蔡晓坤；周俊立；林菊生；孙雪梅；薛秀兰；李超
目的:探讨新型嘌呤核苷磷酸化酶/6-甲基嘌呤-2'-脱氧核糖核苷(PNP/MeP-dR)自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用.方法:构建PNP基因真核表达载体pcDNA3.0/PNP,脂质体介导法将其导入HepG2细胞,利用G418筛选获得稳定转染PNP基因的细胞株HepG2/PNP.采用台盼蓝拒染法测绘细胞生长曲线,MTT法和FCM检测细胞对MeP-dR的敏感性及旁观者效应,HPLC检测PNP酶活性.结果:HepG2/PNP细胞对MeP-dR十分敏感,作用4 d后MeP-dR对HepG2/PNP的IC50为4.5 μmol/L,而100 μmol/L的MeP-dR即可大限度地杀死HepG2/PNP细胞.100 μmol/LMeP-dR作用8 d后,混合细胞中HepG2/PNP比倒仅占5%即可导致所有细胞死亡.HPLC结果显示,PNP基因产物能够将MeP-dR转化为6-MP.结论:PNP/MeP dR系统对肝癌细胞的杀瘤效果明显优于传统的自杀基因系统.本研究为该系统应用于肝癌体内治疗打下基础.
作者：蔡晓坤；周俊立；林菊生；孙雪梅；薛秀兰；李超 刊期： 2006年第02期
由于医学研究所涉及到的数据往往较多,观察案例几十或上百例,而且观察指标也往往不止一个,因此大多数情况下都很难直接罗列原始数据,此时统计方法就成为非常重要的研究工具.在终发表的论文中,对所用统计方法的表述,包括统计图表、统计指标、统计检验结果等的表达或陈述往往占据较大的篇幅.
作者：张文彤；项永兵 刊期： 2006年第02期
临床实践中,尤其血液科、肿瘤科经常遇到血小板减少的病人,有为原发性,有为继发性;有因骨髓生成障碍所致,有因消耗增加所致.部分患者给予输注血小板就可以恢复正常,而有些则采用多种手段仍不能奏效.血小板降低显著(尤其计数小于20×109/L)者会有颅内出血危险[1],因此找到行之有效的升血小板方法非常必要.在当今血小板生成素还未能得到广泛应用的情况下,本研究开展了应用斯普林注射液提升血小板计数的临床观察.
作者：胡俊；陈立；许先吟 刊期： 2006年第02期
目的:探讨MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TIMP-1在宫颈鳞癌组织的表达状态及其与宫颈鳞癌侵袭转移的关系,并初步了解p65表达与MMP-2、MMP-9表达状态之间的关系.方法:采用免疫组化SP法检测了10例正常宫颈组织、13例CINⅡ,11例CINⅢ,30例浸润性宫颈鳞癌组织MMP-2、MMP 9、TIMP-2、TIMP-1和p65的表达状态.结果:浸润癌MMP-9、TIMP-2、TIMP-1阳性表达率明显高于其他几组,p65表达状态与MMP-9基本一致.与MMP-9、MMP-2阴性浸润癌病例相比,MMP-9、MMP-2阳性患者的TIMP-1、TIMP-2阳性表达强度并无明显差异.结论:MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达增加在宫颈鳞癌侵袭过程中起着重要作用,宫颈鳞癌MMP-9高表达可能与p65蛋白高表达有关.
作者：石新兰；黎家华；胡余昌；王飞；姚佳红 刊期： 2006年第02期
多数恶性肿瘤早期缺乏症状,就诊时已属于中晚期,失去了手术与根治性放射治疗的机会,只能采用化疗.尽管近年来新的细胞毒性药物及新的联合方案大大地改善了化疗效果与患者耐受性,可是患者个体对治疗的反应与毒性仍然存在较大差异,这种差异不能用患者年龄、伴随疾病、合并用药、肝肾功能状态等因素加以解释.遗传因素是决定药物疗效与毒性的主要因素,识别这些因素是药物遗传学的主要目标.
作者：周彩存 刊期： 2006年第02期
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ,PPARγ)在结肠癌细胞株HT-29中的表达及其活化后对结肠癌细胞生长的影响.方法:通过RT-PCR和Western blot检测HT-29中PPARγ mRNA及蛋白质的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法检测PPARγ配体罗格列酮(rosiglitazone,Rosi)和15d-PGJ 2对HT-29细胞生长的影响,荧光显微镜、TUNEL法观察Rosi和15d-PGJ2激活PPARγ后诱导HT-29细胞凋亡形态和生化改变,流式细胞仪(FCM)以碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期.结果:RT-PCR及Western blot检测结果表明结肠癌细胞HT-29中存在PPARγ mRNA及蛋白质的表达.MTT结果显示Rosi和15d-PGJ2可抑制HT-29细胞生长,且具有时间、剂量依赖效应.荧光显微镜、TUNEL检测显示PPARγ活化后HT-29细胞出现典型的凋亡现象,10μmol/L Rosi或15d-PGJ2作用48 h后的细胞凋亡率分别为(17.3±1.9)%及(20.8±2.9)%,与对照组(3.86±0.49)%相比差异均具有统计学意义(P＜0.05).FCM结果显示Rosi和15d-PGJ2激活PPARγ后诱导细胞周期阻滞于Go/G1期,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:结肠癌细胞HT 29表达PPARγ,其活化可通过诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞,抑制结肠癌细胞增长.因此,PPARγ可能为结肠癌治疗的一个新靶点.
作者：林茂松；陈卫昌；白霞 刊期： 2006年第02期
目的:构建小鼠secretedfrizzled-related protein-2(SFRP-2)全基因的重组腺病毒表达系统.方法:采用基因工程技术,将SFRP-2基因片段克隆入穿梭质粒pAdTrack-CMV,然后在细菌内与pAdEasy-1进行同源重组,经脂质体转染293细胞包装并扩增腺病毒颗粒.体外原代培养小鼠子宫内膜基质细胞,转染制备的腺病毒颗粒,并用Western blot法检测SFRP-2蛋白的表达.结果:构建的小鼠SFRP-2重组腺病毒载体的效价达到5.6×1012 pfu/mL,转染原代培养的小鼠子宫内膜基质细胞48 h后,有SFRP-2蛋白的明显表达.结论:成功构建含小鼠SFRP-2全基因的重组腺病毒载体.
作者：谭毅；谭冬梅；何明忠；王立芝；后晓南 刊期： 2006年第02期
目的:探讨非小细胞肺癌患者外周血CD4+CD25+调节T细胞水平的特点及其临床意义.方法:采用流式细胞术检测61例非小细胞肺癌患者外周血CD4+CD25+调节T细胞水平,并进行分层分析.结果:非小细胞肺癌组外周血CD4+CD25+调节T细胞水平(27.14±12.74)%,明显高于30例健康人群对照组CD4+CD25+T细胞水平(14.02±5.42)%(P＜0.01),而且该CD4+CD25+调节T细胞CD45RA(-),CD69(-).进一步分层分析显示:与正常对照组比较,随肺癌进展,外周血CD4+CD25+T细胞水平显著升高,进展期尤其明显[Ⅲ期:(25.97±5.94)%,n=20,P＜0.01;Ⅳ期:(35.13±13.27)%,n=26,P＜0.001].结论:非小细胞肺癌患者外周血CD4+CD25+调节T细胞水平明显高于正常,且与肿瘤的发生发展密切相关.去除这群细胞可能有效诱导肿瘤免疫,为肿瘤治疗提供一种新的方法.
作者：刘莉；姚军霞；丁乾；曹如波；王晶；黄士昂 刊期： 2006年第02期
目的:探讨Ku70在卵巢组织中的表达水平与卵巢癌发生发展的关系.方法:应用免疫组化方法检测Ku70蛋白在15例正常卵巢、20例卵巢囊腺瘤和71例卵巢癌组织中的表达.结果:Ku70在正常卵巢、卵巢囊腺瘤和卵巢癌组织中都有不同程度的表达,但卵巢癌组织中Ku70的表达明显高于正常卵巢组织和卵巢囊腺瘤,且卵巢癌组织分化程度越差则Ku70的阳性率越高,表达强度亦越强,不同组织类型的卵巢癌Ku70的表达无差异.结论:Ku70蛋白可能在卵巢癌的发生发展过程中起重要作用.
作者：田晓予；米建强；高庆蕾；邢辉；卢运萍；马丁 刊期： 2006年第02期
肿瘤是严重危害人类健康的疾病之一,其发病率和死亡率都较高.通过筛查,早期检测出肿瘤,及时治疗,可以降低死亡率.理想的筛查方法应具有特异性高、敏感性高、成本低且受试者依从性好等特点.肿瘤标志物尤其是体液中的肿瘤标志物有可能成为理想的筛查工具.肿瘤标志物的研究需要多门学科多种技术的参与.蛋白质组学是一门新兴的学科,能够从整体上研究疾病的发生机制,寻找与疾病相关的标志蛋白.近年来,运用蛋白质组学技术已经发现和鉴定了许多肿瘤标志物.尽管这些技术目前还存在一些缺点,但它处于不断地完善和改进之中,将在肿瘤早期检测中发挥重要作用.
作者：黄颖锋；王贵齐；赵晓航 刊期： 2006年第02期
目的:测定评价欧洲癌症研究与治疗组织(EORTC)的乳腺癌患者生命质量测定量表QLQ-BR53中文版的应用效果.方法:通过测定165例乳腺癌患者的生命质量对QLQ-BR53量表进行评价.所得资料用统计学方法进行相关分析及配对t检验.结果:各领域的重测信度均在0.80以上,而且大部分在0.90以上;各领域内部一致性信度α值除认知功能为0.5l外,其余均在0.70以上;各条目与其领域的相关系数r值均在0.6以上;治疗前后发现躯体功能、角色功能、认知功能、疲倦、恶心与呕吐5个领域的得分差异有统计学意义.结论:QLQ-BR53中文版具有较好的信度和效度,可用于中国乳腺癌患者的生命质量测定,但其反应度有待于进一步研究.
作者：万崇华；杨铮；孟琼；汤学良；卢玉波；邹天宁；张冬梅 刊期： 2006年第02期
目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR:flt-1和KDR)在卵巢癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测VEGF及VEGFR在45例卵巢癌中的表达情况,并进行相关的临床病理因素分析.结果:45例卵巢癌中VEGF、flt-1和KDR阳性表达率分别为86.7%,68.9%,88.9%.Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌中VEGF强阳性表达率93.5%(29/31)高于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌35.7%(5/14)(P=0.001).淋巴结转移阳性组中VEGF强阳性表达率69.2%(9/13)高于淋巴结转移阴性组27.8%(5/18)(P＜0.05).随着卵巢癌临床分期、病理分级、腹水量及残瘤组织的增加,VEGF阳性表达率升高(P＜0.05),而不同组织类型卵巢癌中,VEGF阳性表达率无明显差异(P＞0.05).结论:VEGF与卵巢癌发展有关,能促进肿瘤生长、局部侵袭及远处转移.
作者：汪丛敏；李力；李英惠；吴小华；张金库；宋素格；刘金 刊期： 2006年第02期
目的:研究宫颈腺癌组织中S期激酶相关蛋白2(Skp 2)和细胞周期调控因子p27kip1的表达及其临床意义.方法:采用组织微阵列技术结合免疫组化(二步法)检测106例宫颈腺癌组织和22例慢性宫颈炎组织中Skp 2和p27kip1的表达.结果:106例宫颈腺癌组织Skp 2阳性表达率为67.9%,显著高于慢性宫颈炎组织(P＜0.01);p27kip1阳性表达率为58.5%,明显低于慢性宫颈炎组织(P＜0.05).Skp2在宫颈腺癌的病理分级中,G2、G3组阳性表达率均明显高于G1组(P＜0.05).Skp 2和p27kip1表达与宫颈腺癌组织学类型有明显相关性,子宫内膜样腺癌Skp2阳性表达率明显高于其他类型宫颈腺癌(P＜0.05),透明细胞腺癌p27kip1阳性表达率明显低于其他类型宫颈腺癌(P＜0.05).Skp2和p27kip1阳性表达率无明显负相关.结论:Skp 2高表达与p27kip1低表达在宫颈腺癌的发生、发展中起重要作用,Skp 2高表达可作为宫颈腺癌恶性化的分子指标;采用组织微阵列进行Skp 2和p27kip1免疫组化检测具有可靠性和实用性.
作者：王喜梅；孙雷；刘逢吉；湛丽；郑仁恕；张众 刊期： 2006年第02期
目的:研究抗CD20嵌合抗体片段Fab'突变体诱导B淋巴细胞凋亡的发生、凋亡相关基因表达以及细胞内钙离子的浓度变化.方法:以人B淋巴细胞(Raji细胞)为凋亡细胞模型,通过MTT法、Western blot和流式细胞仪等方法观察bcl-2/bax基因表达、细胞色素c及胞内Ca2+的变化.结果:抗CD20嵌合抗体片段Fab'突变体对Raji细胞生长增殖具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性.细胞中bcl 2表达有微弱的下降,而bax表达明显升高,并出现细胞色素c的释放和胞内Ca2+浓度的升高.结论:抗CD20嵌合抗体片段Fab'突变体诱导Raji细胞凋亡,与bcl-2/bax表达、细胞色素c的释放和胞内Ca2+浓度的升高有关.
作者：杨铭；范冬梅；熊冬生；刘银星；许元富；杨纯正 刊期： 2006年第02期
目的:TRIO基因位于染色体5p扩增区、编码1种在细胞周期调节中起主导作用的蛋白,本研究旨在了解TRIO的扩增和表达是否与膀胱肿瘤细胞的快速增殖有关.方法:Ki67标记染色(Ki67 LI)、荧光原位杂交(FISH)和定量PCR法(LightCyclerTM PCR)被用于研究.结果:TRIO基因扩增与膀胱肿瘤细胞的快速生长相关(P ＜0.0001).膀胱肿瘤分化越差、临床分期越高,Ki67 LI与TRIO基因扩增数目均越高.含2 317例组织微阵列FISH结果显现TRIO扩增仅见于1.8%早期膀胱肿瘤(pTa)(9例/499例),而在膀胱癌(pT1-4)高达12.8%(62例/485例).定量PCR法进一步证实TRIO在显示5p扩增的膀胱癌组织高表达.结论:TRIO扩增与膀胱肿瘤细胞的快速增殖有关,TRIO扩增和高表达可能在膀胱癌的发展过程中发挥重要作用.
作者：郑敏；SAUTER G；MIHATSCH MJ；MOCH H 刊期： 2006年第02期
目的:探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)提高Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV1-TK)/丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)系统联合拓扑替康(topotecan,TPT)对卵巢癌的体内治疗作用.方法:首先用携带HSV1-TK基因的重组逆转录病毒上清转染人卵巢癌细胞系SKOV-3,在含有G418的培养液中筛选获得抗性克隆细胞(命名为SKOV-3/TK).PCR方法检测HSV1-TK基因整合情况;用SKOV-3细胞与SKOV-3/TK细胞按8:2比例混合建立荷瘤鼠模型,作为HSV1-TK/GCV组、HSV1-TK/GCV+TPT组、ATRA联合HSV1-TK/GCV组及ATRA联合HSV1-TK/GCV+TPT组4个实验组,再单用SKOV-3细胞建立荷瘤鼠模型作为对照组;从用药第1天开始每5 d测量肿瘤体积1次,至用药结束后1周,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率,并取瘤组织做病理学检查.结果:各组肿瘤体积与对照组比较抑瘤率分别为38.8%、53.2%、62.3%及95.7%,差异均有显著性(P＜0.01),而且联合ATRA组与未用ATRA组比较差异亦有显著性(P＜0.01).病理结果显示实验组肿瘤组织均出现不同程度的点、片状坏死,以ATRA联合HSV1-TK/GCV+TPT组为重.结论:HSV1-TK/GCV系统联合TPT治疗卵巢癌可起到协同作用;ARTA可以提高HSV1-TK/GCV系统联合TPT对卵巢癌的体内杀伤作用.
作者：吴强；徐梅；孙志华；袁红花；朱孝荣；崔涛 刊期： 2006年第02期
目的:探讨神经内分泌(neuroendocrine,NE)分化标志物:嗜铬蛋白A(CgA)、突触素(Syn)、神经内分泌颗粒和p53对非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)预后的影响.方法:62例NSCLC进行含铂类方案新辅助化疗1～2个周期,然后手术治疗,以免疫组化法检测术后标本中NE分化标志物CgA、Syn及p53,以电镜观察标本中神经内分泌颗粒,随访3年,结果采用SPSS11.0统计软件,进行生存率分析.结果:p53及NE分化标志物联合p53对非小细胞肺癌患者的无病生存期在统计学上均有显著性差异(P＜0.05),NE(+)p53(-)患者生存率较高.说明p53和NE分化联合p53与非小细胞肺癌患者的预后有关.结论:神经内分泌分化和p53两者联合,用于非小细胞肺癌患者无进展生存期评价具有一定的临床价值.
作者：范理宏；陈岗；陆舜；廖美琳；佘君；蔡映云 刊期： 2006年第02期
目的:利用基因转染和RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术在肺腺癌SPC-A1细胞株中分别建立2种Livin异构体的基因沉默体系,旨在进一步体外观察两种异构体基因沉默诱导SPC-A1细胞凋亡效应.方法:构建Livin两种异构体小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)表达载体;以电穿孔法转染SPC-A1细胞,经G418筛选获得稳定转染的细胞克隆;通过半定量RT-PCR和Western blot验证Livin异构体在SPC A1细胞中的基因沉默效率,建立高效Livin异构体基因沉默体系.结果:成功获得Livin异构体siRNA表达载体,经基因转染以及G418抗性筛选,成功建立Livin异构体特异基因沉默SPC-A1细胞克隆.结论:RNAi能高效特异阻断两种Livin异构体表达,为进一步研究其不同的抗凋亡生物学功能,探讨其作为诱导肺癌细胞凋亡治疗分子靶点以及提高肺癌细胞放化疗敏感性打下基础.
作者：孙建国；廖荣霞；陈正堂；王志新；张青；胡义德；王东林；粟永萍 刊期： 2006年第02期
目的:观察珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应并初探其分子机制.方法:体外细胞培养采用人肝癌细胞株SMMC-7721,分为对照(BL)组、珠子参(PJ)组、二甲基亚砜(DMSO)组及5-FU组,采用电镜观察作用后肝癌细胞超微结构改变;流式细胞仪检测肝癌细胞周期和凋亡率;RT PCR法检测癌基因c myc、c-fos和抑癌基因p53、p21表达的变化.结果:与对照组比较,电镜下珠子参组SMMC-7721细胞染色质浓缩,分解成大小不一有膜包绕团块,内含有新月形DNA物质及细胞器,形成凋亡小体;周期分析可见G0/G1期细胞阻滞,阻止了细胞向S期的转换,并引起细胞凋亡,凋亡率达38.34%;RT-PCR半定量分析珠子参能降低癌基因c-myc表达(P ＜0.05),增高抑癌基因p53和p21表达(P ＜0.05).结论:珠子参能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,部分作用机制可能与阻滞细胞停留在G0/G1,降低癌基因c-myc和c-fos表达,增高抑癌基因p53和p21表达有关.
作者：陈涛；陈龙飞；金国琴；李丹 刊期： 2006年第02期
目的:研究X线照射对鼻咽癌细胞中错配修复基因hMSH2和hMLHI表达的影响,探讨放射损伤后肿瘤细胞的DNA错配修复机制.方法:将鼻咽癌CNE-1细胞分为实验组和对照组,对2组细胞进行X线分次外照射.实验组每次照射剂量为2 Gy,总剂量为10 Gy.对照组每次照射剂量为0 Gy.应用RT-PCR、免疫细胞化学及Western blot方法,检测照射终止后不同时间点细胞hMSH2和hMLH1的表达.结果:实验组细胞在照射后hMSH2 mRNA和蛋白的表达均显著强于对照组(P＜0.01);hMLH1 mRNA及蛋白表达与对照组比较无显著差异(P＞0.05).结论:放射可以诱导鼻咽癌细胞hMSH2表达;hMSH2对放射造成的DNA损伤可能有修复作用,这可能是临床上鼻咽癌放疗敏感性降低的原因之一.
作者：范凯；王辉；于志红；王彦；富晶；王朝晖；刘敏；吕申 刊期： 2006年第02期
肿瘤杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院
