冯美卿；史训龙；孙传文；周伟；周珮
目的 研究Smad泛素化调节因子1(Smurf1)对基因重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)诱导成骨作用的影响.方法 通过将质粒pcDEF3-Smurf1临时转染C2C12细胞并应用实时PCR和Western免疫印迹法鉴定其表达Smurf1,空载体pcDNA3.1作为阴性对照;然后用比色法测定细胞碱性磷酸酶活性和实时PCR分析细胞碱性磷酸酶、骨钙素、成骨转录因子Osterix基因表达,观察Smurf1对rhBMP-2诱导C2C12细胞向成骨细胞分化的影响.同时在相差显微镜下观察细胞形态的变化.结果 Smurf1在C2C12细胞可以通过临时转染获得很好的表达.尽管在细胞形态上没有明显的差别,但Smurf1转染的C2C12细胞在rhBMP-2作用48 h后,细胞碱性磷酸酶活性以及细胞碱性磷酸酶、骨钙素、成骨转录因子Osterix基因表达均较对照组明显下降.结论 Smurf1在BMP诱导成骨过程中发挥着负性调节作用.
作者：费琴明；陈统一；张光健；Boden Scott D；TITUS L 刊期： 2006年第05期
目的 分析儿童眼内炎的临床特点和治疗效果,为临床诊治提供指导.方法 回顾性分析2001年1月至2002年12月我院住院患者中儿童眼内炎62例62眼的年龄、性别、致伤原因、就诊时间、感染类型、治疗方式和治疗效果等.结果 除4眼放弃治疗外,所有病例炎症都得到控制.视力记录完整的46眼中,Ⅰ组(玻璃体腔注药+玻璃体手术25眼)视力改善15眼,稳定9眼,减退1眼,Ⅱ组(单纯玻璃体手术12眼)视力改善9眼,稳定3眼,Ⅲ组(单纯玻璃体腔注药9眼)视力改善2眼,稳定7眼.经Mann-Whitney t检验,Ⅰ组与Ⅲ组,Ⅱ组与Ⅲ组手术后视力差异有统计学意义(P＜0.05),Ⅰ组与Ⅱ组手术后视力差异无统计学意义(P＞0.05).结论 儿童眼内炎由于其自身特点,单纯玻璃体腔注药效果欠佳,一经诊断明确,应立即行玻璃体手术,多数患儿的炎症得到控制,视力得到改善.
作者：罗晓刚；姚静；徐格致 刊期： 2006年第05期
目的 建立一种反相高效液相色谱法测定多西紫杉醇注射液含量,同时检测其有关物质.方法 采用Alltima C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm),以甲醇: 20 mmol/L醋酸钠缓冲液(冰醋酸调pH值至5.0)(75: 25, V/V)为流动相,流速1.0 mL/min;检测波长为232 nm,柱温为室温.结果 在选定的色谱条件下,多西紫杉醇的分析不受辅料和有关物质的干扰,定量限为500 ng, 在25～800 μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 9);平均加样回收率为99.92%,日内、日间RSD均＜4%.结论 本法测定多西紫杉醇及其有关物质专属性强,灵敏度高,重现性好,可用于测定注射液中多西紫杉醇的含量和其有关物质检查.
作者：杨蓓；郑璐侠；段更利；陈执中 刊期： 2006年第05期
目的 观察组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator, t-PA)对坐骨神经血-神经屏障损伤后修复的影响.方法 选取野生型小鼠和t-PA基因敲除纯合子小鼠,利用持针器钳夹坐骨神经20 s.在损伤后第3, 7, 11, 15天观察小鼠坐骨神经血-神经屏障修复情况.采用尾静脉注射Evans Blue,观察野生型小鼠组和t-PA基因敲除小鼠组血-神经屏障渗透性的差异.利用免疫荧光和Western Blot观察两组小鼠损伤段坐骨神经血-神经屏障重要的组成性蛋白occludin的恢复情况.结果 小鼠坐骨神经损伤后,t-PA基因敲除小鼠组血-神经屏障的通透性在损伤后第7,11,15天高于野生型小鼠组.免疫荧光及其Western Blot显示t-PA基因敲除延缓了坐骨神经损伤后occludin的表达.结论 t-PA基因缺失对小鼠坐骨神经血-神经屏障损伤后的修复有一定的阻碍作用,与坐骨神经血-神经屏障损伤后,其组成性蛋白occludin的表达减少有关.
作者：凌长春；陶贤梅；萧瑶；胡华；陈祖林；宋后燕 刊期： 2006年第05期
目的 本研究旨在评价经胸右心室穿刺测量大鼠右心室压力的可行性和安全性.方法 将健康雄性SD大鼠(300～350 g)分为实验组(n=8)及对照组(n=8),采用24G BD Intima-Ⅱ(0.7 mm×19 mm)密闭式静脉留置导管,穿刺一侧颈动脉监测其平均压(MCSP);实验组在超声引导下进行经胸右心室穿刺测压,对照组仅刺破胸壁肌肉.导管留置于右心室60 min连续测量右心室压力(RVSP).拔除导管后将两组大鼠于相同环境中饲养至一个月,并于实验前及实验后多个不同时点应用超声心动图检测各组大鼠心功能及血流动力学指标.结果 除了对照组1只死于麻醉意外、实验组2只在穿刺后24 h以内死亡外,其余大鼠一个月时均存活;所有存活大鼠体重增长满意.在导管留置过程中,RVSP及MCSP测值保持稳定;两组之间及实验组操作前后心功能及血流动力学检测指标未见显著差异.结论 超声心动图引导下,经胸右心室穿刺可以准确地测量和监测右心室压力.
作者：信怡；黄国英；夏红萍；邓海燕 刊期： 2006年第05期
目的 对心脏原位移植术进行术前评估和危险性因素分析.方法 对2000年5月-2005年4月间本院106例预行原位心脏移植的病例作回顾性分析.资料分为术前一般状态及肺血管反应性评估、术前实验室检查与用药、麻醉情况、外科情况、术后随访5部分.将气管导管拔除延迟作为应变量进行单因素和Logistic分析.结果 除10例经术前评估进入心肺联合移植等待名单外,在其余96例实施原位心脏移植术的病例中,肺高压组经静脉输注前列腺素E1(PGE1)后,肺血管阻力(PVR)和跨肺压(TPG)有下降(P＜0.05),继而吸入NO,PVR下降(26.3±5.6)%(P＜0.05),TPG下降(20.5±3.8)%(P＜0.05);将气管导管拔除延迟(术后超过24 h)作为应变量的单因素分析中发现,肺高压﹑心肺转流后低血压、肾功能损害、供心缺血时间＞4 h和术前EF＜30%有统计学意义(P＜0.05);将单因素分析后有意义的因素一起放入多元Logistic模型进行逐步回归,肺高压与术前射血分数(EF)＜30%进入模型(OR值12.96和3.57).结论 经术前评估和处理,让肺血管达到大扩张状态,使原本认为不可逆的固定的肺高压显现出可逆的有反应的一面,将给此类患者实施心脏移植带来可能;肺高压、心肺转流后低血压、肾功能损害、供心缺血时间＞4 h和术前EF＜30%是术后延迟拔管的危险因素.
作者：陈伟；姜桢 刊期： 2006年第05期
目的 探讨低声压超声造影诊断体积较小肝癌的价值.方法 使用造影剂SonoVue检查小肝癌249例共267个病灶(大直径≤3 cm),包括原发性肝癌218个,转移性肝癌49个.分析病灶的增强方式和增强时相.结果 多数小肝癌动脉期增强、门脉期消退,原发性和转移性肝癌间增强时相无差异.增强达峰时原发性肝癌以整体增强为主,而转移性肝癌中环状增强的比例明显高于原发性肝癌,两者差异显著.若结合增强方式和时相,本组鉴别诊断肝细胞性肝癌的敏感性为98.1%.结论 超声造影可实时显示小肝癌相对于肝实质增强和消退的动态过程,获得病灶内微血管的影像,从而敏感地鉴别诊断肝癌.
作者：丁红；王文平；黄备建；李超伦；魏瑞雪；徐智章 刊期： 2006年第05期
各种外伤及其他因素如局部缺血,肿瘤等会造成神经系统的部分或全部损伤,从而导致功能丧失和其他神经性疾病.相对中枢神经而言,周围神经再生比较容易,其神经元的轴突在适当条件下可以延伸生长并穿越受损伤区域,达到再生功能,此现象为神经损伤的修复带来了新的希望.借助于外科特别是显微外科的发展,神经损伤的修复和再生研究得到了长足的进展.
作者：杜怀栋；周梁 刊期： 2006年第05期
目的 了解选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulators SERM)雷洛昔芬和结合马雌激素对去势大鼠骨质代谢、子宫内膜及子宫湿重的影响.方法 3月龄的清洁级健康雌性SD大鼠50只,随机分为5组,假手术组,去势组,去势后加用结合马雌激素组,去势后加用低剂量雷洛昔芬组和高剂量雷洛昔芬实验组.各组大鼠手术后90天开始灌胃给药,假手术及去势组每天给予等量赋型剂灌胃,治疗90天.各组实验结束时,处死大鼠后留取L3、L4椎体,用骨形态计量学进行定量分析及光镜观察.处死大鼠后,取出双侧子宫称重,并制作病理切片观察子宫内膜腺体数及子宫内膜形态.结果 ①反应骨形成代谢的指标骨钙素在各组间无显著性差异,反应骨吸收的生化指标PYD/Cr、DPD/Cr在去势组中明显升高.②去势组子宫湿重明显下降,结合马雌激素组与后述三组比较子宫湿重增加;与假手术组比较,其余组的子宫内膜腺体数均有减少.结论 雷洛昔芬和雌激素结合马雌激素对去势大鼠骨质疏松均有治疗作用,雷洛昔芬对子宫内膜腺体及子宫湿重无明显刺激作用.
作者：马莉；屠蕊沁；施德源；杨来春 刊期： 2006年第05期
目的 筛选影响H5N1亚型甲型流感病毒对哺乳动物毒力变异的HA序列主要氨基酸位点.方法 根据相关文献提供的实验结果,将54株H5N1病毒株按其对哺乳动物的毒力强弱分为高毒力组和低毒力组,在NCBI Genbank数据库中下载HA基因序列,用随机森林模型完成主要变异氨基酸位点的筛选.结果 在HA序列中共筛选出8个关键位点,均位于HA1节段,分别为:279、102、228、156、154、172、140、8.位点154和156与其余几个关键位点间、位点140与172间均存在较强的协同交互作用,用上述关键位点重建的随机森林模型对病毒株毒力分类的准确率为83.33%.结论 所筛选出的8个变异位点可能在决定H5N1病毒毒力上起关键作用,值得对其分子生物学作用机理做深入研究.
作者：许慧琳；张文彤；赵耐青；姜庆五 刊期： 2006年第05期
目的 比较非那雄胺和复方敏乐啶治疗男性雄激素源性脱发(AGA)的疗效.方法 107例Hamilton分级在Ⅲ～Ⅴ的患有AGA的男性患者分为2组.组Ⅰ(69例)予非那雄胺(1 mg/d),连服6个月;组Ⅱ(38例)予外用3%复方敏乐啶,每天2次,连用6个月.结果 3个月后Ⅰ组、Ⅱ组头发生长改善总有效率分别为53.62%、44.74%,两组间头发生长改善程度相比差异无显著性(P＞0.05);6个月后Ⅰ组、Ⅱ组头发生长改善总有效率分别为75.36%、57.89%.6个月后两组间头发生长改善程度相比有显著性差异(P＜0.05).结论 非那雄胺治疗AGA的疗效较复方敏乐啶更好且其疗效随治疗时间的延长而提高.
作者：杨勤萍；徐峰；孙春秋；周静；盛友渔 刊期： 2006年第05期
目的 研究吲哚美辛和hTERT-siRNA对胆囊癌细胞株GBC-SD的端粒酶活性、细胞增殖、运动的抑制作用;并试从β-catenin/hTERT信号转导途径揭示其分子机制.方法 采用端粒酶TRAP、半定量RT-PCR和Western Blot印迹方法检测GBC-SD端粒酶活性、hTERT基因和β-catenin基因mRNA、蛋白质表达水平.四甲基偶氮唑盐(MTT)光吸收法检测琥珀酸脱氢酶(SDH)活性并做细胞增殖计数、运用Transwell小室和划线了解癌细胞侵袭与运动情况.结果 质粒pGCsi-H1/GFP-hTERT转染GBC-SD细胞6～24 h再加入吲哚美辛后对GBC-SD细胞的端粒酶、SDH活性、细胞增殖、运动、侵袭力均具有很明显的抑制作用,分别同阴性对照pGCsi-H1/NEGative联合吲哚美辛组、单用吲哚美辛组进行比较,差异有显著性(P＜0.01).pGCsi-H1/GFP-hTERT作用于GBC-SD细胞24h再加入吲哚美辛,检测hTERT mRNA和hTERT蛋白表达,分别与pGCsi-H1/NEGative联合吲哚美辛组、单用吲哚美辛组进行比较,差异有显著性(P＜0.01).pGCsi-H1/GFP-hTERT作用于GBC-SD细胞24h再加入吲哚美辛,检测β-catenin mRNA和β-catenin蛋白表达,分别与pGCsi-H1/NEGative联合吲哚美辛组、单用吲哚美辛组进行比较,无明显差异(P＞0.05).结论 吲哚美辛可增强hTERT-siRNA抑制GBC-SD细胞端粒酶、SDH的活性,及其增殖、运动、侵袭力,降低hTERT mRNA和hTERT蛋白表达,其机制与β-catenin/hTERT信号转导途径受抑存在一定联系.
作者：丁昂；童赛雄；冯平；秦新裕 刊期： 2006年第05期
目的 研究嘌呤能受体(purinergic receptors,P2)家族中P2X不同亚型在新生和成年SD大鼠延髓的表达.方法 成年SD大鼠(6-8 w)和新生SD大鼠(1-5 d),各6只,雌雄不计,取延髓.应用免疫组织化学的方法和图像分析技术,比较P2X2和P2X4受体在新生和成年SD大鼠延髓的表达.结果 P2X2和P2X4嘌呤受体的阳性神经元和阳性纤维在新生鼠和成年鼠的延髓都有广泛表达,主要分布在孤束核、Ⅻ颅神经核和延髓腹外侧区,延髓其他区域为散在的分布.成年鼠和新生鼠的P2X2受体均比P2X4受体表达水平高.在新生鼠延髓,P2X2和P2X4的表达水平均比成年鼠低.结论 P2X2和P2X4阳性神经元和阳性纤维广泛分布在大鼠延髓,为ATP对心血管活动、呼吸活动和痛觉等的调节作用提供了结合位点,也有利于实验中P2X受体亚型阻断剂的选择.随着动物发育成熟,P2X2和P2X4表达水平均增加.
作者：马岩；宁穗；卢宁；李莉；曹银祥；钱源；朱大年；沈霖霖 刊期： 2006年第05期
目的 研究Muller细胞在视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化中的作用.方法 分离培养Muller细胞和不同时期的胚胎视网膜前体细胞,将其与Muller细胞共同培养,并进一步用Muller细胞条件培养液来诱导视网膜前体细胞的分化.倒置相差显微镜每天观察细胞的生长和分化情况,Thy1.1标记视网膜神经节细胞并计数.结果 视网膜前体细胞能分化为多种视网膜细胞类型,包括视网膜神经节细胞.不同时期、不同培养条件下的视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化的百分比不同.单独培养组、共同培养组和Muller细胞条件培养液组视网膜神经节细胞的百分比,E14分别为(16.91±4.05)%,(47.25±9.67)%和(42.36±10.52)%,E18则分别为(4.65±1.88)%,(9.90±3.19)%和(8.69±3.01)%.相同时期的视网膜前体细胞,共同培养组和Muller细胞条件培养液组视网膜神经节细胞的百分比较单独培养组高,差异有统计学意义.相同培养条件下,E14视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化的百分比较E18高,差异有统计学意义.结论 Muller细胞能诱导视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化,可能通过Muller细胞释放某些可溶性因子发挥作用.
作者：姚静；孙兴怀 刊期： 2006年第05期
目的 探讨B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2) Loop domain结构域在Bcl-2 蛋白结构中的作用.方法 应用PCR及Western blot方法检测Bcl-2 Loop domain结构域突变前后Bcl-2蛋白的表达情况.结果 Bcl-2 Loop domain结构域突变后Bcl-2蛋白只在沉淀中检测到,在上清中未检测到.结论 Bcl-2 Loop domain结构域被突变后,Bcl-2蛋白空间结构发生改变,推测Bcl-2 Loop domain结构域在Bcl-2 蛋白结构中起到重要作用.
作者：刘娜；孙志扬；李杨；宋海燕；孙庆文 刊期： 2006年第05期
目的 探讨儿童肺隔离症临床特点、诊断和治疗.方法 回顾性分析1978年至2005年间22例肺隔离症的临床资料,叶内型12例,叶外型9例,双侧1例,手术者18例.叶内型手术方法为病变肺叶切除术,叶外型为隔离肺叶切除,无手术死亡,近中期随访手术效果良好.结果 叶内型与叶外型肺隔离症在发病年龄、性别等方面没有差异,均常见于左下肺,叶内型多以反复呼吸道感染起病,但叶外型肺隔离症的症状不典型(P=0.021),血供变异较多(P=0.022),临床合并畸形更为常见(P=0.021).结论 肺隔离症诊断方法以CT、MRI和血管造影为主,叶外型较叶内型临床发现困难,一旦确诊两型均应手术治疗.
作者：陈纲；陈张根；贾兵；李炘 刊期： 2006年第05期
目的 建立简便、快速纯化D-氨基酸氧化酶(DAAO)的新方法,以利用高纯度的DAAO转化头孢菌素C制备戊二酰-7-氨基头孢霉烷酸(GL-7ACA).方法 通过基因工程手段,构建N端和C端各镶嵌6个组氨酸的DAAO重组质粒,电转化Pichia pastoris GS115电感受态细胞,利用PCR方法筛选阳性转化子,再经甲醇诱导筛选出高表达菌.结果 高表达重组菌(PHD12)摇瓶发酵单位达到2 000 IU/L,发酵罐内达到22 500 IU/L.并利用Ni螯合型树脂对表达的DAAO经一步分离纯化,以60%的总收率获得纯化产物.纯化产物保持良好的转化CPC-Na活性.结论 利用基因工程表达组氨酸标记蛋白,可简化基因工程的下游工序.
作者：冯美卿；史训龙；孙传文；周伟；周珮 刊期： 2006年第05期
目的 构建人血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)表达载体包装质粒pSNAV-VEGF165,并体外检测pSNAV-VEGF165表达和生物学活性.方法 采用分子克隆技术,从pcDNA3(+)-VEGF165质粒获得VEGF165cDNA,并克隆至AAV包装质粒pSNAV上,构建pSNAV-VEGF165 的AAV重组质粒,经酶切及测序鉴定正确,用脂质体介导pSNAV-VEGF165转染HEK293细胞和血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC),荧光免疫组化方法检测VEGF165蛋白,并用MTT法测定VEGF165对VEC增殖的影响.结果 经酶切鉴定及基因测序证实AAV包装质粒pSNAV-VEGF165构建成功,荧光免疫组化显示VEGF165蛋白的表达,对照组未见VEGF165蛋白的表达,MTT法显示VEGF165蛋白对VEC增殖有促进作用.结论 构建的AAV包装质粒pSNAV-VEGF165在体外具有生物学活性,可作为AAV-VEGF165表达载体的包装质粒.
作者：董跃福；王德春；胡有谷；齐宗华 刊期： 2006年第05期
目的 总结经皮血管内成形术(PTA) 及内支架置放术治疗6例锁骨下动脉盗血综合征患者的疗效.方法 6例锁骨下动脉盗血综合征患者,血流数字造影显示锁骨下动脉平均狭窄72%,双上肢动脉收缩压差平均为53.3 mmHg.经股动脉途径行球囊血管成形术4例,经股动脉和肱动脉联合入路双向造影支架打通狭窄或闭塞2例,PTA联合支架置入术4例.结果 5例患者的腔内治疗获得成功,术后即刻桡动脉搏动获得改善,双上肢动脉收缩压差平均为22 mmHg.1例腔内治疗失败,导丝无法打通闭塞段动脉.无任何病例发生严重并发症.5例患者术后随访1～19个月,无神经症状复发.结论 采用腔内技术对锁骨下动脉盗血综合征的患者进行PTA和支架置入后其效果可靠,操作相对简单、安全,术后复发率低.
作者：赵洋；符伟国；王玉琦；徐欣；杨珏 刊期： 2006年第05期
目的 研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用.方法 采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型,二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱,实时定量逆转录PCR检测trap基因和RNA Ⅲ的转录水平,CLUSTAL X对表皮葡萄球菌trap基因与金黄色葡萄球菌序列进行分析,Mega软件构建进化树.结果 比较分析形成生物膜的表皮葡萄球菌ATCC 35984株与不形成生物膜的ATCC 12228株生长中期的蛋白质组,发现ATCC 35984株的TRAP蛋白量明显高于ATCC 12228株.转录水平的检测显示ATCC 12228株和生物膜阳性临床SE1457、SE671株的trap基因均低转录,但RNAⅢ的转录水平未降低.SE1457株agr系统突变后,RNAⅢ的转录明显降低, trap基因的转录无变化.RNAⅢ的转录随细菌生长变化而增加,trap基因转录保持不变.trap序列分析显示其在表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌中较为保守,但存在明显的进化距离.结论 在本论文所研究的表皮葡萄球菌菌株中,trap基因的转录和翻译与细菌生物膜的形成不存在直接的调控相关性;并提示TRAP蛋白不是表皮葡萄球菌agr系统活化所必需的细菌产物;表皮葡萄球菌trap基因序列与金黄色葡萄球菌之间存在差异,可能与其功能差异相关.
作者：朱于莉；杨晓梅；李娜；江娟；陈洁敏；秦智强；李敏；吕元；魏武；瞿涤 刊期： 2006年第05期
复旦学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学
