学术投稿

RNA干扰研究波形蛋白在肝癌细胞增殖中的作用及不同中医治法的调节

胡卫;方肇勤;梁超;管冬元;吴中华

关键词:肝癌, 波形蛋白, 基因芯片, RNA干扰, 治则治法
摘要:目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌波形蛋白( vimentin,VIM)表达的调控差异,以及VIM在人肝癌细胞增殖中的作用.方法:将84只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组以及实验组,除正常组外均采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌,实验组分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)VIM表达的差异;根据人VIM基因编码区设计2个siRNA靶点,并将构建好的重组质粒转染SMMC-7721人肝癌细胞株,Reahime-PCR检测转染前后该基因的表达差异,MTT法检测转染前后细胞生长增殖情况.结果:芯片结果显示,VIM基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加(模型组芯片读数为正常组10倍以上),健脾和活血治法明显下调其表达;采用MTT法筛选到一个VIM基因RNA干扰有效靶序列,脂质体转染144h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;实时荧光定量PCR检测表明,转染72 h后该基因的表达量明显降低(转染效率为50%).结论:肝癌细胞恶性增殖有赖于VIM基因的高表达,健脾和活血方药能显著下调该基因表达.
中国实验方剂学杂志相关文献
  • 基于中药药性加权计算的中医方剂评价方法

    目的:构建中医方剂智能分析方法,对中医处方进行数字化分析处理,得到该方剂的具体功效及适应症.方法:通过构建中医方剂数学模型,将数字化信息进行权值计算,把计算数值放人中医知识库中进行匹配查找得到分析结果.结果:经测试该分析具有较高的准确率,尤其对于经典方剂测试功效与实际功效的对比其准确率可到达83.3%.结论:该方法能够用于中医方剂的评价,具有一定推广使用价值.

    作者:赵汉青;江依法;葛鑫;黄红艳;李芳;李阳;叶晴晴 刊期: 2011年第20期

  • HPLC测定蛭芎活血丸中山柰素的含量

    目的:建立HPLC测定蛭芎活血丸中山柰素含量的方法.方法:采用Eclipse XDB-C18色谱柱,甲醇-水(52:48)为流动相;流速1.0 mL·min-1;检测波长367 nm.结果:山奈素在2.148 ~21.48 mg·L-1线性关系良好(r =0.999 9),平均回收率为99.08%,RSD 0.47%(n=6).结论:方法操作简便,专属性强,结果准确,可用于蛭芎活血丸的质量控制.

    作者:孟建升;蒋俊春;周晓 刊期: 2011年第20期

  • 中药经鼻腔给药研究

    主要对中药经鼻腔给药研究进行文献整理和分析.研究表明,中药经鼻腔给药可以在鼻腔起局部治疗作用,或经鼻吸收后向脑内递药发挥中枢治疗作用,还可以起到治疗全身性疾病的作用.综述了近年来中药经鼻腔给药的实验研究及临床运用,主要包括鼻用制剂国内现状、中药经鼻腔给药基础实验研究(给药途径的选择、剂型的选择、辅料的选择、体外释药评价、药代动力学研究、药效学研究、脑靶向性、安全评价)、中药鼻用制剂的临床观察实例研究,并对其进行了展望,以期为中药经鼻腔给药临床疾病治疗应用和中药鼻用制剂新药开发提供参考.

    作者:邬伟魁;张海燕;宋伟;贺娅;李芳;郑琴;杨明 刊期: 2011年第20期

  • 消栓通脉颗粒对深静脉血栓形成大鼠静脉壁NF-κB,ⅠκB表达的影响

    目的:探讨中药消栓通脉颗粒治疗深静脉血栓形成的机制.方法:72只Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、血栓模型组、复方丹参片组(0.23 g·kg-1,ig)、消栓通脉颗粒组(32g·kg-1,ig).连续给药5d后采用下腔静脉结扎法制备血栓模型,造模后4h连续给药,动态监测各组大鼠术后不同时间点静脉壁核因子κB mRNA(NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65mRNA),抑制因子κB mRNA(ⅠκBα mRNA)表达水平.结果:同一时间点,中药治疗组静脉壁NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65mRNA表达水平显著低于模型组(P<0.01),而IκBα mRNA明显增高(P<0.01);各组静脉壁NF-κB pS0 mRNA,NF-κB p65mRNA表达随手术天数的延长呈现先增强后减弱的趋势,术后3d达到高峰,而IκBα mRNA的表达呈先下降后升高的规律,术后3d降到低谷;与复方丹参片组比较,在同一时间点,消栓通脉颗粒剂组NF-κB p50 mRNA,NF-κB#5 mRNA表达明显降低(P<0.01),而IκBα mRNA表达显著增高(P<0.01).结论:消栓通脉颗粒剂可能通过调控NF-κB/IκB信号传导通路,减轻其介导的静脉壁炎症反应,保护血管内皮细胞功能,发挥抗血栓作用.

    作者:刘政;张明;郝清智;侯玉芬 刊期: 2011年第20期

  • 和厚朴酚联合青蒿素对CNE-2细胞增殖和凋亡的作用

    目的:研究和厚朴酚、青蒿索及二者联合应用在体外能否抑制人鼻咽癌CNE-2细胞的生长以及对其细胞凋亡的影响.方法:MTT法检测和厚朴酚、青蒿素单独或联合对细胞生长的抑制作用,以IC50评判抗肿瘤的效果,应用金氏公式进行联合用药的结果分析;DAPI染色观察细胞的凋亡形态,流式细胞仪检测和厚朴酚、青蒿素单独或联合作用对CNE-2凋亡率的影响.结果:和厚朴酚能显著抑制CNE-2细胞的增殖,并呈剂量依赖关系,其半数抑制浓度(IC50)为8.58 mg·L-1;青蒿素对CNE-2细胞生长没有明显的抑制作用,半数抑制浓度(IC50)为62.24 mg·L.-1;和厚朴酚与青蒿素联合应用对CNE-2细胞的增殖抑制作用优于各单药组,q>1.15.DAPI染色可观察到和厚朴酚与青蒿素联合组核碎裂、凋亡小体,而单药组则不明显;凋亡分析显示联合用药组作用48 h细胞凋亡率显著高于各单药组.结论:和厚朴酚单独能够杀伤CNE-2细胞,并呈量-效关系,青蒿素单独作用不杀伤CNE-2细胞,两者联合应用对CNE-2细胞具有协同杀伤作用.

    作者:王春玲;赖小平;吴安国 刊期: 2011年第20期

  • 养心开郁片对抑郁症模型大鼠行为活动的影响

    目的:探讨养心开郁片对抑郁症模型大鼠行为活动和学习记忆的影响.方法:造模方法为慢性轻度不可预见性的应激模型加孤养,观察对大鼠1%蔗糖偏嗜度、Morris水迷宫实验完成的影响.将SD大鼠随机分成6组,即空白对照组、模型组、盐酸氟西汀组、养心开郁片高、中、低剂量组(1 500,750,375 mg· kg-1).造模同时ig给药,每日1次,连续给药28 d.均按10.0 mL·kg-1给药,对照组、模型组ig等量蒸馏水.结果:养心开郁片中、低剂量组均能增加1%蔗糖水偏嗜度;高、中、低剂量组均能缩短Morris水迷宫中定位导航的潜伏期;中、低剂量组能增加空间搜索时在第四象限的持续时间和路程及穿越目标的总次数;与模型组相比均具有统计学意义(P <0.05或P<0.01).结论:养心开郁片可改善抑郁症模型大鼠的行为和记忆能力,具有一定的抗抑郁作用.

    作者:王晓燕;孙建宁;林海;董力;畅洪异;王静怡 刊期: 2011年第20期

  • 玉米粗多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响

    目的:探讨玉米粗多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响.方法:ICR小鼠随机分成为正常对照组、环磷酰胺模型组、玉米粗多糖低、高剂量组(50,100 mg·kg-1,连续ig7 d).ip环磷酰胺制备小鼠免疫低下模型,检测小鼠的脾脏指数、胸腺指数、血清溶血素( HC50)和小鼠单核-巨噬细胞吞噬指数.结果:玉米粗多糖可显著增加免疫低下小鼠的脾脏指数(P<0.05),并显著提高免疫低下小鼠的单核-巨噬细胞吞噬指数(P<0.001).结论:玉米粗多糖可促进免疫功能低下小鼠的单核-巨噬细胞功能.

    作者:母海成;金在久;施溯筠 刊期: 2011年第20期

  • 山芝麻抗鸭乙型肝炎病毒作用

    目的:研究山芝麻水提物( helicteres angustifolia)体内抗鸭乙型肝炎病毒(duck hepatitis B virus,DHBV)的作用.方法:将DHBV-DNA阳性麻鸭随机分为山芝麻高、中、低剂量组(10,5,2.5 g·kg-1)、拉米夫定50 mg· kg -组和模型组,分别给予相应药物进行干预.用药前、用药第7,14天及停药第7天,取静脉血用实时荧光定量PCR法检测血清DHBV-DNA含量.治疗后取肝脏组织作病理学检查.结果:拉米夫定组用药后血清DHBV-DNA水平迅速降低,停药后立即反跳;山芝麻高、中剂量组用药7,14 d血清中的DHBV-DNA显著降低(P<0.05或P<0.01),停药后仍表现有持续的抑制作用;在给药及停药过程中山芝麻低剂量组血清DHBV-DNA变化不明显.镜下观察显示山芝麻高剂量组与阳性药组鸭肝脏的病理改变有一定的改善.结论:山芝麻在鸭体内有一定的抑制鸭乙型肝炎病毒DNA的作用,其作用有明显的量效和时效反应关系.

    作者:黄权芳;杨辉;韦刚;林兴;张士军;黄仁彬 刊期: 2011年第20期

  • 普通鹿蹄草的化学成分Ⅰ

    目的:研究普通鹿蹄草Pyrola decorata H.Andres全草的化学成分.方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20分子排阻色谱、ODS柱色谱以及制备HPLC等手段进行分离纯化,通过理化性质和波谱学技术进行结构鉴定.结果:从乙酸乙酯层和正丁醇层中分离得到10个化合物,分别鉴定为梅笠草素(1)、齐墩果酸(2)、熊果酸(3)、鹿蹄草素(4)、香草酸(5)、pomolicacid(6)、maslinic acid(7)、colosic acid(8)、3-β-O-α-L-arabinopyranosyl siaresinolic acid-28-O-β-D-glucopyranosyl ester(9)和ziyuglycoside l(10).结论:化合物1~10为首次从普通鹿蹄草种植物中分离得到,其中化合物6~10为首次从鹿蹄草属植物中分离得到.

    作者:张园园;陈晓辉;金哲史;毕开顺 刊期: 2011年第20期

  • 柴胡总皂苷提取物体外溶血作用

    目的:考察柴胡总皂昔提取物的溶血作用和抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响.方法:通过肉眼观察和分光光度法考察不同浓度柴胡皂苷的溶血作用及抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响.结果:柴胡总皂苷质量浓度为在0.01,0.02 g·L-1时,其溶血曲线呈S形,溶血当量为0.01 mg,溶血指数为1∶10万,抗氧化剂与柴胡总皂苷组溶血率低于同浓度柴胡总皂苷组.结论:柴胡总皂苷具有一定的溶血作用,且溶血强度与浓度呈剂量依赖性,抗氧化剂的加入能减轻柴胡总皂苷的溶血作用.

    作者:张国松;封传华;罗晓健;胡鹏翼;肖志强;王跃生 刊期: 2011年第20期

  • 地菍提取物对高血糖模型小鼠血糖的影响

    目的:研究地菍提取物对实验性高血糖小鼠血糖的影响.方法:分别以葡萄糖、肾上腺素、链脲佐菌素( STZ)造成小鼠高血糖模型,动物分为空白、模型、阳性药格列苯脲或盐酸二甲双胍、地菍提取物高、中、低( 60,40,20 g·kg-1)剂量组,连续ig给药10 d,观察地菍提取物的的降糖作用.同时观察其对正常小鼠血糖的影响.结果:地菍提取物对正常小鼠血糖无影响,对葡萄糖致高血糖小鼠有显著降糖作用(P <0.05,P<0.01),对肾上腺素致小鼠急性高血糖有显著拮抗作用(P<0.01),地菍提取物高、中剂量对STZ致高血糖小鼠有显著降糖作用(P<0.01,P<0.05).结论:地菍提取物有显著的降血糖作用.

    作者:李丽;周芳 刊期: 2011年第20期

  • 糖脉康颗粒HPLC-ELSD指纹图谱

    目的:建立糖脉康颗粒的HPLC-ELSD指纹图谱,为评价及控制药品质量提供可靠方法.方法:采用梯度洗脱方法对样品进行分析.Welch Material色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相0.1%冰乙酸-乙腈梯度洗脱,漂移管温度55℃,气体流量1.8 L·min-1,增益值为l,柱温40℃,流速0.8 mL· min -.结果:14批样品标定共有色谱峰24个,标定3个对照品色谱峰,14批样品中12批样品相似度>0.80,方法精密度、稳定性和重复性良好.结论:方法可为糖脉康颗粒的质量控制提供参考.

    作者:赵启鹏;张艺 刊期: 2011年第20期

  • 旋覆代赭汤联合针刺治疗胃癌术后胃瘫13例

    目的:观察旋覆代赭汤联合针刺治疗胃癌术后胃瘫的疗效.方法:13例术后胃瘫患者采用旋覆代赭汤加减联合针刺治疗,采用自身前后对照.结果:13例患者均治愈出院,胃瘫缓解时间(16.60±7.21)d.痊愈率7.69%;有效率92.31%.症状显效率30.77%;症状有效率69.23%.结论:旋覆代赭汤联合针刺治疗有助于胃癌术后胃瘫的恢复.

    作者:杨中;杨国旺;徐咏梅;唐武军;韩冬;张萃;王笑民 刊期: 2011年第20期

  • 桂枝颗粒成型辅料的优选

    目的:优选桂枝颗粒的成型辅料.方法:考察不同种类和比例的辅料对桂枝颗粒成型性、溶化性和吸湿性的影响,并用综合评分法筛选出制备桂枝颗粒的优辅料及辅料比例.结果:制备桂枝颗粒的优辅料为糊精和乳糖,两者使用比例为1:1.结论:采用该方法制成的桂枝颗粒成型性、溶解性好,不容易吸湿,效果理想.

    作者:张卫兵;杨保彦 刊期: 2011年第20期

  • 李萍萍:坚持中西医结合开拓肿瘤治疗新途径——记北京肿瘤医院李萍萍教授及其科研团队

    作者: 刊期: 2011年第20期

  • 痰瘀同治方对大鼠颈总动脉粥样硬化易损斑块稳定性的影响

    目的:探讨痰瘀同治方对大鼠颈总动脉粥样硬化(AS)易损斑块稳定性的影响.方法:采用高脂、高蛋氨酸喂养,4周末行颈总动脉球囊拉伤术造模,术后将大鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组、复方维生素组、痰瘀同治方( TYTZ)7.8,3.9,1.95 g·kg-1组,连续ig 8周.实验结束后,测定各组血清同型半胱氨酸(Hcy)、血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9),基质金属蛋白酶组织抑制因子-1( TIMP-1)和斑块中MMP-9,TIMP-1阳性表达.结果:与模型组比较,辛伐他汀组、复方维生素组和痰瘀同治方7.8,3.9 g·kg-1组血清MMP-9降低并TIMP-1升高,斑块中MMP-9阳性表达降低.结论:痰瘀同治方可通过调节MMP-9/TIMP-1起到稳定颈总动脉粥样硬化易损斑块的作用.

    作者:王建辉;李磊;柳芳;史跃;马彦雷;刘建勋 刊期: 2011年第20期

  • 乌药提取物对胃实寒模型大鼠cAMP,cGMP,GAS,MTL水平的影响

    目的:观察乌药对胃实寒模型大鼠血浆中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)的影响.方法:模型组大鼠采用寒冷刺激法造模3d制备胃实寒模型,按前后体重差随机分成8组,分别为模型对照组、吗丁啉组、红花水煎液组、乌药水煎液组、乌药挥发油组、乌药醇提液组、乌药水提乙醚萃取物组、乌药醇提乙醚萃取物组,乌药各提取物给药剂量均为生药1.64 g·kg-1,第4d造模后10 min,给药组ig相应药液10 mL·kg-1,空白对照组及模型对照组给予等体积蒸馏水,1h后进行第2次给药,以酚红法测定胃排空率.采用酶联免疫法测定大鼠血浆中cAMP,cGMP,MTL和血清GAS的含量.结果:与正常组比较,模型组胃排空率显著降低(P<0.05),cGMP,cAMP/cGMP降低(P<0.05),cAMP,GAS,MTL值无显著差异.与模型组比较,乌药水煎液、乌药挥发油、乌药醇提乙醚萃取物能明显抑制胃排空率(P<0.05或P<0.01);乌药水煎液和乌药挥发油能明显升高cAMP含量(P<0.01),乌药水煎液、乌药挥发油、乌药醇提液、能够明显降低cGMP含量(P<0.0l),乌药水煎液、乌药挥发油、乌药醇提乙醚萃取物能明显升高cAMP/cGMP(P<0.01).结论:乌药水煎液、挥发油和醇提乙醚萃取物组能够明显抑制胃排空,明显升高cAMP/cGMP.

    作者:聂子文;郭建生;陈君;张猛;刘红艳 刊期: 2011年第20期

  • 基于顶空静态进样技术的中药鬼针草挥发性成分GC-MS分析

    目的:建立顶空静态进样快速分析鬼针草低温易挥发性成分的方法.方法:采用顶空静态加热萃取技术,提取鬼针草低温易挥发性成分,进行气相色谱-质谱(GC-MS)分析.结果:经GC-MS分析,鉴定出鬼针草中24个挥发性化学成分,其中α-蒎烯、α-人参烯含量高,分别为25.19%,12.29%.结论:GC-MS结合顶空进样技术,分析鬼针草中的低温易挥发性化学成分信息,寻求中药气味主观认识的化学成分客观表征,为中药采集术语和采集经验的客观化研究提供科学依据,从而有效推进中药现代化的进程.

    作者:李勇;蒋海强;巩丽丽 刊期: 2011年第20期

  • 疏肝活血方促进缺血组织HIF-1α,HGF,VEGFmRNA的表达研究

    目的:探讨疏肝活血方对肢体缺血组织中低氧诱导因子-1α( HIF-1α),肝细胞生长因子(HGF),血管内皮生长因子(VEGF) mRNA表达的调节作用.方法:BALB/c裸鼠64只,随机分为疏肝活血方组、模型组和正常组,股动脉结扎法建立裸鼠肢体缺血模型,分别于术后1,2,3,4周观察各组裸鼠肢体缺血状态的改变,应用苏木素-伊红(HE)染色和CD34免疫组化染色观察肌肉组织一般形态学及微血管数的改变,应用反转录多聚酶链反应( RT-PCR)检测HIF-1α,HGF,VEGF基因在缺血肌肉中表达的动态变化.结果:疏肝活血方能明显改善裸鼠肢体的缺血状态;术后2~4周,疏肝活血方组裸鼠缺血肢体肌肉中的微血管数(MVC)明显高于模型组(P<0.01);疏肝活血方组裸鼠缺血肢体肌肉中HIF-1α,HGF和VEGF的mRNA表达明显强于模型组.结论:疏肝活血方具有明显的促血管生成作用,能够明显上调血管新生相关基因HIF-1α,HGF,VEGF的mRNA表达水平.

    作者:刘艳玲;郑巧楠;袁明殿 刊期: 2011年第20期

  • HPLC测定双黄连注射液中木犀草苷

    目的:建立双黄连注射液中木犀草苷的RP-HPLC含量测定方法.方法:采用聚酰胺柱纯化富集木犀草苷,通过Waters C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min -,检测波长350 nm,柱温35℃.结果:木犀草苷进样量在34.3 ~343.0 ng线性关系良好(r=0.999 7);方法回收率为99.2%,RSD 3.3%(n=6).结论:方法灵敏、简便、准确,可用于双黄连注射液中木犀草苷的含量测定.

    作者:樊磊磊;刘乃强;王雪芹;李振国;邢向伟 刊期: 2011年第20期

中国实验方剂学杂志

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主管:国家中医药管理局

主办:中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会