学术投稿

PCR微板杂交对金黄色葡萄球菌凝血酶血清型进行分子分型

罗红;胡必成;陈峻;马威

关键词:PCR, 微板杂交, 金黄色葡萄球菌, 凝血酶, 血清型, 凝固酶, 兔抗血清, 酶的活性, 菌株, 鉴定过程, 中和抑制试验, 鉴定方法, 凝块, 酶活性, 流行病学调查, 结果, 高活性, 微生物检验, 杂交技术, 血清中和
摘要:在临床微生物检验和污染食物的葡萄球菌流行病学调查中,常常需要对分离的金黄色葡萄球菌的凝固酶进行血清分型.尽管凝固酶被分成10个血清型[1],但目前商品化抗血清只能鉴定Ⅰ~Ⅷ型.每个血清型用兔抗血清的中和抑制试验确定, 即金黄色葡萄球菌菌株产生的凝固酶与血清型特异的抗血清在试管里混合后,再加兔血浆, 如果凝固酶的型别与抗血清对应,就不会形成凝块.如果没有抗血清(Ⅰ~Ⅷ型)能够中和凝固酶,则成为不能分型的菌株(nontypeable, NT), 这种常规的鉴定方法强烈依赖凝固酶的活性,因此,低凝固酶活性的菌株可能需要延迟观察时间,等待血浆凝块的发生,而那些具有极高活性的菌株可能引起假结果,因为抗血清不能中和凝固酶的活性.同样的道理,对于NT菌株来说,其凝固酶的活性不能被抗血清中和,凝块是否形成需要用所有八种抗血清证实.因此,为了鉴定NT和高活性的凝固酶的菌株,需要训练有素的工作人员的认真观察.此外,鉴定过程费时费力,且结果的判读常常主观.后来用微板的方法[2] 对常规的方法进行了改进,但与常规方法一样,结果受凝固酶活性的影响较大.本文旨在建立用PCR结合微板杂交技术对凝固酶血清型进行鉴定.
放射免疫学杂志相关文献
  • 过敏性紫癜患儿外周血B细胞和T淋巴细胞亚群与TNF-α水平的相关性分析

    过敏性紫癜为儿科常见病、多发病,患者往往存在有不同程度免疫功能的紊乱.主要表现为细胞免疫受抑制,T、B淋巴细胞比例紊乱.国内已见有患儿红细胞免疫功能与细胞因子紊乱的报告[1].本文对患儿外周血B和T淋巴细胞亚群与血清TNF-α水平相关性分析.现将结果报告如下.

    作者:冯飞燕 刊期: 2011年第05期

  • 发热时检测血清PCT与外周血涂片NAP积分的临床价值比较

    发热多数是由细菌、病毒感染引起,临床需要早期快速了解是何种性质发热,才能决定冶疗方案及是否应用抗生素.故发现方便快捷、 灵敏度高和特异性好的检验指标是关键.通过本文血清降钙素原(PCT)检测具有方便快捷、灵敏度高和特异性佳等优点,在发热时具有病因诊断鉴别价值及为临床应用抗生素提供理论依据,现将结果报告如下.

    作者:张翊;黄伟萍 刊期: 2011年第05期

  • 乙型肝炎患者血清EPO、TGF-β1和TSGF测定的临床意义

    促红细胞生成素(EPO)主要由肾小球细胞分泌的红细胞生成因子和血浆中来自肝脏的红细胞生成素结合而成.其主要代谢器官为肝脏,其次为肾脏[1].血清转化生长因子-β1(TGF-β1)是由肿瘤细胞产生的细胞因子,它作为促进因子在肿瘤的发生和发展中起着十分重要的作用于[2],肿瘤特异性生长因子(TSGF)检测对肿瘤的筛查有重要的临床价值[3].本文报告乙型肝炎患者血清EPO、TGF-β1和TSGF检测的临床价值.现将结果报告如下.

    作者:田水孝 刊期: 2011年第05期

  • 不同剂量X射线对人外周血有核细胞DNA及精子DNA损伤的比较

    目的:应用单细胞凝胶电泳技术检测不同剂量X射线对人离体外周血有核细胞DNA及精子DNA的损伤,评估外周血有核细胞及精子在高剂量X射线照射后DNA的损伤程度.方法:采用血常规正常的人外周血和采集精液常规正常的人精液,用能量为6MV的X射线给予0Gy,2Gy,4Gy,6Gy,8Gy,10Gy的剂量照射.照射后1h内进行单细胞凝胶电泳检测人离体外周血中有核细胞和人离体精液中精子的彗星率、慧尾长度和尾巴DNA含量.结果:0Gy对照组人离体外周血中有核细胞的彗星率和离体精液中精子的彗星率分别是1.00%±0.10%、2.1%±1.5%,有统计学差异(υ=18,t=2.31>1.734,P<0.05);2Gy组人离体外周血中有核细胞的彗星率和精液中精子的彗星率分别是27.10%±4.71%、47.37%±8.32%,有统计学差异(υ=18,t=6.76>1.734,P<0.05) ;4Gy组人离体外周血中有核细胞的彗星率和精液中精子的彗星率分别是76.32%±10.28%、92.22%±9.02%,有统计学差异(υ=18,t=3.68<1.734,P<0.05);6Gy组人离体外周血中有核细胞的彗星率和精液中精子的彗星率分别是94.36%±3.24%、100%有统计学差异(υ=18,t=5.508>1.734,P<0.05);8Gy、10Gy组人离体外周血中有核细胞的彗星率和精液中精子的彗星率都分别是100%、100%无统计学差异.结论:实验足以佐证在一定剂量范围内(2~6Gy)精子彗星实验比人离体外周血中单个核细胞彗星实验能更敏感的反映X射线对人体的损伤.

    作者:王辉;邹练;江其生;李峰生;何蕊;宋秀军 刊期: 2011年第05期

  • HLA-B27、CRP、免疫球蛋白联检辅助诊断强直性脊柱炎

    强直性脊柱炎(AS)是一种主要累及脊柱、中轴骨胳及四肢大关节以椎间盘纤维环及其附近结缔组织纤维化、骨化和关节强直为病变特点的慢性炎症性疾病.该病早期进展较慢,但后期发展较快,很短时间内形成驼背畸形,髋、膝等关节强直,故早期诊断显得尤为重要.本病的特征是持续性炎症,炎症高度活动和低度活动相交替.

    作者:王伟群;楼亚玲;宋大伟 刊期: 2011年第05期

  • APN、CD62P、hs-CRP在冠心病病程发展中的作用

    目的:探讨在冠状动脉粥样硬化发展中脂联素(adipomectin,APN)、CD62P、hs-CRP的作用.方法:检测60例稳定型心绞痛患者(stable angina pectoris,SAP组)、58例不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris,SAP组),50例急性心肌梗死患者(AMI组)及40例健康个体(对照组)外周血中APN、CD62P、hs-CRP的含量情况.结果:各组APN含量比较,AMI组低于UAP组(P<0.05),UAP组低于SAP组(P<0.05),SAP组低于对照组(P<0.05).各组CD62P、hs-CRP含量比较,AMI组高于UAP组(均P<0.05),UAP组高于SAP组(均P<0.05),SAP组高于对照组(均P<0.05).结论:在冠心病的病程发展中,存在APN的低水平表达,同时存在CD62P、hs-CRP的高水平表达,APN、CD62P、hs-CRP的异常表达加剧了冠心病的病程进展.病情严重程度不同的各组患者间存在APN、CD62P、hs-CRP的含量差异,APN、CD62P、hs-CRP的含量可作为冠心病危险分层的参考指标.

    作者:张勤军;陈明聪 刊期: 2011年第05期

  • ACI患者治疗前后血清Hcy、ACA、APN联检的临床意义

    目的:探讨了急性脑梗死(ACI)患者治疗前后血清Hcy、ACA和APN水平的变化及临床意义.方法:应用放免法和酶联法对32例ACI患者进行了治疗前后血清Hcy、ACA、脂联素(Adiponectin,APN)检测并与35名正常健康人作比较.结果:在治疗前血清Hcy、ACA水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),而APN水平则非常显著地低于正常人组(P<0.01),经3个月综合治疗后血清Hcy、ACA和APN水平与正常人组比较仍有显著性差异(P<0.05).且血清Hcy水平与ACA水平呈正相关(r=0.6138,P<0.01),与APN水平呈显著负相关(r=-0.4218,P<0.05).结论:检测ACI患者血清Hcy、ACA、APN水平的变化对了解病情、观察预后均有重要的临床价值.

    作者:郭洪卫 刊期: 2011年第05期

  • 血浆全段甲状旁腺激素测定在肾脏疾病中的临床应用

    目的:探讨全段甲状旁腺激素(i-PTH)在肾脏疾病中的临床应用价值.方法:检测和分析了46例肾功能不全失代偿期组、39例肾功能衰竭期组、35例尿毒症期组患者的全段甲状旁腺激素(i-PTH),并和41例正常对照组进行比较.结果:i-PTH浓度病例组与正常对照组有显著性差异(P<0.01),各组间i-PTH也有显著性差异(P<0.01).结论:慢性肾功能不全的患者,随着肾功能的恶化,i-PTH有逐渐升高的趋势.

    作者:朱梅;任春霖;陈华茜;王朝晖;周晓莉 刊期: 2011年第05期

  • 血浆生物标志物测定对早期诊断ACS患者的临床分析

    目的:为了探讨血浆生物标志物对早期诊断急性冠状动脉综合征(ACS)患者的临床分析.方法:108例ACS患者[包括42例AMI和66例不稳定型心绞痛(UAP)患者]、32例稳定型心绞痛(SAP)和42例正常对照组,利用荧光免疫分析血浆中N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平,超敏免疫比浊法测定了血浆超敏C-反应蛋白(hs-CRP)和化学发光免疫分析肌钙蛋白I(cTnI)水平,并进行了对比性分析.结果:在108例ACS患者中,42例急性心肌梗死(AMI)患者血浆NT-proBNP、hs-CRP和cTnI水平较之66例UAP、32例SAP患者和42例正常对照组明显增高(P均<0.01),66例UAP患者血浆NT-proBNP、hs-CRP和cTnI水平较之32例SAP患者和42例正常对照组具有明显差异(P<0.05,<0.01和<0.01),32例SAP患者较之42例正常对照组血浆hs-CRP具有明显差异(P<0.05),而NT-proBNP和cTnI无明显差异(P均>0.05).108例ACS患者的血浆NT-proBNP、hs-CRP和cTnI水平均随疾病的严重程度而增高.结论:血浆中NT-proBNP、hs-CRP和cTnI的测定,或为可予期待的生物标志物,并且是早期诊断ACS的佳指标.

    作者:钮金英;杨永青 刊期: 2011年第05期

  • 乙型肝炎HBsAg、HBsAb共存的血清学模式与HBV DNA相关性探讨

    乙型肝炎病毒血清学标志物是乙型肝炎临床诊断和治疗的重要依据,不同的血清标志物模式具有不同的临床意义[1].在HBV感染者血清标志物中,HBsAg和HBsAb是对应的一组抗原抗体.通常HBsAg消失后HBsAb产生,但近几年临床实验室经常会遇到HBsAg 和HBsAb同时阳性的不常见模式.本文收集我院2009年3月~2011年4月门诊及住院患者中出现此模式的标本121例,对其血清标志物模式与HBV DNA的关系进行探讨.

    作者:黄其俊;吴坚敏 刊期: 2011年第05期

  • 甲状腺癌中BRAFV600E突变的表达及意义

    甲状腺癌起源于滤泡细胞,是常见的内分泌肿瘤,其组织学类型主要包括乳头状癌(PTC),滤泡状癌(FTC),未分化癌(ATC) 和髓样癌(MTC),其中以PTC所占比例大[1].丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)通路的激活与PTC的发生和进展有密切关系,而BRAF激酶的突变在A、B、C三种Raf激酶中能有效的激活MAPK通路,发生率高于已知的其他PTC相关基因突变(如RET/PTC、NTRK1重组和RAS点突变)[2],是甲状腺癌相关的MAPK通路异常激活的一个主要原因[3].当BRAF基因发生突变时,将导致RAS/RAF/MEK/ERK信号通路(也称MAPK信号通路)信号通路持续性激活,使细胞异常增殖、分化而终导致肿瘤的发生[4].本文主要探讨BRAF V600E突变情况与性别、发病年龄、甲状腺包膜外浸润、颈淋巴结转移及远处转移等临床病理学特征的关系,以此探讨BRAF基因点突变与PTC的生物侵袭性及预后的关系.

    作者:曹艳;石光清;向谷良 刊期: 2011年第05期

  • PCR微板杂交对金黄色葡萄球菌凝血酶血清型进行分子分型

    在临床微生物检验和污染食物的葡萄球菌流行病学调查中,常常需要对分离的金黄色葡萄球菌的凝固酶进行血清分型.尽管凝固酶被分成10个血清型[1],但目前商品化抗血清只能鉴定Ⅰ~Ⅷ型.每个血清型用兔抗血清的中和抑制试验确定, 即金黄色葡萄球菌菌株产生的凝固酶与血清型特异的抗血清在试管里混合后,再加兔血浆, 如果凝固酶的型别与抗血清对应,就不会形成凝块.如果没有抗血清(Ⅰ~Ⅷ型)能够中和凝固酶,则成为不能分型的菌株(nontypeable, NT), 这种常规的鉴定方法强烈依赖凝固酶的活性,因此,低凝固酶活性的菌株可能需要延迟观察时间,等待血浆凝块的发生,而那些具有极高活性的菌株可能引起假结果,因为抗血清不能中和凝固酶的活性.同样的道理,对于NT菌株来说,其凝固酶的活性不能被抗血清中和,凝块是否形成需要用所有八种抗血清证实.因此,为了鉴定NT和高活性的凝固酶的菌株,需要训练有素的工作人员的认真观察.此外,鉴定过程费时费力,且结果的判读常常主观.后来用微板的方法[2] 对常规的方法进行了改进,但与常规方法一样,结果受凝固酶活性的影响较大.本文旨在建立用PCR结合微板杂交技术对凝固酶血清型进行鉴定.

    作者:罗红;胡必成;陈峻;马威 刊期: 2011年第05期

  • 冠心病心衰患者血清CRP、Hcy、NF-κB和D-D水平变化与病情进展关系的临床分析

    本文选择了35例不同分级的冠心病心衰患者的血清C-反应蛋白(CRP)、同型半胱氨酸(Hcy)、核因子-κB (NF-κB)和D-二聚体(D-D)水平,现报道如下.

    作者:张婕 刊期: 2011年第05期

  • 四种常用抗精神病药影响人体血清PRL水平的分析

    目的:研究四种常用抗精神病药物:利培酮、氯丙嗪、氯氮平和奎硫平影响人体血清垂体泌乳素水平的现象,探讨血清垂体泌乳素水平改变的程度和这四种抗精神病药物的关系.方法:采用微粒子免疫化学发光分析对232例单独使用上述四种抗精神病药物3个月以上的住院男性精神病患者的血清中垂体泌乳素(PRL)进行测定,并与健康男性对照组和各研究组之间进行比较.结果:各研究组PRL都显著高于对照组男性(P<0.01),比较各研究组内PRL水平,利培酮组显著高于氯丙嗪组(P<0.01),利培酮组和氯丙嗪组均显著高于氯氮平和奎硫平组(P<0.01),而氯氮平组和奎硫平组之间无显著性差异(P>0.05).结论:利培酮、氯丙嗪、氯氮平和奎硫平这四种抗精神病药物都可导致人体血清PRL水平不同程度的升高,利培酮使PRL升高的作用较强,氯丙嗪其次,氯氮平和奎硫平较小.

    作者:胥杰;孔繁荣;陈澄;张英丽 刊期: 2011年第05期

  • 尿α1-m、β2-m、m-Alb和TRF联检对糖尿病肾病早期诊断的价值

    本文采用免疫速率散射比浊法对反映肾脏早期损害的尿α1-m、β2-m、m-Alb和TRF的四项指标进行联检,观察糖尿病肾病(DN)早期改变,并探讨其意义.

    作者:张路路;陈亚宝;李林 刊期: 2011年第05期

  • 不同基因型慢性乙型重型肝炎患者外周血T细胞亚群的分析

    慢性乙型重型肝炎(简称慢重肝)是指在慢性肝炎或肝硬化基础上出现肝组织大块或亚大块坏死,病死率高达50%以上.因其发病机制复杂,至今仍未完全阐明.有研究表明,机体细胞免疫在慢重肝的发生、发展过程中起着重要作用.因此本文对乙型慢重肝患者外周血T淋巴细胞亚群以及与HBV基因型之间的关系进行研究,旨在探讨不同基因型的乙型慢重肝患者免疫学指标的变化,为临床疾病的治疗及判断预后提供实验依据.

    作者:李秀梅;梁树人;李萍;戴晨阳;徐健;刘莉 刊期: 2011年第05期

  • 糖尿病患者联检β2-m、Alb、BUN、Cr、UA结果分析

    本文采用放射免疫分析测定糖尿病患者血、尿β2-m,同时检测尿白蛋白(Alb)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA).探讨糖尿病引起肾损害的早期诊断依据.

    作者:孙东兵 刊期: 2011年第05期

  • 卵巢癌患者手术治疗前后血清CA125、IGF-Ⅰ和IL-8检测的临床意义

    文献证实[1],检测CA125 水平为卵巢癌公认的标志物,对卵巢癌的病情检测有重要的临床价值.血清IGF-Ⅰ是由多种肿瘤细胞产生和分泌的调控因子,是一种多肽类生长因子, 在恶性肿瘤的发生和发展中具有重要的作用[2].IL-8是第1个被发现具有趋化作用的细胞因子,近年发现,IL-8在许多恶性肿瘤组织中检测到IL-8,且与肿瘤血管的生成、生长、转移、复发等密切相关[3].本文对卵巢癌患者手术治疗前后进行血清CA125、IGF-Ⅰ和IL-8检测,现将结果报告如下.

    作者:曹爱邡 刊期: 2011年第05期

  • 心力衰竭患儿治疗前后血清APN、BNP、ANF检测的临床意义

    目的:探讨了心力衰竭患者治疗前后血清APN、BNP、ANF水平的变化及临床意义.方法:应用放免法和酶联法对30例心力衰竭患者进行了治疗前后血清APN、BNP和ANF检测,并与35名正常健康人作比较.结果:心力衰竭患者在治疗前血清APN水平非常显著地低于正常人组(P<0.01),而血清BNP、ANF水平则非常显著地高于正常人组(P<0.01),经治疗1个月后与正常人组比较仍有显著差异(P<0.05).结论:检测心力衰竭患者血清APN、BNP和ANF水平的变化对疗效观察、预后判断均具有重要的临床价值.

    作者:葛恒松;胡敏;高新春 刊期: 2011年第05期

  • 温州市2994例妇女人乳头瘤病毒感染情况分析

    近年来宫颈癌发病率有上升且年轻化的趋势[1,2].由于宫颈癌存在着一个较长的、可逆转的癌前病变期,早期宫颈癌患者治愈率高达90%,宫颈癌及癌前病变的早期筛查与处理是防治宫颈癌的主要手段.为了解本地区妇女生殖道人乳头瘤病毒(human papillo-mavirus,HPV)感染及型别、年龄分布情况,本文采用凯普导流杂交方法对温州地区妇女宫颈HPV感染情况进行检测分析,现报道如下.

    作者:许锴;卢洁;张德亭;童郁 刊期: 2011年第05期

放射免疫学杂志

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