窦金民；郭莉莉；刘宏磊；陈接根；黄海燕；宋后燕；汤其群
目的研究肿瘤细胞自然状态下耐药时,肿瘤细胞多药耐药与转移的关系.方法选取112例未经化疗的非小细胞性肺癌手术切除标本,用免疫组织化学染色观察P-gp、CD147、MMP-1、MT1-MMP的蛋白表达,分析各指标之间的关系.结果人肺癌组织中P-gp的表达与CD147、MMP-1、MT1-MMP具有明显的一致性,CD147、MMP-1、MT1-MMP在腺癌中表达高于鳞癌,且与淋巴结转移相关.结论非小细胞性肺癌自然状态下耐药时,P-gp与CD147、MMPs等肿瘤浸润、转移相关蛋白的表达之间可能存在着共同的调节机制.CD147对MMPs的调节,可能与多药耐药肿瘤的浸润、转移特性有关.
作者：董敏；周仲文；赵仲华；张秀荣；许祖德 刊期： 2005年第04期
目的探讨鸟苷酸结合蛋白基因β3亚单位(Gprotein β3 Subunit,GNB3)第10外显子C825T多态同中国哈萨克族人群肥胖的关系.方法应用PCR技术及限制性长度多态(RFLP)技术在277例哈萨克族正常体重者,121例超重者及102例肥胖者中检测GNB3基因C825T多态性.结果GNB3基因C825T多态3种基因型分别为TT、CT及CC.其中CT、TT基因型分布频率在正常体重组、超重组及肥胖组分别为46.9%,54.5%,54.9%,23.4%,16.6%,20.6%,基因型分布在组间无显著性差异(P=0.39).T等位基因分布在正常体重组、超重组及肥胖组分别为46.9%,43.8%,48.0%,组间也无显著性差异(P=0.63).将正常体重及超重者按高血压及正常血压分层,发现超重及肥胖的高血压者TT基因型频率(26.2%)较正常体重的高血压者(14.7%)有增高趋势(P=0.061).结论GNB3基因825T等位基因可能不是中国哈萨克族肥胖的主要遗传易感因子,但TT基因型可能在超重的高血压者中有一定作用,此基因在中国其他人群肥胖合并高血压中的作用有必要进行深入研究.
作者：周一俭；梁鸿子；王笑峰；汪师贞；林仁勇；金力；温浩 刊期： 2005年第04期
目的明确大鼠嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病模型的适宜条件和病程演变,为该模型更好地用于肾病综合征、肾硬化发病机制及治疗的研究奠定基础.方法用6周龄雄性Wistar大鼠,一次性颈静脉注射PAN,分别以2、3、4、5、7、9 mg/100 g体重的剂量给药,以等量生理盐水作对照,测定2周内不同时间点的尿蛋白排泄量;另以9 mg/100 g体重的剂量给药,观察28周内尿蛋白、血清胆固醇和三酰甘油的变化及肾组织的病理改变.结果各个剂量的PAN均可引起不同程度的蛋白尿,约在10～14 d达到高峰,高达(592.0±61.0)mg/24 h.28周连续观察的结果显示,PAN组动物的尿蛋白呈现典型的双相曲线,即第2周达到高峰,伴有血清胆固醇及三酰甘油的升高,此后逐渐降至接近正常,但自第12周起尿蛋白再度逐渐上升,第28周可达急性期峰值的一半.结论6周龄雄性Wistar大鼠,一次性颈静脉注射适量PAN可建立不同程度的肾病模型,成功率极高,方法简单,用药量省,动物价廉易得,且急性期发病快而周期短,不失为研究人类相应疾病的良好模型.
作者：刘丽华；朱春芳；欧周罗 刊期： 2005年第04期
目的建立兔角膜缘干细胞体外培养方法,观察其生物学特性.方法用含20%胎牛血清1640培养液对兔角膜缘干细胞进行体外培养,倒置显微镜观察培养细胞体外生长的形态,电镜观察培养细胞的超微结构并进行免疫细胞化学和间接免疫荧光鉴定.结果植块48～72 h细胞开始贴壁生长,7～10 d形成良好的单层,细胞呈圆形、卵圆形或多边形,类似角膜上皮细胞;电镜下,可见细胞表面有许多微绒毛,细胞间有桥粒连接,胞质丰富,胞质细胞器较多,含有线粒体等结构;免疫细胞化学和间接免疫荧光染色显示,培养第8天少量细胞角蛋白K3(AE5)免疫反应呈阳性,细胞质被染色,培养第14天和第21天,较多细胞AE5免疫反应阳性.结论含20%胎牛血清1640培养液能作为角膜缘干细胞培养的基础液.应用组织培养方法获得的原代培养细胞具有与正常角膜缘干细胞相一致的生物学特性.
作者：韩晓洁；佘振钰；俞彰；周国民 刊期： 2005年第04期
目的探讨A549肺腺癌多细胞球体的多药耐药基因(mdr1)和多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达,甲氧基异丁基异腈(MIBI)摄取结果能否预测化疗效果.方法①血浆高峰浓度的化疗药物顺铂(DDP)、长春花碱酰胺(VDS)、氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶,5-FU)、羟喜树碱(HCP)、丝裂霉素(MMC)、多柔比星(阿霉素,ADM)分别进行药物敏感性实验.②单层贴壁细胞培养.96孔板1个,每组4孔,2×104细胞/孔.③MTT检测观察疗效.细胞加化疗药后培养48 h,然后加MTT 5 mg/mL,每孔20 μL,4 h后用酶标仪(490 nm)测量吸光度值.④RT-PCR检测A549细胞和MCF-7耐药株的mdr1和MRP表达,β2-MG作内参照.⑤96孔板内每孔一个球体,每孔掺入99mTc-MIBI 9.25×104 Bq(2.5μCi),分别于60和120 min结束掺入并测量γ计数.结果①A549细胞药敏实验对DDP不敏感,对MMC、VDS、ADM、5-FU、HCP敏感.②MCF-7长春新碱耐药株(MCF-7/VCR)对DDP、VDS不敏感,对MMC、ADM、5-FU和HCP较敏感.③A549细胞及球体的Mdr1/β2-MG为0,MRP/β2-MG分别为0.76和0.62;MCF-7耐药细胞的mdr1/β2-MG和MRP/β2-MG分别为35和4.36.④A549多细胞球体对99mTc-MIBI 120 min的摄取值高于60 min摄取值(P＜0.05).结论A549多细胞球体的mdr1和MRP表达水平较低以及MIBI摄取阳性提示无多药耐药性产生,与化疗药物敏感性检测结果基本一致.A549细胞对DDP耐药说明除mdr1和MRP之外,还存在与转运蛋白间接相关的其他耐药机制.
作者：史德刚；黄钢；苗积生；林祥通 刊期： 2005年第04期
有研究显示,妇女绝经后卵巢功能衰退,雌激素的下降使体内糖、脂代谢发生明显改变,而且雌激素的下降与胰岛素抵抗亦有关.本实验通过卵巢切除来降低大鼠体内的雌激素水平,明确其对大鼠肥胖评定指数(Lee Index)与糖代谢的影响.
作者：丁昉；石凤英；刘邦忠；高键 刊期： 2005年第04期
目的检测心房颤动(AF)患者血浆组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)抗原的变化,探讨组织因子凝血途径在心房血栓形成机制中的作用.方法选择心房颤动患者64例,采用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定血浆TF和TFPI抗原水平,并与对照组进行比较.结果①与正常对照组比较,AF组血浆TF抗原水平显著增高[(1 060.0±669.8)pg/mL vs (423.6±245.1)pg/mL,P=0.000],总TFPI和游离TFPI抗原水平降低[(38.2±8.9)ng/mL vs(70.1±24.0)ng/mL,P=0.000;(26.3±8.0)ng/mL vs(41.2±16.7)ng/mL,P=0.000].②伴左房血栓心房颤动组与无左房血栓心房颤动组比较,伴左房血栓心房颤动组TF抗原水平显著增高[(1 431.4±564.5)pg/mL vs(904.6±660.3)pg/mL,P=0.004],总TFPI和游离TFPI抗原水平降低[(33.1±9.6)ng/mL vs(40.0±7.8)ng/mL,P=0.01;(22.9±8.2)ng/mL vs (22.7±7.4)ng/mL,P=0.048].结论心房颤动患者血浆组织因子途径改变表现为凝血活性增高和抗凝活性减低,组织因子凝血途径参与了心房颤动患者心房血栓形成机制.
作者：周亚刚；刘立根；施劲东；朱宏钧；蒋克泉；伍旭升；曹健敏 刊期： 2005年第04期
目的探讨急、慢性病毒性心肌炎和感染性扩张型心肌病小鼠心肌细胞凋亡的动态变化.方法以柯萨奇病毒B3感染Balb/c小鼠建立急、慢性心肌炎和扩张型心肌病的系列动物模型,同期设正常对照;经组织病理学方法和超声心动图验证模型后,以缺口末端标记法(TUNEL)检测各组小鼠心肌细胞凋亡.结果各期感染小鼠心肌细胞凋亡率较同期对照组明显增高,心肌细胞凋亡率依次分别为(8.2±1.4)%vs(1.3±0.5)%,(15.3±1.1)%vs(2.7±0.7)%,(13.9±2.1)%vs(3.1±0.6)%,(均P＜0.01).结论心肌细胞凋亡贯穿病毒性心脏病全程,可能对其病程和预后产生深远影响.
作者：张召才；李双杰；杨英珍；陈瑞珍；程蕾蕾；葛均波；陈灏珠 刊期： 2005年第04期
目的研究Smad2在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达,为肝纤维化的发生和发展机制提供进一步的实验依据.方法用免疫组化法检测慢性乙型肝炎患者肝活检组织中Smad2的表达及其变化规律.结果Smad2阳性着色定位于细胞质,肝血窦窦壁细胞、星状细胞、变性肝细胞均可见Smad2蛋白表达.随着肝损伤、肝脏病理改变的进展,Smad2的表达逐渐增强.结论慢性乙型肝炎患者肝组织升高的Smad2主要由非实质细胞产生.Smad 2的表达与肝组织炎症和纤维化程度成正比.
作者：顾文君；沈锡中；朱腾方；胡锡琪 刊期： 2005年第04期
目的报告内窥镜辅助下手术治疗上干型胸廓出口综合征的新方法.方法为9例上干型胸廓出口综合征患者局麻下通过颈外侧区作长1.5 cm切口,在内窥镜辅助下切断部分前、中斜角肌的腱性起始纤维.结果术后随访4个月～2年.按Wood等的评定标准评价:优6例,良2例,可1例.结论在内窥镜辅助下经颈部微小切口切断部分前、中斜角肌的腱性起始纤维可解除斜角肌对臂丛神经的压迫,是一种治疗上干型胸廓出口综合征的有效微创手术方法.
作者：林浩东；陈德松；方有生；顾玉东 刊期： 2005年第04期
目的观察3木脂素类成分:异型南五味子丁素(heteroclitin D,HD)、五味子酚(schisanhenol,SAL)和(+)-安五脂素[(+)-anwulignan,AN]对血小板聚集的影响.方法采用Born比浊法,观察此3种木脂素在0.05～25 mg/L时对腺苷二磷酸(adenosine diphosphate,ADP)和血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)诱导的兔血小板1、3、5 min聚集率和大聚集率以及大聚集时间的影响.结果①HD和SAL可呈剂量依赖性抑制ADP和PAF诱导的血小板大聚集率,AN的抑制作用较弱.②对ADP诱导的血小板1、3、5 min聚集率,HD和SAL均可全程稳定抑制,AN 5mg/L在3、5min时有较明显的抑制作用;对PAF诱导的血小板1、3、5 min聚集率,HD在1、3 min时抑制作用较强,SAL在3、5 min时抑制作用较强.③HD、SAL和AN对ADP和PAF诱导的血小板大聚集时间无明显影响.结论HD、SAL和AN在离体水平可不同程度抑制ADP和PAF诱导的兔血小板聚集.HD的抑制作用强,可视为南五味子属药用植物的重要活性成分之一.
作者：蒋仕丽；章蕴毅；陈道峰 刊期： 2005年第04期
目的研究高压氧治疗(HBOT)对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠外周神经传导速度和血清、局部转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法STZ糖尿病大鼠造模成功2个月,经电镜证实有神经病变后,随机分为3组:①HBOT组(n=31):用胰岛素控制血糖,每天接受0.15 MPa、HBOT 1 h,连续20 d;②糖尿病对照(DM,n=32)组:仅用胰岛素控制血糖;③正常对照(NC,n=20)组:腹腔注射生理盐水的无糖尿病的正常STZ大鼠.分别在疗程10、20 d时做肌电图后处死,取股动脉血用EIA法测定血清TGF-β1水平,同时取后肢神经进行苏木精-伊红染色、病理学观察和电镜观察,并用TGF-β1多抗对神经组织做DAB二步法免疫组化染色.结果HBOT10 d后,治疗组后肢坐骨神经的传导速度明显高于同期DM组(P＜0.05),但低于NC组;HBOT 20 d后,治疗组后肢胫、腓神经的传导速度明显高于同期DM组(P＜0.01);而与NC组间无明显差异(P＞0.05);血清TGF-β1水平较DM组明显降低(P＜0.05),与NC组间无明显差异.病理观察显示神经组织髓鞘内外的TGF-β1染色明显减少.结论HBOT可改善STZ大鼠糖尿病周围神经病变,其机制可能与抑制TGF-β1生成和其在神经组织表达有关.
作者：刘芳；周景花；丁巧英；彭名淑；管佩玲；张杰；姚庆姑 刊期： 2005年第04期
表皮生长因子受体(EGFR)是ErbB(ErbB1～4)家族的一员,即ErbB1.EGFR为一种跨膜糖蛋白,属受体型酪氨酸蛋白激酶(RTK),其配体包括EGF、TGFα、amphiregulin、he-patin-bind-ing-EGF、heregulin、betacellulin,后3种也可与ErbB4结合.由于EGFR在多种肿瘤中有过表达和(或)异常表达,与肿瘤的发生、发展关系密切,故其研究进展倍受关注[1].
作者：于晓棠；陆世伦；朱世能 刊期： 2005年第04期
近年来,全反式维甲酸(全反式视黄酸,all-trans retinoic acid,ATRA)用于某些实验性增生性肾炎的治疗取得了良好的效果,引起了人们极大的兴趣.本文报告小剂量ATRA对大鼠非增生性嘌呤霉素氨基核苷肾病的改善作用.
作者：刘丽华；朱春芳；欧周罗 刊期： 2005年第04期
目的建立一种HPLC法同时测定地塞米松色甘酸钠滴鼻液中磷酸地塞米松和色甘酸钠含量.方法采用Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:A:缓冲液(0.01 mol/L磷酸二氢钾,pH为4.7),B:甲醇,0～5 min:A-B(42:58),6 min后A-B(30:70),流速:1 mL/min,柱温:25℃,检测波长:240 nm.外标法计算含量.结果在该色谱条件下,磷酸地塞米松和色甘酸钠线性良好(r＞0.999,n=6),加样回收率为98%～102.55%(n=3),RSD＜2.0%(n=3).样品在8 h内稳定.测得样品含量合格,在97%～103%.结论经方法学实验验证,该方法简便,快速,结果准确,可靠,重现性好.
作者：黄滔敏；杨鸿；刘振；沙云菲；段更利 刊期： 2005年第04期
目的探讨内侧半月板半脱位与退变性关节炎骨赘增生、半月板损伤和关节渗出的关系.方法回顾性分析120膝关节MRI图像,记录半月板突出、膝关节骨赘增生、半月板损伤、关节积液的情况.将突出≥3mm定义为半月板半脱位,统计分析半月板半脱位与骨赘增生、半月板损伤、关节积液的关系.结果半月板半脱位与骨赘增生(69%),半月板损伤(70%)有关(P＜0.05),与关节积液无关(P＞0.05),比值比(OR)及95%可信区(CI)间分别为2.347(1.102～4.997)、2.494(1.169～5.322)、0.880(0.417～1.853).结论半月板突出与骨赘增生、半月板损伤有关,可能是退变性关节炎发生、发展因素之一.
作者：黄加张；顾湘杰；王旭；陈飞雁 刊期： 2005年第04期
目的研究无精子症和少精子症患者染色体畸变及Y染色体(Yq11区)无精子症因子(azoospermic factor,AZF)微缺失情况,建立Y染色体微缺失的临床筛查方法.对原发性无精子及少弱精症患者与AZF微缺失的关系.方法对145例患者(无精子症102例,严重少精子症43例)经染色体核型分析及AZF的3个位点8对引物PCR扩增,检测染色体畸变和Y染色体微缺失率.选取6个Y染色体特异性序列标签位点(STS),用PCR技术检测145例精子发生障碍患者AZF区微缺失情况.结果145例中染色体核型异常12例,占8.3%.AZF区微缺失21例,缺失率为14.5%.无精子症和严重少精子症AZF缺失率分别为14.70%和11.62%.145例中AZF区微缺失21例,表现为无精子症.缺失均在AZFc区,7例为DAZ(sY254、sY255)缺失,另2例为DNA加sY157缺失.结论染色体畸变和Y染色体微缺失是导致无精子症和严重少精子症的主要原因之一.无精子症缺失率高于严重少精子症患者.AZF 3个位点8对引物PCR扩增可作为Y染色体微缺失的临床筛查方法.
作者：金辛良；徐丹枫；朱晓明；谭剑敏；周伟民；张涛亮；许嘉骏；高赟；闵志廉 刊期： 2005年第04期
目的探讨异氟醚对大鼠肺缺血再灌注损伤下核因子-κB(NF-κB)结合活性及细胞因子诱导的中性粒细胞趋化物(CINC)基因表达的影响.方法建立在体大鼠肺缺血再灌注模型.SD雄性大鼠120只,随机分成4组(n=30):手术对照组(C组),缺血再灌注组(IR组),异氟醚-缺血再灌注组(ISO-IR组)和异氟醚组(ISO-C组).分别在缺血45 min、再灌注30、60、120 min处死大鼠,行动脉血气分析,测定肺组织湿干比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性、NF-κB结合活性和肺组织CINC mRNA的表达、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数、沉渣白细胞分类和总蛋白(TP)的含量及肺组织病理学检查.结果①再灌注后IR组和ISO-IR组的W/D值、MPO活性、NF-κB结合活性和CINCmRNA的表达均高于C组(P＜0.05),而再灌注60 min后ISO-IR组的以上各指标较IR组均有明显降低(P＜0.05);②IR组BALF中中性粒细胞(PMN)所占的百分比较C组明显升高(P＜0.05),而ISO-IR组的升高并不显著,且较IR组明显降低;③IR组和ISO-IR组BALF中TP含量均较C组升高明显(P＜0.05),但ISO-IR组又明显低于IR组(P＜0.05);④ISO-IR组肺组织病理学变化较IR组明显减轻.结论异氟醚的应用可以减轻肺缺血再灌注损伤,作用机制可能与其抑制NF-κB的活化,降低肺组织CINC mRNA的表达上调,减少肺内PMN的浸润密切相关.
作者：王婷；蒋豪；薛张纲；欧周罗 刊期： 2005年第04期
目的观察醛糖还原酶(AR)基因转染及AR抑制剂(ARI)对体外培养大鼠肾系膜细胞(MsC)增殖的影响.方法应用Western blot检测转基因MsC及PDGF作用MsC后AR的表达.四唑蓝比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,对比大鼠正常MsC和转基因MsC的生长情况,并观察ARI--Sorbinil和Zopolrestat对血小板源性生长因子(PDGF)和小牛血清(NBS)促细胞增殖作用的影响.结果①Western blot鉴定转基因MsCAR表达较正常MsC明显增高;②转染组较正常组生长速度快;③PDGF作用MsC后可上调AR的表达;④PDGF和10%NBS均可显著刺激两组细胞的增殖,ARI可部分抑制PDGF对正常组和转染组的促增殖作用,对10%NBS,ARI可部分抑制其对转染组的促增殖作用,而对正常组无显著影响,抑制作用呈剂量依赖性.结论AR可能参与了MsC在病理状况下的过度增殖过程.
作者：车祺；蒋涛；林伊凤；李慧；张农 刊期： 2005年第04期
目的确定肝脂酶(hepatic lipase,HL)LIPC基因9种突变在中国人群中的频率,并探讨这些突变与脂代谢和冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病,CAD)易感性的关系.方法对224例CAD患者和129例正常人LIPC基因相应位点进行通用TaqMan探针技术的实时荧光PCR方法,检测LIPC基因单核苷酸多态性(SNP).用HWE软件、STA或SPSS软件分别进行遗传平衡检验和多变量等统计学分析.结果在正常对照组和CAD患者组中LIPC的9个高频SNPs位点均检出突变基因.RS2242064位点突变基因型为A/A、A/C、C/C,其频率在CAD患者组和对照组中分布有显著差异(P=0.019);RS2242064位点突变的等位基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡;在平衡了其他混杂因素的情况下A/C基因型是冠心病的一项独立的危险因素,且非常显著(OR=1.95,P=0.021).在CAD组中AC突变杂合子与A/A+C/C的患者相比,apo(A)显著降低(P=0.045),HDL显著降低(P=0.02).结论在中国人群中LIPC的9个高频SNPs位点突变均在入选对象中检出,LIPC基因RS2242064位点突变为A/C基因型可能是中国人的易感因子之一.
作者：傅蕾；施海明；黄薇；王颖；罗心平；何仲海；许建中；金慧根 刊期： 2005年第04期
复旦学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学
