黎莉;徐从高;王秀问;张昕;魏军民;孙雅红;张芳
目的:对1998年本室建立的人肝癌细胞系HCC-9810进行细胞遗传学分析.方法:采用组织块培养法,培养液为含20%的胎牛血清的RPMI-1640,用扫描电镜和透射电镜观察细胞形态,放射免疫方法检测肿瘤标志物,并用改良的热变性姬姆萨R显代(RHG)方法与G显带相结合进行细胞遗传学检测.结果:该细胞系经异种接种能形成移植性肿瘤,染色体为非整倍体,有4q-,11q-,13q+等.结论:检出的这些畸变可能与肝癌的发生、发展有关.
作者:孙建芝;李桂杰;李丽珍;秦平;刘博;宋强 刊期: 2004年第06期
目的:探讨p15基因在食管癌中的表达以及与食管癌临床病理及预后的关系.方法:应用酚:氯仿法提取46例食管癌患者的肿瘤及癌旁正常组织中高分子量的基因组DNA,并对p15基因外显子1和2进行PCR扩增,以1.5%琼脂糖凝胶电泳及溴化乙烷染色,分析PCR产物中p15基因的纯合性缺失.结果:正常食管粘膜组织中未见p15基因的纯合性缺失.食管癌肿瘤组织中,p15基因的纯合性缺失率为63.04%(29/46),且与食管癌的临床病理分级及DNA含量有关.结论:p15基因的纯合性缺失在食管癌发生、发展中起重要作用,可作为肿瘤标志物判断食管癌患者的预后.
作者:杨国涛;王善政;王德江;马玉燕;周璐 刊期: 2004年第06期
目的:用重组PCR技术对人单核细胞趋化蛋白-1(hμMCP-1)基因cDNA进行缺失突变,构建其突变体-7 ND cDNA.方法:根据hμMCP-1基因缺失突变前后的两段基因分别设计两对含有酶切位点的引物,以pBlueScript-hμMCP-1为模板,进行重组PCR反应,将PCR产物与T载体连接进行TA克隆,酶切鉴定并测序确定其长度为342 bp,继之将目的基因克隆入pcDNA3.1真核表达载体.结果:成功构建hμMCP-1cDNA突变体-7ND的真核细胞表达载体,测序结果表明,该突变体N端第2至8位氨基酸缺失.结论:重组PCR技术是十分有效、可靠的基因缺失突变方法.
作者:仲琳;张运;张梅;季晓平;李大庆;张岩;张冰;杨军;刘少荣 刊期: 2004年第06期
目的:探讨抑癌基因p27kipl与细胞核增殖相关的抗原ki-67在非小细胞肺癌中的表达,分析两者之间的关系及其对预后的影响.方法:采用免疫组织化学方法对64例非小细胞肺癌术后病理标本中p27kipl及Ki-67进行检测.结果:肺癌组织中平均p27kipl标记42.39%.p27kipl表达水平的下降与组织学分级(P<0.05)、淋巴结受侵(P<0.01)、高肿瘤增殖活性(P<0.001)密切相关;高Ki-67标记与淋巴结转移有关(P<0.05).p27kipl与Ki-67之间呈负相关(r=-0.472,P<0.001).Kaplan-Meier生存分析显示,p27kipl高表达者中位生存期39个月,而低表达者14个月(P<0.01);Ki-67低表达者中位生存期32个月,而高表达者13个月(P<0.01).在p27kipl与Ki-67相结合的预后判断中,高Ki-67/低p27的患者病情进展快,生存期短,低Ki-67/高p27表达的患者生存期明显延长.生存期的COX单因素分析表明,p27kipl、Ki-67、组织学分级、淋巴结转移具有统计学意义,而多因素分析中仅p27kipl、Ki-67、淋巴结转移是独立的预后因素.结论:淋巴结转移、p27kipl和Ki-67的表达可作为判断预后的指标.而p27kipl、Ki-67结合对判断预后及根治术后选择治疗方案具有重要的价值.
作者:陈强华;王力秋 刊期: 2004年第06期
米氮平又名米塔扎平(mirtazapine),属哌嗪氮卓类衍生物,具有抗抑郁、抗焦虑及镇定作用,属新型抗抑郁药[1].本文采用HPLC法可准确、快速地测定该类药物的含量及有关物质,该方法已用于米氮平原料药和胶囊剂的质量标准研究.
作者:高彦慧;赵桂森;陈萍;程秀民;田进国 刊期: 2004年第06期
卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcomaassociated herpesvirus,KSHV)又称人疱疹病毒8型(HHV-8),是1994年美国学者Chang[1]等首先从AIDS患者卡波氏肉瘤(KS)组织中发现的一种新的肿瘤病毒,目前被认为是KS的致病因子.KS是AIDS患者易患的一种血管瘤,在AIDS患者中的发病率可高达50%.
作者:张心声;齐眉;朱海峰;司桂玲;赵蔚明 刊期: 2004年第06期
目的:研究bcl-2及fas在体外培养的卵巢癌细胞系3AO及其耐药系3AO/cDDP的表达及化疗药物拓扑替康(topotecan,TPT)与顺铂(cisplatinum,cDDP)对两种基因表达的影响.方法:用人卵巢上皮癌细胞系3AO及其cDDP耐药细胞系3AO/cDDP进行体外培养实验,用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测两种细胞系在化疗药物顺铂(cDDP)与拓扑替康治疗前后的fas和bcl-2表达.结果:与3AO相比,fas与bcl-2在3AO/cDDP中的表达明显降低(P<0.01);cDDP和TPT可使fas在3AO中的表达明显升高(P<0.01),bcl-2明显降低(P<0.01);cDDP和TPT对fas表达影响较为显著(P<0.01),对bcl-2无显著影响(P>0.05).结论:fas可能在卵巢癌的化疗耐药中起作用,但bcl-2的作用尚不明确;cDDP及TPT可能通过fas介导的细胞凋亡机制促进细胞死亡.
作者:延俊元;刘培淑;张燕玲;王翠兰;薛云霞 刊期: 2004年第06期
目的:分析中国汉族人群21号染色体上3个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)的等位基因及基因型分布情况.方法:采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析100名中国汉族人21号染色体上D21S11、D21S1435、D21S2055位点的遗传多态性.结果:在中国汉族人群中,D21S11、D21S1435、D21S2055位点分别检出7、6和18个等位基因,18、17和56种基因型,杂合度分别为73%、82%和91%.结论:中国汉族人群中21号染色体的3个STR位点有较好的多态性,其基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡.
作者:邹永新;龚瑶琴;张锡宇;郭辰虹;高贵敏;陈丙玺 刊期: 2004年第06期
目的:评价我国系统性红斑狼疮患者的生活质量并探讨其影响因素.方法:用系统性红斑狼疮疾病活动指数计分(SLEDAI)和系统性红斑狼疮国际合作临床的系统性红斑狼疮损伤指数计分(SLICCACR DI)分别测定153例系统性红斑狼疮患者的活动指数和损伤指数,用世界卫生组织生活质量简表(WHOQOL-BREF)中文版对患者的生活质量进行自评.将患者按照临床诊断类型和临床分期进行分组,对不同分型和分期患者各个领域的生活质量得分进行方差分析,并对各领域得分与可能的影响因素进行相关分析和多元逐步回归分析.结果:SLE患者生活质量得分普遍较低,各领域得分从46.49±20.05到64.52±15.33不等.影响生活质量的主要因素有疾病的临床分期、活动指数、损伤指数、年龄、文化程度、家庭关系等.其中受疾病本身影响较明显的生活质量领域有生理、心理、总体健康感觉和量表总得分.结论:SLE患者生活质量较差,临床分期、活动度、损伤程度影响患者的生理功能和总体健康感觉;生理、心理、社会关系、环境领域的生活质量还受年龄、文化程度、家庭关系的影响.
作者:刘静;舒强;王洁贞;武庆锐 刊期: 2004年第06期
目的:探讨血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)蛋白的变化对急性心肌梗死(AMI)冠状动脉(冠脉)再通诊断的价值.方法:动态测定溶栓治疗(24例)和常规治疗(26例)的AMI血清CK-MB蛋白量,CK-MB、CK活性值的变化,并根据临床指标将其分为冠脉再通组和未通组.结果:冠脉再通组21例(溶栓治疗中19例,常规治疗中2例);冠脉未通组29例(溶栓治疗中5例、常规治疗中24例).测定结果显示,血清CK-MB蛋白量、CK-MB活性值及CK活性值的峰值距AMI发病时间均值:冠脉再通组分别为9.6、10.8、12.2 h,冠脉未通组分别为21.6、24.1、28.7 h;峰值持续时间均值:冠脉再通组分别为6.3、8.5、14.7 h,冠脉未通组分别为14.8、22.4、24.8 h;下降至正常时间均值:冠脉再通组分别为32.2、38.5、48.8 h,冠脉未通组分别为40.3、46.6、64.3 h.结论:冠脉再通组CK-MB蛋白峰值显著提前,峰值期持续时间明显缩短,恢复正常时间迅速,有助于AMI冠脉再通的早期诊断.
作者:邢姗姗;张兴华;邢启崇 刊期: 2004年第06期
目的:探讨冠状动脉搭桥术的病例选择、手术方法和治疗效果.方法:回顾性分析1997年1月~至2003年12月齐鲁医院施行的体外循环下冠状动脉搭桥术(CPBCABG)99例,非体外循环冠状动脉搭桥术(OPCABG)74例,冠状动脉搭桥加瓣膜置换术(CABG+VP)20例的临床资料.结果:手术死亡6例,死亡率3.1%.体外循环下单纯冠状动脉搭桥术死亡率为2%,非体外循环冠状动脉搭桥术死亡率为2.7%,冠状动脉搭桥加瓣膜置换术死亡率为10%.短期随访3~6个月,症状消失占93.0%,症状明显减轻占5.4%.结论:患者近期随访效果良好,3组的手术死亡率差异无统计学意义(P>0.05).
作者:吴树明;张供;张希全;李跃华;宋毅;于建华;王涛;孙文宇;庞昕焱 刊期: 2004年第06期
目的:建立人破伤风免疫噬菌体抗体库,筛选抗破伤风类毒素的抗体基因,并在大肠杆菌中表达可溶性Fab段.方法:从破伤风类毒素免疫志愿者中分离淋巴细胞,提取细胞总RNA,用一组人IgG Fab基因特异性引物,从合成的cDNA中经PCR扩增出抗体轻链(VL+CL)和重链Fd(VH+CH1)基因,分别经XbaⅠ/SacⅠ和SpeⅠ/XhoⅠ酶切克隆入噬菌粒pComb3.用破伤风外毒素作为抗原进行筛选富集获得特异性抗破伤风类毒素的噬菌体抗体,切去噬菌体外壳蛋白基因Ⅲ(gⅢ),表达可溶性人抗破伤风类毒素的Fab段.结果:经核苷酸序列分析证实,所获得的基因为人IgG Fab基因;用ELISA鉴定表明,表达的人IgG Fab抗体能特异性地与破伤风外毒素结合.结论:利用噬菌体抗体库技术筛选可得到与破伤风外毒素特异性结合的人抗破伤风类毒素基因工程抗体.
作者:刘军莉;王群;张蘋;高尚先;孙汶生;张利宁 刊期: 2004年第06期
目的:利用寡核苷酸芯片检测SARS病毒.方法:根据序列Blast比对分析结果,设计逆转录不对称PCR扩增引物和寡核苷酸检测探针.采用Trizol试剂从人静脉血中提取总RNA,经过逆转录和不对称PCR扩增得到的PCR产物与排列有寡核苷酸探针的芯片杂交,杂交后的芯片经激光共聚焦扫描分析.结果:SARS阳性样品与寡核苷酸芯片杂交后出现阳性杂交信号,具有不同二级结构的寡核苷酸探针杂交信号强度不一.结论:寡核苷酸芯片适于快速准确、平行大量地检测SARS病毒.
作者:鲁艳芹;韩金祥;潘继红;黄海燕 刊期: 2004年第06期
PET图像的衰减校正(attenuation correction,AC)大多采用68Ge或137Cs,有关CT衰减校正(computerd tomography attenuation correction,CTAC)的报道较少.本研究对45例患者行全身18F-FDG显像,评价CTAC与非CT衰减校正(NCTAC)在PET-CT诊断肿瘤方面的价值.
作者:马俊;刘松涛;牟均青 刊期: 2004年第06期
目的:通过检测大鼠肺动脉高压模型肺动脉壁内金属基质蛋白酶-1(MMP-1)、金属基质蛋白酶-3(MMP-3)的表达水平,探讨MMP-1和MMP-3对肺动脉高压肺血管重建的影响.方法:采用套管连接法建立大鼠肺动脉高压模型.将60只健康雄性Wistar大鼠随机分为实验组(S1、S2)各20只和对照组(C1、C2)各10只,实验组用套管连接右侧颈总动脉近心端和右侧颈外静脉第1属支的近心端,对照组只在相同部位作假手术.于实验后第8周和第16周测定肺动脉收缩压和右心室收缩压,留取肺组织行免疫组化法染色,应用IA1型自动图像分析系统测定血管壁中MMP-1和MMP-3的含量相对值.结果:术后8周S1组PAP和RVP均显著升高,与C1组相比有显著差异(P<0.005),术后16周S2组PAP和RVP升高,与C2组相比有显著差异(P<0.001);S1组与S2组比较亦有显著差异(P<0.001);术后8、16周S1组大鼠肺血管大中动脉中膜弹力纤维和平滑肌胞浆及细胞外基质中有较多MMP-1和MMP-3棕褐色颗粒沉积,同时可见血管内膜增厚,管腔狭窄,平滑肌肌层增厚,无肌型小动脉肌化;而对照组大鼠肺血管无明显MMP-1和MMP-3棕褐色颗粒沉积和肺高压病理改变.IA1型自动图像分析量化结果显示,术后8、16周实验组和对照组均差异显著(P<0.001);S2组和S1组有显著差异(P<0.001).结论:MMP-1和MMP-3参与了对肺血管重建的触发作用,MMP-1和MMP-3参与了肺动脉高压肺血管重建的全过程.
作者:夏伟;赵翠芬;李福海;时庆;杨杰 刊期: 2004年第06期
目的:探讨绞股蓝皂甙(gypenoside,GP)对谷氨酸(glutamate,Glu)介导的氧化性神经毒性的拮抗作用.方法:体外培养胎鼠大脑皮层神经细胞,建立Glu氧化性损伤模型,用MTT法测定细胞活力,透射电镜观察Glu所致的神经细胞死亡方式,流式细胞术分析细胞凋亡率.结果:GP以时间依赖性方式明显拮抗谷氨酸介导的氧化性神经毒性,于Glu损伤前达到佳保护效果,Glu氧化性毒性导致神经细胞发生凋亡兼具坏死特征的死亡,Glu损伤组细胞凋亡率(21.63%)明显高于正常对照组(0.09%)及GP保护组(8.94%).结论:GP可明显拮抗Glu介导的氧化性神经毒性.
作者:辛华;商林珊;刘金成;朱庆均;赵玲;王旭平;张保华;冯玉新 刊期: 2004年第06期
岩青兰(dracocephalum rupestra)是唇形科青兰属植物,多分布于海拔1500米高度之上,该植物地上全草富含黄酮类成分[1,2].药效学研究证明,总黄酮具有较好的抗血小板聚集作用,可增加冠脉流量,提高小鼠耐缺氧能力;毒理学试验未发现明显毒性,表明该总黄酮作为治疗心脑血管系统疾病的新药开发具有较好的前景.总黄酮中柚皮素-7-O-葡萄糖苷和北美圣草素-7-O-葡萄糖苷在岩青兰中含量较高,本文采用常压、中压柱色谱等方法制得了这两种成分的对照品并以这两种成分为质量指标,建立了HPLC检测方法,该法测定简便,检测灵敏,稳定性和重现性好,可用于本药材质量控制.同时,测定了不同采收时期全草中两种二氢黄酮苷的含量,为确定药材合理的采收时期、开发利用该植物资源提供理论依据.
作者:任冬梅;娄红祥;季梅;崔新德;邹满 刊期: 2004年第06期
目的:比较洋地黄制剂、β受体阻滞剂和两药合用三种方法治疗房颤的效果.方法:采用荟萃分析方法,检索并筛选相关文献,比较三种用药方法治疗前后静息心率的变化,以此推断其疗效.结果:三种用药方法均可控制房颤后心室率,两药合用疗效尤为显著,其作用要强于单独使用洋地黄制剂或β受体阻滞剂.结论:两药合用疗效明显,是治疗房颤、控制心室率较为理想的方法.
作者:邵晶晶;孙勇新;杜进香 刊期: 2004年第06期
目的:探讨姜黄素(curcumin,Cur)及其联合化疗对人卵巢癌细胞株3AO细胞体外生长的抑制作用.方法:将Cur单独应用或与临床上常用的卵巢上皮癌化疗药物顺铂(cDDP)、卡铂(CBP)、拓扑替康(TPT)联合应用,观察对3AO细胞生长抑制率的影响,药物敏感实验采用MTT法.结果:Cur抑制3AO细胞的生长,其半数抑制浓度(IC50)为23.4μmol/L;Cur与各种浓度的cDDP、CBP或TPT联用,可提高各种药物对3AO细胞的生长抑制率(P<0.05~0.01).结论:Cur在体外对人卵巢癌3AO细胞具有抑制作用,与cDDP、CBP或TPT联合应用,可提高3种药物的化疗效果.
作者:李强;季梅;季华 刊期: 2004年第06期
目的:探讨胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growth factor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)对卵巢癌细胞AO、3AO基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达的诱导调节.方法:以IGF-Ⅱ处理卵巢癌细胞AO、3AO,用明胶酶谱法和RT-PCR法检测MMP-2蛋白的分泌以及基因表达.结果:IGF-Ⅱ能双相调节浆液性囊腺癌细胞AO中MMP-2的分泌,低浓度(10ng/ml)时能上调MMP-2的分泌,随着IGF-Ⅱ的浓度增加该作用增强;但高浓度时(100ng/ml),诱导作用显著下降;IGF-Ⅱ不增加粘液性囊腺癌细胞3AO培养上清中MMP-2蛋白的分泌.此外,IGF-Ⅱ不影响两种卵巢癌细胞中MMP-2的基因表达.结论:IGF-Ⅱ在一定程度上能刺激上皮性卵巢癌MMP-2蛋白表达,可能在卵巢癌的侵袭转移方面起重要作用.
作者:王利红;钟景琦;王伟萍;宋俊芬;吴小华;单保恩 刊期: 2004年第06期