学术投稿

肺炎链球菌自溶素基因的克隆、表达及蛋白纯化

徐江红;陈兵;章德广;郭建;顾凌澜

关键词:肺炎链球菌, 自溶素基因, 克隆和表达
摘要:目的 克隆肺炎链球菌自溶素(LytA)基因并在大肠埃希菌中表达及蛋白纯化.方法 用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将其插入原核表达载体pET32a(+),构建pET32a(+)-LytA重组质粒,经IPTG诱导使该基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,亲和层析法纯化目的 蛋白,将获得的蛋白用Western blot 鉴定.结果 扩增出的DNA序列与GenBank中的LytA基因序列一致,成功构建了pET32a(+)-LytA重组质粒并在大肠埃希菌中高效表达,所表达的蛋白经Western blot证实为肺炎链球菌自溶素融合蛋白.结论 成功克隆了肺炎链球菌自溶素基因,并将其在大肠埃希菌中表达、纯化,为新型肺炎链球菌疫苗的研制奠定了基础.
复旦学报(医学版)杂志相关文献
  • 生长调节致癌基因-1及其在肿瘤发生发展中的作用

    生长调节致癌基因-1(GRO-1)是CXC趋化因子的一种,GRO-1与其受体CXCR2结合后,参与机体的多种病理生理过程,包括炎症、感染、创伤愈合和肿瘤发生.其在恶性肿瘤演进中所起的作用是多方面的,它通过直接促进肿瘤生长、转移以及通过促进肿瘤血管形成、白细胞浸润,共同促进肿瘤的发生发展.因此,GRO-1可能可以作为肿瘤的治疗靶点和诊断标志物.

    作者:范灵玲;陈晓军;丰有吉 刊期: 2009年第02期

  • 乳腺癌辅助内分泌治疗进展

    内分泌治疗用于乳腺癌已有100多年的历史,具有疗效确实、耐受性良好的特点,已在各期激素受体阳性乳腺癌的辅助治疗中占据重要地位.10年三苯氧胺(TAM)治疗相对5年进一步降低了复发率;芳香化酶抑制剂(AIs)无论起始应用,还是在TAM治疗不同时间后换用均相对5年TAM的治疗显著提高了无病生存率;在以换药为基础的临床试验也观察到了总生存率的改善,故AIs已成为绝经后辅助内分泌治疗的标准药物之一,但是对于AIs治疗的佳药物、佳方案和佳时间以及用药的佳顺序策略、以及在绝经前患者中的(与卵巢抑制联合)临床价值尚不明确,目前仍未能得出统一的答案,值得进一步探讨.

    作者:林燕苹;陆劲松;邵志敏;沈镇宙 刊期: 2009年第02期

  • 胸段硬膜外阻滞复合七氟醚麻醉对兔缺氧性肺损伤时炎症因子的影响

    目的 观察胸段硬膜外阻滞复合七氟醚麻醉对兔缺氧性肺损伤时炎症因子的影响.方法 健康新西兰大白兔28只,随机分为4组(n=7):对照组(C组)、缺氧组(H组)、七氟醚组(S组)和硬膜外复合七氟醚组(ES组).ES组硬膜外导管首剂注入1%利多卡因3 mg/kg,此后每小时追加该剂量.麻醉后气管插管,机械通气,H组、S组和ES组吸入14%的氮氧混合气体,直至PaO2/FiO2<300,急性肺损伤(ALI)模型建立,并于自主呼吸(T0),模型建立后15 min、30 min、1 h、2 h 和3 h(T1-5)测PaO2.C组始终吸21%的氧气,并于相应时点测PaO2.于T0和T5时抽右颈动脉血5 mL,测血清IL-6、IL-8和IL-10浓度.结果 H组、S组和ES组在缺氧15 min后建立急性肺损伤模型.H组T5时的IL-6和IL-8分别为(94.1±15.1)和(59.5±14.9)pg/mL,S组此时的IL-6和IL-8分别为(90.2±17.3)和(53.9±8.7)pg/mL,均较T0时显著升高(P<0.05).两组T5时的IL-10分别为(24.9±7.6)和(25.2±4.9)pg/mL,较T0时显著降低(P<0.05).ES组T5时的IL-6为(56.2±19.9)pg/mL,显著低于H组和S组(P<0.05),较C组无显著差异(P>0.05),H组和S组该时点的IL-6浓度显著高于C组(P<0.05).结论 胸段硬膜外阻滞复合七氟醚麻醉可抑制兔缺氧性肺损伤时的炎症反应.

    作者:仓静;王丽珺;薛张纲 刊期: 2009年第02期

  • GlideScope视频喉镜和Macintosh直接喉镜在颈椎制动患者气管插管中的比较

    目的 比较GlideScope视频喉镜和Macintosh直接喉镜在颈椎制动患者气管插管中的难易,及两种工具插管对血液动力学的影响.方法 拟在经口气管插管全身麻醉下行择期手术的患者60例,ASA Ⅰ级,年龄18~60岁,随机分为G组和M组(n=30).常规麻醉诱导后,手法制动头颈部,G组采用GlideScope视频喉镜,M组用Macintosh直接喉镜行气管插管.分析比较两组声门暴露情况(Cormark-Lehane分级)以及暴露时间,试插次数,失败例数,有无助手辅助,插管前后心率与收缩压乘积(rate-pressure product,RPP)变化.结果 与M组比较,G组声门暴露情况较好,但暴露时间显著延长(P<0.05).M组需要助手辅助及插管失败的比例均高于G组.两组RPP的变化在各个时点无显著差别.结论 在为颈椎制动患者气管插管中,GlideScope视频喉镜能够更好的显露声门,降低插管难度,提高插管的成功率.

    作者:徐振东;张军;李琼;李佩盈;梁伟民 刊期: 2009年第02期

  • 山楂叶总黄酮降血脂防治鹌鹑脂肪肝形成的实验研究

    目的 研究不同浓度的山楂叶总黄酮对鹌鹑血脂和脂肪肝形成的防治作用.方法 将60只雌、雄各半的鹌鹑分成6组:正常组(N)喂以普通饲料;高脂饮食模型组(M)喂以高胆固醇脂饲料,诱发形成脂肪肝模型;脂必妥药物对照组(ZBT)、山楂叶总黄酮低、中、高浓度实验组(HLF1、HLF2、HLF3)在喂高脂饲料的同时分别喂1 g/kg体重ZBT、20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg体重山楂叶总黄酮溶液各1 mL.实验6个月后取动物血清、肝脏,检测动物血清、肝脏组织中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷丙转氨酶(AST)、谷草转氨酶(ALT)的含量,制备鹌鹑肝脏组织石蜡切片和电镜切片观察其病理学变化.结果 山楂叶总黄酮实验各组与模型组相比,其血清和肝脏匀浆液的TC、TG、LDL-C、MDA、AST、ALT等含量均显著下降(P<0.001),而HDL-C、GSH、SOD含量则明显上升(P<0.001),且山楂叶总黄酮的浓度呈明显的量效关系.石蜡切片和电镜切片也显示山楂叶总黄酮实验组动物肝脏中的脂质积累和脂肪肝病理学变化明显轻于模型组.结论 山楂叶总黄酮具有明显降低血脂、减轻动物肝脏内各类脂质沉积的作用,还具有很好的抗氧化作用,能显著地保护肝脏组织的生理生化功能,对由高脂饮食引起的高血脂和脂肪肝具有明显的防治作用.

    作者:叶希韵;徐敏华;李晓峰;王耀发 刊期: 2009年第02期

  • 改良光棒与直接喉镜在气管插管中的应用比较

    目的 比较改良光棒和直接喉镜气管内插管成功率、口腔损伤和血流动力学的影响,评价改良光棒在临床麻醉中的应用效果.方法 200例根据美国麻醉医师协会体格情况分级(ASA)Ⅰ~Ⅱ级拟行气管插管病人随机分改良光棒组(A组,n=100)和喉镜组(B组,n=100).根据综合气道评估分为Ⅰ~Ⅳ级,记录入室后、诱导后、插管即刻、插管后1 min、3 min、5 min的收缩压(SAP)、舒张压(DAP)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脉搏血氧饱和度(SpO2)变化,及插管成功率、插管时间、口腔损伤、插管后并发症的发生情况.结果 两组插管成功率分别为 A组97%,B组为90% .A组的成功率明显高于B组(P<0.05).气道分级Ⅳ级的病人插管成功率A组(100%)明显高于B组(50%)(P<0.05).插管后即刻、插管后1 min B组病人的SBP、DBP、MAP、HR循环指标较A组明显升高,有显著性差异(P<0.05).口腔损伤和并发症B组明显高于A组(P<0.05).结论 改良光棒插管成功率高、口腔损伤少、对血流动力学影响较轻,是一种成功率高、损伤轻、安全、有效、轻便的气管插管器具.

    作者:李彩霞;刘伟;陈春欢;徐文庆 刊期: 2009年第02期

  • Ebp1基因对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖的抑制作用

    目的 研究异位表达ebp1基因对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖能力的影响.方法 pcDNA3.1-ebp1真核表达载体稳定转染舌鳞状细胞癌细胞系(Tca8113).Western blot和RT-PCR验证稳定转染细胞中ebp1的表达;观察细胞生长、增殖,细胞周期改变,通过软琼脂克隆形成,裸小鼠体内成瘤等方法来评价ebp1抑制肿瘤细胞生长的作用.结果 Ebp1转染细胞的细胞生长、增殖明显受抑制,细胞周期改变,G0/G1和G2/M细胞增多,而S期细胞减少,软琼脂克隆形成率明显下降;移植小鼠模型中肿瘤平均直径和重量Tca-0细胞明显大于Tca-1细胞和Tca-3细胞.结论 Ebp1异位表达对Tca8113有多种抗肿瘤特性,可进一步探讨将ebp1基因作为舌鳞状细胞癌的治疗措施的可能性.

    作者:王庆;余优成;陈万涛;潘红芽;张志愿;陶凤娟 刊期: 2009年第02期

  • GLUT1和VEGF在肾癌组织中的表达及其临床意义

    目的 观察葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学的方法检测60例肾透明细胞癌患者的肿瘤组织、瘤旁肾组织以及远离肿瘤的正常肾组织中GLUT1和VEGF的表达,并结合肾癌患者的临床病理特征进行比较.用Western blot法来进一步验证肿瘤组织和正常组织中GLUT1表达的差异.结果 GLUT1在肾癌组织中的表达高于瘤旁肾组织和正常肾组织(P<0.001);在直径≥5 cm的肿瘤中的表达强度高于直径<5 cm的肿瘤(P=0.033).与局限期(TNMⅠ+Ⅱ期)肾癌相比,进展期(TNMⅢ+Ⅳ期)肾癌有高表达GLUT1的趋势(P=0.085).但在不同分级的肾癌组织中,GLUT1表达没有差异.Western blot 检测结果也表明肾癌组织中GLUT1的表达明显高于相对应的正常肾组织.VEGF在肾癌组织中的表达高于瘤旁肾组织和正常肾组织(P=0.001);在直径≥5 cm的肿瘤中的表达强度要高于直径<5 cm的肿瘤(P=0.017).进展期肾癌VEGF的表达水平明显高于局限期肾癌(P=0.017).在不同分级的肾癌组织中,VEGF的表达也没有发现差异.GLUT1的表达与VEGF的表达呈正相关(r=0.307,P=0.017).结论 GLUT1和VEGF的表达与肾透明细胞癌的临床病理特征存在一定联系,两者可能共同参与了肾透明细胞癌的发生、发展.

    作者:许乐;林宗明;陈莲;陈弘;刘宇军;鲁继东;张立;王国民 刊期: 2009年第02期

  • 第三届复旦-MDACC诊断病理新进展研讨会通知

    第三届复旦-MDACC诊断病理新进展研讨会将于2009年6月4日-8日在上海复旦大学附属肿瘤医院举行.本届研讨会由复旦大学附属肿瘤医院与美国M. D. 安德森癌症中心联合主办,上海市医学会病理专科委员会、上海复旦临床病理诊断中心以及美国M. D. 安德森癌症中心全球学术项目部 (Global Academic Program)协办.会议期间(6月5日)还将举行复旦大学附属肿瘤医院病理科建科60周年庆典暨2009上海市病理工作者联谊活动.

    作者: 刊期: 2009年第02期

  • 大鼠面神经支配的口轮匝肌及腓肠肌对罗库溴铵敏感性的比较

    目的 比较非去极化肌松药罗库溴铵对大鼠面神经支配的口轮匝肌及体神经支配的腓肠肌的诱发肌电位(EEMG)的抑制程度.方法 制作10例大鼠右侧面神经主干压榨伤模型,取正常和损伤侧口轮匝肌及正常腓肠肌离体肌条分为3组,分别记录电刺激法诱发的肌张力振幅;观察梯度浓度罗库溴铵作用下,3组肌条的肌张力振幅变化程度,以肌张力振幅抑制百分比(MTAI%)表示EEMG抑制程度.结果 3组肌条的MTAI%均随罗库溴铵浓度升高而呈剂量依赖性地增加;在不同浓度罗库溴铵水平下,腓肠肌的MTAI%均大于口轮匝肌的MTAI%(P<0.05);而正常和损伤侧口轮匝肌的MTAI%比较没有显著的统计学意义.结论 面神经支配的口轮匝肌对非去极化肌松药罗库溴铵的敏感性明显低于肢体神经支配的腓肠肌,而这种差异没有表现在正常和损伤面神经支配的肌肉间.

    作者:周汝元;吴淦桐;王浩;李绍清;陈莲华 刊期: 2009年第02期

  • 慢性进行性眼外肌麻痹的临床、病理和诊断(附12例报道)

    目的 探讨进行性眼外肌麻痹(CPEO)的临床、病理特点及诊断.方法 对我院肌肉活检确诊的12例CPEO的临床、病理和诊断进行分析.结果 12例患者中男6例,女6例,平均起病年龄11.6岁.2例为同胞兄弟.12例均有进行性加重的双上睑下垂和眼球活动障碍,其中1例起病不对称.除眼外肌麻痹外,4例闭目肌力减退,1例轻度肢体无力,3例有内分泌异常.1例血清静止乳酸有轻度增高,2例CK、LDH轻度增高,5例EMG呈轻度肌源性损害.肌活检破碎红纤维(RRF)阳性肌纤维数和细胞色素氧化酶(COX)阴性肌纤维数均明显>2%.结论 CPEO临床表现为进行性发展的眼外肌麻痹,主要为上睑下垂和眼球运动障碍,仅少数患者有复视,部分患者有轻度肢体无力和不能耐受疲劳.诊断主要依赖肌活检病理发现不同数量的RRF和COX缺失纤维.

    作者:孙莉;卢家红;陆肇曾 刊期: 2009年第02期

  • 经尿道切除术后并发尿道狭窄的原因及技术改良

    目的 探索经尿道切除(transurethral resection,TUR)手术后患者尿道狭窄形成原因及其改良方法.方法 对我院2003年7月至2007年3月间进行的740例TUR手术后发生的尿道狭窄患者28例进行回顾性分析讨论,并对2007年3月至2008年4月进行254例手术方式改良的患者进行前瞻性研究,随访3~15个月,有3名患者出现不同程度狭窄.比较两组患者尿道狭窄发生率的差异.结果 TUR术后尿道狭窄的发生部位依次位于尿道外口、膀胱颈口、前列腺部、球膜部及阴茎体部,经过技术改良后,尿道狭窄的发生率明显下降(P<0.05).结论 尿道狭窄是TUR手术后常见并发症,但是可以在技术上改良以减少其发生率.

    作者:陆勇;丁强;徐可;王翔 刊期: 2009年第02期

  • 钛表面塑性变形纳米化对MC3T3细胞黏附的影响

    目的 研究纯钛表面塑性变形纳米化后对小鼠成骨细胞株MC3T3细胞黏附等生物学行为的影响.方法 应用塑性变形技术使纯钛表面纳米化,钛板大小10 mm×10 mm×1 mm.未处理纯钛为对照组(n=6),塑性变形纳米化钛板为实验组(n=6).扫描电镜观察MC3T3细胞在材料表面的黏附形态,荧光显微镜检测细胞黏附的数目,应用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞骨架肌动蛋白的特点.结果 扫描电镜下观察表明,MC3T3细胞是以多个大小不等的胞突黏附于纳米化钛板表面,细胞表现良好的伸展形态;荧光显微镜显示,细胞在纳米化钛板表面的黏附能力较表面未处理钛板明显提高(P<0.05);激光共聚焦扫描显微镜下观察发现,纳米化钛板表面结构能促进细胞骨架肌动蛋白纤维的充分铺展.结论 纯钛表面塑性变形纳米化后,能明显促进MC3T3细胞在其表面的黏附和铺展,改善了纯钛的生物相容性.

    作者:陶凤娟;余优成;陈万涛;万鹏波;叶冬霞;于晓平;王庆 刊期: 2009年第02期

  • 内皮细胞生物反应器构建的初步研究

    目的 采用培养液循环式人工毛细管培养系统构建血管内皮细胞生物反应器,并对其形态和功能进行鉴定.方法 将内皮细胞种植于无纺布中空纤维生物反应器的外腔,用培养液循环式人工毛细管培养系统进行培养,定期检测培养液中乳酸、葡萄糖、一氧化氮(nitrogen oxide,NO)和血管性血友病因子(von Willebrand Factor,vWf)的浓度.根据乳酸的浓度变化计算反应器内细胞的数量,通过葡萄糖的消耗和NO、vWf的产生反映内皮细胞的活力和功能.对其中的无纺布进行电镜、DAPI染色荧光显微镜检查,观察内皮细胞在生物反应器外腔无纺布上的生长情况.结果 随着时间变化,培养液中的乳酸浓度进行性升高,升高的速度逐渐增大;葡萄糖浓度则逐渐降低,降低的速度逐渐增大;反映内皮细胞功能的NO在初数小时轻度降低后也逐渐升高;在培养液中检测出内皮细胞的特异性标志物vWf;荧光显微镜和电镜下观察细胞在无纺布上生长良好,并具有内皮细胞的形态.结论 血管内皮细胞能在无纺布中空纤维生物反应器外腔的无纺布上生长,并具有良好的形态和功能,提示未来在治疗脓毒症中的潜在价值.

    作者:谢琼虹;丁峰;刘骏峰;尤莉;钟建泳;李冰;李一;顾勇;林善锬 刊期: 2009年第02期

  • 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体与放、化疗联合应用诱导喉癌Hep-2细胞凋亡途径研究

    目的 探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的敏感性及其与放、化疗联用时的凋亡途径.方法 采用CCK-8法检测TRAIL、顺铂、紫杉醇作用下Hep-2细胞生长抑制率;流式细胞仪检测Hep-2细胞凋亡率; Western blot法检测Hep-2细胞内caspase蛋白表达变化.结果 Hep-2细胞对TRAIL诱导的凋亡不敏感,24 h IC50为596.92 μg/L;顺铂、紫杉醇、放射线与TRAIL联合应用时Hep-2细胞凋亡率显著高于单药应用(P<0.05);caspase-9抑制剂Z-LETD-FMK使TRAIL、顺铂、紫杉醇对Hep-2细胞的生长抑制率显著下降(P<0.05);联合用药组caspase-8、caspase-9表达量均有显著升高(P<0.05).结论 人喉癌Hep-2细胞对TRAIL诱导的细胞凋亡不敏感,TRAIL通过内源性途径诱导Hep-2细胞凋亡;活化后的caspase-9、caspase-3通过环状反馈作用激活caspase-8,增强了Hep-2细胞对TRAIL的敏感性,是联合用药对Hep-2细胞发挥协同效应的机制之一.

    作者:张明;周梁;田洁 刊期: 2009年第02期

  • 职校学生健康危险行为的影响因素及其作用方式

    目的 探讨外部因素和自身因素对职校生健康危险行为的直接和间接影响,为干预活动提供依据.方法 以上海市3所职业学校所有2005年入学的一年级学生为调查对象,采用结构式匿名问卷调查的方式收集有关健康危险行为的信息.结果 亲子关系越好,越少发生健康危险行为;同伴认同度越高越容易发生健康危险行为;同伴认同比亲子关系对职校生健康危险行为的影响更大.此外,自我评价高的对象发生健康危险行为的可能性增加,未发现职校生的学校支持对健康危险行为有直接影响,但对自我评价有积极影响.结论 亲子关系和同伴认同是影响职校生健康危险行为的两个重要因素,提示可利用同伴和家庭资源来有效减少职校生健康危险行为的发生.

    作者:楼超华;廉启国;涂晓雯;高尔生 刊期: 2009年第02期

  • 年龄对正常成年人视网膜神经纤维层厚度的影响

    目的 使用偏振激光扫描仪对部分健康的中国成年人视网膜神经纤维层(RNFL)厚度进行测定,评估年龄和RNFL厚度之间的关系.方法 使用GDxVCC神经纤维分析仪的两种不同检测模式(可变角膜补偿,VCC;强化角膜补偿,ECC)测定150例患者共150眼的视网膜神经纤维层厚度.测量参数包括:颞侧-上方-鼻侧-下方-颞侧平均(TSNITave)、上方平均(Superiorave)、下方平均(Inferiorave)、TSNIT标准差(TSNITstdDev)、和神经纤维指数(NFI).结果 VCC检测模式得到的TSNITave、Superiorave、Inferiorave、TSNITstdDev、NFI平均值分别为(57.12±6.26),(69.35±4.21),(67.59±7.06),(25.46±4.02),(17.35±7.59).ECC检测模式五项检测值分别为:(56.15±5.32),(68.24±6.63),(66.90±2.40),(24.80±6.76),(18.84±8.51).VCC和ECC模式的检测值之间的差异不具统计学意义.在总样本人群中检测参数指标与年龄存在统计学意义的相关性.而在40岁以上人群中检测参数指标与年龄未发现相关性.结论 VCC和ECC模式对检测150例正常国人视网膜神经纤维层厚度的检测值之间不存在统计学差异.对21~70岁的健康人眼中,RNFL厚度检测值随年龄增长而变薄,但在40岁以上人群中未见此改变.

    作者:马晓昀;徐格致 刊期: 2009年第02期

  • RNA干扰VEGF-C基因下调COX-2、Bcl-2表达对乳腺癌细胞凋亡的影响

    目的 利用人血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)小RNA干扰(siRNA)表达载体--重组质粒pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA,研究VEGF-C基因下调抑制COX-2、Bcl-2表达及对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435的体外作用.方法 pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA表达质粒和阴性对照质粒稳定转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-435,RT-PCR和Western blot检测转染前后VEGF-C、COX-2基因和VEGF-C、COX-2、Bcl-2蛋白的表达;MTT法和流式细胞仪检测VEGF-C RNA干扰对细胞的作用.结果 pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA转染乳腺癌细胞MDA-MB-435,VEGF-C基因和蛋白水平表达量明显降低,COX-2和Bcl-2表达下调,细胞体外活性下降,72 h后凋亡率达60%.结论 针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体抑制VEGF-C表达的同时下调COX-2和Bcl-2的表达,促进乳腺癌细胞MDA-MB-435的凋亡.

    作者:顾斐;邹强;倪泉兴 刊期: 2009年第02期

  • 温血停跳液再灌注对大鼠热缺血供心的心肌保护作用

    目的 研究温血停跳液再灌注对大鼠热缺血供心的心肌保护作用.方法 24只SD大鼠随机分为对照组(A组,n=8,无热缺血,冷缺血4 h,常规心肌保护)、热缺血组(B组,n=8,热缺血10 min,冷缺血4 h,常规心肌保护)、温血停跳液再灌注组(C组,n=8,热缺血10 min,冷缺血4 h,常规心肌保护后添加温血停跳液再灌注).保存结束后建立Langendorff模型:观察复苏情况,检测冠状静脉窦溢出液(C组检测冠状静脉窦回血)内心肌酶水平,测定平均冠脉流量,描记左室内压波形,计算相应血流动力学指标,测定心肌组织含水量,行组织学检查.结果 A组、C组心脏复苏显著优于B组,前者在复灌初始即全部恢复窦性心律,后者复灌初始全部为室颤,须经历15~20 min恢复窦性心律,其中一只经反复按压至实验结束仍未复律.B组、C组心肌酶漏出水平分别如下.CK:(2 191.25±1 408.08)U/L、(2 918.63±1 194.55)U/L;CK-MB:(82.13±37.08)U/L、(472.25±133.74)U/L;AST:(71.25±27.91)U/L、(323.38±102.98)U/L;LDH:(189.50±71.34)U/L、(1 548.38±943.62)U/L,均显著高于A组;A组[CK:(94.00±99.42)U/L;CK-MB:(14.75±9.33)U/L;AST:(12.13±8.59)U/L;LDH:(35.75±28.95)U/L](P<0.01).A组平均冠脉流量为(8.71±1.42)mL/min显著大于B组流量(6.56±1.54)mL/min (P<0.05),C组平均冠脉流量为(7.96±1.17)mL/min,与A组无统计学差异(P>0.05).A组和C组心率(HR)、左室内压上升支大斜率(+dp/dt max)、左室内压下降支大斜率(-dp/dt max)分别为HR:(248.22±36.56)bpm、(266.07±27.75)bpm,+dp/dt max:(144.32±32.89)kPa/s、(147.04±27.04)kPa/s,-dp/dt max:(126.81±35.07)kPa/s、(141.96±31.83)kPa/s,两组之间无统计学差异(P>0.05).B组HR、+dp/dt max 、-dp/dt max分别为(177.88±83.96)bpm、(41.33±42.13)kPa/s、(31.77±31.14)kPa/s,显著低于A组(P<0.05).B组、C组心肌含水量分别为(81.10±1.24)%和(80.52±0.90)%,均显著高于A组(78.90±1.33)%(P<0.05).B组较A组、C组心肌及冠脉内皮组织学损伤严重.结论 温血停跳液再灌注显著减少大鼠热缺血供心缺血再灌注损伤,改善复苏及复苏后血流动力学.

    作者:刘欢;郑佳予;宋凯;洪涛 刊期: 2009年第02期

  • iNOS抑制剂1400W对宫颈癌HeLa细胞株生长的抑制作用

    目的 探讨诱导型一氧化氮合酶抑制剂1 400 W单独或者联合顺铂对宫颈癌HeLa 细胞株生长及凋亡的影响.方法 培养宫颈癌HeLa 细胞株,应用MTT法检测1 400 W及顺铂对HeLa细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测1 400 W及顺铂对HeLa细胞凋亡的影响;RT-PCR检测1 400 W及顺铂对HeLa细胞E6,p53 mRNA表达的影响.结果 1 400 W和顺铂均能抑制HeLa细胞生长,其抑制作用与剂量呈正相关.1 400 W单药并不增加HeLa细胞凋亡,而1 400 W联合顺铂后明显增加HeLa细胞凋亡(P<0.05),两者联合也使HeLa细胞E6,p53 mRNA表达明显下降(P<0.05).结论 1 400 W及顺铂均可抑制HeLa细胞增殖.1 400 W联合顺铂明显增加宫颈癌HeLa细胞凋亡率,并且较单独使用顺铂时作用更显著.顺铂联合iNOS抑制剂抗肿瘤可能是一种更有希望的新辅助疗法.

    作者:叶君;孙红 刊期: 2009年第02期

复旦学报(医学版)杂志

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