及Caspase-3的表达量.结果 高温组JNK1/2的表达量与对照组无明显差异,各组内不同时间的表达量无明显变化;P-JNK1/2在对照组中不表达,高温组8~48 h时的表达量均高于相应的对照组(P<0.05),于16 h时表达增加为显著;Caspase-3在对照组中无表达,在高温组8~48 h时表达增加(P<0.05),于8 h时增加为显著.结论 高温刺激能促使JNK1/2发生磷酸化和凋亡基因Caspase-3的活化,这可能是高温致胚胎先天性畸形的原因之一.
作者:刘雯;马金龙;高彦丽;林万润;郭成浩 刊期: 2009年第12期
目的 探讨人乳头瘤病毒58型(HPV58)早期基因E2作为DNA疫苗候选抗原的可行性.方法 构建HPV58E2真核重组表达载体pcDNA3/58E2,转染SiHa细胞,利用RT-PCR检测HPV58E2 mRNA的转录.pcDNA3/58E2 DNA肌肉注射免疫BALB/C小鼠,EusA检测小鼠血清中特异性anti-HPV58E2 IgG水平.结果 RT-PCR结果表明,pcD-NA3/58E2能够在真核细胞中有效转录HPV58E2rnRNA.动物实验表明,质粒pcDNA3/58E2肌肉接种可诱导免疫小鼠产生抗E2特异性抗体.结论 本研究成功构建了重组真核表达载体pcDNA3/58E2,并初步证明HPV58 E2 DNA疫苗有良好的免疫原性.
作者:张晓丽;李潇;王鑫;郑琳;赵蔚明;齐眉 刊期: 2009年第12期
目的 观察低频超声辅助尿激酶静脉溶栓治疗大鼠急性脑梗塞后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的变化,探讨其在低频超声助溶脑缺血再灌注损伤及出血性转化中的作用.方法 应用血栓栓塞法制备Wistar大鼠脑梗塞模型,分别给予尿激酶、低频超声照射,采用NSS评价治疗前后神经功能,采用红四氮唑染色法测定脑梗塞体积,采用免疫组化法监测MMP-9的表达.结果 梗塞组用药前后NSS评分差异不明显(t=0.85,P>0.05);尿激酶组、低频超声加尿激酶组给药后24h NSS评分明显低于溶栓前(t=12.59,t=15.31,P均<0.01).3组梗塞灶体积有显著性差异(F=125.99,P<0.01),尿激酶组、低频超声加尿激酶组梗塞灶体积显著小于梗塞组(q=18.02,P<0.01;q=20.62,P<0.01),两组之间差异不显著(q=2.59,P>0.05).尿激酶组和低频超声加尿激酶组MMP-9表达阳性率及光密度值均显著高于梗塞组(F=78.92,F=209.14,P<0.01),两组之间差异不明显(q=2.86,2.47,P>0.05).结论 尿激酶在脑梗死超早期有显著溶栓作用,低频超声波具有显著的协助尿激酶溶栓作用,可以减少尿激酶用量,MMP-9可能在脑梗塞后溶栓的出血转化中起着重要作用.
作者:宋玉强;毕建忠 刊期: 2009年第12期
目的 采用液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用法(HPLC/MS/MS),以保留时间、结构和分子量信息为指标测定抗风湿、镇痛类中药制剂中可能添加的糖皮质激素类化学药醋酸泼尼松及泼尼松.方法 建立HPLC/MS/MS方法,液相色谱:色谱柱为Agilent C18柱,以0.01 mol/L甲酸铵溶液(甲酸调节pH值至4.0)-甲醇(30:70)为流动相,流速0.4mL/min,柱温30℃,检测波长270nm;质谱:电喷雾离子源正离子检测方式(ESl+),m/z范围50~1000,离子源喷射电压5KV,雾化电压40psi,干燥气温度350℃,干燥气(N2)流速10 L/min,毛细管电压15V.结果 通过与对照品峰的保留时间及一级、二级质谱图谱比较,确定样品中是否添加了化学药.应用该法在供试品溶液中检出了醋酸泼尼松.结论 该方法选择性强,可用于鉴别中药制剂中非法添加糖皮质激素类化学药醋酸泼尼松及泼尼松.
作者:黄萍;凌霄 刊期: 2009年第12期
目的 观察尿毒清对阿霉素(ADR)肾病大鼠肾脏转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)和骨调素(0PN)mRNA表达的影响,探讨尿毒清治疗慢性肾脏疾病的机制.方法 成年雄性SD大鼠24只,采用单侧肾切除加重复尾静脉注射ADR的方法制作ADR肾病模型,随机分为正常组(N组)、模型组(M组)、尿毒清组(Ni组)、贝那普利组(B组)4组,每组6只.用药第4、8周后观察各组大鼠24h尿蛋白定量、血脂、血浆总蛋白(TP)、血浆白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的水平,实时荧光定量PCR测定第8周肾组织中TGF-β_1、TIMP-1、PAI-1及OPN mRNA的表达.结果 尿毒清和贝那普利均能减少ADR肾病大鼠尿蛋白,降低BUN、Scr,升高血浆蛋白,纠正脂代谢紊乱,减少TGF-β_1、TIMP-1、PAI-1及OPN mRNA的表达,与M组相比有显著差异(P<0.01);而Ni组PAI-1 mRNA水平较B组显著降低(P<0.01).结论 尿毒清可下调ADR肾病大鼠肾脏组织TGF-β_1、TIMP-1、PAI-1及OPN mRNA的合成,可能是其治疗慢性肾脏疾病的重要机制之一.
作者:王娜;亓敏;梁素忍;冯进波;彭涛;裴斐;胡昭 刊期: 2009年第12期
目的 评价自酸蚀粘结剂XenoⅢ与激光联合应用对离体牙牙本质小管通透性的影响.方法 将40颗离体牙制备成牙本质暴露模型,随机均分为4组,分别给予自酸蚀粘结剂、激光、自酸蚀粘结剂与激光联合应用、对照组,并用染色法测量染料渗入的大距离.结果 联合应用组的染料渗入距离较自酸蚀粘结剂组或激光组减少(P<0.05),较对照组明显减少(P<0.01).结论 酸蚀粘结剂与激光联合应用较单独使用自酸蚀粘结剂或激光能更好地降低牙本质小管的通透性.
作者:熊伯刚;许伟森;刘智永;熊世江 刊期: 2009年第12期
目的 研究Graves病(GD)不同阶段患者外周血叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FOXP3)、糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体(GITR)及IL-2受体α链(CD25)基因的表达变化,探讨其在GD发病机制中的作用.方法 收集GD患者90例,按病情分为GD初诊组30例(男13例,女17例);GD缓解组30例(男10例,女20例);GD复发组30例(男11例,女19例).健康查体者30例(男14例,女16例)作为健康对照组.应用实时荧光定量PCR法检测各组外周血单个核细胞中FOXP3、GITR及CIY25 mRNA含量,同时利用电化学发光的方法测定各组血清甲状腺激素水平及甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)的水平.结果 GD各组患者外周血FOXP3mRNA表达均较健康对照组显著降低(P<0.05),GD缓解组FOXP3 mRNA水平较GD初诊组显著升高(P<0.05),复发组FOXP3 mRNA水平虽低于缓解组(P<0.05),但明显高于GD初诊组(P<0.05);GD各组女性患者FOXP3mRNA表达水平显著高于男性患者(P<0.05);Graves初诊及复发组GITR mRNA、CD25mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05).结论 FOXP3、GITR及CD35可能参与了Graves的发生、发展及复发过程.
作者:王宏伟;张莹;陈福琴 刊期: 2009年第12期
目的 总结先天性三尖瓣下移畸形(Ebsein畸形)的临床解剖分型及外科治疗方法.方法 2005年7月到2009年3月收治的Ebstein畸形25例患者,根据术中所见的三尖瓣畸形及下移的程度分为I型8例,Ⅱ型12例,Ⅲ型5例.其中l型全部行后瓣环成形术,Ⅱ型中9例行房化心室折叠术+三尖瓣成形术,2例行三尖瓣置换术,1例行三尖瓣成形+双向腔肺动脉分流术(双向Gleen术).Ⅲ型全部行三尖瓣置换术.结果 全组病例无死亡.2例术后出现低心排综合征.应用强心利尿药后均好转,其余患者术后恢复良好.随访15例,随访时间4个月~2年,复查超声心动图显示:12例三尖瓣水平无返流,3例三尖瓣水平见轻-中度返流信号,10例心功能I级(NYHA分级),5例心功能Ⅱ级(NYHA分级).结论 Ebstein心脏畸形的临床病理解剖分型对其临床诊断及手术方案的选择有较高的价值.
作者:李金东;王安彪;张海洲;张文龙;王正军;訾捷;范全心 刊期: 2009年第12期
目的 建立测定透析液中去铁酮(DFP)浓度的高效液相色谱法(HPLC),观察DFP的大鼠血浆蛋白结合率.方法 以体外方式,采用平衡透析法模拟DFP在大鼠体内与血浆蛋白结合的过程,并用HPLC法测定其透析液中DFP的浓度及血浆蛋白结合率.结果 低、中、高3种浓度下,DFP的大鼠血浆蛋白结合率范围为4.25%~5.31%,不同浓度组血浆蛋白结合率差异无统计学意义(P>0.05).结论 DFP血浆蛋白结合率较低,属于低血浆蛋白结合药物,其主要以游离形式存在而发挥药效.
作者:巩泉泉;刘萍;徐华雷;张雅楠;贾晓静;李玉彩 刊期: 2009年第12期
目的 探讨S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(sAMDC)基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭能力的抑制作用.方法 用特异性沉默SAMDC基因表达的RNA干扰真核表达载体SAMDC shRNA表达载体(pGPU6-SAMDC)转染乳腺癌MCF-7细胞,采用RT-PcR和Western-blot技术分别检测SAMDC mRNA和蛋白质表达水平;细胞增殖实验(CCK-8法)和细胞周期分析评价SAMDC基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,肿瘤侵袭实验观察SAMDC基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7侵袭活性的影响.结果 SAMDC shRNA表达载体转染后,MCF-7细胞SAMDC mRNA水平下调43.8%,蛋白表达水平下降66.5%;MCF-7细胞的增殖活性和侵袭能力均受到明显抑制,细胞增殖活性下降37%,细胞周期分析G1期细胞增加.结论 SAMDC基因沉默可通过延长细胞周期的G1期而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并能降低癌细胞侵袭活性,提示SAMDC可作为乳腺癌基因治疗的靶分子.
作者:辛佳璇;陈世敏;王伟;阎云飞;徐春晓;刘斌;刘贤锡 刊期: 2009年第12期
目的 研究中老年糖尿病患者心脏血流动力学的特点,探讨利用无创血流动力学监护系统早期发现糖尿病心脏病变的敏感指标.方法 将218例研究对象分为正常对照组(n=130)、糖尿病前期组(n=23)和糖尿病组(n=65),测定体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、脉压(PP)、平均动脉压(MAP)等指标.应用LIFEGARDⅡ型无创血流动力学监护系统测定心输出量(CO)、心脏指数(CI)、体循环血管阻力(SVR)、体循环血管阻力指数(SVRI)、每搏输出量(SV)、每搏指数(SI)、胸腔液体量(TFC)、加速度指数(ACI)、左心做功指数(LEWI)、射血前期(PEP)、左室射血时间(LVET)、速度指数(Ⅵ)、收缩时间比率(STR)、心率(HR).结果 ①与正常对照组相比,糖尿病组WHR、FPG、TC、SBP、PP、PEP和SIR升高(P<0.05或P<0.01);ACI、VI降低(P<0.01);②与正常对照组相比,糖尿病前期组FPG升高(P<0.01):ACI、VI降低(P<0.05);③相关分析:ACI与BMI、WHR、FIG、SBP、DBP、MAP和HR呈负相关(P<0.01);PEP与BMI呈正相关(P<0.01);Ⅵ与BMI、WHR、FIG、SBP、DBP、MAP和HR呈负相关(P<0.01);STR与BMI和WHR呈正相关(P<0.05或P<0.01).结论 中老年糖尿病患者、糖尿病前期患者存在不同程度的心脏血流动力学异常,BMI是引起上述指标改变的共同危险因素;ACI和Ⅵ可作为评价糖尿病心脏血流动力学异常的无创性敏感性指标.
作者:于飞;李保应;石珊珊;王茜;张志勉;高海青 刊期: 2009年第12期
目的 了解食管癌变过程中中心体的变化及P53蛋白的表达情况,探讨中心体异常和P53蛋白过表达在食管癌变过程中的作用.方珐选取食管鳞状细胞癌50例,非典型增生22例,正常食管粘膜12例的石蜡包埋组织,采用免疫组织化学染色sP法检测P53蛋白的表达,组织免疫荧光染色法检测中心体的变化.结果 食管癌组织中P53蛋白呈过表达(88%),非典型增生组织中呈弱表达(54%),而正常组织无表达.同样,食管癌组织中有明显中心体异常,非典型增生组织中可见部分中心体异常,而正常组织未见中心体异常.中心体异常和P53蛋白过表达均与肿瘤分化程度及浸润程度呈正相关(P<0.05).食管鳞癌组织中突变的P53蛋白表达与中心体异常显著相关(P<0.05).结论 中心体异常和P53蛋白过表达发生于食管癌变的早期阶段,且与预后相关.P53突变可能参与中心体异常的形成,与之共同参与食管癌的发生.
作者:张楠;孙美丽;李哲;刘杰;王琳琳;孙玉萍 刊期: 2009年第12期
目的 优选复方中草药免疫活性成分佳的工艺条件.方法 用均匀试验法设计佳提取工艺条件,以复方的提取物得率、巨噬细胞吞噬活性和淋巴细胞增值率为测定指标,研究液料比、温度、提取时间和醇沉比例四个因素提取的免疫活性成分对小白鼠免疫功能的影响.结果 佳提取工艺条件为:液料比20:1(g/mL),温度为100℃,提取时间为170min,醇沉比例为85%.结论 该工艺适合于中草药免疫复方配伍的筛选.
作者:张明 刊期: 2009年第12期
目的 构建人高迁移率族蛋白1(HMGBI)表达载体,并探讨其免疫调节作用.方法 从HMGBl克隆载体酶切分离HMGB1基因片段,插入增强型绿色荧光蛋白载体pCITE-EGFP,菌落PCR和酶谱分析鉴定重组载体.重组表达质粒转染人单核细胞系(U937),梯度G418筛选,荧光和Western blot检测HMGB1的表达.结果 茵落PCR和酶谱分析显示目的 基因被正确插入真核表达载体,获得重组质粒pCITE-EGFP-HMGB1,转染U937细胞随培养基中G418浓度的升高而增强,转染细胞中目的 蛋白HMGB1表达量明显升高.结论 成功构建重组栽体 PCITE-EGFP-HMGB1,并获得稳定表达人HMGB1的单核细胞系,为研究HMGB1对单核巨噬细胞的作用及其机制奠定基础.
作者:徐洁;崔彬;焦玉莲;游力;张捷;刘晓雯;曲芸芸;朱敏;孙新平;赵跃然 刊期: 2009年第12期
目的 探讨青岛市结核病发病的时空聚集性.方法 应用时空重排扫描统计量(采用SaTSCan v8.0软件)对青岛市2006年1月1日至2007年12月31日的结核病登记资料进行分析.结果 回顾性时空聚集分析确定了5个可能的结核病发病聚集区域:莱西市日庄镇东庞周围区域的结核病发病在2006年10月1日至2006年12月31日期间具有聚集性(P=0.001),李沧区永安路办事处文安路周围区域的结核病发病在2007年1月1日至2007年6月30日期间具有聚集性(P=0.006),平度市崔家集镇王家庄周围区域的结核病发病在2006年3月1日至2006年3月31日期间具有聚集性(P=0.016),即墨市普东镇后家屯周围区域的结核病发病在2007年7月1日至2007年8月31日期间具有聚集性(P=0.041),胶南市大村镇大石岭周围区域的结核病发病在2006年4月1日至2006年4月30日期间具有聚集性(P=0.066).结论 时空重排扫描统计量是空间流行病学中用于评价疾病时空聚集性的一种有效的方法,可为结核病时空聚集性特征的阐明以及结核病的有效防控提供统计学依据.
作者:刘云霞;李士雪;王忠东;薛付忠 刊期: 2009年第12期
目的 研究肾移植术后新生人类白细胞抗原(HLA)抗体及主要组织相容性I类相关链A抗原(MICA)抗体的产生对移植肾功能的损伤作用.方法 采用免疫磁珠流式细胞仪液相芯片技术检测96例肾移植患者HLA及MICA抗体.根据检测结果,将患者分为HLA抗体阳性组(HLA+)、MICA抗体阳性组(MICA+)、以及HLA、MICA抗体阴性组(HLA-/MICA-),观察并比较各组不良免疫事件的发生率.再根据有无急性排斥(AR),将患者分为排斥组(AR+)和非排斥(AR-)组,观察HLA抗体、MICA抗体对移植肾功能的影响.结果 HLA+组急性排斥反应发生率高于HLA-/MICA-组(43.5%vs 11.7%,P<0.05);MICA+组急性排斥反应发生率与HLA-/MICA-组比较差异无统计学意义(15.3%vs 11.7%,P>0.05);AR+组中,HLA+患者术后1、3、6和12个月时血清肌酐水平高于HLA-/MICA-患者,MICA+患者在术后1、3月时血肌酐水平高于抗体阴性患者;AR-组中,HLA+患者术后6、12个月血肌酐水平高于HLA-/MICA-患者;MICA+组在术后6个月及12个月的尿蛋白定量均值高于150 mg,并随时间逐渐升高.结论 HLA抗体对移植肾功能的损伤作用表现为血清肌酐的升高以及与急性排斥反应的发生有关;MICA抗体对移植肾功能的损伤主要表现为尿蛋白定量的升高.
作者:彭志国;田军;扈煜;张鲁伟;崔先泉;毕正;鲜万华;孙怀斌;李恩刚 刊期: 2009年第12期
目的 探讨血脂异常患者膳食掇入情况及相关危险因素.方法 选取217例血脂异常患者和163例健康人群进行病例对照研究,比较两组的膳食摄入情况,并分别与平衡膳食宝塔建议量比较;进行非条件多因素Logistic回归分析寻找危险因素.结果 病例组谷薯杂豆类、畜禽肉类、鱼虾类、植物油每天摄入量高于健康组(P<0.05);两组均存在严重的蔬菜、水果、乳类摄入不足,而植物油、食盐摄入过多现象;谷薯杂豆类、畜禽肉类、甜食、动物内脏、咸菜、植物油摄入过多,腰臀比(WHR)和脉压大、经常吃夜宵和零食、睡前<4h晚餐、经常接受他人食品是血脂异常的危险因素,饮茶、适量进食畜禽肉类是其保护因素.结论 两组均存在某些食物摄入过多和不足的情况;血脂异常存在严重的膳食依赖性,对危险因素的探讨有助于确定血脂异常高危人群和采取针对性的防治措施.
作者:张凤凤;王淑娥;李心河;王惠敏;赵长峰 刊期: 2009年第12期
目的 探讨腹膜透析患者盐摄入量与口腔盐敏感度的关系.方法 收集2008年3~12月在北京大学第三医院腹膜透析中心和山东大学齐鲁医院肾内科定期随访的45例腹膜透析患者的24 h透出液及尿液做化验检查.收取患者的饮食记录,按盐排出量和血压将这些患者分为低盐摄入组(21例)和高盐摄入组(24例),检测每位患者口腔对氯化钠的敏感度,按味觉缺失分评价味觉缺失程度.结果 两组患者年龄、性别比例等基本生理资料差异无统计学意义(P>0.05),但两组患者的口腔盐敏感度差异有统计学意义(P<0.05),钠盐摄入多的腹膜透析患者口腔盐敏感度较钠盐摄入少者差.结论 腹膜透析患者盐摄入量与其口腔盐敏感度密切相关.
作者:刘茂静;范晓红;鲁新红;阿拉塔;汪涛;胡昭 刊期: 2009年第12期
目的 探讨冠心病、糖尿病患者对平板运动试验后心率恢复的影响以及心率恢复异常对无症状的糖尿病患者合并冠心病的诊断价值.方法 对88例拟诊冠心病患者行平板运动试验,以糖尿病史及血糖水平分为非糖尿病组(n=45)、糖尿病组(n=43).根据冠脉造影结果,非糖尿病组分为非冠心病组(A组,n=22)和冠心病组(B组,n=23),糖尿病组分为非冠心病组(C组,n=22)和冠心病组(D组,n=21).计算运动后1、2、3、4和5 min心率恢复值并进行比较.研究心率恢复异常对非糖尿病和糖尿病患者合并冠心痛的诊断价值.结果 平板运动后1、2、3、4和5min心率恢复值由大到小依次为A、C、B和D组.与非糖尿病组相比,心率恢复异常诊断糖尿病所合并冠心病的灵敏性高,特异性和准确性无差别.结论 冠心病对心率恢复的影响大于糖尿病,心率恢复异常可以作为筛选糖尿病患者是否合并冠心病的指标之一.
作者:张玉红;李贵双;李海德 刊期: 2009年第12期
目的 探讨颈椎病所致吞咽障碍患者的数字化x线吞咽造影录像表现,并评定其应用价值.方法 对175例颈椎病性吞咽障碍患者行数字化X线造影录像检查,应用图像后处理软件对录像逐帧分析,计数颈椎增生以及咽、食管后壁压迹的位置、数量,测量压迹宽度、深度.结果 175例患者椎体前缘唇样、鸟嘴样增生396处,共出现压迹331个,其中单一压迹82例(46.5%),两处压迹30例(17.2%),三处压迹63例(36.3%);压迹位于C3/4椎间隙9个(2.7%)、C4/5椎间隙78个(23.6%),C5/6椎间隙154个(46.5%)、C6/7椎间隙81个(24.5%),C7/T1椎间隙9个(2.7%);其中轻度压迹216个(65.2%),中度压迹75个(22.6%),重度压迹40个(12.2%).结论 数字化X线吞咽造影录像能够直观、精确、详细的分析颈椎病所致吞咽障碍患者颈椎骨质的改变以及咽、食管后壁受压情况,有重要的应用价值.
作者:王光明;杨小庆;燕敦华;杨玉娥;李德春 刊期: 2009年第12期