张波;张向红;曾庆东;李胜;李占元
目的:观察人早孕绒毛膜匀浆(UPHC)和人脐静脉内皮细胞(ECHUV)对早期鼠胚体外发育的影响.方法:观察早期鼠胚在UPHC培养液及ECHUV联合培养液中的发育情况;用ELISA法检测两培养系统上清液中表皮生长因子(EGF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量.结果:在UPHC培养系统和ECHUV联合培养系统中,早期鼠胚的桑葚胚形成率分别为79.5%和81.2%,囊胚形成率分别为60.2%和61.2%,囊胚孵出率分别为41.0%和42.1%,均明显高于对照组(P<0.05).早期鼠胚A和B级桑葚胚形成率,在UPHC培养系统中分别为45.2%和32.3%,在ECHUV培养系统中分别为44.6%和27.7%,均显著高于对照组(P<0.05).UPHC培养系统和ECHUV联合培养系统中,EGF的浓度分别为(52.65±7.37)pg/ml和(58.14±3.03)pg/ml;GM-CSF的浓度分别为(11.81±3.76)pg/ml和(9.20±2.59)pg/ml;VEGF的浓度分别为(61.43±11.38)pg/ml和(256.54±9.15)pg/ml,均显著高于对照组(P<0.05);ECHUV培养系统的VEGF浓度又显著高于UPHC培养系统(P<0.01).结论:UPHC和ECHUV培养系统促进早期鼠胚体外发育,提高桑葚胚和囊胚形成率、囊胚孵出率和胚胎质量,其作用与EGF、GM-CSF及VEGF有关.
作者:王伟;李继俊;陈子江;李明江;曲春晓 刊期: 2003年第06期
目的:探讨细胞色素P450 2A6(cytochromeP450 2A6,CYP2A6)在不同胎龄胎儿嗅粘膜内的发育表达.方法:应用免疫组化法观察CYP2A6在胚胎发育16、18、22、28和38周胎儿嗅粘膜内的表达情况.结果:CYP2A6的表达始于孕18周,在支持细胞核上区胞浆顶端阳性着色,彼此相连呈一条带状,上皮中、下层个别支持细胞核下区也呈现稍弱的免疫阳性反应.到孕22周时,固有层Bowman腺细胞浆内开始出现CYP2A6阳性着色,但此时Bowman腺体数量较少,腺细胞仅单层排列围成腺腔.随胎儿发育CYP2A6表达强度不断增大,孕28周时整个支持细胞的阳性着色更加清晰,固有层内Bowman腺数量明显增多,并且腺细胞呈多层排列,胞浆内CYP2A6阳性强度开始超出上皮层内的支持细胞.孕38周时免疫反应达峰值,其中支持细胞的染色勾画出其独特的极性结构:细胞核上区宽阔,胞浆内CYP2A6染色清晰,而核下区逐渐缩窄,以足状突的形式附着于基膜上.结论:人胎儿发育时期嗅粘膜内有CYP2A6酶表达,并且与嗅感受神经元发育基本同步,二者可能存在共同的调控因子.固有层Bowman腺细胞内CYP2A6的开始表达时间晚于上皮层支持细胞,但却是嗅粘膜内CYP2A6表达的主要部位以及嗅素代谢转化的主要场所.
作者:任翔;陈瑛;张克杰;史丽;丁元萍 刊期: 2003年第06期
目的:寻找急性心肌梗死(AMI)患者出现溶栓抵抗的预测因子.方法:将68例急性心肌梗死患者分为溶栓再通组和溶栓未通组,比较两组患者溶栓前的纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)及超敏C-反应蛋白(hsCRP)水平的不同.结果:溶栓未通组PAI-1、sV-CAM-1水平均显著高于再通组,P<0.05;溶栓未通组和再通组hsCRP水平差异无统计学意义,P>0.05.结论:PAI-1、sVCAM-1有可能成为溶栓抵抗的预测指标.
作者:朱艳利;朱兴雷;吕琳;郑霞;卓晶明 刊期: 2003年第06期
目的:构建牛乳头瘤病毒晚期基因L1-GFP融合基因真核表达质粒,自细胞水平探讨优化密码对晚期基因L1蛋白瞬时表达的影响.方法:用PCR方法扩增获得优化密码人源化BPVL1(hL1)基因.TA克隆后,酶切释放hL1基因,定向插入质粒pET30a/NM-GFP的BamHI、SacII位点,获得正确框架的hL1-GFP融合基因.再用BamHI、NotI酶切释放hL1-GFP融合基因,与pcDNA3载体定向重组构建真核表达质粒pcDNA3/hL1-GFP.同法克隆获得含野生型BPVL1-GFP融合基因的表达质粒pcDNA3/wL1-GFP.用质粒DNA分别在体外转染哺乳动物细胞COS-1细胞和Wish细胞,荧光显微镜下观察L1-GFP融合蛋白的瞬时表达情况.结果:酶切鉴定表明成功构建了含wL1-GFP、hLI-GFP的真核表达载体,与pcDNA3/wL1-GFP相比,pcDNA3/kL1-GFP在COS-1细胞、WISH细胞中获得有效表达.结论:优化密码能提高乳头瘤病毒L1基因在哺乳动物细胞内的蛋白表达.
作者:王红;赵蔚明;周亚滨;贾继辉;孙建芝;于修平 刊期: 2003年第06期
目的:探讨脾脏放射治疗小儿难治性原发血小板减少性紫癜(RITP)的临床应用价值.方法:采用直线加速器的高能X线对患者脾脏进行放射治疗,放疗前后观察外周血血小板的数量,临床症状及体征.统计学采用配对计量资料t检验.结果:放疗后血小板数量较放疗前显著增加(P<0.001),临床症状及体征明显好转.放疗结束2月后临床评价,有效率86.7%.1年后复查,有效率66.7%.3年后随诊,有效率60%.未发现与放射治疗有关的并发症.结论:采用脾脏照射是治疗小儿难治性原发性血小板减少性紫癜安全有效的方法,且可避免脾脏切除.
作者:姜玉华;程玉峰;赵潍萍;李贞;菊秀丽;沈柏均 刊期: 2003年第06期
目的:研究可溶性细胞间粘附因子-1(sICAM-1)在Graves眼病(GO)炎性活动期与静止期的水平差异及其与各项甲状腺功能指标的关系.方法:将GO炎性活动期与静止期患者,Graves病(GD)无眼病患者及正常对照,分为A、B、C、D四组,抽取空腹静脉全血,测血清sICAM-1,各组间进行比较.并分析各组sICAM-1与FT3、FT4、TG、TM的相关关系.结果:①A、B、C组患者血清sICAM-1均明显高于正常对照组(P<0.05).A组患者sICAM-1水平高,与B组及C组患者相比有统计学差异(P<0.01);②前三组各组内sICAM-1与FT3、FT4成直线相关关系,与TG、TM成直线相关关系;③GO炎性活动期患者sICAM-1与GO评分成正相关.结论:血清sICAM-1水平可作为反映GO活动性评判的免疫指标,长期监测sICAM-1可预示GD进展为临床活动性眼病的可能性.
作者:陈福琴;戚朝霞;邵倩;郝明强 刊期: 2003年第06期
目的:探讨肺动脉高压对甲状腺功能亢进(甲亢)性心脏病的早期诊断价值.方法:应用彩色多普勒超声诊断技术评价了75例甲亢患者的肺动脉压,其中单纯甲亢患者34例,甲亢性心脏病(甲亢心)患者41例,92例为健康对照组.用放射免疫法测定了所有受试者治疗前后的甲状腺功能、血浆内皮素(ET1)、血管紧张素Ⅰ(A1)及血管紧张素Ⅱ(A2)的含量.结果:34例甲亢组患者检出肺动脉高压12例(32.4%),41例甲亢心患者检出肺动脉高压39例(94.5%)(P<0.05).单纯甲亢组中12例肺动脉高压患者有4例在2~6月之内发生了心房颤动.甲亢患者血浆中ET1、A1及A2水平显著高于对照组(P<0.01).结论:用彩色多普勒超声诊断技术检出的肺动脉高压,是甲亢心的早期诊断指标,其敏感度为81%,特异度为92.59%,阳性预测值为96.23%,阴性预测值为67.57%.是一个实用的无创早期诊断方法.肾素-血管紧张素-醛固酮系统被激活可能参与了肺动脉高压的形成过程.
作者:陈玉萍;司福中;甘志浩;盛春勇;任忠发 刊期: 2003年第06期
目的:比较霉酚酸酯(MMF)与环磷酰胺(CTX)静脉冲击疗法治疗Ⅳ型狼疮性肾炎(LN)的近期疗效及对肾脏病理改变的影响.方法:28例患者均经临床和肾活检确诊为Ⅳ型LN,随机分为2组,MMF治疗组用糖皮质激素联合MMF(1.0~1.5 g·d-1)治疗;CTX组用糖皮质激素联合CTX治疗.结果:治疗12个月时MMF组蛋白尿及血尿下降程度大于CTX组.尿蛋白下降和尿红细胞减少超过基础值50%者,MMF组分别为78.6%和92.9%,CTX组分别为42.9%和57.1%.MMF组降低ANA及ds-DNA抗体的作用优于CTX组.治疗4~7个月时重复肾活检显示,MMF治疗组肾组织学活动性指数(AI)下降程度大于CTX组,MMF治疗组AI由16.9±6.4降至3.5±1.6,CTX组AI由15.2±3.8降至6.4±1.2.MMF组感染并发症发生率低于CTX组.结论:激素联合MMF控制Ⅳ型LN的疗效优于CTX且副反应低.
作者:朱彬;周振安;刘子栋;王小平;任万军 刊期: 2003年第06期
1997年5月~2001年2月,我院采用水囊扩张建立腹膜后腔的方法,施行后腹腔镜泌尿外科手术治疗肾囊肿22例,手术全部成功,均未出现并发症,现报告如下.
作者:徐忠华;崔先泉;胡三元;张向宁;田军;张楠;刘照旭;周尊林;玄绪军;郑宝钟 刊期: 2003年第06期
目的:应用RT-PCR法检测Ⅲ期非小细胞肺癌患者骨髓的微转移.方法:用逆转录PCR(reverse transcriptase polvmerase chain reaction,RT-PCR)技术检测41例Ⅲ期非小细胞肺癌患者及10例肺良性病变患者肋骨骨髓中癌胚抗原(carcinoma embryonic antigen,CEA)的表达情况.结果:41例肺癌患者骨髓中CEA mRNA阳性率为46.3%(19/41),肺良性病变患者骨髓中未见表达,两者差异显著(P=0.005).CEA mRNA的表达与肺癌患者年龄、性别、肿瘤分化程度无明显关系.鳞癌中CEA mRNA表达阳性率为21.7%(5/23),腺癌为66.7%(8/12),鳞癌中的表达低于腺癌(P=0.013).结论:以CEA mRNA为分子标记,用RT-PCR法检测Ⅲ期非小细胞肺癌患者肋骨骨髓微转移具有较高敏感性和特异性,有助于发现亚临床转移灶,指导临床治疗.
作者:彭忠民;王善政;张林 刊期: 2003年第06期
目的:研究米非司酮对人卵巢上皮癌细胞株3AO体外增殖和性激素受体ER、PR表达的影响.方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢上皮癌细胞株3AO体外增殖活性,以流式细胞间接荧光技术检测肿瘤细胞ER、PR蛋白表达率.结果:米非司酮以剂量和时间依赖方式抑制3AO细胞体外增殖活性,3AO细胞在不同浓度米非司酮(5、10、20、40、80μmol/L)和不同时间(24、48、72、96、120h)培养下,生长抑制率从1.7%增加至85.2%(P<0.05),米非司酮和地塞米松联合应用与相同浓度的米非司酮单独应用比较,细胞增殖抑制率差异无统计学意义(P>0.05).米非司酮浓度为10μmol/L,培养48 h,3AO细胞PR表达率为(12.7±1.4)%,明显低于对照组(44.9±1.4)%,(P>0.01);3AO细胞ER表达率为(55.1±1.7)%,与米非司酮组ER表达率(52.3±0.8)%比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:米非司酮以剂量-时间依赖方式抑制人卵巢上皮癌3AO细胞体外增殖活性,其对3AO细胞的抑制作用与PR变化相关.
作者:李强;李继俊;季梅 刊期: 2003年第06期
目的:获得纯的重组SARSCoV M蛋白,并初步测定重组蛋白的抗原性.方法:软件分析SARSCoV M蛋白富含免疫表位的片断,体外合成编码SARSCoV M蛋白15-170aa序列的DNA片段,利用DNA重组技术,将该合成DNA克隆至表达载体pGEX-5X-1,构建重组质粒pGEX-SARSCoV M.在大肠杆菌BL21中诱导表达GST-SARSCoV M重组融合蛋白,分离纯化GST-SARSCoV M蛋白,利用纯化蛋白作为抗原,建立ELISA试验检测抗SARSCoV M抗体.结果:GST-SARSCoV M蛋白分子量为43kD,纯化的GST-SARSCoV M蛋白作为抗原检测血清中SARSCoV M抗体,53例正常成人献血者血清未检出SARSCoV M抗体.结论:SARSCoV M蛋白表达成功,在健康人血清中未检出SARSCoV M抗体.
作者:栾怡;于修平;赵蔚明;张静;周亚滨;齐眉 刊期: 2003年第06期
目的:优选葛根汤颗粒喷雾干燥的佳工艺条件.方法:应用正交设计法,以每小时药粉产率及有效成分含量为考察指标,对影响葛根汤喷雾干燥过程的因素进行考察.结果:正交试验法设计的三个因素中,浸膏的相对密度影响显著,入塔风温影响较显著.结论:颗粒佳工艺条件为:入塔风温:170℃,气流量:700L/h,浸膏相对密度:1.22,在此条件下,葛根汤颗粒有效成分中葛根素及芍药苷的含量明显高于原湿法制粒制剂.
作者:季梅;娄红祥;马斌;任冬梅 刊期: 2003年第06期
目的:探讨颅脑手术后发生颅内感染(intracranial infections,ICI)的危险因素及预防措施.方法:回顾性分析1994年1月至2002年12月我科4 877例颅脑手术患者临床资料.结果:术后发生颅内感染141例,感染率2.89%.术后有脑脊液漏、刀口皮下积液及术后急症再次手术者,术后颅内感染的发生率分别为35.34%、24.60%及15.78%,明显高于平均感染率(P<0.05);有颅脑手术史者术后ICI发生率为5.10%,幕下手术后为6.40%,手术时间4~8 h为4.40%,8 h以上为7.09%,术前使用糖皮质激素者为4.80%.结论:术后脑脊液漏、局部皮下积液及急症再次手术是术后ICI发生的危险因素.
作者:江玉泉;徐卫萍;吴承远;刘玉光;周茂德;王磊 刊期: 2003年第06期
目的:研究大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)体外扩增不同诱导剂向神经元样细胞诱导分化的潜能.方法:采用贴壁筛选法分离Wistar大鼠股骨rMSCs,体外扩增5~10代后,分别用2-巯基乙醇、硫代甘油等无血清的DMEM培养液诱导hMSCs分化为神经元.用流式细胞仪鉴定rMSCs特异抗原表达,免疫组化鉴定诱导后神经元样细胞的神经元烯醇化酶(NSH)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP).结果:大鼠MSCs体外扩增传至5代后,流式细胞仪显示rMSCs CD27、CD44、CD90呈阳性表达;将rMSC加入2-巯基乙醇和硫代甘油等诱导剂3 h后,rMSC胞体收缩,突起伸出;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF表达阳性,GFAP阴性.结论:大鼠骨髓间充质干细胞在体外一定条件下可以分化为神经元样细胞.
作者:刘雪平;姚红;朱艳丽;张捷;宋玉琴;赵跃然;焦玉莲 刊期: 2003年第06期
目的:探讨风湿性心脏瓣膜病并发房颤患者围手术期电击结合口服胺碘酮在复律中的应用价值.方法:围手术期口服胺碘酮,术中瓣膜置换后,根据心脏自动复跳情况采用电击复律.结果:关胸后、术后3 d、10d、3个月分别有93.3%、80.0%、73.3%、66.7%的患者维持窦性心律.结论:该方法复律安全、效果好,可提高房颤的转复率,减少术后复发率.
作者:王伟;徐巨林 刊期: 2003年第06期
目的:应用多普勒组织成像技术(DTI)评价肥厚型心肌病患者(HCM)左心室局部与整体舒缩功能.方法:采用DTI技术测量HCM患者室间隔和左心室侧壁中段以及二尖瓣瓣环-室间隔和二尖瓣瓣环-侧壁交界处的收缩期、舒张早期和舒张晚期DTI速度峰值(Sm1~4Em1~4、Am1~4),并与正常组进行比较.结果:HCM患者室间隔和侧壁中段以及二尖瓣瓣环-室间隔和二尖瓣瓣环-侧壁交界处收缩期Sm1~4与正常组相比无显著差异,但舒张早期Em1~4明显低于正常,舒张晚期Am1~4明显高于正常,Em1~4/Am1~4明显减低;在正常人中,Em1/Am1和Em2/Am2无显著性差异(P>0.05),但HCM患者Em1/Am1明显低于Em2/Am2(P<0.05),且该组患者室间隔厚度明显大于侧壁厚度[(2.36±0.50)cm vs(1.20±0.23)cm,P<0.05].结论:DTI技术测量的室壁运动速度可早期而准确反映HCM患者左心室舒缩功能的变化,为左心室舒缩功能的评价提供了一种新的方法.
作者:郭媛;史承耀;牟晓梅;赵静;岳欣;安丰双;钟明;卜培莉;张梅;张运 刊期: 2003年第06期
目的:探讨碳酸氢钠、氢氧化钠、活性炭和中药防风对小鼠河豚毒素经口中毒的拮抗作用.方法:用小鼠死亡时间和死亡率评价碳酸氢钠等化合物拮抗河豚毒素效果.结果:碳酸氢钠、氢氧化钠、活性炭和中药防风可使小鼠50%~100%存活(P<0.01).氢氧化钠拮抗效果比碳酸氢钠、活性炭和中药防风明显.中药与氢氧化钠、中药与碳酸氢钠、氢氧化钠与碳酸氢钠混合后,小鼠存活率均低于单独使用.结论:碳酸氢钠、氢氧化钠、活性炭和中药防风对小鼠河豚毒素经口中毒均有明显的拮抗作用.混合使用不如单独使用拮抗效果明显.
作者:谢克勤;于丽华;朱振平;张理 刊期: 2003年第06期
目的:探讨达必佳不同用量对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo trans-fer,IVF-ET)的影响.方法:将准备长方案促排卵行IVF-ET的214例患者随机分为2组,Ⅰ组每天肌肉注射达必佳0.1 mg,Ⅱ组每天肌肉注射达必佳0.05 mg,观察两组中促性腺激素用量情况、HCG日子宫内膜厚度、激素水平、获卵数、受精数和妊娠率.结果:Ⅰ组与Ⅱ组患者年龄、不孕年限、注射绒毛膜促性腺激素(HCG)日子宫内膜厚度、激素水平、受精率、妊娠率无统计学意义,但Ⅱ组促性腺激素用量少,获卵数多.结论:达必佳减量后仍然可以达到充分的垂体抑制,减少促性腺激素的用量,不影响IVF-ET的成功率.
作者:盛燕;陈子江;高芹;唐蓉;石玉华;孙梅 刊期: 2003年第06期
目的:构建含有单纯疱疹病毒Ⅰ型包膜糖蛋白D全基因片段的克隆载体及酵母表达载体,为进一步真核表达重组gD蛋白奠定基础.方法:应用PCR方法从HSV-Ⅰ基因组中扩增糖蛋白D的全长基因,产物回收后与pMD-18T载体连接,并转化,经氨苄筛选及测序,建立克隆载体pMD18T-gD;克隆载体与表达载体双酶切后,产物连接、转化大肠杆菌JM109,筛选、测序后确定构建了酵母表达载体pGAPZαA-gD.结果:重组质粒pMD18T-gD和pGAPZαA-gD经PCR和酶切均出现相应长度的片段,测序结果证实为gD基因,序列分析同源性为99.66%.结论:成功构建了含有单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D全基因的克隆载体及酵母表达质粒.
作者:王战勇;王志玉;温红玲;宋艳艳;王桂亭;许洪芝 刊期: 2003年第06期