学术投稿

人早孕绒毛膜匀浆和脐静脉内皮细胞对早期鼠胚体外发育的影响

王伟;李继俊;陈子江;李明江;曲春晓

关键词:脐静脉, 绒毛膜, 表皮生长因子, 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子, 血管内皮生长因子, 胚胎, 小鼠, 体外
摘要:目的:观察人早孕绒毛膜匀浆(UPHC)和人脐静脉内皮细胞(ECHUV)对早期鼠胚体外发育的影响.方法:观察早期鼠胚在UPHC培养液及ECHUV联合培养液中的发育情况;用ELISA法检测两培养系统上清液中表皮生长因子(EGF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量.结果:在UPHC培养系统和ECHUV联合培养系统中,早期鼠胚的桑葚胚形成率分别为79.5%和81.2%,囊胚形成率分别为60.2%和61.2%,囊胚孵出率分别为41.0%和42.1%,均明显高于对照组(P<0.05).早期鼠胚A和B级桑葚胚形成率,在UPHC培养系统中分别为45.2%和32.3%,在ECHUV培养系统中分别为44.6%和27.7%,均显著高于对照组(P<0.05).UPHC培养系统和ECHUV联合培养系统中,EGF的浓度分别为(52.65±7.37)pg/ml和(58.14±3.03)pg/ml;GM-CSF的浓度分别为(11.81±3.76)pg/ml和(9.20±2.59)pg/ml;VEGF的浓度分别为(61.43±11.38)pg/ml和(256.54±9.15)pg/ml,均显著高于对照组(P<0.05);ECHUV培养系统的VEGF浓度又显著高于UPHC培养系统(P<0.01).结论:UPHC和ECHUV培养系统促进早期鼠胚体外发育,提高桑葚胚和囊胚形成率、囊胚孵出率和胚胎质量,其作用与EGF、GM-CSF及VEGF有关.
山东大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 小鼠轮状病毒EW株VP7基因的克隆及其在重组腺病毒中的表达

    目的:构建表达小鼠轮状病毒(EDIM)EW株VP7基因的重组腺病毒,以在小鼠模型上研究轮状病毒的免疫保护机制.方法:用RT-PCR方法扩增EDIM VP7全长cDNA并进行基因序列分析,将所得的VP7基因片段插入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,获得重组质粒pShuttleCMV-EVP7,将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183获得重组腺病毒质粒pAdCMV-EVP7,将该质粒线性化后转染293细胞包装重组腺病毒rvAdEVP7.以rvAdEVP7胛感染293细胞,并分别应用电子显微镜、PCR、RT-PCR和Western blot等方法观察rvAdEVP7的形态、VP7基因整合、遗传稳定性、VP7基因在细胞内转录及表达等有关生物学特性.结果:获得了小鼠轮状病毒的全长cDNA,重组腺病毒rvAdEVP7具有典型的腺病毒形态,PCR、RT-PCR和Western blot等分子生物学方法分析显示:rvAdEVP7中确有特异性的VP7基因稳定整合;有较好的遗传稳定性;感染293细胞后能有效转录;可表达轮状病毒主要结构蛋白VP7.结论:成功构建含VP7基因的重组腺病毒rvAdEVP7,为进一步研究轮状病毒的免疫保护机制打下了基础.

    作者:李勇;王健伟;屈建国;于修平;王大燕;姜秀丽;洪涛 刊期: 2003年第06期

  • 增殖细胞核抗原在上颌窦鳞状细胞癌的表达

    目的:探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuc1ear antigen,PCNA)在上颌窦鳞癌中的表达及其与上颌窦鳞癌发生发展的关系.方法:应用免疫组化SABC法检测了35例上颌窦鳞癌和15例鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的PCNA表达.结果:PCNA染色阳性细胞为细胞核染色.PCNA指数上颌窦鳞癌为86.94±9.83,鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤为46.14±2.66,二者差异有统计学意义(P<0.001).随上颌窦鳞癌的分化程度的降低,PCNA指数增加,不同分化间PCNA指数差异有统计学意义(均为P<0.05).结论:PCNA的表达与上颌窦鳞癌的发生及分化程度相关.

    作者:韩敏;张秋贵;陈瑛 刊期: 2003年第06期

  • 肝硬化患者血浆转化因子TGF-β1测定的意义

    目的:探讨肝硬化患者血浆转化因子β1(TGF-β1)的变化及其意义.方法:经病史、临床生化、B超检查确诊的72例乙肝后肝硬化患者,依据child-pugh分级分为3级,其中A级23例,B级29例,C级20例.健康志愿献血者6例做为正常对照组.ELISA法测定血浆TGF-β1的变化.并同时检测血透明质酸酶(HA)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、血浆白蛋白、凝血酶原时间及其活动度、胆红素改变.结果:随着肝硬化的进展,血浆TGF-β1、血HA、CⅣ、PCⅢ逐渐增加.child B、child C级患者血浆TGF-β1与血HA、PCⅢ均明显增加.血浆TGF-β1与血HA呈正相关(child B组r=0.51,P<0.01;child C组r=0.67,P<0.01),与血PCⅢ呈正相关(child B组r=0.63,P<0.05;child C组r=0.74,P<0.01).结论:血浆TGF-β1可反映肝纤维化程度,联合HA、PCⅢ检测可用作肝硬化诊断、追踪观察的有意义指标.

    作者:武希润;王琦;师水生;郭文栋;吕敏和 刊期: 2003年第06期

  • 组织多肽特异性抗原在胰腺癌诊断中的意义

    组织多肽特异性抗原(TPS)是一种酸性蛋白质,分子量为45 000,血清中TPS含量的高低是衡量肿瘤细胞分裂和增殖活性的一个较为特异的指标[1].为探讨TPS在胰腺癌诊断中的意义.我们用酶联免疫方法对52例胰腺癌患者血清中的TPS进行了术前测定,并与糖抗原19-9(CA19-9)进行对比,现报告如下.

    作者:张波;张向红;曾庆东;李胜;李占元 刊期: 2003年第06期

  • 职业性铅接触与尿绒毛膜酶活性的关系

    目的:探讨铅接触者尿绒毛膜酶活性的变化及其意义.方法:对147例铅作业工人采用免疫吸附比色法测定尿绒毛膜酶(LAP、ALP)活性.结果:铅接触者尿绒毛膜酶活性增加[LAP(16.16±3.18)μg/L、ALP(30.83±4.91)μg/L],且随接触时间延长而升高,铅接触史≥5年者尿绒毛膜酶活性[LAP(18.94±5.22)、ALP(33.45±5.13)μg/L]较铅接触史<5年者[LAP(14.12±2.76)、ALP(28.6±3.82)μg/L]为高(P<0.05).结论:尿绒毛膜酶活性升高是铅致早期肾损害的敏感指标.

    作者:杜贻萌;李琦;鹿庆华;孙慧;吴凡;林娟 刊期: 2003年第06期

  • 人嗅粘膜内细胞色素P450 2A6的发育表达

    目的:探讨细胞色素P450 2A6(cytochromeP450 2A6,CYP2A6)在不同胎龄胎儿嗅粘膜内的发育表达.方法:应用免疫组化法观察CYP2A6在胚胎发育16、18、22、28和38周胎儿嗅粘膜内的表达情况.结果:CYP2A6的表达始于孕18周,在支持细胞核上区胞浆顶端阳性着色,彼此相连呈一条带状,上皮中、下层个别支持细胞核下区也呈现稍弱的免疫阳性反应.到孕22周时,固有层Bowman腺细胞浆内开始出现CYP2A6阳性着色,但此时Bowman腺体数量较少,腺细胞仅单层排列围成腺腔.随胎儿发育CYP2A6表达强度不断增大,孕28周时整个支持细胞的阳性着色更加清晰,固有层内Bowman腺数量明显增多,并且腺细胞呈多层排列,胞浆内CYP2A6阳性强度开始超出上皮层内的支持细胞.孕38周时免疫反应达峰值,其中支持细胞的染色勾画出其独特的极性结构:细胞核上区宽阔,胞浆内CYP2A6染色清晰,而核下区逐渐缩窄,以足状突的形式附着于基膜上.结论:人胎儿发育时期嗅粘膜内有CYP2A6酶表达,并且与嗅感受神经元发育基本同步,二者可能存在共同的调控因子.固有层Bowman腺细胞内CYP2A6的开始表达时间晚于上皮层支持细胞,但却是嗅粘膜内CYP2A6表达的主要部位以及嗅素代谢转化的主要场所.

    作者:任翔;陈瑛;张克杰;史丽;丁元萍 刊期: 2003年第06期

  • 葡萄籽原花青素抗兔动脉粥样硬化形成的实验研究

    目的:观察葡萄籽原花青素(GSPE)对兔动脉粥样硬化(AS)形成的影响并探讨其作用机制.方法:30只雄性新西兰兔随机分为正常对照(A)组、高脂模型(B)组、GSPE(C)组,分别饲喂:标准、标准+1%胆固醇、标准+1%胆固醇+1%GSPE的颗粒饲料.于实验前1天和实验第1、2、4、8、12周末取空腹血,检测血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)和血浆氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL).12周末动物取血后处死,取主动脉作病理形态学观察.所有数据经SAS 8.2混合模型方差分析.结果:与高脂模型组相比,GSPE能显著降低血清TC(P<0.0001)、LDL-C(P<0.0001)、TG(P<0.0001)、TG/HDL(P<0.0001),升高HDL-C(P<0.05);GSPE能显著降低血清MDA、血浆ox-LDL(P<0.0001);病理分析显示GSPE组兔主动脉壁厚度和泡沫细胞数量较高脂模型组明显减轻、减少(P<0.01).结论:GSPE具有预防AS的作用,该作用的发挥与其能调节血脂、抗LDL氧化修饰有关,并能改善胰岛素抵抗.

    作者:马亚兵;高海青;由倍安;伊永亮;毕轶;刘相菊;沈琳;李曼 刊期: 2003年第06期

  • 照射脾脏治疗小儿难治性原发血小板减少性紫癜(附15例临床报告)

    目的:探讨脾脏放射治疗小儿难治性原发血小板减少性紫癜(RITP)的临床应用价值.方法:采用直线加速器的高能X线对患者脾脏进行放射治疗,放疗前后观察外周血血小板的数量,临床症状及体征.统计学采用配对计量资料t检验.结果:放疗后血小板数量较放疗前显著增加(P<0.001),临床症状及体征明显好转.放疗结束2月后临床评价,有效率86.7%.1年后复查,有效率66.7%.3年后随诊,有效率60%.未发现与放射治疗有关的并发症.结论:采用脾脏照射是治疗小儿难治性原发性血小板减少性紫癜安全有效的方法,且可避免脾脏切除.

    作者:姜玉华;程玉峰;赵潍萍;李贞;菊秀丽;沈柏均 刊期: 2003年第06期

  • 急性心肌梗死患者PAI-1、sVCAM-1及hsCRP水平与溶栓抵抗的关系

    目的:寻找急性心肌梗死(AMI)患者出现溶栓抵抗的预测因子.方法:将68例急性心肌梗死患者分为溶栓再通组和溶栓未通组,比较两组患者溶栓前的纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)及超敏C-反应蛋白(hsCRP)水平的不同.结果:溶栓未通组PAI-1、sV-CAM-1水平均显著高于再通组,P<0.05;溶栓未通组和再通组hsCRP水平差异无统计学意义,P>0.05.结论:PAI-1、sVCAM-1有可能成为溶栓抵抗的预测指标.

    作者:朱艳利;朱兴雷;吕琳;郑霞;卓晶明 刊期: 2003年第06期

  • 阿奇霉素固态类脂纳米粒的制备及其体外释药特性的研究

    目的:以硬脂酸为载体材料制备阿奇霉素固态类脂纳米粒(AZM-sLN),并考察其体外释药特性.方法:采用乳化蒸发-低温固化法制备AZM-SLN;并对其形态、粒径、包封率、结构和质量、体外释药特性等进行研究.结果:得到的硬脂酸固态类脂纳米粒为类球形实体,粒径分布比较均匀,平均粒径dav=(17.75±5.00)nm;三批载药纳米粒的包封率为(81.57±1.33)%;体外释药符合Higuchi方程;用DSC分析证明纳米粒确已形成.结论:硬脂酸纳米粒有可能成为一种新型药物载体.

    作者:张典瑞;张君华;陈江飞 刊期: 2003年第06期

  • 反相高效液相色谱法测定注射用盐酸氨溴索的含量

    盐酸氨溴索(ambroxol hydrochloride),化学名反式-4-[(2-氨基-3,5-二溴苄基)氨基]环己醇盐酸盐,临床用于治疗多种原因引起的痰多、咳嗽,是某些祛痰药的主要成份[1,2].

    作者:吴敬德;凌霄;席延卫 刊期: 2003年第06期

  • SARS冠状病毒M基因片断在大肠杆菌中表达及其抗原性的研究

    目的:获得纯的重组SARSCoV M蛋白,并初步测定重组蛋白的抗原性.方法:软件分析SARSCoV M蛋白富含免疫表位的片断,体外合成编码SARSCoV M蛋白15-170aa序列的DNA片段,利用DNA重组技术,将该合成DNA克隆至表达载体pGEX-5X-1,构建重组质粒pGEX-SARSCoV M.在大肠杆菌BL21中诱导表达GST-SARSCoV M重组融合蛋白,分离纯化GST-SARSCoV M蛋白,利用纯化蛋白作为抗原,建立ELISA试验检测抗SARSCoV M抗体.结果:GST-SARSCoV M蛋白分子量为43kD,纯化的GST-SARSCoV M蛋白作为抗原检测血清中SARSCoV M抗体,53例正常成人献血者血清未检出SARSCoV M抗体.结论:SARSCoV M蛋白表达成功,在健康人血清中未检出SARSCoV M抗体.

    作者:栾怡;于修平;赵蔚明;张静;周亚滨;齐眉 刊期: 2003年第06期

  • 促性腺激素释放激素用量对体外受精-胚胎移植影响的探讨

    目的:探讨达必佳不同用量对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo trans-fer,IVF-ET)的影响.方法:将准备长方案促排卵行IVF-ET的214例患者随机分为2组,Ⅰ组每天肌肉注射达必佳0.1 mg,Ⅱ组每天肌肉注射达必佳0.05 mg,观察两组中促性腺激素用量情况、HCG日子宫内膜厚度、激素水平、获卵数、受精数和妊娠率.结果:Ⅰ组与Ⅱ组患者年龄、不孕年限、注射绒毛膜促性腺激素(HCG)日子宫内膜厚度、激素水平、受精率、妊娠率无统计学意义,但Ⅱ组促性腺激素用量少,获卵数多.结论:达必佳减量后仍然可以达到充分的垂体抑制,减少促性腺激素的用量,不影响IVF-ET的成功率.

    作者:盛燕;陈子江;高芹;唐蓉;石玉华;孙梅 刊期: 2003年第06期

  • 米非司酮对人卵巢癌3AO细胞体外增殖和性激素受体ER、PR的影响

    目的:研究米非司酮对人卵巢上皮癌细胞株3AO体外增殖和性激素受体ER、PR表达的影响.方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢上皮癌细胞株3AO体外增殖活性,以流式细胞间接荧光技术检测肿瘤细胞ER、PR蛋白表达率.结果:米非司酮以剂量和时间依赖方式抑制3AO细胞体外增殖活性,3AO细胞在不同浓度米非司酮(5、10、20、40、80μmol/L)和不同时间(24、48、72、96、120h)培养下,生长抑制率从1.7%增加至85.2%(P<0.05),米非司酮和地塞米松联合应用与相同浓度的米非司酮单独应用比较,细胞增殖抑制率差异无统计学意义(P>0.05).米非司酮浓度为10μmol/L,培养48 h,3AO细胞PR表达率为(12.7±1.4)%,明显低于对照组(44.9±1.4)%,(P>0.01);3AO细胞ER表达率为(55.1±1.7)%,与米非司酮组ER表达率(52.3±0.8)%比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:米非司酮以剂量-时间依赖方式抑制人卵巢上皮癌3AO细胞体外增殖活性,其对3AO细胞的抑制作用与PR变化相关.

    作者:李强;李继俊;季梅 刊期: 2003年第06期

  • 三棱镜适应在内斜视治疗中的应用

    内斜视患者手术前使用三棱镜做三棱镜适应(Prism Adaptation,PA),可以提高手术成功率,对预测获得性内斜视患者手术后的感觉和运动融合有效.

    作者:田旭;张林娜;陈澎 刊期: 2003年第06期

  • 霉酚酸酯与环磷酰胺治疗Ⅳ型狼疮性肾炎的疗效比较

    目的:比较霉酚酸酯(MMF)与环磷酰胺(CTX)静脉冲击疗法治疗Ⅳ型狼疮性肾炎(LN)的近期疗效及对肾脏病理改变的影响.方法:28例患者均经临床和肾活检确诊为Ⅳ型LN,随机分为2组,MMF治疗组用糖皮质激素联合MMF(1.0~1.5 g·d-1)治疗;CTX组用糖皮质激素联合CTX治疗.结果:治疗12个月时MMF组蛋白尿及血尿下降程度大于CTX组.尿蛋白下降和尿红细胞减少超过基础值50%者,MMF组分别为78.6%和92.9%,CTX组分别为42.9%和57.1%.MMF组降低ANA及ds-DNA抗体的作用优于CTX组.治疗4~7个月时重复肾活检显示,MMF治疗组肾组织学活动性指数(AI)下降程度大于CTX组,MMF治疗组AI由16.9±6.4降至3.5±1.6,CTX组AI由15.2±3.8降至6.4±1.2.MMF组感染并发症发生率低于CTX组.结论:激素联合MMF控制Ⅳ型LN的疗效优于CTX且副反应低.

    作者:朱彬;周振安;刘子栋;王小平;任万军 刊期: 2003年第06期

  • 乙醇慢性摄入对大鼠肝组织细胞因子TGF-β、TNF-α mRNA表达的影响

    目的:观察乙醇慢性摄入对大鼠肝组织细胞因子TGF-β、TNF-αmRNA表达的影响.方法:选用30只体重(200±20)g的Wistar雄性大鼠,随机分为3组(每组10只),对照组为清水+普通饮食(A组),实验组为:①20%酒精饮料+普通饮食(B组);②20%酒精饮料+高脂饮食(C组).饲养3个月全部处死,分别进行血清酶学、血脂、组织病理学及细胞因子基因学测定.结果:A组无异常,B、C组均出现血脂升高及病理学变化,同时C组出现酶学变化,B、C组肝组织TGF-β、TNF-αmRNA表达水平增高.结论:乙醇慢性摄入上调大鼠肝组织细胞因子TGF-β、TNF-αmRNA的表达.

    作者:郝洪升;邢全台;陈建;李延青;赵幼安;袁孟彪 刊期: 2003年第06期

  • 牙科全瓷修复材料-GC陶瓷的肌肉埋植实验研究

    目的:进一步检验GC牙科全瓷材料的生物相容性.方法:选用兔龄3个月左右,体重2~3kg纯种新西兰大白兔8只,进行肌肉埋植实验.结果:实验动物均未出现局部及全身不良反应.组织学观察与阴性对照无显著性差异.结论:GC牙科全瓷材料有良好的组织相容性.

    作者:刘倩;郭庆泰;张立军;刘文侠;郭剑 刊期: 2003年第06期

  • 单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D酵母表达载体的构建

    目的:构建含有单纯疱疹病毒Ⅰ型包膜糖蛋白D全基因片段的克隆载体及酵母表达载体,为进一步真核表达重组gD蛋白奠定基础.方法:应用PCR方法从HSV-Ⅰ基因组中扩增糖蛋白D的全长基因,产物回收后与pMD-18T载体连接,并转化,经氨苄筛选及测序,建立克隆载体pMD18T-gD;克隆载体与表达载体双酶切后,产物连接、转化大肠杆菌JM109,筛选、测序后确定构建了酵母表达载体pGAPZαA-gD.结果:重组质粒pMD18T-gD和pGAPZαA-gD经PCR和酶切均出现相应长度的片段,测序结果证实为gD基因,序列分析同源性为99.66%.结论:成功构建了含有单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D全基因的克隆载体及酵母表达质粒.

    作者:王战勇;王志玉;温红玲;宋艳艳;王桂亭;许洪芝 刊期: 2003年第06期

  • 组织多普勒技术定量分析肥厚型心肌病患者左心室局部与整体舒缩功能

    目的:应用多普勒组织成像技术(DTI)评价肥厚型心肌病患者(HCM)左心室局部与整体舒缩功能.方法:采用DTI技术测量HCM患者室间隔和左心室侧壁中段以及二尖瓣瓣环-室间隔和二尖瓣瓣环-侧壁交界处的收缩期、舒张早期和舒张晚期DTI速度峰值(Sm1~4Em1~4、Am1~4),并与正常组进行比较.结果:HCM患者室间隔和侧壁中段以及二尖瓣瓣环-室间隔和二尖瓣瓣环-侧壁交界处收缩期Sm1~4与正常组相比无显著差异,但舒张早期Em1~4明显低于正常,舒张晚期Am1~4明显高于正常,Em1~4/Am1~4明显减低;在正常人中,Em1/Am1和Em2/Am2无显著性差异(P>0.05),但HCM患者Em1/Am1明显低于Em2/Am2(P<0.05),且该组患者室间隔厚度明显大于侧壁厚度[(2.36±0.50)cm vs(1.20±0.23)cm,P<0.05].结论:DTI技术测量的室壁运动速度可早期而准确反映HCM患者左心室舒缩功能的变化,为左心室舒缩功能的评价提供了一种新的方法.

    作者:郭媛;史承耀;牟晓梅;赵静;岳欣;安丰双;钟明;卜培莉;张梅;张运 刊期: 2003年第06期

山东大学学报(医学版)杂志

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主办:山东大学