郭伟剑
背景与目的：原癌基因Bmi-1是多梳基因家族中的一员，能调节正常干细胞和肿瘤干细胞的自我更新能力。近年来发现其在多种恶性肿瘤中表达上调。本文旨在观察Bmi-1基因沉默对肺腺癌A549细胞体内外增殖的影响，并初步探讨其机制。方法：根据本实验室设计的4条针对Bmi-1的小干扰RNA(siRNA)序列，选择一条已经证实有效的序列作为靶序列和一条随机序列作为阴性对照，构建重组逆转录病毒siRNA表达载体并将其转染入A549细胞中；应用RT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测对Bmi-1基因的沉默效果；应用MTT比色法、台盼蓝拒染法及平板克隆形成实验检测Bmi-1-siRNA对A549细胞体外增殖的影响；利用流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期；通过裸鼠腋窝皮下接种各组细胞，观察Bmi-1-siRNA对A549细胞在裸鼠体内的致瘤能力的影响；Western blot检测PTEN、p-AKT、cyclin D1、P21、P27蛋白表达。结果：Bmi-1-siRNA有效地沉默了Bmi-1基因mRNA和蛋白的表达；沉默Bmi-1基因的表达能够抑制A549细胞的体内外增殖能力，使干扰组细胞的细胞周期阻滞于G1期；沉默Bmi-1基因的表达后，干扰组细胞中PTEN、P21、P27蛋白增加，p-AKT、cyclin D1蛋白表达降低。结论：Bmi-1-siRNA通过使细胞周期阻滞于G1期来抑制肺腺癌A549的体内外增殖能力，这种抑制作用涉及cyclin D1和p-AKT表达下降以及P21/P27和PTEN的表达上调。
作者：郑翔宇；朱杰；王艺芳；刘纯青；刘奔；杨春辉；刘丹丹；孟秀香 刊期： 2013年第07期
背景与目的：大肠癌是一种高发病率的恶性肿瘤，化疗可以减少肿瘤的生长和复发。当前较为重要的是探究标志物能够预测化疗耐药标志物，从而帮助确定治疗方案。方法：选取2007年11月-2010年5月复旦大学附属肿瘤医院大肠外科Ⅳ期大肠癌患者手术标本，术后患者都使用大肠癌术后规范化一线化疗(希罗达+奥沙利铂)。选取化疗耐药与有效癌组织标本各3例共6例使用microRNA芯片检测。筛选出有统计学意义的miRNA：miR-4299、miR-196b、miR-324-5p、miR-455-3p和miR-939，将候选miRNA在100例Ⅳ期大肠癌患者手术癌组织标本中进行real-time PCR验证。结果：通过芯片筛选，共5个miRNA可能与大肠癌一线化疗耐药有关。miR-4299和miR-196b对化疗耐药有显著诊断意义。miR-4299的AUC为0.784，而miR-196b的AUC为0.647。两个联合诊断AUC为0.848，敏感度和特异度分别为67.9%和90.9%。结论：miR-4299和miR-196b有可能作为诊断对大肠癌一线化疗耐药的标志物。
作者：胡劲松；蔡三军 刊期： 2013年第07期
背景与目的：食管内镜治疗近年来发展迅速，本研究旨在探讨新型多环黏膜切除器DT-6在食管内镜下切除术(endoscopic resection，ER)的应用价值。方法：2011年6月至今，复旦大学附属肿瘤医院胸外科使用DT-6多环黏膜切除器完成了100例食管内镜下切除术。选取已有6个月以上随访期的患者为研究对象，对手术参数、围手术和术后随访情况作总结和分析，并比较食管切除术和内镜治疗在治疗食管癌前病变或早期癌的围手术参数。结果：2011年6月-2012年1月，共有32例患者在复旦大学附属肿瘤医院胸外科接受食管内镜下切除术，术中均使用新型DT-6。32例患者中，男性22例，女性10例，平均年龄59.0岁(25~83岁)。共进行了34次内镜下切除术，包括31例内镜下黏膜切除(endoscopic mucosal resection，EMR)和3例内镜黏膜下病变剥离术(endoscopic submucosal dissection，ESD)，平均每次手术切取标本数为(3.4±1.0)块，标本平均直径为(11.8±2.7)mm，术中出血量为(5.45±1.47)mL。术后中位随访时间8.3个月，无一例出现出血、穿孔或食管狭窄。食管癌前病变和早期癌行食管内镜下切除术相比食管切除术在手术用时、出血量、住院时间和并发症方面差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论：新型多环黏膜切除器行食管内镜下切除术具有简便、安全、有效的优势，值得进一步推广。内镜手术与食管切除术对早期食管癌(T1a之前)和高级别上皮内瘤变的远期治疗效果是否等同，还需要经过长期的临床随访。
作者：张裔良；张杰；陈海泉；相加庆；张亚伟；陈苏峰；李鹤成；孙艺华；胡鸿；繆珑升；马龙飞；James Luketich；James Luketich 刊期： 2013年第07期
背景与目的：由己建立的小鼠基因打靶模型证实，K-ras突变启动了胰腺癌前病变-胰腺上皮内瘤变(pancreatic intraepithelial neoplasia，PanIN)，p53、p16失活均可单独促进小鼠PanIN发展为浸润性胰腺癌。作为人胰腺癌中另一失活频率高发的抑癌基因Smad4，本课题组前期研究提示，应用RNA干扰技术沉默PanIN细胞株中内源性Smad4表达，促使PanIN细胞恶性转化。基于此目的，本研究进一步探讨siRNA干扰Smad 4基因对PanIN细胞体内外增殖及转移能力的影响，从而有助于阐明PanIN恶性转化的新机制。方法：构建和筛选能特异性静默PanIN细胞中Smad4表达的佳siRNA稳定表达质粒,稳定转染佳siRNA表达质粒进入PanIN细胞，用Zeocin筛选稳定转染克隆，挑选阳性克隆、扩增，稳定转染后细胞命名为PanIN-S。本研究运用细胞计数、克隆形成实验等分别比较两组在活细胞率和体外增殖能力的影响，同时为进一步验证Smad 4基因静默对PanIN细胞体外迁移、侵袭能力的影响，本研究采用Transwell和Mitigel assay检测其干扰前后体外运动、侵袭能力。动物实验中，建立PanIN及PanIN-S细胞组裸鼠移植瘤模型，并应用免疫组化方法检测并比较两组PCNA、VEGF和MMP-9的表达及其差异。结果：成功构建了Smad4基因siRNA体系；体外实验中与PanIN组相比， PanIN-S组细胞增殖、侵袭能力明显增强，差异有统计学意义(P<0.05)；动物模型免疫组化结果显示，与PanIN组相比，PanIN-S组PCNA、VEGF和MMP-9表达显著增高(P<0.05)。结论：K-ras突变基础上小鼠PanIN细胞Smad4基因静默促使PanIN细胞的恶性转化；PanIN基础上Smad4静默促使小鼠PanIN细胞体内外增殖及转移能力的增强，其增殖及转移可能与PCNA、VEGF和MMP-9高表达有关。
作者：齐晓光；胡毅；汪进良；谈文龙；王琪；王立夫；Tuveson DA 刊期： 2013年第07期
背景与目的：当今对于喉癌的治疗，在根治性手术的基础上，如何提高患者术后的生存质量得到越来越广泛的重视。本研究对累及前联合或双侧声带的声门型喉癌进行改良喉垂直前位部分切除或改良环状软骨会厌舌骨吻合术(cricohyoidoepiglottopexy，CHEP)，并对两种手术方式的疗效进行对比评估。方法：将中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院头颈二科2005-2007年累及前联合或双侧声带的声门型喉癌60例患者随机交替归入A、B两组，A组30例患者采用改良喉垂直前位部分切除+双侧胸骨舌骨肌瓣修复手术，B组30例患者采用改良CHEP手术。5年内定期随访并进行回顾性分析。结果：5年生存率A组为86.7%，B组为83.3%，差异无统计学意义(P=0.718)。发音功能：可胜任嘈杂环境交流，并能发出“a”、“i”等元音的A组22例(22/30)，B组21例(21/30)；仅能发出“ha”、“hi”等音，不能胜任嘈杂环境交流的A组8例(8/30)，B组9例(9/30)，两组差异无统计学意义(P=0.774)。4周复查误咽发生率：A组为0(0/30)，B组为16.7%(5/30)，两组差异有统计学意义(P=0.026)；术后拔管平均时间A组为(10.0±2.3)d，B组为(20.0±4.6)d，两组差异有统计学意义(P=0.0000)；拔管后再次出现呼吸困难A组为16.7%(5/30)，B组为0(0/30)，两组差异有统计学意义(P=0.026)。结论：对累及前联合或双侧声带的声门型喉癌，改良喉垂直前位部分切除+双侧胸骨舌骨肌瓣修复术和改良CHEP手术在5年生存率、术后发音效果无统计学差异。前者术后误咽小，拔管时间早，一定程度上减轻了患者的痛苦，但部分患者拔管后因放疗后组织粘连等因素导致呼吸困难需再次住院手术；后者术后误咽相对重，恢复时间长，拔管平均时间相对长，但拔管后不会再次出现呼吸困难，并且手术的适应证更加广泛。两种术式各有优势。
作者：田皞；喻建军；李赞；周晓；戴杰 刊期： 2013年第07期
背景与目的：研究发现，许多微小RNA(microRNAs，miRNAs)与恶性肿瘤密切相关，其中miR-31(microRNA-31)在许多肿瘤中呈异常改变。中国是食管鳞状上皮细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)高发的地区之一。本研究旨在调查miR-31在ESCC中的表达水平与临床病理学因素以及预后的关系。方法：采用实时反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)技术检测食管癌细胞株KYSE410、EC1和EC9706，以及81例ESCC组织和癌旁正常组织中miR-31的表达水平。结果与临床资料和随访结果结合作统计分析。结果：在3株ESCC细胞株以及75.31%的ESCC组织中，miR-31表达上调。并且miR-31的高表达与更严重的淋巴结转移(P=0.043)、更深的浸润深度(P=0.002)以及更晚期的病理分期有关(P=0.027)，而与其他临床病理学因素无关(P>0.05)。此外，miR-31的高表达与较差的无进展生存期(progression-free survival，PFS)有关(Kaplan-Meier分析P=0.014，多变量Cox分析P=0.021)。结论：miR-31可能是ESCC一项新的诊断和预后评价指标。
作者：罗君；凌志强；彭兵锋；袁嘉敏；郑智国；毛伟敏 刊期： 2013年第07期
去泛素化酶具有逆转泛素化的作用，其大多数研究还保留在分子生物学领域，在转化医学研究中尚未引起充分的重视。目前研究发现，去泛素化酶的目的蛋白通过各种途径影响肿瘤的发生、发展，如细胞凋亡和自噬、炎性反应和肿瘤的关系、肿瘤缺氧、肿瘤信号通路、细胞周期的调节和DNA损伤等。现就去泛素化酶与肿瘤发生、发展的关系及研究进展作一综述。
作者：戴陈新(综述)；袁健；郑亚新(审校) 刊期： 2013年第07期
背景与目的：原发性宫颈及阴道恶性黑色素瘤是一类罕见的、恶性程度高、预后极差的肿瘤。本研究旨在探讨原发性宫颈及阴道恶性黑色素瘤患者的临床特点、治疗方式及预后。方法：对复旦大学附属肿瘤医院1998年12月-2011年7月收治的51例宫颈及阴道恶性黑色素瘤患者的临床资料进行回顾性分析。结果：2、4年无进展生存率分别为32.8%、13.1%，2、4年总生存率分别为67.2%、39.8%，3例带瘤生存超过5年。随访期内，29例(56.9%)患者发生复发转移，主要部位为阴道残端/盆腔(10例，34.5%)、肝(4例，13.9%)、肺(3例，10.3%)、骨(3例，10.3%)和外阴(3例，10.3%)等。单因素分析显示，肿瘤大小和脉管癌栓是影响患者总体生存的重要因素(P＜0.05)，盆腔淋巴结转移是影响无进展生存的重要因素(P＝0.05)。术后联合放化疗和免疫治疗组中位疾病进展时间为17个月，而单纯化疗组为9个月，单纯免疫治疗组为11个月。结论：原发性宫颈及阴道恶性黑色素瘤预后差。手术、放化疗和免疫综合治疗具有控制疾病进展、延长患者生存的作用。
作者：杨莉；吴小华；张志毅；李子庭；王华英；臧荣余；程玺 刊期： 2013年第07期
背景与目的：上皮钙黏蛋白(E-cadherin，E-cad)作为一种关键的结构蛋白对正常的细胞极性、上皮形态和细胞分化非常重要。近有研究表明E-cad基因启动子区域-160 C/A基因多态性与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)的易感性有关。本研究旨在评价中国汉族人群中NPC危险性和E-cad基因启动子-160 C/A位点多态性的关系。方法：选取303例明确诊断为NPC的患者为实验组，同时选取318位健康志愿者为对照组。采用TaqMan探针技术检测启动子区域-160 C/A位点的单核苷酸多态性。结果：按性别和年龄调整后，实验组E-cad基因启动子-160 C/A位点A/A基因型危险性显著高于对照组(调整后OR=2.09，95%CI：1.03~4.22，P=0.04)。按性别分层后，女性NPC患者中A/A基因型危险性显著高于对照组(OR=7.57，95%CI：1.57~36.47，P=0.012)。此外，与NPC患者中男性A/A基因型比对，女性A/A基因型具有更高的患病风险(OR=2.66，95%CI：1.14~6.20，P=0.024)。结论：E-cad基因启动子-160 C/A位点的A/A基因型是中国汉族人群患NPC的危险因素之一，尤其对于女性患者尤为显著。
作者：金娜；胡凯；朱庆尧；袁超；王涛 刊期： 2013年第07期
孤立性纤维性肿瘤(solitary fibrous tumor，SFT)是一种较为少见的梭形细胞肿瘤，可发生在全身各部位［1］。我科在临床工作中诊治1例盆腔巨大SFT，现报道如下。1临床资料患者，男性，33岁，因“下腹部隐痛伴排便困难”于2010年8月19日入院。查体：距肛缘4～5 cm直肠后壁与骶骨间可扪及巨大肿块，质硬，表面光滑，呈分叶状，欠活动。辅助检查：腹部超声见膀胱后方前列腺区域内12 cm×9.5 cm×8.4 cm不均质回声区。盆腔CT示盆部尾椎前方类椭圆形强化影，其内见低密度坏死区及结节状钙化灶，与周围分界较清，盆腔淋巴结未见增大。初步诊断：盆腔肿瘤。为明确病理诊断，在B超引导下行肿块穿刺活检。病理诊断结果为SFT。随后在全麻下行剖腹探查术。术中见肿瘤位于骶前，将直肠及膀胱向前推移，肿瘤前壁部分与直肠粘连明显。切除肿瘤及粘连的直肠段，行乙状结肠造瘘。术后标本巨检：肿块13 cm×11 cm×9 cm，外有包膜，切面褐色，质地较硬。镜下：肿瘤细胞大小较一致，呈短梭形，核染色质分布均匀，瘤细胞有异型性。肿瘤细胞混杂于嗜酸性胶原中，分布有明显细胞密集区与细胞疏松区。肿瘤中血管丰富，可见“血管外皮瘤样区”。免疫组化：CD117(-)，CD34(+)，Bcl-2(+)，Ki-67(+)<3%。病理诊断：盆腔SFT。患者术后定期随访，复查胸片、腹部B超、盆腔MRI，现术后2年未见复发及转移征象(图1)。
作者：吴毅；肖英明；廖洪 刊期： 2013年第07期
背景与目的：卵巢甲状腺肿是一种少见肿瘤，尤其伴有卵巢外播散的更为少见。本研究旨在探讨卵巢甲状腺肿的临床及病理组织学特征、诊断及鉴别诊断。方法：观察14例良、恶性卵巢甲状腺肿的临床及病理学特征，行免疫组化EnVision法染色，PCR-DNA检测，同时复习相关文献。结果：14例良、恶性卵巢甲状腺肿患者平均年龄45.6岁(18~71岁)，以盆腔肿物为主要临床表现。其中12例为卵巢甲状腺肿，镜下主要由增生的甲状腺组织构成；1例为恶性卵巢甲状腺肿，镜下呈甲状腺乳头状癌表现；1例来源于卵巢甲状腺肿的高分化滤泡癌(highly differentiated follicular carcinoma of ovarian origin，HDFCO)，镜下组织学呈良性但生物学呈恶性表现。结论：卵巢甲状腺肿是少见的单胚层畸胎瘤，恶变率低，尤其是超出卵巢病变已有播散而镜下组织学呈良性的卵巢甲状腺肿发病率更低，具有较独特的临床病理学特征。良、恶性卵巢甲状腺肿预后均较好，需与颗粒细胞瘤、类癌鉴别。
作者：卿松；李晓红；苗娜；刘霞；马遇庆；张巍 刊期： 2013年第07期
基底细胞腺癌是一种少见的唾液腺肿瘤，好发于大唾液腺，发生于小唾液腺者罕见，发生于鼻咽者目前尚未见报道。现报道1例发生在鼻咽的基底细胞腺癌，观察、描述病理学形态，分析免疫组化结果，并复习文献，总结小唾液腺基底细胞腺癌的临床病理特征。
作者：陈彤箴；金佳；何霞云 刊期： 2013年第07期
背景与目的：结直肠锯齿状腺瘤(serrated adenoma，SA)是2000年被WHO正式命名为独立的一种疾病，与传统腺瘤(traditional adenoma，TA)和结直肠癌(colorectal carcinoma，CRC)比较有其独特的性质。本研究通过对锯齿状腺瘤、传统腺瘤和结直肠癌组织中端粒酶、p53及Ki-67的免疫组化表达比较，探讨锯齿状腺瘤与普通腺瘤的恶性潜能异同及与大肠腺癌的关系。方法：运用免疫组化MaxVision法对37例锯齿状腺瘤、36例传统腺瘤，34例结直肠癌组织标本进行端粒酶、p53及Ki-67检测。结果：端粒酶在锯齿状腺瘤、传统腺瘤和结直肠癌组间差异有统计学意义(P<0.05)，结直肠癌组阳性率高于锯齿状腺瘤组(P<0.05)，锯齿状腺瘤组高于传统腺瘤组(P<0.01)；Ki-67在锯齿状腺瘤与传统腺瘤两组差异无统计学意义(P>0.05)，结直肠癌组的阳性率则明显高于锯齿状腺瘤和传统腺瘤组(P<0.01)；结直肠癌组p53阳性率高于传统腺瘤组(P<0.01)，传统腺瘤组高于锯齿状腺瘤组(P<0.01)。结论：端粒酶、p53及Ki-67检测显示：锯齿状腺瘤是一种具有较强活性的腺瘤，端粒酶的激活可能在其癌变过程中起一定作用。
作者：吴又明；丁彦青；李纳；王金生；郭周庆；冷雷；黄东 刊期： 2013年第07期
背景与目的：研究发现锌指蛋白139(ZNF139)在胃癌中表达异常，但ZNF139与胃癌的多药耐药性(multidrugresistance，MDR)关系尚不明确。本研究检测了人胃癌细胞株SGC7901和耐药细胞株SGC7901/ADR中ZNF139和MRP-1、MDR1/P-gp、GST-π的mRNA和蛋白表达情况，并对其表达关系和意义进行分析。方法：体外培养SGC7901、SGC7901/ADR，逆转录-聚合酶连反应(reverse transcription-polymerase chain reaction， RT-PCR)检测两种细胞ZNF139和MRP-1、MDR1/P-gp、GST-πmRNA表达情况，采用蛋白质印迹法(Western blot)法检测各基因蛋白表达变化情况。合成针对ZNF139的小干扰RNA(siRNA-ZNF139)重组质粒并转染SGC7901/ADR，检测转染前后SGC7901/ADR中MRP-1、MDR1/P-gp、GST-π表达的变化。结果：SGC7901和SGC7901/ADR两种细胞中均有ZNF139、MRP-1、MDR1/P-gp、GST-πmRNA和蛋白阳性表达，SGC7901/ADR细胞中ZNF139、MRP-1、MDR1/P-gp、GST-πmRNA和蛋白表达均明显高于SGC7901细胞(P<0.05)。转染siRNA-ZNF139后SGC7901/ADR细胞中ZNF139表达明显受到抑制，MRP-1、MDR1/P-gp、GST-π表达也明显降低(P<0.05)。结论：ZNF139通过上调MRP-1、MDR1/P-gp、GST-π基因表达而参与胃癌多药耐药形成。
作者：李勇；赵群；檀碧波；范立侨；刘庆伟；焦志凯；赵雪峰；郝英杰 刊期： 2013年第07期
近10年来，转移性大肠癌的内科治疗效果取得了较大进步。尽管有效的化疗药物并不多，但作为主要治疗手段已将转移性大肠癌患者的中位生存期延长，分子靶向药物也是在应用化疗的基础上进一步延长生存期。目前治疗转移性大肠癌的国际标准化疗药物包括3种：5-FU或口服药xeloda、奥沙利铂(oxaliplatin，L-OHP)、伊立替康(irinotecan，CPT-11)。此外，雷替曲塞、替吉奥也在转移性肠癌的治疗中取得了一定疗效，提供了新的选择。由于患者的病情不同，如何选择与优化药物组合与治疗方案以提高疗效、减轻药物引起的不良反应是学者们应该思考的问题。现回顾相关的临床试验结果，并依此对如何优化选择治疗药物与方案进行分析与探讨。
作者：郭伟剑 刊期： 2013年第07期
中国癌症杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学附属肿瘤医院
