许乐；林宗明；陈莲；陈弘；刘宇军；鲁继东；张立；王国民
目的 克隆肺炎链球菌自溶素(LytA)基因并在大肠埃希菌中表达及蛋白纯化.方法 用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将其插入原核表达载体pET32a(+),构建pET32a(+)-LytA重组质粒,经IPTG诱导使该基因在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,亲和层析法纯化目的 蛋白,将获得的蛋白用Western blot 鉴定.结果 扩增出的DNA序列与GenBank中的LytA基因序列一致,成功构建了pET32a(+)-LytA重组质粒并在大肠埃希菌中高效表达,所表达的蛋白经Western blot证实为肺炎链球菌自溶素融合蛋白.结论 成功克隆了肺炎链球菌自溶素基因,并将其在大肠埃希菌中表达、纯化,为新型肺炎链球菌疫苗的研制奠定了基础.
作者：徐江红；陈兵；章德广；郭建；顾凌澜 刊期： 2009年第02期
目的 研究温血停跳液再灌注对大鼠热缺血供心的心肌保护作用.方法 24只SD大鼠随机分为对照组(A组,n=8,无热缺血,冷缺血4 h,常规心肌保护)、热缺血组(B组,n=8,热缺血10 min,冷缺血4 h,常规心肌保护)、温血停跳液再灌注组(C组,n=8,热缺血10 min,冷缺血4 h,常规心肌保护后添加温血停跳液再灌注).保存结束后建立Langendorff模型:观察复苏情况,检测冠状静脉窦溢出液(C组检测冠状静脉窦回血)内心肌酶水平,测定平均冠脉流量,描记左室内压波形,计算相应血流动力学指标,测定心肌组织含水量,行组织学检查.结果 A组、C组心脏复苏显著优于B组,前者在复灌初始即全部恢复窦性心律,后者复灌初始全部为室颤,须经历15～20 min恢复窦性心律,其中一只经反复按压至实验结束仍未复律.B组、C组心肌酶漏出水平分别如下.CK:(2 191.25±1 408.08)U/L、(2 918.63±1 194.55)U/L;CK-MB:(82.13±37.08)U/L、(472.25±133.74)U/L;AST:(71.25±27.91)U/L、(323.38±102.98)U/L;LDH:(189.50±71.34)U/L、(1 548.38±943.62)U/L,均显著高于A组;A组[CK:(94.00±99.42)U/L;CK-MB:(14.75±9.33)U/L;AST:(12.13±8.59)U/L;LDH:(35.75±28.95)U/L](P<0.01).A组平均冠脉流量为(8.71±1.42)mL/min显著大于B组流量(6.56±1.54)mL/min (P<0.05),C组平均冠脉流量为(7.96±1.17)mL/min,与A组无统计学差异(P>0.05).A组和C组心率(HR)、左室内压上升支大斜率(+dp/dt max)、左室内压下降支大斜率(-dp/dt max)分别为HR:(248.22±36.56)bpm、(266.07±27.75)bpm,+dp/dt max:(144.32±32.89)kPa/s、(147.04±27.04)kPa/s,-dp/dt max:(126.81±35.07)kPa/s、(141.96±31.83)kPa/s,两组之间无统计学差异(P>0.05).B组HR、+dp/dt max 、-dp/dt max分别为(177.88±83.96)bpm、(41.33±42.13)kPa/s、(31.77±31.14)kPa/s,显著低于A组(P<0.05).B组、C组心肌含水量分别为(81.10±1.24)%和(80.52±0.90)%,均显著高于A组(78.90±1.33)%(P<0.05).B组较A组、C组心肌及冠脉内皮组织学损伤严重.结论 温血停跳液再灌注显著减少大鼠热缺血供心缺血再灌注损伤,改善复苏及复苏后血流动力学.
作者：刘欢；郑佳予；宋凯；洪涛 刊期： 2009年第02期
目的 探讨外部因素和自身因素对职校生健康危险行为的直接和间接影响,为干预活动提供依据.方法 以上海市3所职业学校所有2005年入学的一年级学生为调查对象,采用结构式匿名问卷调查的方式收集有关健康危险行为的信息.结果 亲子关系越好,越少发生健康危险行为;同伴认同度越高越容易发生健康危险行为;同伴认同比亲子关系对职校生健康危险行为的影响更大.此外,自我评价高的对象发生健康危险行为的可能性增加,未发现职校生的学校支持对健康危险行为有直接影响,但对自我评价有积极影响.结论 亲子关系和同伴认同是影响职校生健康危险行为的两个重要因素,提示可利用同伴和家庭资源来有效减少职校生健康危险行为的发生.
作者：楼超华；廉启国；涂晓雯；高尔生 刊期： 2009年第02期
目的 研究异位表达ebp1基因对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖能力的影响.方法 pcDNA3.1-ebp1真核表达载体稳定转染舌鳞状细胞癌细胞系(Tca8113).Western blot和RT-PCR验证稳定转染细胞中ebp1的表达;观察细胞生长、增殖,细胞周期改变,通过软琼脂克隆形成,裸小鼠体内成瘤等方法来评价ebp1抑制肿瘤细胞生长的作用.结果 Ebp1转染细胞的细胞生长、增殖明显受抑制,细胞周期改变,G0/G1和G2/M细胞增多,而S期细胞减少,软琼脂克隆形成率明显下降;移植小鼠模型中肿瘤平均直径和重量Tca-0细胞明显大于Tca-1细胞和Tca-3细胞.结论 Ebp1异位表达对Tca8113有多种抗肿瘤特性,可进一步探讨将ebp1基因作为舌鳞状细胞癌的治疗措施的可能性.
作者：王庆；余优成；陈万涛；潘红芽；张志愿；陶凤娟 刊期： 2009年第02期
目的 采用培养液循环式人工毛细管培养系统构建血管内皮细胞生物反应器,并对其形态和功能进行鉴定.方法 将内皮细胞种植于无纺布中空纤维生物反应器的外腔,用培养液循环式人工毛细管培养系统进行培养,定期检测培养液中乳酸、葡萄糖、一氧化氮(nitrogen oxide,NO)和血管性血友病因子(von Willebrand Factor,vWf)的浓度.根据乳酸的浓度变化计算反应器内细胞的数量,通过葡萄糖的消耗和NO、vWf的产生反映内皮细胞的活力和功能.对其中的无纺布进行电镜、DAPI染色荧光显微镜检查,观察内皮细胞在生物反应器外腔无纺布上的生长情况.结果 随着时间变化,培养液中的乳酸浓度进行性升高,升高的速度逐渐增大;葡萄糖浓度则逐渐降低,降低的速度逐渐增大;反映内皮细胞功能的NO在初数小时轻度降低后也逐渐升高;在培养液中检测出内皮细胞的特异性标志物vWf;荧光显微镜和电镜下观察细胞在无纺布上生长良好,并具有内皮细胞的形态.结论 血管内皮细胞能在无纺布中空纤维生物反应器外腔的无纺布上生长,并具有良好的形态和功能,提示未来在治疗脓毒症中的潜在价值.
作者：谢琼虹；丁峰；刘骏峰；尤莉；钟建泳；李冰；李一；顾勇；林善锬 刊期： 2009年第02期
目的 研究不同浓度的山楂叶总黄酮对鹌鹑血脂和脂肪肝形成的防治作用.方法 将60只雌、雄各半的鹌鹑分成6组:正常组(N)喂以普通饲料;高脂饮食模型组(M)喂以高胆固醇脂饲料,诱发形成脂肪肝模型;脂必妥药物对照组(ZBT)、山楂叶总黄酮低、中、高浓度实验组(HLF1、HLF2、HLF3)在喂高脂饲料的同时分别喂1 g/kg体重ZBT、20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg体重山楂叶总黄酮溶液各1 mL.实验6个月后取动物血清、肝脏,检测动物血清、肝脏组织中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷丙转氨酶(AST)、谷草转氨酶(ALT)的含量,制备鹌鹑肝脏组织石蜡切片和电镜切片观察其病理学变化.结果 山楂叶总黄酮实验各组与模型组相比,其血清和肝脏匀浆液的TC、TG、LDL-C、MDA、AST、ALT等含量均显著下降(P<0.001),而HDL-C、GSH、SOD含量则明显上升(P<0.001),且山楂叶总黄酮的浓度呈明显的量效关系.石蜡切片和电镜切片也显示山楂叶总黄酮实验组动物肝脏中的脂质积累和脂肪肝病理学变化明显轻于模型组.结论 山楂叶总黄酮具有明显降低血脂、减轻动物肝脏内各类脂质沉积的作用,还具有很好的抗氧化作用,能显著地保护肝脏组织的生理生化功能,对由高脂饮食引起的高血脂和脂肪肝具有明显的防治作用.
作者：叶希韵；徐敏华；李晓峰；王耀发 刊期： 2009年第02期
目的 提高对少见类型肝脏原发性恶性肿瘤的诊疗水平.方法 收集我院经手术病理确诊的少见类型肝脏原发性恶性肿瘤40例,对各种类型肝脏原发性恶性肿瘤的临床特点进行回顾性总结.结果 少见类型的原发性肝脏恶性肿瘤占同期所有原发性肝脏恶性肿瘤手术病例的0.74%(40/5 487),包括12种病理类型:血管肉瘤6例,平滑肌肉瘤5例,恶性纤维组织细胞瘤5例,横纹肌肉瘤1例,胚胎性肉瘤1例,上皮样血管内皮瘤1例,淋巴瘤5例,囊腺癌4例,类癌3例,鳞癌2例,腺鳞癌3例,癌肉瘤4例.临床表现无症状者21例;右上腹痛者12例,其中肝肿瘤破裂1人;上腹不适者5例,黄疸2例,发热1例.实验室检查中32.5%HBsAg阳性(13/40),CT检查无1例直接确诊,其中3例肝脏淋巴瘤诊断为血管瘤或慢性炎症,3例肝肉瘤分别诊断为慢性炎症、血管瘤或囊腺瘤,2例鳞癌全部误诊为肝结核或肝囊肿,1例类癌诊断为纤维板层癌,1例囊腺癌诊断为肝囊肿,其余病例术前CT诊断均为肝脏恶性肿瘤.预后方面,4例肝淋巴瘤和2例肝囊腺癌生存期超过5年;肝肉瘤1年生存率超过50%,但3年生存率不超过25%;5例肝脏鳞癌、腺鳞癌病例均在术后1年内死亡.结论 各种少见类型的肝脏原发性恶性肿瘤临床表现无特异性,实验室检查中亦无血清特异性肿瘤标志物,影像学与肝细胞肝癌和某些肝脏良性肿瘤很难鉴别,术前诊断十分困难.治疗仍以手术切除为主,预后以肝囊腺癌和肝淋巴瘤预后较好,以肝脏鳞癌和腺鳞癌预后差.
作者：王天浩；潘志刚；任正刚 刊期： 2009年第02期
目的 观察葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学的方法检测60例肾透明细胞癌患者的肿瘤组织、瘤旁肾组织以及远离肿瘤的正常肾组织中GLUT1和VEGF的表达,并结合肾癌患者的临床病理特征进行比较.用Western blot法来进一步验证肿瘤组织和正常组织中GLUT1表达的差异.结果 GLUT1在肾癌组织中的表达高于瘤旁肾组织和正常肾组织(P<0.001);在直径≥5 cm的肿瘤中的表达强度高于直径<5 cm的肿瘤(P=0.033).与局限期(TNMⅠ+Ⅱ期)肾癌相比,进展期(TNMⅢ+Ⅳ期)肾癌有高表达GLUT1的趋势(P=0.085).但在不同分级的肾癌组织中,GLUT1表达没有差异.Western blot 检测结果也表明肾癌组织中GLUT1的表达明显高于相对应的正常肾组织.VEGF在肾癌组织中的表达高于瘤旁肾组织和正常肾组织(P=0.001);在直径≥5 cm的肿瘤中的表达强度要高于直径<5 cm的肿瘤(P=0.017).进展期肾癌VEGF的表达水平明显高于局限期肾癌(P=0.017).在不同分级的肾癌组织中,VEGF的表达也没有发现差异.GLUT1的表达与VEGF的表达呈正相关(r=0.307,P=0.017).结论 GLUT1和VEGF的表达与肾透明细胞癌的临床病理特征存在一定联系,两者可能共同参与了肾透明细胞癌的发生、发展.
作者：许乐；林宗明；陈莲；陈弘；刘宇军；鲁继东；张立；王国民 刊期： 2009年第02期
规范瞬时受体电位离子通道(canonical transient receptor potential channel,TRPC)对钠和钙离子具有通透性.各种TRPC同聚体或异聚体复合物调节着血管中平滑肌和内皮细胞的诸多生理功能,它们的异常表达通常与高血压、内皮通透性增加等疾病的发生相关,是导致血管重构的重要分子基础.因此,研究TRPC在血管重构过程中的作用,能够为疾病的治疗提供新思路.
作者：顾明；李芳萍；张雪梅 刊期： 2009年第02期
目的 应用黏接再植术及牙周翻瓣植骨术对后牙冠根纵折伴牙周脓肿手术治疗的疗效进行评价.方法 选择50例患者的52颗后牙冠根纵折伴牙周脓肿的患牙进行完整拔除、牙槽窝修整、患牙体外根管治疗、黏接再植、牙周翻瓣植骨术.从临床症状、探诊深度、龈沟出血指数、松动度和影像学评价治疗效果.结果 经3年的随访,50例患者的52颗后牙冠根纵折患牙的临床疗效达81%.结论 后牙冠根纵折伴牙周脓肿采用黏接再植和牙周翻瓣植骨术的综合治疗,是一种保存自体牙的有效技术.
作者：俞立英；黄丽娟；吴斌 刊期： 2009年第02期
目的 比较GlideScope视频喉镜和Macintosh直接喉镜在颈椎制动患者气管插管中的难易,及两种工具插管对血液动力学的影响.方法 拟在经口气管插管全身麻醉下行择期手术的患者60例,ASA Ⅰ级,年龄18～60岁,随机分为G组和M组(n=30).常规麻醉诱导后,手法制动头颈部,G组采用GlideScope视频喉镜,M组用Macintosh直接喉镜行气管插管.分析比较两组声门暴露情况(Cormark-Lehane分级)以及暴露时间,试插次数,失败例数,有无助手辅助,插管前后心率与收缩压乘积(rate-pressure product,RPP)变化.结果 与M组比较,G组声门暴露情况较好,但暴露时间显著延长(P<0.05).M组需要助手辅助及插管失败的比例均高于G组.两组RPP的变化在各个时点无显著差别.结论 在为颈椎制动患者气管插管中,GlideScope视频喉镜能够更好的显露声门,降低插管难度,提高插管的成功率.
作者：徐振东；张军；李琼；李佩盈；梁伟民 刊期： 2009年第02期
目的 比较改良光棒和直接喉镜气管内插管成功率、口腔损伤和血流动力学的影响,评价改良光棒在临床麻醉中的应用效果.方法 200例根据美国麻醉医师协会体格情况分级(ASA)Ⅰ～Ⅱ级拟行气管插管病人随机分改良光棒组(A组,n=100)和喉镜组(B组,n=100).根据综合气道评估分为Ⅰ～Ⅳ级,记录入室后、诱导后、插管即刻、插管后1 min、3 min、5 min的收缩压(SAP)、舒张压(DAP)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脉搏血氧饱和度(SpO2)变化,及插管成功率、插管时间、口腔损伤、插管后并发症的发生情况.结果 两组插管成功率分别为 A组97%,B组为90% .A组的成功率明显高于B组(P<0.05).气道分级Ⅳ级的病人插管成功率A组(100%)明显高于B组(50%)(P<0.05).插管后即刻、插管后1 min B组病人的SBP、DBP、MAP、HR循环指标较A组明显升高,有显著性差异(P<0.05).口腔损伤和并发症B组明显高于A组(P<0.05).结论 改良光棒插管成功率高、口腔损伤少、对血流动力学影响较轻,是一种成功率高、损伤轻、安全、有效、轻便的气管插管器具.
作者：李彩霞；刘伟；陈春欢；徐文庆 刊期： 2009年第02期
目的 研究纯钛表面塑性变形纳米化后对小鼠成骨细胞株MC3T3细胞黏附等生物学行为的影响.方法 应用塑性变形技术使纯钛表面纳米化,钛板大小10 mm×10 mm×1 mm.未处理纯钛为对照组(n=6),塑性变形纳米化钛板为实验组(n=6).扫描电镜观察MC3T3细胞在材料表面的黏附形态,荧光显微镜检测细胞黏附的数目,应用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞骨架肌动蛋白的特点.结果 扫描电镜下观察表明,MC3T3细胞是以多个大小不等的胞突黏附于纳米化钛板表面,细胞表现良好的伸展形态;荧光显微镜显示,细胞在纳米化钛板表面的黏附能力较表面未处理钛板明显提高(P<0.05);激光共聚焦扫描显微镜下观察发现,纳米化钛板表面结构能促进细胞骨架肌动蛋白纤维的充分铺展.结论 纯钛表面塑性变形纳米化后,能明显促进MC3T3细胞在其表面的黏附和铺展,改善了纯钛的生物相容性.
作者：陶凤娟；余优成；陈万涛；万鹏波；叶冬霞；于晓平；王庆 刊期： 2009年第02期
目的 探索洞庭湖区钉螺分布的动态变化,为钉螺生态学及螺口动力学提供理论依据.方法 选择湖南省岳阳市君山区洞庭湖的一块草滩为研究现场,在2007年10月至2008年5月洞庭湖未涨水期间进行随机抽样查螺,实验室内压螺鉴定死活后分框计数.首先计算中位数、四分位间距及聚集度指标等进行统计描述,然后采用大似然法拟合负二项分布、对数正态分布、指数分布等不同的分布类型以探索不同时间点的钉螺分布状态.结果 观察期间各月份钉螺的分布均为正偏态分布,钉螺密度的中位数分别为7、9、1、0、3、4和1(只/0.01 m2),四分位间距分别为13、8、3、2、4、6和4;方差均大于均数,聚集性指数随密度同方向变化.水退初期10月份的钉螺数据对几种分布均不能较好拟合,11月份的钉螺分布呈对数正态分布,2008年4月份的钉螺分布同时符合负二项分布和指数分布,其它各月份的钉螺分布均呈负二项分布.结论 钉螺分布不是单一的负二项分布,可能存在着与密度有关的一种动态变化,有待于提出新的、更广义的分布模型来更好地反映这种动态变化.
作者：王海银；张志杰；周艺彪；姜庆五 刊期： 2009年第02期
内分泌治疗用于乳腺癌已有100多年的历史,具有疗效确实、耐受性良好的特点,已在各期激素受体阳性乳腺癌的辅助治疗中占据重要地位.10年三苯氧胺(TAM)治疗相对5年进一步降低了复发率;芳香化酶抑制剂(AIs)无论起始应用,还是在TAM治疗不同时间后换用均相对5年TAM的治疗显著提高了无病生存率;在以换药为基础的临床试验也观察到了总生存率的改善,故AIs已成为绝经后辅助内分泌治疗的标准药物之一,但是对于AIs治疗的佳药物、佳方案和佳时间以及用药的佳顺序策略、以及在绝经前患者中的(与卵巢抑制联合)临床价值尚不明确,目前仍未能得出统一的答案,值得进一步探讨.
作者：林燕苹；陆劲松；邵志敏；沈镇宙 刊期： 2009年第02期
目的 探讨进行性眼外肌麻痹(CPEO)的临床、病理特点及诊断.方法 对我院肌肉活检确诊的12例CPEO的临床、病理和诊断进行分析.结果 12例患者中男6例,女6例,平均起病年龄11.6岁.2例为同胞兄弟.12例均有进行性加重的双上睑下垂和眼球活动障碍,其中1例起病不对称.除眼外肌麻痹外,4例闭目肌力减退,1例轻度肢体无力,3例有内分泌异常.1例血清静止乳酸有轻度增高,2例CK、LDH轻度增高,5例EMG呈轻度肌源性损害.肌活检破碎红纤维(RRF)阳性肌纤维数和细胞色素氧化酶(COX)阴性肌纤维数均明显>2%.结论 CPEO临床表现为进行性发展的眼外肌麻痹,主要为上睑下垂和眼球运动障碍,仅少数患者有复视,部分患者有轻度肢体无力和不能耐受疲劳.诊断主要依赖肌活检病理发现不同数量的RRF和COX缺失纤维.
作者：孙莉；卢家红；陆肇曾 刊期： 2009年第02期
控制性超排卵(COH)大力推动了体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术的发展,但超生理水平的内分泌环境也使子宫内膜的发育发生改变,从而可能对子宫内膜容受性(ER)产生影响.本文就ER有关的标志物及COH对其表达影响的相关研究作一综述.
作者：高敏芝；张慧琴；孙兆贵 刊期： 2009年第02期
生长调节致癌基因-1(GRO-1)是CXC趋化因子的一种,GRO-1与其受体CXCR2结合后,参与机体的多种病理生理过程,包括炎症、感染、创伤愈合和肿瘤发生.其在恶性肿瘤演进中所起的作用是多方面的,它通过直接促进肿瘤生长、转移以及通过促进肿瘤血管形成、白细胞浸润,共同促进肿瘤的发生发展.因此,GRO-1可能可以作为肿瘤的治疗靶点和诊断标志物.
作者：范灵玲；陈晓军；丰有吉 刊期： 2009年第02期
目的 利用人血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)小RNA干扰(siRNA)表达载体--重组质粒pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA,研究VEGF-C基因下调抑制COX-2、Bcl-2表达及对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435的体外作用.方法 pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA表达质粒和阴性对照质粒稳定转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-435,RT-PCR和Western blot检测转染前后VEGF-C、COX-2基因和VEGF-C、COX-2、Bcl-2蛋白的表达;MTT法和流式细胞仪检测VEGF-C RNA干扰对细胞的作用.结果 pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA转染乳腺癌细胞MDA-MB-435,VEGF-C基因和蛋白水平表达量明显降低,COX-2和Bcl-2表达下调,细胞体外活性下降,72 h后凋亡率达60%.结论 针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体抑制VEGF-C表达的同时下调COX-2和Bcl-2的表达,促进乳腺癌细胞MDA-MB-435的凋亡.
作者：顾斐；邹强；倪泉兴 刊期： 2009年第02期
目的 探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的敏感性及其与放、化疗联用时的凋亡途径.方法 采用CCK-8法检测TRAIL、顺铂、紫杉醇作用下Hep-2细胞生长抑制率;流式细胞仪检测Hep-2细胞凋亡率; Western blot法检测Hep-2细胞内caspase蛋白表达变化.结果 Hep-2细胞对TRAIL诱导的凋亡不敏感,24 h IC50为596.92 μg/L;顺铂、紫杉醇、放射线与TRAIL联合应用时Hep-2细胞凋亡率显著高于单药应用(P<0.05);caspase-9抑制剂Z-LETD-FMK使TRAIL、顺铂、紫杉醇对Hep-2细胞的生长抑制率显著下降(P<0.05);联合用药组caspase-8、caspase-9表达量均有显著升高(P<0.05).结论 人喉癌Hep-2细胞对TRAIL诱导的细胞凋亡不敏感,TRAIL通过内源性途径诱导Hep-2细胞凋亡;活化后的caspase-9、caspase-3通过环状反馈作用激活caspase-8,增强了Hep-2细胞对TRAIL的敏感性,是联合用药对Hep-2细胞发挥协同效应的机制之一.
作者：张明；周梁；田洁 刊期： 2009年第02期
复旦学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学
