朱艳利；朱兴雷；吕琳；郑霞；卓晶明
目的:构建牛乳头瘤病毒晚期基因L1-GFP融合基因真核表达质粒,自细胞水平探讨优化密码对晚期基因L1蛋白瞬时表达的影响.方法:用PCR方法扩增获得优化密码人源化BPVL1(hL1)基因.TA克隆后,酶切释放hL1基因,定向插入质粒pET30a/NM-GFP的BamHI、SacII位点,获得正确框架的hL1-GFP融合基因.再用BamHI、NotI酶切释放hL1-GFP融合基因,与pcDNA3载体定向重组构建真核表达质粒pcDNA3/hL1-GFP.同法克隆获得含野生型BPVL1-GFP融合基因的表达质粒pcDNA3/wL1-GFP.用质粒DNA分别在体外转染哺乳动物细胞COS-1细胞和Wish细胞,荧光显微镜下观察L1-GFP融合蛋白的瞬时表达情况.结果:酶切鉴定表明成功构建了含wL1-GFP、hLI-GFP的真核表达载体,与pcDNA3/wL1-GFP相比,pcDNA3/kL1-GFP在COS-1细胞、WISH细胞中获得有效表达.结论:优化密码能提高乳头瘤病毒L1基因在哺乳动物细胞内的蛋白表达.
作者：王红；赵蔚明；周亚滨；贾继辉；孙建芝；于修平 刊期： 2003年第06期
目的:观察全脑缺血后再灌流时不同脑区聚胺代谢动态变化,并探讨其临床意义.方法:采用高效液相色谱法检测脑缺血再灌流后海马、脑皮质及脑白质中腐胺(Puc)、精脒(Spd)和精胺(Spm)的水平.结果:脑缺血再灌流1 h Puc水平明显升高,1 d时达峰浓度,3 d仍维持较高水平.Spd水平随再灌流的时间延长逐渐降低.缺血再灌流1 h Spm水平轻微升高,2h达峰水平,3d后恢复正常.结论:全脑缺血再灌流后存在聚胺水平异常变化,其中Puc水平变化是反映缺血性脑损伤严重程度的理想生化指标.
作者：郑国玲；李义召；卢林；张秋玲；李明欣 刊期： 2003年第06期
目的:探讨颅脑手术后发生颅内感染(intracranial infections,ICI)的危险因素及预防措施.方法:回顾性分析1994年1月至2002年12月我科4 877例颅脑手术患者临床资料.结果:术后发生颅内感染141例,感染率2.89%.术后有脑脊液漏、刀口皮下积液及术后急症再次手术者,术后颅内感染的发生率分别为35.34%、24.60%及15.78%,明显高于平均感染率(P＜0.05);有颅脑手术史者术后ICI发生率为5.10%,幕下手术后为6.40%,手术时间4～8 h为4.40%,8 h以上为7.09%,术前使用糖皮质激素者为4.80%.结论:术后脑脊液漏、局部皮下积液及急症再次手术是术后ICI发生的危险因素.
作者：江玉泉；徐卫萍；吴承远；刘玉光；周茂德；王磊 刊期： 2003年第06期
目的:探讨达必佳不同用量对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo trans-fer,IVF-ET)的影响.方法:将准备长方案促排卵行IVF-ET的214例患者随机分为2组,Ⅰ组每天肌肉注射达必佳0.1 mg,Ⅱ组每天肌肉注射达必佳0.05 mg,观察两组中促性腺激素用量情况、HCG日子宫内膜厚度、激素水平、获卵数、受精数和妊娠率.结果:Ⅰ组与Ⅱ组患者年龄、不孕年限、注射绒毛膜促性腺激素(HCG)日子宫内膜厚度、激素水平、受精率、妊娠率无统计学意义,但Ⅱ组促性腺激素用量少,获卵数多.结论:达必佳减量后仍然可以达到充分的垂体抑制,减少促性腺激素的用量,不影响IVF-ET的成功率.
作者：盛燕；陈子江；高芹；唐蓉；石玉华；孙梅 刊期： 2003年第06期
目的:探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuc1ear antigen,PCNA)在上颌窦鳞癌中的表达及其与上颌窦鳞癌发生发展的关系.方法:应用免疫组化SABC法检测了35例上颌窦鳞癌和15例鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的PCNA表达.结果:PCNA染色阳性细胞为细胞核染色.PCNA指数上颌窦鳞癌为86.94±9.83,鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤为46.14±2.66,二者差异有统计学意义(P＜0.001).随上颌窦鳞癌的分化程度的降低,PCNA指数增加,不同分化间PCNA指数差异有统计学意义(均为P＜0.05).结论:PCNA的表达与上颌窦鳞癌的发生及分化程度相关.
作者：韩敏；张秋贵；陈瑛 刊期： 2003年第06期
目的:研究大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)体外扩增不同诱导剂向神经元样细胞诱导分化的潜能.方法:采用贴壁筛选法分离Wistar大鼠股骨rMSCs,体外扩增5～10代后,分别用2-巯基乙醇、硫代甘油等无血清的DMEM培养液诱导hMSCs分化为神经元.用流式细胞仪鉴定rMSCs特异抗原表达,免疫组化鉴定诱导后神经元样细胞的神经元烯醇化酶(NSH)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP).结果:大鼠MSCs体外扩增传至5代后,流式细胞仪显示rMSCs CD27、CD44、CD90呈阳性表达;将rMSC加入2-巯基乙醇和硫代甘油等诱导剂3 h后,rMSC胞体收缩,突起伸出;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF表达阳性,GFAP阴性.结论:大鼠骨髓间充质干细胞在体外一定条件下可以分化为神经元样细胞.
作者：刘雪平；姚红；朱艳丽；张捷；宋玉琴；赵跃然；焦玉莲 刊期： 2003年第06期
组织多肽特异性抗原(TPS)是一种酸性蛋白质,分子量为45 000,血清中TPS含量的高低是衡量肿瘤细胞分裂和增殖活性的一个较为特异的指标[1].为探讨TPS在胰腺癌诊断中的意义.我们用酶联免疫方法对52例胰腺癌患者血清中的TPS进行了术前测定,并与糖抗原19-9(CA19-9)进行对比,现报告如下.
作者：张波；张向红；曾庆东；李胜；李占元 刊期： 2003年第06期
目的:研究肾上腺皮质激素治疗病毒性心肌炎时血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)的变化.方法:对不同时期应用激素治疗的心肌炎小鼠采用化学发光法检测血清cTnI水平,并同正常对照组及病毒对照组比较,同时与心肌病理积分进行相关分析.结果:病毒性心肌炎小鼠血清cTnI显著升高,并与病理变化呈直线正相关(r=O.70).病毒性心肌炎早期和中期使用肾上腺皮质激素可明显降低cTnI水平,中期使用肾上腺皮质激素疗效尤为明显.结论:中期应用激素治疗CVB3心肌炎小鼠可明显阻止炎细胞浸润心脏组织,降低血清cTnI水平,保护心肌细胞,控制心肌炎病情发展,改善预后.
作者：王述昀；牟道玉；马沛然；汪翼；韩秀珍；王玉林 刊期： 2003年第06期
目的:探讨细胞色素P450 2A6(cytochromeP450 2A6,CYP2A6)在不同胎龄胎儿嗅粘膜内的发育表达.方法:应用免疫组化法观察CYP2A6在胚胎发育16、18、22、28和38周胎儿嗅粘膜内的表达情况.结果:CYP2A6的表达始于孕18周,在支持细胞核上区胞浆顶端阳性着色,彼此相连呈一条带状,上皮中、下层个别支持细胞核下区也呈现稍弱的免疫阳性反应.到孕22周时,固有层Bowman腺细胞浆内开始出现CYP2A6阳性着色,但此时Bowman腺体数量较少,腺细胞仅单层排列围成腺腔.随胎儿发育CYP2A6表达强度不断增大,孕28周时整个支持细胞的阳性着色更加清晰,固有层内Bowman腺数量明显增多,并且腺细胞呈多层排列,胞浆内CYP2A6阳性强度开始超出上皮层内的支持细胞.孕38周时免疫反应达峰值,其中支持细胞的染色勾画出其独特的极性结构:细胞核上区宽阔,胞浆内CYP2A6染色清晰,而核下区逐渐缩窄,以足状突的形式附着于基膜上.结论:人胎儿发育时期嗅粘膜内有CYP2A6酶表达,并且与嗅感受神经元发育基本同步,二者可能存在共同的调控因子.固有层Bowman腺细胞内CYP2A6的开始表达时间晚于上皮层支持细胞,但却是嗅粘膜内CYP2A6表达的主要部位以及嗅素代谢转化的主要场所.
作者：任翔；陈瑛；张克杰；史丽；丁元萍 刊期： 2003年第06期
目的:构建含有单纯疱疹病毒Ⅰ型包膜糖蛋白D全基因片段的克隆载体及酵母表达载体,为进一步真核表达重组gD蛋白奠定基础.方法:应用PCR方法从HSV-Ⅰ基因组中扩增糖蛋白D的全长基因,产物回收后与pMD-18T载体连接,并转化,经氨苄筛选及测序,建立克隆载体pMD18T-gD;克隆载体与表达载体双酶切后,产物连接、转化大肠杆菌JM109,筛选、测序后确定构建了酵母表达载体pGAPZαA-gD.结果:重组质粒pMD18T-gD和pGAPZαA-gD经PCR和酶切均出现相应长度的片段,测序结果证实为gD基因,序列分析同源性为99.66%.结论:成功构建了含有单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D全基因的克隆载体及酵母表达质粒.
作者：王战勇；王志玉；温红玲；宋艳艳；王桂亭；许洪芝 刊期： 2003年第06期
目的:探讨风湿性心脏瓣膜病并发房颤患者围手术期电击结合口服胺碘酮在复律中的应用价值.方法:围手术期口服胺碘酮,术中瓣膜置换后,根据心脏自动复跳情况采用电击复律.结果:关胸后、术后3 d、10d、3个月分别有93.3%、80.0%、73.3%、66.7%的患者维持窦性心律.结论:该方法复律安全、效果好,可提高房颤的转复率,减少术后复发率.
作者：王伟；徐巨林 刊期： 2003年第06期
目的:探讨碳酸氢钠、氢氧化钠、活性炭和中药防风对小鼠河豚毒素经口中毒的拮抗作用.方法:用小鼠死亡时间和死亡率评价碳酸氢钠等化合物拮抗河豚毒素效果.结果:碳酸氢钠、氢氧化钠、活性炭和中药防风可使小鼠50%～100%存活(P＜0.01).氢氧化钠拮抗效果比碳酸氢钠、活性炭和中药防风明显.中药与氢氧化钠、中药与碳酸氢钠、氢氧化钠与碳酸氢钠混合后,小鼠存活率均低于单独使用.结论:碳酸氢钠、氢氧化钠、活性炭和中药防风对小鼠河豚毒素经口中毒均有明显的拮抗作用.混合使用不如单独使用拮抗效果明显.
作者：谢克勤；于丽华；朱振平；张理 刊期： 2003年第06期
目的:探讨脾脏放射治疗小儿难治性原发血小板减少性紫癜(RITP)的临床应用价值.方法:采用直线加速器的高能X线对患者脾脏进行放射治疗,放疗前后观察外周血血小板的数量,临床症状及体征.统计学采用配对计量资料t检验.结果:放疗后血小板数量较放疗前显著增加(P＜0.001),临床症状及体征明显好转.放疗结束2月后临床评价,有效率86.7%.1年后复查,有效率66.7%.3年后随诊,有效率60%.未发现与放射治疗有关的并发症.结论:采用脾脏照射是治疗小儿难治性原发性血小板减少性紫癜安全有效的方法,且可避免脾脏切除.
作者：姜玉华；程玉峰；赵潍萍；李贞；菊秀丽；沈柏均 刊期： 2003年第06期
1990年1月～2002年2月,我们共收治13例胫骨近端单侧髁骨巨细胞瘤患者,疗效良好,报告如下.
作者：刘巧慧；刘培来；郭公英；李德强 刊期： 2003年第06期
目的:比较霉酚酸酯(MMF)与环磷酰胺(CTX)静脉冲击疗法治疗Ⅳ型狼疮性肾炎(LN)的近期疗效及对肾脏病理改变的影响.方法:28例患者均经临床和肾活检确诊为Ⅳ型LN,随机分为2组,MMF治疗组用糖皮质激素联合MMF(1.0～1.5 g·d-1)治疗;CTX组用糖皮质激素联合CTX治疗.结果:治疗12个月时MMF组蛋白尿及血尿下降程度大于CTX组.尿蛋白下降和尿红细胞减少超过基础值50%者,MMF组分别为78.6%和92.9%,CTX组分别为42.9%和57.1%.MMF组降低ANA及ds-DNA抗体的作用优于CTX组.治疗4～7个月时重复肾活检显示,MMF治疗组肾组织学活动性指数(AI)下降程度大于CTX组,MMF治疗组AI由16.9±6.4降至3.5±1.6,CTX组AI由15.2±3.8降至6.4±1.2.MMF组感染并发症发生率低于CTX组.结论:激素联合MMF控制Ⅳ型LN的疗效优于CTX且副反应低.
作者：朱彬；周振安；刘子栋；王小平；任万军 刊期： 2003年第06期
1997年5月～2001年2月,我院采用水囊扩张建立腹膜后腔的方法,施行后腹腔镜泌尿外科手术治疗肾囊肿22例,手术全部成功,均未出现并发症,现报告如下.
作者：徐忠华；崔先泉；胡三元；张向宁；田军；张楠；刘照旭；周尊林；玄绪军；郑宝钟 刊期： 2003年第06期
目的:获得纯的重组SARSCoV M蛋白,并初步测定重组蛋白的抗原性.方法:软件分析SARSCoV M蛋白富含免疫表位的片断,体外合成编码SARSCoV M蛋白15-170aa序列的DNA片段,利用DNA重组技术,将该合成DNA克隆至表达载体pGEX-5X-1,构建重组质粒pGEX-SARSCoV M.在大肠杆菌BL21中诱导表达GST-SARSCoV M重组融合蛋白,分离纯化GST-SARSCoV M蛋白,利用纯化蛋白作为抗原,建立ELISA试验检测抗SARSCoV M抗体.结果:GST-SARSCoV M蛋白分子量为43kD,纯化的GST-SARSCoV M蛋白作为抗原检测血清中SARSCoV M抗体,53例正常成人献血者血清未检出SARSCoV M抗体.结论:SARSCoV M蛋白表达成功,在健康人血清中未检出SARSCoV M抗体.
作者：栾怡；于修平；赵蔚明；张静；周亚滨；齐眉 刊期： 2003年第06期
目的:构建表达小鼠轮状病毒(EDIM)EW株VP7基因的重组腺病毒,以在小鼠模型上研究轮状病毒的免疫保护机制.方法:用RT-PCR方法扩增EDIM VP7全长cDNA并进行基因序列分析,将所得的VP7基因片段插入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,获得重组质粒pShuttleCMV-EVP7,将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183获得重组腺病毒质粒pAdCMV-EVP7,将该质粒线性化后转染293细胞包装重组腺病毒rvAdEVP7.以rvAdEVP7胛感染293细胞,并分别应用电子显微镜、PCR、RT-PCR和Western blot等方法观察rvAdEVP7的形态、VP7基因整合、遗传稳定性、VP7基因在细胞内转录及表达等有关生物学特性.结果:获得了小鼠轮状病毒的全长cDNA,重组腺病毒rvAdEVP7具有典型的腺病毒形态,PCR、RT-PCR和Western blot等分子生物学方法分析显示:rvAdEVP7中确有特异性的VP7基因稳定整合;有较好的遗传稳定性;感染293细胞后能有效转录;可表达轮状病毒主要结构蛋白VP7.结论:成功构建含VP7基因的重组腺病毒rvAdEVP7,为进一步研究轮状病毒的免疫保护机制打下了基础.
作者：李勇；王健伟；屈建国；于修平；王大燕；姜秀丽；洪涛 刊期： 2003年第06期
目的:探讨肝硬化患者血浆转化因子β1(TGF-β1)的变化及其意义.方法:经病史、临床生化、B超检查确诊的72例乙肝后肝硬化患者,依据child-pugh分级分为3级,其中A级23例,B级29例,C级20例.健康志愿献血者6例做为正常对照组.ELISA法测定血浆TGF-β1的变化.并同时检测血透明质酸酶(HA)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、血浆白蛋白、凝血酶原时间及其活动度、胆红素改变.结果:随着肝硬化的进展,血浆TGF-β1、血HA、CⅣ、PCⅢ逐渐增加.child B、child C级患者血浆TGF-β1与血HA、PCⅢ均明显增加.血浆TGF-β1与血HA呈正相关(child B组r=0.51,P＜0.01;child C组r=0.67,P＜0.01),与血PCⅢ呈正相关(child B组r=0.63,P＜0.05;child C组r=0.74,P＜0.01).结论:血浆TGF-β1可反映肝纤维化程度,联合HA、PCⅢ检测可用作肝硬化诊断、追踪观察的有意义指标.
作者：武希润；王琦；师水生；郭文栋；吕敏和 刊期： 2003年第06期
目的:优选葛根汤颗粒喷雾干燥的佳工艺条件.方法:应用正交设计法,以每小时药粉产率及有效成分含量为考察指标,对影响葛根汤喷雾干燥过程的因素进行考察.结果:正交试验法设计的三个因素中,浸膏的相对密度影响显著,入塔风温影响较显著.结论:颗粒佳工艺条件为:入塔风温:170℃,气流量:700L/h,浸膏相对密度:1.22,在此条件下,葛根汤颗粒有效成分中葛根素及芍药苷的含量明显高于原湿法制粒制剂.
作者：季梅；娄红祥；马斌；任冬梅 刊期： 2003年第06期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
