孙建芝；李桂杰；李丽珍；秦平；刘博；宋强
目的:用重组PCR技术对人单核细胞趋化蛋白-1(hμMCP-1)基因cDNA进行缺失突变,构建其突变体-7 ND cDNA.方法:根据hμMCP-1基因缺失突变前后的两段基因分别设计两对含有酶切位点的引物,以pBlueScript-hμMCP-1为模板,进行重组PCR反应,将PCR产物与T载体连接进行TA克隆,酶切鉴定并测序确定其长度为342 bp,继之将目的基因克隆入pcDNA3.1真核表达载体.结果:成功构建hμMCP-1cDNA突变体-7ND的真核细胞表达载体,测序结果表明,该突变体N端第2至8位氨基酸缺失.结论:重组PCR技术是十分有效、可靠的基因缺失突变方法.
作者：仲琳；张运；张梅；季晓平；李大庆；张岩；张冰；杨军；刘少荣 刊期： 2004年第06期
卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcomaassociated herpesvirus,KSHV)又称人疱疹病毒8型(HHV-8),是1994年美国学者Chang[1]等首先从AIDS患者卡波氏肉瘤(KS)组织中发现的一种新的肿瘤病毒,目前被认为是KS的致病因子.KS是AIDS患者易患的一种血管瘤,在AIDS患者中的发病率可高达50%.
作者：张心声；齐眉；朱海峰；司桂玲；赵蔚明 刊期： 2004年第06期
目的:探讨氧自由基在阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)发生中的作用及可能机制,评价褪黑素(Melatonin,MT)的临床应用价值.方法:采用超氧自由基产生系统黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统(X/XO)作用于PC12细胞,以褪黑素拮抗其作用,观察细胞的形态学变化;MTT法检测细胞存活率,DNA电泳和流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT-PCR技术测定凋亡相关基因bcl-2、bax的表达.结果:X/XO作用后,PC12细胞出现凋亡特征性改变,凋亡率增加,电泳呈现DNA ladders,凋亡相关基因bax上调;而10-5M褪黑素即能改善凋亡情况.结论:氧自由基可诱导神经元凋亡从而促进AD发生,其机制与促凋亡相关基因Bax表达增高有关;褪黑素可减缓神经元凋亡,可用于临床预防与治疗.
作者：杨玲玲；付振涛；孔峰；胡晓燕；曾季平；崔行 刊期： 2004年第06期
目的:研究葡萄籽多酚(grape seed polyphenol,GSP)对人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADR的体内外耐药逆转作用.方法:采用MTT法检测1.2 mg/L和2.4 mg/L GSP对MCF-7/ADR的体外耐药逆转倍数.建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,实验分为4组:对照组,GSP组,阿霉素(adriamycin,ADR)组和ADR+GSP组,观察GSP对肿瘤细胞的体内耐药逆转作用;采用流式细胞术测定不同用药组P-糖蛋白(Pgp)表达变化.结果:体外1.2 mg/L GSP即可有效逆转耐药,2.4 mg/L GSP的逆转倍数为9.44;体内裸鼠抑瘤实验显示,GSP有一定抑瘤作用,联用ADR可显著抑制肿瘤生长,20 mg/kg GSP可有效逆转CF-7/ADR细胞的耐药性,抑瘤率为54.64%.流式细胞术结果显示,联用GSP与ADR组肿瘤细胞Pgp表达明显低于单独使用ADR组.结论:GSP能在体内外逆转MCF-7/ADR细胞的耐药性,此作用可能是通过抑制Pgp表达实现的.
作者：张翠娟；周庚寅；李丽；喻芳；孙妍琳；马超 刊期： 2004年第06期
目的:探讨p15基因在食管癌中的表达以及与食管癌临床病理及预后的关系.方法:应用酚:氯仿法提取46例食管癌患者的肿瘤及癌旁正常组织中高分子量的基因组DNA,并对p15基因外显子1和2进行PCR扩增,以1.5%琼脂糖凝胶电泳及溴化乙烷染色,分析PCR产物中p15基因的纯合性缺失.结果:正常食管粘膜组织中未见p15基因的纯合性缺失.食管癌肿瘤组织中,p15基因的纯合性缺失率为63.04%(29/46),且与食管癌的临床病理分级及DNA含量有关.结论:p15基因的纯合性缺失在食管癌发生、发展中起重要作用,可作为肿瘤标志物判断食管癌患者的预后.
作者：杨国涛；王善政；王德江；马玉燕；周璐 刊期： 2004年第06期
米氮平又名米塔扎平(mirtazapine),属哌嗪氮卓类衍生物,具有抗抑郁、抗焦虑及镇定作用,属新型抗抑郁药[1].本文采用HPLC法可准确、快速地测定该类药物的含量及有关物质,该方法已用于米氮平原料药和胶囊剂的质量标准研究.
作者：高彦慧；赵桂森；陈萍；程秀民；田进国 刊期： 2004年第06期
目的:研究声动力学治疗对宫颈癌细胞的体外效应.方法:应用超声激活血卟啉,采用四甲基偶氮唑蓝法、克隆形成率方法检测声动力学治疗对宫颈癌细胞的生长抑制作用.结果:血卟啉单独应用对细胞无明显生长抑制作用.单纯应用超声有一定的细胞杀伤作用,血卟啉和超声联合作用时,有明显的超声增敏作用.随着血卟啉浓度的升高和超声辐照时间的延长,血卟啉联合超声对细胞的生长抑制作用明显增强(P＜0.05),克隆形成率也明显降低(P＜0.05).结论:声动力学治疗能明显抑制宫颈癌细胞的生长增殖.
作者：车艳辞；傅庆诏；张秀国；马道新；白俊绥 刊期： 2004年第06期
在牙髓及根尖周病的治疗中,根管治疗被认为是佳的治疗方法,而根管预备成型是决定根管治疗成败的关键之一.由于根管再通难度大,成功率低,对干尸治疗、塑化治疗失败和外伤等所致的阻塞根管行根管治疗存在很大的难度,本研究组应用Maillefer Profile机用扩孔钻联合根尖定位仪对81例患者95颗牙齿的196个阻塞根管进行根管预备,经X-片证实效果良好.
作者：吴益华；王可；边惠芝；薛兰德；胡秀莲 刊期： 2004年第06期
目的:探讨缺血性心脏病慢性心力衰竭患者治疗前后血中脑钠素(BNP)和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)水平的变化及其临床意义.方法:将42例慢性心力衰竭患者分为Ⅰ组(29例,cTnI＜0.15 ng/ml)和Ⅱ组(13例,cTnI＞0.15 ng/ml),均给予地高辛、利尿剂和血管紧张素转换酶抑制剂或血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂等常规治疗,分别于治疗前、治疗后2周和4周检测左室舒张末期内径(LVDd)、左室射血分数(LVEF)、BNP和cTnI等指标.结果:治疗前Ⅱ组LVEF值显著低于Ⅰ组(P＜0.05),心功能分级、LVDd、BNP、cTnI测值显著高于Ⅰ组(P＜0.05);治疗2周后,Ⅰ组心功能分级、LVEF值、LVDd及BNP水平明显改善,与治疗前比较差异具有统计学意义(P＜0.05);治疗4周后,Ⅱ组心功能分级、LVEF值、LVDd、BNP及cTnI水平较治疗前明显改善(P＜0.05),但Ⅱ组LVDd及cTnI水平仍高于Ⅰ组治疗后水平(P＜0.05);治疗前,Ⅰ组BNP水平与LVDd测值呈高度正相关(r=0.871),Ⅱ组BNP水平与LVDd测值呈中度正相关(r=0.619),两者比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);Ⅱ组cTnI水平与LVDd测值呈正相关(r=0.629).结论:综合评价BNP和cTnI的测定结果,可以了解慢性心力衰竭患者的心功能状况和左室重塑程度,预测心衰患者对治疗的反应,为临床治疗提供指导.
作者：方征；李方；高扬；邹雄 刊期： 2004年第06期
目的:比较直接经皮冠脉内介入(percutaneous coronary intervention,PCI)和静脉溶栓治疗ST段抬高型急性心肌梗死(ST-segment elevation acute myocardial infarction,STEMI)的疗效.方法:对295例STEMI患者行直接PCI(介入组,158例)或静脉溶栓(溶栓组,137例)治疗,比较两组的梗死相关动脉开通率、左室射血分数、病死率、主要不良心脏事件发生率和平均住院时间.结果:两组基础临床特征无显著差异.与溶栓组比较,介入组(98.6%的患者同时置入支架)具有较高的梗死相关动脉开通率(96.2%vs67.2%,P＜0.05)和左室射血分数[(63.2±12.3)%vs(51.4±3.4)%,P＜0.05],且住院期间病死率(3.2%vs5.8%,P＜0.05)、主要不良心脏事件发生率(8.2%vs 20.4%,P＜0.05)和平均住院天数[(10.5±7.3)d vs(25.5±12.7)d,P＜0.05]显著低于溶栓组.结论:与静脉溶栓比较,直接PCI治疗STEMI疗效更佳.
作者：陈玉国；徐峰；张运；孙祎；李继福；李贵双；纪求尚；李瑞建 刊期： 2004年第06期
岩青兰(dracocephalum rupestra)是唇形科青兰属植物,多分布于海拔1500米高度之上,该植物地上全草富含黄酮类成分[1,2].药效学研究证明,总黄酮具有较好的抗血小板聚集作用,可增加冠脉流量,提高小鼠耐缺氧能力;毒理学试验未发现明显毒性,表明该总黄酮作为治疗心脑血管系统疾病的新药开发具有较好的前景.总黄酮中柚皮素-7-O-葡萄糖苷和北美圣草素-7-O-葡萄糖苷在岩青兰中含量较高,本文采用常压、中压柱色谱等方法制得了这两种成分的对照品并以这两种成分为质量指标,建立了HPLC检测方法,该法测定简便,检测灵敏,稳定性和重现性好,可用于本药材质量控制.同时,测定了不同采收时期全草中两种二氢黄酮苷的含量,为确定药材合理的采收时期、开发利用该植物资源提供理论依据.
作者：任冬梅；娄红祥；季梅；崔新德；邹满 刊期： 2004年第06期
目的:分析中国汉族人群21号染色体上3个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)的等位基因及基因型分布情况.方法:采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析100名中国汉族人21号染色体上D21S11、D21S1435、D21S2055位点的遗传多态性.结果:在中国汉族人群中,D21S11、D21S1435、D21S2055位点分别检出7、6和18个等位基因,18、17和56种基因型,杂合度分别为73%、82%和91%.结论:中国汉族人群中21号染色体的3个STR位点有较好的多态性,其基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡.
作者：邹永新；龚瑶琴；张锡宇；郭辰虹；高贵敏；陈丙玺 刊期： 2004年第06期
目的:探讨抑癌基因p27kipl与细胞核增殖相关的抗原ki-67在非小细胞肺癌中的表达,分析两者之间的关系及其对预后的影响.方法:采用免疫组织化学方法对64例非小细胞肺癌术后病理标本中p27kipl及Ki-67进行检测.结果:肺癌组织中平均p27kipl标记42.39%.p27kipl表达水平的下降与组织学分级(P＜0.05)、淋巴结受侵(P＜0.01)、高肿瘤增殖活性(P＜0.001)密切相关;高Ki-67标记与淋巴结转移有关(P＜0.05).p27kipl与Ki-67之间呈负相关(r=-0.472,P＜0.001).Kaplan-Meier生存分析显示,p27kipl高表达者中位生存期39个月,而低表达者14个月(P＜0.01);Ki-67低表达者中位生存期32个月,而高表达者13个月(P＜0.01).在p27kipl与Ki-67相结合的预后判断中,高Ki-67/低p27的患者病情进展快,生存期短,低Ki-67/高p27表达的患者生存期明显延长.生存期的COX单因素分析表明,p27kipl、Ki-67、组织学分级、淋巴结转移具有统计学意义,而多因素分析中仅p27kipl、Ki-67、淋巴结转移是独立的预后因素.结论:淋巴结转移、p27kipl和Ki-67的表达可作为判断预后的指标.而p27kipl、Ki-67结合对判断预后及根治术后选择治疗方案具有重要的价值.
作者：陈强华；王力秋 刊期： 2004年第06期
目的:建立人破伤风免疫噬菌体抗体库,筛选抗破伤风类毒素的抗体基因,并在大肠杆菌中表达可溶性Fab段.方法:从破伤风类毒素免疫志愿者中分离淋巴细胞,提取细胞总RNA,用一组人IgG Fab基因特异性引物,从合成的cDNA中经PCR扩增出抗体轻链(VL+CL)和重链Fd(VH+CH1)基因,分别经XbaⅠ/SacⅠ和SpeⅠ/XhoⅠ酶切克隆入噬菌粒pComb3.用破伤风外毒素作为抗原进行筛选富集获得特异性抗破伤风类毒素的噬菌体抗体,切去噬菌体外壳蛋白基因Ⅲ(gⅢ),表达可溶性人抗破伤风类毒素的Fab段.结果:经核苷酸序列分析证实,所获得的基因为人IgG Fab基因;用ELISA鉴定表明,表达的人IgG Fab抗体能特异性地与破伤风外毒素结合.结论:利用噬菌体抗体库技术筛选可得到与破伤风外毒素特异性结合的人抗破伤风类毒素基因工程抗体.
作者：刘军莉；王群；张蘋；高尚先；孙汶生；张利宁 刊期： 2004年第06期
目的:探讨绞股蓝皂甙(gypenoside,GP)对谷氨酸(glutamate,Glu)介导的氧化性神经毒性的拮抗作用.方法:体外培养胎鼠大脑皮层神经细胞,建立Glu氧化性损伤模型,用MTT法测定细胞活力,透射电镜观察Glu所致的神经细胞死亡方式,流式细胞术分析细胞凋亡率.结果:GP以时间依赖性方式明显拮抗谷氨酸介导的氧化性神经毒性,于Glu损伤前达到佳保护效果,Glu氧化性毒性导致神经细胞发生凋亡兼具坏死特征的死亡,Glu损伤组细胞凋亡率(21.63%)明显高于正常对照组(0.09%)及GP保护组(8.94%).结论:GP可明显拮抗Glu介导的氧化性神经毒性.
作者：辛华；商林珊；刘金成；朱庆均；赵玲；王旭平；张保华；冯玉新 刊期： 2004年第06期
目的:评价重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)治疗癌性贫血的疗效和安全性.方法:非髓性癌性贫血患者46例,皮下注射rHuEPO 150 U/kg,每周3次,连续8周,同时化疗至少2周期.比较治疗前后血红蛋白(HB)、红细胞压积(Hct)水平,评价体力状态和生活质量的变化以及药物不良反应.结果:44例可评价血液学反应,其中23例(52.3%)HB上升≥20g/L或HB≥120 g/L,Hct值也明显上升(P＜0.05).体力状态0-2级的患者较rHuEPO治疗前增加5例,QOL评分略微增加(P＞0.05),8例患者疲劳程度减轻.粒细胞减少、消化道反应等不良反应多与化疗相关.结论:rHuEPO能明显提高非髓性癌性贫血患者化疗时的HB水平,改善体力状态和生活质量,提高化疗耐受性,副作用少且使用安全.
作者：黎莉；徐从高；王秀问；张昕；魏军民；孙雅红；张芳 刊期： 2004年第06期
2002年1月～2003年3月,采用螺旋CT多平面容积重建(multiplanar volumetric reconstructions,MPVR)技术对临床怀疑有腰椎滑脱的37例患者进行分析诊断,报告如下.
作者：赵素红；刘庆伟；孙宪昶；杨玉海；吕守臣 刊期： 2004年第06期
目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对阿霉素抗白血病的增效作用.方法:用MTT法测定单用阿霉素及与EGCG联合应用时对人白血病K562细胞的增殖抑制作用;以流式细胞术分析联合用药前后细胞内阿霉素浓度的变化;以免疫细胞化学方法检测联合用药前后细胞bax/bcl-2比值的变化.结果:联合应用EGCG能够降低阿霉素对K562细胞的IC50、增加细胞内阿霉素浓度及细胞bax/bcl-2的比值,并具有剂量依赖性.结论:EGCG能够增强阿霉素对K562细胞的抗肿瘤活性,其作用机制可能是通过增加细胞内阿霉素浓度及增加细胞bax/bcl-2比值.
作者：赵芳；张茂宏；李丽珍；王鲁群；赵川莉 刊期： 2004年第06期
目的:研究bcl-2及fas在体外培养的卵巢癌细胞系3AO及其耐药系3AO/cDDP的表达及化疗药物拓扑替康(topotecan,TPT)与顺铂(cisplatinum,cDDP)对两种基因表达的影响.方法:用人卵巢上皮癌细胞系3AO及其cDDP耐药细胞系3AO/cDDP进行体外培养实验,用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测两种细胞系在化疗药物顺铂(cDDP)与拓扑替康治疗前后的fas和bcl-2表达.结果:与3AO相比,fas与bcl-2在3AO/cDDP中的表达明显降低(P＜0.01);cDDP和TPT可使fas在3AO中的表达明显升高(P＜0.01),bcl-2明显降低(P＜0.01);cDDP和TPT对fas表达影响较为显著(P＜0.01),对bcl-2无显著影响(P＞0.05).结论:fas可能在卵巢癌的化疗耐药中起作用,但bcl-2的作用尚不明确;cDDP及TPT可能通过fas介导的细胞凋亡机制促进细胞死亡.
作者：延俊元；刘培淑；张燕玲；王翠兰；薛云霞 刊期： 2004年第06期
目的:探讨p35基因对氯化锰(MnCl2)诱导的PC12细胞凋亡的作用.方法:将p35基因转染PC12细胞得到可稳定表达p35基因的PC12/p35细胞株,使用相差显微镜观察、MTT染色和流式细胞分析等方法检测p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞凋亡的作用.结果:p35基因在PC12细胞中的稳定表达可以有效地抑制MnCl2诱导的PC12细胞凋亡.结论:p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞具有保护作用.
作者：曾季平；王立祥；胡晓燕；秦文；孔峰；杨玲玲；崔行；刘新垣 刊期： 2004年第06期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
