胡薇;马赛;郭冬梅;季静;杨晓倩;崔晞
目的 研究hTERT启动子调控下CD137L表达载体的构建及其在人卵巢癌细胞系中的表达,探讨CD137L靶向基因治疗的可行性.方法 采用RT-PCR法从K562细胞中克隆CD137L全长基因,将其克隆到真核表达载体pcDNA3中,构建的质粒为pcDNA3-hCD137L,用HindⅢ和Xba Ⅰ双酶切后将CD137L再定向插入pBTdel-279中,构建成hTERT启动子调控下CD137L表达载体pBTdel-279-hCD137L,采用酶切法和测序法鉴定.用Fugene6转染试剂盒将两种重组质粒分别瞬时转染人卵巢癌细胞株OVCR3和人胚肺成纤维细胞株HELF,RT-PCR和流式细胞仪检测CD137L的表达.结果 测序证实所克隆的CD137L基因序列与GENE-BANK中的序列相符.经限制性内切酶酶切,电泳后显示片段插入正确,证实构建成功.pcDNA3-hCD137L转染后OVCR3细胞和HELF细胞均可检测到CD137L的表达,但pBTdel-279-hCD137L转染后仅在OVCR3细胞中检测到其表达,在HELF细胞中无表达.流式细胞显示pBTdel-279-hCD137L转染效率低于pcDNA3-hCD137L.结论 hTERT启动子调控下CD137L表达载体构建正确,并可在卵巢癌细胞中较高表达,为探讨靶向基因治疗提供了实验依据,但hTERT启动子活性仍低于CMV启动子.
作者:张溪;崔保霞;马道新;孔北华 刊期: 2007年第12期
目的 通过观察不同人群中血糖、血压、血脂和胰岛素抵抗指数等指标与血清抵抗素的关系,探讨抵抗素与肥胖和2型糖尿病的关系.方法 随机选择55例2型糖尿病患者和34例健康人,根据血糖水平和体重指数(BMI)分为正常体重组(A组)、单纯肥胖组(B组)、非肥胖糖尿病组(C组)和肥胖合并糖尿病组(D组).检测血清抵抗素水平、糖化血红蛋白(HbAlc)及空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)、血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,根据HOMA模型计算胰岛素抵抗指数.通过分析各组抵抗素水平的不同及与临床各指标的相关性,分析其影响因素.结果 D组的血清抵抗素显著高于A、B和C组(P值均<0.001).B组和C组的血清抵抗素显著高于A组(P<0.05,P<0.01).直线相关分析显示,血清抵抗素浓度与HbAlc、LDL、IRI、SBP和BMI成正相关(r=0.222- r=0.233,r=0.286,r=0.407,r=0.480),与HDL和FINS成负相关(r=-0.198,r=-0.138).多元逐步回归分析显示,血清抵抗素浓度受BMI、HbAlc和收缩压影响较大.结论 抵抗素是联系肥胖与2型糖尿病的信号分子,参与胰岛素抵抗和肥胖的发生.抵抗素不仅参与影响血糖和血脂的代谢,而且与高血压也有相关性.
作者:肖正大;张荣花;费洪华 刊期: 2007年第12期
目的 研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)对肺纤维化模型的干预作用和对TGF-β1的影响.方法 45只SD雄性大鼠随机分成3组,每组15只:①干预组:经气管灌注博莱霉素,随后从第2天起每两天腹腔给予尿激酶干预;②模型组:气管内灌注博莱霉素;③对照组:气管内滴入生理盐水.模型组与对照组腹腔给予生理盐水.所有动物第28天全部处死.肺组织经苏木精-伊红(HE)、Masson胶原染色来评价肺泡炎和肺纤维化.对肺泡灌洗液进行细胞计数、分类,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测灌洗液中TGF-β1含量.结果 尿激酶干预组中性粒细胞百分比为(3.1±1.8),低于模型组(9.3±4.1),高于对照组(2.5±1.3),差异有统计学意义(P<0.01).干预组肺泡炎程度为(0.9±0.7)分,低于模型组(1.7±0.6)分,高于对照组(0.2±0.4)分,差异有统计学意义(P<0.01).干预肺纤维化程度(1.1±0.7)分,低于模型组的(2.0±0.8)分(P<0.01).干预组TGF-β1含量在第28天为(42.5±1.7)ng/mL,低于模型组的(45.6±0.6)ng/mL(P<0.01),差异有统计学意义.结论 尿激酶能减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能通过抑制TGF-β1来实现.
作者:万兵;郑金旭;黄新建;严玉兰;吴建农 刊期: 2007年第12期
目的 探讨颈椎不稳对于黄韧带中转化生长因子β1(TGFβ1)、骨形态发生蛋白2(BMP2)基因表达的影响及其意义.方法 采用逆转录聚合酶联反应技术(RT-PCR)对正常与颈椎不稳定动物模型的黄韧带中不同时间点TGFβ1、BMP2的表达水平进行测量比较.结果 在不同时间点,颈椎不稳组黄韧带中TGFβ1、BMP2的基因表达较正常黄韧带组均增高(P<0.01).结论 TGFβ1、BMP2在颈椎不稳大鼠黄韧带的表达在不同时间点有明显变化,这种变化可能在加速黄韧带的退变中起重要作用.
作者:张喜善;蔡国栋;李建民;杨明峰 刊期: 2007年第12期
目的 研究亚硒酸钠与维生素C联合应用对银屑病小鼠模型肝脏、肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和丙二醛(MDA)含量及阴道上皮有丝分裂的影响.方法 使用昆明种雌性小鼠建立阴道上皮有丝分裂银屑病模型.将小鼠随机分为8组,阴性对照组(A组)、阳性对照组(B组),亚硒酸钠低、中、高剂量组(C、D、E组),亚硒酸钠-维生素C低、中、高剂量组(F、G、H组).分别给药12 d.后1次给药1 h后,腹腔注射秋水仙碱,脱颈椎处死小鼠.取肝、肾组织制备成匀浆,测其中蛋白含量、SOD、GSH-PX活性和MDA含量.光学显微镜下观察细胞有丝分裂.结果 阳性对照组和各补硒组小鼠肝中GSH-PX及SOD活性显著高于阴性对照组(P<0.05),MDA的含量与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);肾中各组GSH-PX活性显著高于阴性对照组(P<0.05),SOD的活性及MDA的含量与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05).亚硒酸钠及亚硒酸钠-维生素C的各剂量组均可显著抑制小鼠阴道上皮的有丝分裂(P<0.05),不同剂量的亚硒酸钠组间及亚硒酸钠-维生素C组间与阳性对照组间差异无统计学意义.结论 亚硒酸钠可提高银屑病小鼠肝、肾中GSH-PX活性,促进体内抗氧化系统的作用,有效抑制阴道上皮有丝分裂,且亚硒酸钠与维生素C可能并无协同作用.
作者:胡薇;马赛;郭冬梅;季静;杨晓倩;崔晞 刊期: 2007年第12期
目的 对比研究通心络与辛伐他汀对兔易损斑块的稳定作用.方法 30只实验兔采用球囊拉伤腹主动脉+高脂喂养建立动脉粥样硬化模型,10周末改喂普通饲料并随机分为自然消退组、通心络组、辛伐他汀组,每组10只,持续药物干预12周,22周末斑块局部转染携带p53的复制缺陷型重组腺病毒载体,24周末,应用蝰蛇毒、组胺触发.检测血脂并进行体表超声、声学密度和病理学检测.结果 通心络组和辛伐他汀组与自然消退组比较,血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)(P<0.01)、腹主动脉内中膜厚度(IMT)(P<0.05,P<0.01)均显著降低;内-中膜校正回声强度(AIIc%)显著升高(P<0.05~0.01).辛伐他汀组与通心络比较,TC水平降低(P<0.01).结论 通心络和辛伐他汀一样具有稳定易损斑块的作用,且疗效相当.
作者:鹿晓婷;张蕾;刘燕;刘运芳;燕芳芳;赵玉霞 刊期: 2007年第12期
目的 探讨三萜类化合物熊果酸(ursolic acid,UA)诱导子宫内膜癌细胞HHUA的凋亡作用.方法 采用细胞培养技术,用不同浓度的药物在一定的时间内处理细胞株,采用MTT法、活细胞荧光染色技术、流式细胞技术(FCM)、RT-PCR、细胞免疫化学技术,研究UA对HHUA细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用.结果 UA抑制HHUA细胞增殖,且呈时间和浓度依赖性,并使细胞呈典型的凋亡形态学特征,核质浓集,出现凋亡小体,使细胞周期阻滞在G0/G1期,并诱导人半胱天冬蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达增加,bcl-2蛋白表达减少.结论 UA诱导HHUA细胞凋亡,其机制涉及caspase-3和bcl-2依赖性凋亡调节通路.
作者:张娴;杨兴升 刊期: 2007年第12期
目的 探讨长期应用毛果芸香碱对兔眼角膜内皮细胞有无影响及影响方式.方法 用2%的毛果芸香碱给兔滴眼1个月和3个月后,取下兔眼球迅速固定,分离角膜内皮组织,用蛋白印迹(Western-blot)法检测兔眼角膜内皮细胞中抗凋亡基因bcl-2蛋白及凋亡基因bax蛋白的表达,流式细胞仪检测角膜内皮细胞的凋亡率,透射电镜下观察各组角膜内皮细胞的超微结构变化.结果 应用毛果芸香碱1个月及3个月后,均呈现兔眼角膜内皮细胞凋亡基因bax蛋白表达增多,抗凋亡基因bcl-2蛋白表达减少,3个月组兔眼角膜内皮细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),透射电镜下观察可见,1个月及3个月组细胞内空泡形成,线粒体肿胀,内质网扩张,细胞核固缩,染色质固缩周边化等典型凋亡改变.结论 长期应用2%的毛果芸香碱可以诱导兔眼角膜内皮细胞发生凋亡.
作者:陶远;王红;乔智 刊期: 2007年第12期
目的 检测宫颈癌和正常宫颈组织中人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)及其受体DcR1和DR4的表达,探讨TRAIL及其受体的表达与宫颈癌发生、发展的关系.方法 免疫组织化学Envision法检测43例宫颈癌和30例正常宫颈组织中TRAIL及其受体DcR1、DR4的表达.结果 TRAIL、DcR1、DR4免疫阳性产物为棕黄色,定位于胞浆或胞膜,TRAIL及DcR1在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织,DR4在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织(P<0.05);TRAIL、DcR1、DR4在宫颈癌组织中的表达与患者的年龄、分期、淋巴结转移无关(P>0.05).结论 TRAIL是肿瘤细胞分化差的标志之一;宫颈癌细胞由于DR4的高表达和DcR1的低表达而易被TRAIL诱导凋亡.
作者:张文凤;朱琳;张萍 刊期: 2007年第12期
目的 了解儿童屈光性弱视波前像差的特点,探讨波前像差在屈光性弱视形成中的作用.方法 83例屈光不正性弱视儿童经1%阿托品散瞳3 d后进行检影验光,电脑验光、20d后复光,获得矫正视力,并行波前像差检查,观察各类高阶像差的分布,近视、远视及散光对高阶像差的影响,弱视程度与高阶像差的关系.结果 眼球总RMS(波前像差的均方根)值与屈光度呈正相关(P<0.05),随散光度的增加,高阶像差中的三叶散光、慧差、球差都增加(P<0.05).结论 像差随屈光度数的增大而增大,散光度数对高阶像差有明显的影响.高阶像差分析有助于了解儿童屈光不正性弱视形成的原因.
作者:杨珺;张晓;曹乾忠 刊期: 2007年第12期
目的 探讨多层螺旋CT(multi-slice computed tomography,MSCT)对婴幼儿先天性感音性耳聋(sensonneural hearing loss,SNHL)的诊断价值.方法 对74例婴幼儿SNHL患者采用颞骨轴位高分辨率MSCT扫描及多平面重建(MPR),对感兴趣内耳用容积再现技术(VRT)进行重建.结果 63例语前聋组患者中42例(84耳)双侧内耳MSCT表现无明显异常;21例(42耳)显示内耳骨迷路畸形(其中29耳多种畸形共存):耳蜗间隔发育不全Ⅰ型1例(2耳),耳蜗间隔发育不全Ⅱ型(Mondini畸形)4例(8耳),前庭-外半规管畸形12例(24耳),前庭导水管扩大13例(26耳);内耳道畸形3例(3耳);外耳道未发育1例(1耳);其中37耳MSCT横断面图像和MPR,VRT图像均可清晰显示畸形的部位和程度,5耳Mondini型畸形患者VRT图像较MSCT横断面图像更能清晰的显示畸形部位;7例(12耳)分泌性中耳炎.11例语后聋组中显示8例(16耳)内耳结构基本正常,3例(6耳)为大前庭水管综合征,3例(6耳)分泌性中耳炎.结论 MSCT结合MPR及VRT可更加准确的对内耳骨迷路畸形的程度和部位做出诊断,是对婴幼儿SNHL病因诊断重要的一种检查方法.
作者:边致强;刘亚群;李笃民;崔凤玉 刊期: 2007年第12期
目的 探讨Caspase-3激活和细胞色素c释放在脑缺血再灌注损伤后神经元细胞凋亡中的作用.方法利用MACo法建立小鼠急性脑缺血模型,以酶活性测定、Western杂交和免疫组化等方法对Caspase-3活性变化和激活以及细胞色素c释放进行规律性观察.结果 ①脑缺血再灌注损伤后3 h Caspase-3活性即开始升高,并随时间延长而进一步升高,12~24 h达到高峰;②脑缺血再灌注损伤后6 h Caspase-3明显激活,手术组是假手术组的7.6倍(P<0.01);③脑缺血再灌注损伤后6h细胞色素c明显释放,手术组是假手术组的8.5倍(P<0.01).结论 脑缺血再灌注损伤后早期Caspase-3明显激活,细胞色素c明显释放,表明Caspase-3激活和细胞色素c释放参与了脑缺血再灌注损伤早期过程,有助于进一步研究脑缺血再灌注损伤的机制.
作者:张文华;周璐;徐淑军;陈腾;贾德泽;周茂德;吴承远 刊期: 2007年第12期
目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)基因单核苷酸多态性(SNP)与乙型肝炎病毒(HBV)感染的关系.方法 采用基因芯片技术检测150例HBV感染患者(病例组)和不相关联的100例急性乙型肝炎病毒感染自行恢复后对照人群(对照组)中TNF-α-238G/A,-308G/A和IL-6-597G/A,-174G/C,-572G/C位点SNP.结果 TNF-α-308GG基因型和G等位基因频率,病例组明显高于对照组(P<0.01,相对危险度[OR]=6.71及P<0.01,OR=2.22);TNF-308AA基因型与抗病毒治疗具有协同作用(P<0.05,OR=2.91).未见IL-6和TNF-α其他位点的SNP与病例组有任何相关性.结论 TNF-308GG基因型及其等位基因G与乙型肝炎病毒感染易感性相关,而TNF-308AA基因型则与抗病毒治疗具有协同抗病毒作用.
作者:邢培祥;ZOU Ming-jin;邹明瑾;邢全台;王洪春;汪运山 刊期: 2007年第12期
本文采用泰素帝联合吉西他宾治疗30例晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cnacer,NSCLC),取得了较好的近期疗效.
作者:王玮;孙文辉;鲁露 刊期: 2007年第12期
目的 观察异丙酚对兔全身热疗后颈内静脉球部血中乳酸(LAC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及皮质区细胞凋亡的影响,探讨异丙酚对全身热疗后急性脑损伤的保护机制.方法 将新西兰大白兔随机均分为阴性对照组(A组)、热应激模型组(B组)、异丙酚低剂量5 mg·kg-1·h-1泵注组(C组)、异丙酚高剂量10 mg·kg-1·h-1泵注组(D组),模拟肿瘤全身高温治疗方法采用全身高温照射B、C、D组动物,维持肛温42℃2 h.不同时点抽取颈内静脉球部血,测定LAC、SOD、MDA含量,48 h后处死兔取脑皮质组织做含水量测定与HE染色,采用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导dUTP标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,并将脑细胞凋亡百分数分别与体温恢复稳定时脑血SOD、MDA浓度进行直线相关性分析.结果与A组相比,B组LAC、MDA、SOD含量明显升高或下降(P<0.05或P<0.01),HE染色组织损伤明显,细胞凋亡百分数明显升高(P<0.01);与B组相比,C、D组LAC、MDA、SOD含量明显下降或升高(P<0.05或P<0.01),HE染色组织损伤减轻,细胞凋亡百分数明显降低(P<0.01),且10 mg·kg-1·h-1异丙酚组脑保护作用优于5 mg·kg-1·h-1组.各组脑细胞凋亡百分数与体温恢复稳定时脑血清SOD浓度之间呈负相关(r=-0.725,P<0.01),与体温恢复稳定时脑血清MDA浓度之间呈正相关(r=0.769,P<0.01).结论 异丙酚对全身热疗后脑神经细胞损伤具有保护作用,其机制可能与清除自由基进而抑制细胞凋亡有关,10mg·kg-1·h-1异丙酚组脑保护作用较好.
作者:王志刚;王舟;赵鑫;卜祥梅;冯昌 刊期: 2007年第12期
目的 探讨二脱氧肌苷(didanosine,ddI)对分散培养的胎鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元胞体和突起生长的影响.方法 分散培养的胎鼠DRG神经元用不同浓度的ddI(1 μg/mL,5μg/mL,10μg/mL,20 μg/mL)孵育,对分散培养的DRG神经元用微管相关蛋白2(microtubule associated protein 2,MAP2)免疫荧光标记后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)观察神经元胞体和突起的改变.结果 分散培养的胎鼠DRG神经元用ddI孵育3 d后,神经元突起的数目减少和长度变短,而神经元的胞体的大小则没有明显变化.结论 ddI可直接影响分散培养的胎鼠DRG神经元突起的生长.
作者:刘花香;刘真;杨向东;王丽红;李振中 刊期: 2007年第12期
目的 探讨高血压患者B型脑钠肽(BNP)与左室肥厚(LVH)和舒张功能异常(LVDD)的相关性.方法 入选84例高血压患者,根据左室重量指数(LVMI)分为左室肥厚组和正常组;根据舒张功能不全(LVDD)诊断标准分为舒张功能不全组和正常组,测定其脑钠肽浓度.结果 脑钠肽与左室后壁厚度(LVP-WT)和LVMI成正相关(r=0.74 P<0.01;r=0.61 P<0.01),与E/A值和舒张早期血流播散速率(FPV)成负相关(r=0.74 P<0.01;r=0.61 P<0.01).结论 在心功能正常的高血压患者中,BNP是预测LVH和LVDD有价值的生化指标.
作者:李玉香;李继福 刊期: 2007年第12期
目的 观察缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)在神经管畸形(neural tube defects,NTDs)发生中神经上皮的表达,以探讨Cx43与NTDs发生的关系.方法 用过量RA建立小鼠胚胎NTDs模型.用SABC免疫组化方法和图像处理系统,分析比较实验组和对照组神经管发育情况以及Cx43蛋白表达的位置和强度.结果 对照组神经管发育良好并适时闭合,实验组神经管发育不良而且不能闭合,脑泡不能发育;Cx43蛋白表达于神经上皮细胞的细胞膜和细胞质内,而且实验组明显高于对照组(P<0.05);Cx43蛋白的表达表现出时间的差异性.结论 Cx43蛋白定位于神经管上皮细胞的胞膜和胞质内,且有时间差异性.Cx43蛋白的过高表达可能与RA致NTDs密切相关.
作者:马永臻;武玉玲 刊期: 2007年第12期
目的 比较不同磁共振成像(MR)序列对肛瘘病变的显示,探讨其在临床诊治中的应用价值.方法 收集15例临床疑诊为肛瘘的患者,于术前行MR扫描,MR扫描序列包括矢状T2WI(SAG T2WI)、冠状T2脂肪抑制序列(COR T2 FS),轴位FSE T1 WI(AX T1 WI),轴位FRFSET2 WI(AX T2 WI),轴位T2脂肪抑制序列(AXT2 FS)和动态增强(DCE),检查结果与手术结果对照.结果 15例患者术中共发现内口16个,瘘管14个.根据John Morris等的分类方法,15例患者中,1级肛瘘3例,2级肛瘘6例,3级肛瘘3例,4级肛瘘2例,5级肛瘘1例,其中2例为单纯肛周脓肿.在内口的显示率上,动态增强扫描高于其他扫描序列,但与轴位T2脂肪抑制序列相比无统计学意义(P>0.05).在瘘管的显示率上,动态增强扫描亦高于其他扫描序列,但仅与轴位T2WI序列相比有统计学意义(P<0.05).结论 动态增强扫描结合冠状面扫描可以较好地显示肛瘘病变,能够为外科手术方式的选择提供较详尽的影像资料.
作者:李莹;李传福;戴勇;孟祥水;康笑水 刊期: 2007年第12期
甲氨喋呤(MTX)是小儿急性淋巴细胞病治疗的常用鞘内注射用药.我院以往鞘注甲氨喋呤(MTX)多次,偶有疼痛、麻木、消化道反应等,均为一过性.近来发生1例甲氨喋呤(MTX)鞘内注射致严重过敏反应,报告如下.
作者:史承耀;赵燕;周文 刊期: 2007年第12期