姚静；孙兴怀
目的 探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)在四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化形成过程中的作用.方法 用50% CCl4经腹腔注射,每周2次共8周诱导雄性S-D大鼠肝纤维化模型.将S-D大鼠随机分3组:正常对照组给橄榄油腹腔注射;罗非昔布组在CCl4诱导肝纤维化模型的同时给予选择性COX-2抑制剂罗非昔布(按10 mg·d-1·kg-1体重溶于10 mL生理盐水中灌胃);模型对照组在CCl4诱导肝纤维化模型的同时给予同等体积的生理盐水灌胃.第8周末处死大鼠,病理组织学观察肝纤维化严重程度并评分,并通过Masson三色染色法将胶原染成蓝色,用图像分析仪自动分析胶原面积.用Western blot检测肝组织COX-2表达和Ⅳ型胶原.计数肝窦内α-SMA阳性的细胞数来观察肝星状细胞的活化.结果 与肝纤维化模型组相比,罗非昔布干预组肝组织纤维化严重程度明显减轻(平均积分分别为:4.00±0.00 vs 2.89±0.60, P＜0.05)、胶原面积也减少(分别为:30.7±8.9 vs 23.5±6.5, P＜0.05)、肝窦内平均α-SMA阳性细胞数明显减少(分别为:12.5±1.3 vs 7.4±1.4, P＜0.01);Western blot分析提示:与肝纤维化模型组相比,罗非昔布能降低Ⅳ型胶原表达、对COX-2表达无明显影响.结论 COX-2在肝纤维化的形成过程中发挥重要作用,选择性COX-2抑制剂罗非昔布具有减轻或阻止肝纤维生成的作用.
作者：涂传涛；郭津生；方国汀；王吉耀 刊期： 2006年第05期
目的 探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制.方法 采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平,用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量,并用DNA酶(DNase Ⅰ)研究表皮葡萄球菌胞外DNA在生物膜形成和起始黏附中的作用;采用 pBT2质粒同源重组敲除的方法构建了表皮葡萄球菌1457的atlE基因突变株,研究atlE基因敲除突变对起始黏附能力、生物膜形成及胞外DNA释放能力的影响.结果 表皮葡萄球菌atlE基因的表达与胞外DNA的释放量有相关性;DNA酶能影响未成熟生物膜且能降低起始黏附能力;ΔatlE 菌株胞外DNA的释放减少,起始黏附能力明显降低,不形成生物膜.结论 表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白能通过释放胞外DNA在表皮葡萄球菌的生物膜起作用.
作者：欧元祝；朱于莉；陈洁敏；秦智强；江娟；杨晓梅；瞿涤 刊期： 2006年第05期
目的 研究吲哚美辛和hTERT-siRNA对胆囊癌细胞株GBC-SD的端粒酶活性、细胞增殖、运动的抑制作用;并试从β-catenin/hTERT信号转导途径揭示其分子机制.方法 采用端粒酶TRAP、半定量RT-PCR和Western Blot印迹方法检测GBC-SD端粒酶活性、hTERT基因和β-catenin基因mRNA、蛋白质表达水平.四甲基偶氮唑盐(MTT)光吸收法检测琥珀酸脱氢酶(SDH)活性并做细胞增殖计数、运用Transwell小室和划线了解癌细胞侵袭与运动情况.结果 质粒pGCsi-H1/GFP-hTERT转染GBC-SD细胞6～24 h再加入吲哚美辛后对GBC-SD细胞的端粒酶、SDH活性、细胞增殖、运动、侵袭力均具有很明显的抑制作用,分别同阴性对照pGCsi-H1/NEGative联合吲哚美辛组、单用吲哚美辛组进行比较,差异有显著性(P＜0.01).pGCsi-H1/GFP-hTERT作用于GBC-SD细胞24h再加入吲哚美辛,检测hTERT mRNA和hTERT蛋白表达,分别与pGCsi-H1/NEGative联合吲哚美辛组、单用吲哚美辛组进行比较,差异有显著性(P＜0.01).pGCsi-H1/GFP-hTERT作用于GBC-SD细胞24h再加入吲哚美辛,检测β-catenin mRNA和β-catenin蛋白表达,分别与pGCsi-H1/NEGative联合吲哚美辛组、单用吲哚美辛组进行比较,无明显差异(P＞0.05).结论 吲哚美辛可增强hTERT-siRNA抑制GBC-SD细胞端粒酶、SDH的活性,及其增殖、运动、侵袭力,降低hTERT mRNA和hTERT蛋白表达,其机制与β-catenin/hTERT信号转导途径受抑存在一定联系.
作者：丁昂；童赛雄；冯平；秦新裕 刊期： 2006年第05期
目的 探讨皮质激素在减少骨水泥假体柄型髋关节置换术中血压、心率和氧饱和度波动的临床意义.方法 收集40例行髋关节置换患者的资料,按年龄、性别、原发疾病、麻醉风险评估、手术医师和假体来源进行配对分成2组.每组20例,其中14例全髋置换,6例双极股骨头置换.两组术前准备、手术步骤和术中处理原则均相同.其中一组在行股骨髓腔注入骨水泥前5分钟使用地塞米松10 mg静脉推注,另一组则不给为对照组,在麻醉前、皮肤切开、股骨扩髓、髓腔冲洗、骨水泥植入、假体植入和切口关闭等7个阶段监测患者平均动脉压(MAP)、心率(HR)、氧饱和度(SaO2)和心律等指标,对各项数据作对比分析.结果 40例患者围手术期均安全度过.MAP在骨水泥植入过程中波动为明显,地塞米松组MAP平均下降9.9 mmHg,而对照组下降14.6 mmHg,两者差异有统计学意义.心率在骨水泥植入和假体植入过程中呈现加速,两组之间无显著差异.手术过程中SaO2保持相当稳定,均大于94%.两组每例均出现不同程度的房性或室性早搏或心电传导阻滞表现,各有1例出现较严重心律失常,经麻醉医师处理后均好转稳定.结论 应用骨水泥的髋关节置换手术中,骨水泥植入阶段容易引起血压和心率的波动.骨水泥植入前使用地塞米松能适当减少血压波动的范围.
作者：黄钢勇；夏军；魏亦兵；徐冠华；王思群；周建伟；黄煌渊 刊期： 2006年第05期
目的 分析儿童眼内炎的临床特点和治疗效果,为临床诊治提供指导.方法 回顾性分析2001年1月至2002年12月我院住院患者中儿童眼内炎62例62眼的年龄、性别、致伤原因、就诊时间、感染类型、治疗方式和治疗效果等.结果 除4眼放弃治疗外,所有病例炎症都得到控制.视力记录完整的46眼中,Ⅰ组(玻璃体腔注药+玻璃体手术25眼)视力改善15眼,稳定9眼,减退1眼,Ⅱ组(单纯玻璃体手术12眼)视力改善9眼,稳定3眼,Ⅲ组(单纯玻璃体腔注药9眼)视力改善2眼,稳定7眼.经Mann-Whitney t检验,Ⅰ组与Ⅲ组,Ⅱ组与Ⅲ组手术后视力差异有统计学意义(P＜0.05),Ⅰ组与Ⅱ组手术后视力差异无统计学意义(P＞0.05).结论 儿童眼内炎由于其自身特点,单纯玻璃体腔注药效果欠佳,一经诊断明确,应立即行玻璃体手术,多数患儿的炎症得到控制,视力得到改善.
作者：罗晓刚；姚静；徐格致 刊期： 2006年第05期
Endoglin又名CD105,为细胞膜糖蛋白,通过调节细胞对转化生长因子β(TGF-β)的反应,参与血管发育和重塑.Endoglin在肿瘤新生的血管内皮细胞和肿瘤组织边缘部分血管内皮细胞中高表达,已成为抑制肿瘤血管生成、治疗肿瘤的理想分子靶位.
作者：韩非；朱虹光 刊期： 2006年第05期
目的 探讨儿童肺隔离症临床特点、诊断和治疗.方法 回顾性分析1978年至2005年间22例肺隔离症的临床资料,叶内型12例,叶外型9例,双侧1例,手术者18例.叶内型手术方法为病变肺叶切除术,叶外型为隔离肺叶切除,无手术死亡,近中期随访手术效果良好.结果 叶内型与叶外型肺隔离症在发病年龄、性别等方面没有差异,均常见于左下肺,叶内型多以反复呼吸道感染起病,但叶外型肺隔离症的症状不典型(P=0.021),血供变异较多(P=0.022),临床合并畸形更为常见(P=0.021).结论 肺隔离症诊断方法以CT、MRI和血管造影为主,叶外型较叶内型临床发现困难,一旦确诊两型均应手术治疗.
作者：陈纲；陈张根；贾兵；李炘 刊期： 2006年第05期
目的 研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用.方法 采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型,二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱,实时定量逆转录PCR检测trap基因和RNA Ⅲ的转录水平,CLUSTAL X对表皮葡萄球菌trap基因与金黄色葡萄球菌序列进行分析,Mega软件构建进化树.结果 比较分析形成生物膜的表皮葡萄球菌ATCC 35984株与不形成生物膜的ATCC 12228株生长中期的蛋白质组,发现ATCC 35984株的TRAP蛋白量明显高于ATCC 12228株.转录水平的检测显示ATCC 12228株和生物膜阳性临床SE1457、SE671株的trap基因均低转录,但RNAⅢ的转录水平未降低.SE1457株agr系统突变后,RNAⅢ的转录明显降低, trap基因的转录无变化.RNAⅢ的转录随细菌生长变化而增加,trap基因转录保持不变.trap序列分析显示其在表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌中较为保守,但存在明显的进化距离.结论 在本论文所研究的表皮葡萄球菌菌株中,trap基因的转录和翻译与细菌生物膜的形成不存在直接的调控相关性;并提示TRAP蛋白不是表皮葡萄球菌agr系统活化所必需的细菌产物;表皮葡萄球菌trap基因序列与金黄色葡萄球菌之间存在差异,可能与其功能差异相关.
作者：朱于莉；杨晓梅；李娜；江娟；陈洁敏；秦智强；李敏；吕元；魏武；瞿涤 刊期： 2006年第05期
目的 比较研究小鼠体内外胸腺细胞CD4+CD25+双阳性T细胞发育的动态变化,为天然调节性T细胞的研究提供基础数据.方法 采用14.5天龄胚鼠胸腺进行体外培养,以FACS检测不同时间点胸腺细胞的表型变化,同时计数每个胸腺小叶的细胞数变化.结果 胸腺在体内发育的第14.5、15、16、17、18、19天CD4+CD25+双阳性T细胞的比例、细胞的数量与在体外胸腺培养的第1～6天在胸腺细胞中的比例、细胞数发育趋势相似;CD4+CD25+双阳性T细胞占CD4+T细胞的比例分别为8.19%、16.41%、24.06%、13.62%、8.10%、2.35%,占CD25+细胞的比例分别为0.34%、1.08%、2.40%、10.59%、32.51%、34.04%.与体内结果相似,胸腺细胞体外培养的结果显示:在培养的第1～6天,CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例分别为58.29%、12.14%、6.08%、17.78%、9.06%、4.04%,占CD25+T细胞的比例分别为3.75%、10.81%、17.20%、51.93%、61.64%、80.06%.结论 体外培养的CD4+CD25+双阳性胸腺细胞数量和比例变化与体内发育变化趋势一致,在体外培养第4天(约等于18.5天胚鼠)和体内发育的第17天该群细胞比例大,这将为天然调节性T细胞的发生、发育学研究提供有效的参考.
作者：邵先安；徐薇；龚燕平；张瑞华；王缨；储以微；李宝华；蒋正刚；熊思东 刊期： 2006年第05期
目的 比较非那雄胺和复方敏乐啶治疗男性雄激素源性脱发(AGA)的疗效.方法 107例Hamilton分级在Ⅲ～Ⅴ的患有AGA的男性患者分为2组.组Ⅰ(69例)予非那雄胺(1 mg/d),连服6个月;组Ⅱ(38例)予外用3%复方敏乐啶,每天2次,连用6个月.结果 3个月后Ⅰ组、Ⅱ组头发生长改善总有效率分别为53.62%、44.74%,两组间头发生长改善程度相比差异无显著性(P＞0.05);6个月后Ⅰ组、Ⅱ组头发生长改善总有效率分别为75.36%、57.89%.6个月后两组间头发生长改善程度相比有显著性差异(P＜0.05).结论 非那雄胺治疗AGA的疗效较复方敏乐啶更好且其疗效随治疗时间的延长而提高.
作者：杨勤萍；徐峰；孙春秋；周静；盛友渔 刊期： 2006年第05期
目的 构建含有人骨形态发生蛋白2(human bone morphogenetic protein 2, hBMP2)cDNA的重组慢病毒DNA,在293T细胞中进行慢病毒包装和表达检测.用慢病毒感染大鼠骨髓间质干细胞后,观察其向成骨细胞分化的情况.方法 从GenBank中调出hBMP2基因序列,设计带有NheⅠ、AgeⅠ酶切位点引物.从人肝脏组织中抽提总RNA,再反转录成cDNA,扩增出hBMP2 cDNA的全长序列.测序验证后克隆到慢病毒载体pHIV-CS-CDF-CG-PRE上,通过PCR扩增、酶切、测序等方法鉴定重组慢病毒DNA.将该重组慢病毒DNA同辅助质粒一起共感染293T细胞,通过重组而包装成能表达hBMP2基因的有活性的慢病毒.慢病毒感染大鼠骨髓间质干细胞,通过碱性磷酸酶(AP)、钙沉积定量测定、Ⅰ型胶原蛋白表达观察干细胞向成骨细胞转化的情况.结果 ①扩增出1.2 kb左右的hBMP2全长cDNA与GeneBank中的hBMP2阅读框架序列完全一致;②成功构建和克隆了含hBMP2基因的慢病毒重组DNA(pHIV -hBMP2);③对重组慢病毒DNA进行了成功包装和分析.④大鼠骨髓间质干细胞感染慢病毒后,碱性磷酸酶分泌增加,钙沉积增加,Ⅰ型胶原蛋白表达增加,成功向成骨细胞转化.结论 重组慢病毒携带hBMP2基因感染大鼠骨髓间质干细胞可以使其向成骨细胞定向分化,为组织工程研究提供良好的种子细胞.
作者：马晓生；吕飞舟；李小康；黄煌渊；姜建元 刊期： 2006年第05期
目的 探讨低声压超声造影诊断体积较小肝癌的价值.方法 使用造影剂SonoVue检查小肝癌249例共267个病灶(大直径≤3 cm),包括原发性肝癌218个,转移性肝癌49个.分析病灶的增强方式和增强时相.结果 多数小肝癌动脉期增强、门脉期消退,原发性和转移性肝癌间增强时相无差异.增强达峰时原发性肝癌以整体增强为主,而转移性肝癌中环状增强的比例明显高于原发性肝癌,两者差异显著.若结合增强方式和时相,本组鉴别诊断肝细胞性肝癌的敏感性为98.1%.结论 超声造影可实时显示小肝癌相对于肝实质增强和消退的动态过程,获得病灶内微血管的影像,从而敏感地鉴别诊断肝癌.
作者：丁红；王文平；黄备建；李超伦；魏瑞雪；徐智章 刊期： 2006年第05期
目的 研究Muller细胞在视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化中的作用.方法 分离培养Muller细胞和不同时期的胚胎视网膜前体细胞,将其与Muller细胞共同培养,并进一步用Muller细胞条件培养液来诱导视网膜前体细胞的分化.倒置相差显微镜每天观察细胞的生长和分化情况,Thy1.1标记视网膜神经节细胞并计数.结果 视网膜前体细胞能分化为多种视网膜细胞类型,包括视网膜神经节细胞.不同时期、不同培养条件下的视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化的百分比不同.单独培养组、共同培养组和Muller细胞条件培养液组视网膜神经节细胞的百分比,E14分别为(16.91±4.05)%,(47.25±9.67)%和(42.36±10.52)%,E18则分别为(4.65±1.88)%,(9.90±3.19)%和(8.69±3.01)%.相同时期的视网膜前体细胞,共同培养组和Muller细胞条件培养液组视网膜神经节细胞的百分比较单独培养组高,差异有统计学意义.相同培养条件下,E14视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化的百分比较E18高,差异有统计学意义.结论 Muller细胞能诱导视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化,可能通过Muller细胞释放某些可溶性因子发挥作用.
作者：姚静；孙兴怀 刊期： 2006年第05期
目的 了解选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulators SERM)雷洛昔芬和结合马雌激素对去势大鼠骨质代谢、子宫内膜及子宫湿重的影响.方法 3月龄的清洁级健康雌性SD大鼠50只,随机分为5组,假手术组,去势组,去势后加用结合马雌激素组,去势后加用低剂量雷洛昔芬组和高剂量雷洛昔芬实验组.各组大鼠手术后90天开始灌胃给药,假手术及去势组每天给予等量赋型剂灌胃,治疗90天.各组实验结束时,处死大鼠后留取L3、L4椎体,用骨形态计量学进行定量分析及光镜观察.处死大鼠后,取出双侧子宫称重,并制作病理切片观察子宫内膜腺体数及子宫内膜形态.结果 ①反应骨形成代谢的指标骨钙素在各组间无显著性差异,反应骨吸收的生化指标PYD/Cr、DPD/Cr在去势组中明显升高.②去势组子宫湿重明显下降,结合马雌激素组与后述三组比较子宫湿重增加;与假手术组比较,其余组的子宫内膜腺体数均有减少.结论 雷洛昔芬和雌激素结合马雌激素对去势大鼠骨质疏松均有治疗作用,雷洛昔芬对子宫内膜腺体及子宫湿重无明显刺激作用.
作者：马莉；屠蕊沁；施德源；杨来春 刊期： 2006年第05期
目的 观察组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator, t-PA)对坐骨神经血-神经屏障损伤后修复的影响.方法 选取野生型小鼠和t-PA基因敲除纯合子小鼠,利用持针器钳夹坐骨神经20 s.在损伤后第3, 7, 11, 15天观察小鼠坐骨神经血-神经屏障修复情况.采用尾静脉注射Evans Blue,观察野生型小鼠组和t-PA基因敲除小鼠组血-神经屏障渗透性的差异.利用免疫荧光和Western Blot观察两组小鼠损伤段坐骨神经血-神经屏障重要的组成性蛋白occludin的恢复情况.结果 小鼠坐骨神经损伤后,t-PA基因敲除小鼠组血-神经屏障的通透性在损伤后第7,11,15天高于野生型小鼠组.免疫荧光及其Western Blot显示t-PA基因敲除延缓了坐骨神经损伤后occludin的表达.结论 t-PA基因缺失对小鼠坐骨神经血-神经屏障损伤后的修复有一定的阻碍作用,与坐骨神经血-神经屏障损伤后,其组成性蛋白occludin的表达减少有关.
作者：凌长春；陶贤梅；萧瑶；胡华；陈祖林；宋后燕 刊期： 2006年第05期
目的 研究Smad泛素化调节因子1(Smurf1)对基因重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)诱导成骨作用的影响.方法 通过将质粒pcDEF3-Smurf1临时转染C2C12细胞并应用实时PCR和Western免疫印迹法鉴定其表达Smurf1,空载体pcDNA3.1作为阴性对照;然后用比色法测定细胞碱性磷酸酶活性和实时PCR分析细胞碱性磷酸酶、骨钙素、成骨转录因子Osterix基因表达,观察Smurf1对rhBMP-2诱导C2C12细胞向成骨细胞分化的影响.同时在相差显微镜下观察细胞形态的变化.结果 Smurf1在C2C12细胞可以通过临时转染获得很好的表达.尽管在细胞形态上没有明显的差别,但Smurf1转染的C2C12细胞在rhBMP-2作用48 h后,细胞碱性磷酸酶活性以及细胞碱性磷酸酶、骨钙素、成骨转录因子Osterix基因表达均较对照组明显下降.结论 Smurf1在BMP诱导成骨过程中发挥着负性调节作用.
作者：费琴明；陈统一；张光健；Boden Scott D；TITUS L 刊期： 2006年第05期
目的 总结心内直视手术应用鱼精蛋白所致严重循环抑制病例的救治经验.方法 回顾我中心自1995年4月～2005年8月间,心脏直视手术中输注鱼精蛋白中和肝素后出现严重循环抑制的病例资料,分析其临床特点及发生鱼精蛋白毒性反应的影响因素.结果 共有7例病人在术中出现了严重的循环抑制,都发生于输注鱼精蛋白后3-7 min(平均4 min);其中3例经心脏按摩和血管活性药的应用后好转,4例重新全量肝素化后建立体外转流(时间分别为258、173、155、97 min).全组7例病人全部抢救成功.平均机械通气时间57 h(36-84 h);平均ICU留置时间82 h(64-112 h).结论 鱼精蛋白过敏反应所导致的严重循环抑制为突发事件且往往危及生命,必要的预防措施和及时有效的抢救是成功挽救患者生命的重要环节.
作者：谈卫强；贾兵；陈张根；李炘；叶明；钟慧 刊期： 2006年第05期
目的 研究六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因导入后人外周血单个核细胞(PBMC)对烷化剂抗药性的改变.方法 利用脂质体法将含人MGMT基因的真核表达载体导入体外培养的外周血单个核细胞,实时PCR及Western blot检测目的基因mRNA及蛋白水平的表达.四氮唑蓝法(MTT)检测细胞对硝卡芥抗药性的改变.结果 转染目的基因组在mRNA及蛋白水平与转空载体及对照相比均为高表达.MTT法结果显示转目的基因组对硝卡芥的IC50是转空载体组及对照组的两倍.结论 MGMT基因导入能够增强外周血单个核细胞对烷化剂的抗性从而起到保护作用.
作者：李栋博；王季石；方琴 刊期： 2006年第05期
目的 筛选影响H5N1亚型甲型流感病毒对哺乳动物毒力变异的HA序列主要氨基酸位点.方法 根据相关文献提供的实验结果,将54株H5N1病毒株按其对哺乳动物的毒力强弱分为高毒力组和低毒力组,在NCBI Genbank数据库中下载HA基因序列,用随机森林模型完成主要变异氨基酸位点的筛选.结果 在HA序列中共筛选出8个关键位点,均位于HA1节段,分别为:279、102、228、156、154、172、140、8.位点154和156与其余几个关键位点间、位点140与172间均存在较强的协同交互作用,用上述关键位点重建的随机森林模型对病毒株毒力分类的准确率为83.33%.结论 所筛选出的8个变异位点可能在决定H5N1病毒毒力上起关键作用,值得对其分子生物学作用机理做深入研究.
作者：许慧琳；张文彤；赵耐青；姜庆五 刊期： 2006年第05期
各种外伤及其他因素如局部缺血,肿瘤等会造成神经系统的部分或全部损伤,从而导致功能丧失和其他神经性疾病.相对中枢神经而言,周围神经再生比较容易,其神经元的轴突在适当条件下可以延伸生长并穿越受损伤区域,达到再生功能,此现象为神经损伤的修复带来了新的希望.借助于外科特别是显微外科的发展,神经损伤的修复和再生研究得到了长足的进展.
作者：杜怀栋；周梁 刊期： 2006年第05期
复旦学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学
