于晓棠；陆世伦；朱世能
目的探讨急性排斥反应过程中RANTES基因与蛋白在移植心脏局部表达的意义及环孢素的影响.方法施行大鼠异位心脏移植术,移植大鼠分为3组,每组45只,对照组5只:SD大鼠间的移植为同系移植组(A组),Wistar至SD大鼠的移植分为未用环孢素干预组(B组)及环孢素干预组(C组),健康SD大鼠为对照组.采用RT-PCR方法检测RANTES mRNA的表达,免疫组化方法检测RANTES蛋白的表达.结果RANTESmRNA在A组各时间点和对照组均呈低水平表达,在B组的表达变化与急性排斥反应的进程相关,术后第3天RANTESmRNA表达上调至峰值(3.5±1.27);C组应用环孢素后,RANTESmRNA表达峰值(1.2±0.78)显著低于B组(t=2.18,P＜0.05).RANTES蛋白定位于移植心脏血管内皮细胞与间质单个核浸润细胞.结论RANTES基因与蛋白的表达上调与排斥反应过程中移植物间质单个核细胞浸润密切相关,可能对急性排斥反应的早期诊断有帮助;抑制RANTES信号通路可能是CsA发挥免疫抑制作用的又一分子免疫学机制.
作者：顾晓；唐孝达；顾沈阳；杨尚琪；周佩军；徐达；王祥慧；谭建明；宋言峥 刊期： 2005年第04期
目的建立一种HPLC法同时测定地塞米松色甘酸钠滴鼻液中磷酸地塞米松和色甘酸钠含量.方法采用Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:A:缓冲液(0.01 mol/L磷酸二氢钾,pH为4.7),B:甲醇,0～5 min:A-B(42:58),6 min后A-B(30:70),流速:1 mL/min,柱温:25℃,检测波长:240 nm.外标法计算含量.结果在该色谱条件下,磷酸地塞米松和色甘酸钠线性良好(r＞0.999,n=6),加样回收率为98%～102.55%(n=3),RSD＜2.0%(n=3).样品在8 h内稳定.测得样品含量合格,在97%～103%.结论经方法学实验验证,该方法简便,快速,结果准确,可靠,重现性好.
作者：黄滔敏；杨鸿；刘振；沙云菲；段更利 刊期： 2005年第04期
目的探讨A549肺腺癌多细胞球体的多药耐药基因(mdr1)和多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达,甲氧基异丁基异腈(MIBI)摄取结果能否预测化疗效果.方法①血浆高峰浓度的化疗药物顺铂(DDP)、长春花碱酰胺(VDS)、氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶,5-FU)、羟喜树碱(HCP)、丝裂霉素(MMC)、多柔比星(阿霉素,ADM)分别进行药物敏感性实验.②单层贴壁细胞培养.96孔板1个,每组4孔,2×104细胞/孔.③MTT检测观察疗效.细胞加化疗药后培养48 h,然后加MTT 5 mg/mL,每孔20 μL,4 h后用酶标仪(490 nm)测量吸光度值.④RT-PCR检测A549细胞和MCF-7耐药株的mdr1和MRP表达,β2-MG作内参照.⑤96孔板内每孔一个球体,每孔掺入99mTc-MIBI 9.25×104 Bq(2.5μCi),分别于60和120 min结束掺入并测量γ计数.结果①A549细胞药敏实验对DDP不敏感,对MMC、VDS、ADM、5-FU、HCP敏感.②MCF-7长春新碱耐药株(MCF-7/VCR)对DDP、VDS不敏感,对MMC、ADM、5-FU和HCP较敏感.③A549细胞及球体的Mdr1/β2-MG为0,MRP/β2-MG分别为0.76和0.62;MCF-7耐药细胞的mdr1/β2-MG和MRP/β2-MG分别为35和4.36.④A549多细胞球体对99mTc-MIBI 120 min的摄取值高于60 min摄取值(P＜0.05).结论A549多细胞球体的mdr1和MRP表达水平较低以及MIBI摄取阳性提示无多药耐药性产生,与化疗药物敏感性检测结果基本一致.A549细胞对DDP耐药说明除mdr1和MRP之外,还存在与转运蛋白间接相关的其他耐药机制.
作者：史德刚；黄钢；苗积生；林祥通 刊期： 2005年第04期
目的探讨更年春方对卵巢切除大鼠骨与子宫组织雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型的调节.方法10～12月龄SD雌性大鼠卵巢切除建立骨质疏松模型.分别用更年春方、尼尔雌醇灌药4个月,RT-PCR法检测胫骨骨骺与子宫组织ER亚型mRNA的表达.结果大鼠卵巢切除后,血E2水平、椎骨骨密度、子宫湿重及胫骨骨骺与子宫组织ERα、ERβmRNA的表达均明显下降.尼尔雌醇治疗后椎骨骨密度、子宫湿重及胫骨骨骺与子宫组织ERα、ERβmRNA的表达均增高;更年春方组椎骨骨密度及胫骨骨骺与子宫组织ERβmRNA的表达增高,而子宫湿重及胫骨骨骺与子宫组织ERα mRNA的表达无明显改变.结论更年春方对卵巢切除骨质疏松大鼠有防治作用,对子宫无不良反应.其机制可能与其选择性上调胫骨骨骺与子宫组织ERβmRNA的表达有关.
作者：刘克菊；王文君；金慰芳；周文江；李大金 刊期： 2005年第04期
表皮生长因子受体(EGFR)是ErbB(ErbB1～4)家族的一员,即ErbB1.EGFR为一种跨膜糖蛋白,属受体型酪氨酸蛋白激酶(RTK),其配体包括EGF、TGFα、amphiregulin、he-patin-bind-ing-EGF、heregulin、betacellulin,后3种也可与ErbB4结合.由于EGFR在多种肿瘤中有过表达和(或)异常表达,与肿瘤的发生、发展关系密切,故其研究进展倍受关注[1].
作者：于晓棠；陆世伦；朱世能 刊期： 2005年第04期
弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)伤情重,治疗困难,死亡率高,预后差.在平时和战时均常见,在重型颅脑损伤中占20%～50%,在车祸致重型颅脑损伤中占85%[1],在死亡患者中占29%～43%,仅次于急性硬膜下血肿[2],是颅脑损伤患者重残及植物生存的常见原因之一[3],文献报道其死亡率高达42%～62%[4].因此,对DAI的发病机制、影像学特征、临床表现和治疗措施等方面进行深入研究,将有助于提高颅脑损伤的诊治水平.
作者：颜玉峰；季耀东；昝明熙 刊期： 2005年第04期
目的探讨出生顺序与肝癌发生的关系,估计环境因素与遗传因素在肝癌发生中的相对作用.方法应用Haldane-Smith法和Greenwood-Yule法对肝癌患者进行出生顺序分析.结果用Haldane-Smith法分析97例肝癌患者的出生顺序,∑6A=1 542,∑Χ6A=1 617,C值为0.935(P＞0.20);对肝癌先证者按HBsAg携带状态进行分层分析,HBsAg阳性者的C值为0.950(P＞0.20),阴性者的C值为0.274(P＞0.50).用Greenwood-Yule法比较肝癌患者出生顺序的实际分布和期望分布,显示两者无明显差异,实际数与期望数的比值波动在0.78～1.38,没有随出生顺序而增加或降低的趋势;按肝癌先证者HBsAg携带状态进行分层分析,无论HBsAg阳性或阴性,其出生顺序的实际分布和期望分布均无明显差异,实际数与期望数的比值亦均无随出生顺序而增加或降低的趋势.结论洛阳市肝癌的发生可能与出生顺序无关.
作者：曹燕燕；边建超；郭惠媛；王启敏；王启军；张竹梅；汤伯明 刊期： 2005年第04期
目的观察3木脂素类成分:异型南五味子丁素(heteroclitin D,HD)、五味子酚(schisanhenol,SAL)和(+)-安五脂素[(+)-anwulignan,AN]对血小板聚集的影响.方法采用Born比浊法,观察此3种木脂素在0.05～25 mg/L时对腺苷二磷酸(adenosine diphosphate,ADP)和血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)诱导的兔血小板1、3、5 min聚集率和大聚集率以及大聚集时间的影响.结果①HD和SAL可呈剂量依赖性抑制ADP和PAF诱导的血小板大聚集率,AN的抑制作用较弱.②对ADP诱导的血小板1、3、5 min聚集率,HD和SAL均可全程稳定抑制,AN 5mg/L在3、5min时有较明显的抑制作用;对PAF诱导的血小板1、3、5 min聚集率,HD在1、3 min时抑制作用较强,SAL在3、5 min时抑制作用较强.③HD、SAL和AN对ADP和PAF诱导的血小板大聚集时间无明显影响.结论HD、SAL和AN在离体水平可不同程度抑制ADP和PAF诱导的兔血小板聚集.HD的抑制作用强,可视为南五味子属药用植物的重要活性成分之一.
作者：蒋仕丽；章蕴毅；陈道峰 刊期： 2005年第04期
近年来,全反式维甲酸(全反式视黄酸,all-trans retinoic acid,ATRA)用于某些实验性增生性肾炎的治疗取得了良好的效果,引起了人们极大的兴趣.本文报告小剂量ATRA对大鼠非增生性嘌呤霉素氨基核苷肾病的改善作用.
作者：刘丽华；朱春芳；欧周罗 刊期： 2005年第04期
目的研究Smad2在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达,为肝纤维化的发生和发展机制提供进一步的实验依据.方法用免疫组化法检测慢性乙型肝炎患者肝活检组织中Smad2的表达及其变化规律.结果Smad2阳性着色定位于细胞质,肝血窦窦壁细胞、星状细胞、变性肝细胞均可见Smad2蛋白表达.随着肝损伤、肝脏病理改变的进展,Smad2的表达逐渐增强.结论慢性乙型肝炎患者肝组织升高的Smad2主要由非实质细胞产生.Smad 2的表达与肝组织炎症和纤维化程度成正比.
作者：顾文君；沈锡中；朱腾方；胡锡琪 刊期： 2005年第04期
目的研究甲泼尼龙5 mg/kg是否能有效抑制体外循环(CPB)诱发的炎症反应,并对肺血管内皮功能产生保护效应.方法健康家犬15只,随机分为3组,A组:不进行CPB,作为非体外对照组;B组:麻醉后注射生理盐水10 mL,常规全麻和CPB,主动脉阻断90 min;C组:麻醉后静脉给予甲泼尼龙5 mg/kg,其余处理同B组.B、C组分别在手术前及主动脉开放前、开放后30 min和90 min 4个时间点采动脉血,放免法测定血浆白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)和白介素-10(IL-10)水平;手术结束时,A、B、C 3组均取右肺动脉段,固定于张力传感器,测定血管环内皮依赖性和非内皮依赖性扩张能力的变化.结果CPB前各细胞因子水平无统计学差异,CPB使IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10产生增多,血浆水平明显升高(P＜0.01);C组IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8升高幅度较小,与B组相比有明显差异,而IL-10水平明显高于B组.3组肺血管环对去甲肾上腺素的反应相似,ACh产生的大舒张反应在CPB后的肺动脉环明显降低,只有A组的50%(P＜0.001);体外前注射甲泼尼龙5 mg/kg使ACh产生的大舒张反应从31%升高到48%(P＜0.01);各组动脉环对硝酸甘油产生的舒张反应相似,其Rmax和EC50在3组间无统计学差异.结论术前注射甲泼尼龙5 mg/kg能有效抑制CPB诱发的炎症反应、保护血管内皮功能,改善肺动脉的内皮依赖性舒张功能.
作者：郭克芳；姜桢；曾真；张惠琴；王春生 刊期： 2005年第04期
目的确定肝脂酶(hepatic lipase,HL)LIPC基因9种突变在中国人群中的频率,并探讨这些突变与脂代谢和冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病,CAD)易感性的关系.方法对224例CAD患者和129例正常人LIPC基因相应位点进行通用TaqMan探针技术的实时荧光PCR方法,检测LIPC基因单核苷酸多态性(SNP).用HWE软件、STA或SPSS软件分别进行遗传平衡检验和多变量等统计学分析.结果在正常对照组和CAD患者组中LIPC的9个高频SNPs位点均检出突变基因.RS2242064位点突变基因型为A/A、A/C、C/C,其频率在CAD患者组和对照组中分布有显著差异(P=0.019);RS2242064位点突变的等位基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡;在平衡了其他混杂因素的情况下A/C基因型是冠心病的一项独立的危险因素,且非常显著(OR=1.95,P=0.021).在CAD组中AC突变杂合子与A/A+C/C的患者相比,apo(A)显著降低(P=0.045),HDL显著降低(P=0.02).结论在中国人群中LIPC的9个高频SNPs位点突变均在入选对象中检出,LIPC基因RS2242064位点突变为A/C基因型可能是中国人的易感因子之一.
作者：傅蕾；施海明；黄薇；王颖；罗心平；何仲海；许建中；金慧根 刊期： 2005年第04期
目的通过分析35年间子宫内膜癌的病例,了解子宫内膜癌发病在35年间的变化特点.方法回顾性分析中山医院1969年3月-2003年12月收治的子宫内膜癌病例209例,以年代为限分为3组,1969-1979年第1组25例,1980-1989年第2组41例,1990-1999年第3组57例,2000年1月-2003年12月为第4组86例.采用对照研究的方法回顾性分析4组病例占同期妇科住院病例的比例、对发病例数、发病年龄、生育和月经情况、合并高血压、糖尿病及肥胖进行比较分析.结果4组病例分别是同期妇科住院病例的0.39%、0.68%、0.84%和17.4%.第4组是第1、2、3组的44.6倍、25.6倍、20.7倍,第3组是第1、2组的2.2倍、1.2倍,第2组是第1组的1.7倍.子宫内膜癌病例数以每10年几何对数的速度增长,第4组的年平均数是第1组的10倍.发病年龄每10年增大1岁,P=0.032 8.第3、4组流产数明显多于第1、2组P=0.036,P=0.003.第4组绝经年龄和行经年限增加P=0.044 4,P=0.002 0.第3、4组合并糖尿病、肥胖病例明显增加P=0.011 4,P=0.028 2.结论我国目前子宫内膜癌的病例增长迅速与国外一致,发病年龄并未年轻化,同国外相近.近10年糖尿病、肥胖发病率增加、绝经延后和行经年限增加是子宫内膜癌发病率增加的因素之一.
作者：杨丹；韩立敏 刊期： 2005年第04期
目的研究肿瘤细胞自然状态下耐药时,肿瘤细胞多药耐药与转移的关系.方法选取112例未经化疗的非小细胞性肺癌手术切除标本,用免疫组织化学染色观察P-gp、CD147、MMP-1、MT1-MMP的蛋白表达,分析各指标之间的关系.结果人肺癌组织中P-gp的表达与CD147、MMP-1、MT1-MMP具有明显的一致性,CD147、MMP-1、MT1-MMP在腺癌中表达高于鳞癌,且与淋巴结转移相关.结论非小细胞性肺癌自然状态下耐药时,P-gp与CD147、MMPs等肿瘤浸润、转移相关蛋白的表达之间可能存在着共同的调节机制.CD147对MMPs的调节,可能与多药耐药肿瘤的浸润、转移特性有关.
作者：董敏；周仲文；赵仲华；张秀荣；许祖德 刊期： 2005年第04期
目的分析牙科汞合金充填对成人健康的影响.方法128名牙科汞合金充填者与128名对照作为研究对象.测定尿中汞、白蛋白(ALB)、β2微球蛋白尿(β2-MG)和N-己酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平,并用尿肌酐进行校正.WHO核心测试组合评价情感状态和神经行为功能.结果充填组的平均尿汞水平为4.34 mol Hg/mmol Cr,显著高于对照组的平均水平(3.57 nmolHg/mmol Cr,P=0.000).汞合金充填面数量、喜烫食习惯、磨牙习惯以及性别是影响汞释放的主要因素.充填组与对照组肾功能指标没有统计学差异.不论充填数多少和充填时间长短,均未发现情感状态的改变.虽然充填组复杂反应耗时比对照组多,符号译码总操作次数和正确次数比对照组低,但多元回归分析显示这种改变与充填数无关.结论虽然牙科汞暴露可以增加机体汞负荷,本研究表明目前的暴露水平下还不会导致明显的肾脏和神经系统损害.
作者：叶细标；许缃；徐培成；朱霖；傅华 刊期： 2005年第04期
目的报告内窥镜辅助下手术治疗上干型胸廓出口综合征的新方法.方法为9例上干型胸廓出口综合征患者局麻下通过颈外侧区作长1.5 cm切口,在内窥镜辅助下切断部分前、中斜角肌的腱性起始纤维.结果术后随访4个月～2年.按Wood等的评定标准评价:优6例,良2例,可1例.结论在内窥镜辅助下经颈部微小切口切断部分前、中斜角肌的腱性起始纤维可解除斜角肌对臂丛神经的压迫,是一种治疗上干型胸廓出口综合征的有效微创手术方法.
作者：林浩东；陈德松；方有生；顾玉东 刊期： 2005年第04期
目的研究无精子症和少精子症患者染色体畸变及Y染色体(Yq11区)无精子症因子(azoospermic factor,AZF)微缺失情况,建立Y染色体微缺失的临床筛查方法.对原发性无精子及少弱精症患者与AZF微缺失的关系.方法对145例患者(无精子症102例,严重少精子症43例)经染色体核型分析及AZF的3个位点8对引物PCR扩增,检测染色体畸变和Y染色体微缺失率.选取6个Y染色体特异性序列标签位点(STS),用PCR技术检测145例精子发生障碍患者AZF区微缺失情况.结果145例中染色体核型异常12例,占8.3%.AZF区微缺失21例,缺失率为14.5%.无精子症和严重少精子症AZF缺失率分别为14.70%和11.62%.145例中AZF区微缺失21例,表现为无精子症.缺失均在AZFc区,7例为DAZ(sY254、sY255)缺失,另2例为DNA加sY157缺失.结论染色体畸变和Y染色体微缺失是导致无精子症和严重少精子症的主要原因之一.无精子症缺失率高于严重少精子症患者.AZF 3个位点8对引物PCR扩增可作为Y染色体微缺失的临床筛查方法.
作者：金辛良；徐丹枫；朱晓明；谭剑敏；周伟民；张涛亮；许嘉骏；高赟；闵志廉 刊期： 2005年第04期
目的表达和纯化人睫状神经营养因子(CNTF)并观察其生物学活性.方法用PCR方法构建人CNTF的结构基因,并克隆于pLy4原核表达载体中.将重组表达质粒pLy4-CNTF转化大肠埃希菌JF1125,30℃培养至A600(nm)达到0.6时,迅速升温至42℃诱导目的蛋白的表达.细菌经超声破胞,包涵体经变性、复性、透析和阴离子交换层析,获得纯化的CNTE重组蛋白.然后,用鸡胚背根神经节神经元细胞存活实验观察其生物活性.结果42℃诱导后可以获得Mr≈22.9×103的目的蛋白,Westem印迹结果进一步表明,其具有人CNTF的抗原性.表达蛋白主要以不溶形式存在,占菌体蛋白的35%以上,表达产物经变性、复性,纯化后可获得纯度90%以上的目的蛋白.该重组蛋白能够促进鸡胚背根神经节神经元细胞的存活.结论在大肠埃希菌JF1125中成功表达了人CNTF分子,经变性、复性,纯化后得到具有生物活性的蛋白.
作者：窦金民；郭莉莉；刘宏磊；陈接根；黄海燕；宋后燕；汤其群 刊期： 2005年第04期
目的探讨鸟苷酸结合蛋白基因β3亚单位(Gprotein β3 Subunit,GNB3)第10外显子C825T多态同中国哈萨克族人群肥胖的关系.方法应用PCR技术及限制性长度多态(RFLP)技术在277例哈萨克族正常体重者,121例超重者及102例肥胖者中检测GNB3基因C825T多态性.结果GNB3基因C825T多态3种基因型分别为TT、CT及CC.其中CT、TT基因型分布频率在正常体重组、超重组及肥胖组分别为46.9%,54.5%,54.9%,23.4%,16.6%,20.6%,基因型分布在组间无显著性差异(P=0.39).T等位基因分布在正常体重组、超重组及肥胖组分别为46.9%,43.8%,48.0%,组间也无显著性差异(P=0.63).将正常体重及超重者按高血压及正常血压分层,发现超重及肥胖的高血压者TT基因型频率(26.2%)较正常体重的高血压者(14.7%)有增高趋势(P=0.061).结论GNB3基因825T等位基因可能不是中国哈萨克族肥胖的主要遗传易感因子,但TT基因型可能在超重的高血压者中有一定作用,此基因在中国其他人群肥胖合并高血压中的作用有必要进行深入研究.
作者：周一俭；梁鸿子；王笑峰；汪师贞；林仁勇；金力；温浩 刊期： 2005年第04期
目的制备具有缓释特性和可生物降解性的多柔比星聚β-羟基丁酸酯微球.方法以生物可降解性材料聚β-羟基丁酸酯为载体,液中干燥法制备多柔比星微球,并对其表面特征、载药量、包封率、粒径、跨距、体外释放、灭菌的影响进行考察.结果所得微球呈桔红色,外观圆整,分散性好;载药量为1.01%,包封率为16.79%,平均粒径为43.13 μm,跨距为1.45;微球体外释放呈现3个不同阶段,60 d累计释放率达65%;灭菌剂量低于6 kGy时,灭菌后仍有菌落检出,当灭菌剂量＞12 kGy时材料和药物的性质有改变,剂量以9 kGy为宜.结论微球具有缓释长效作用,是一类有前途的治疗增殖性视网膜病变的制剂.
作者：胡弢；吴宝剑；吴伟 刊期： 2005年第04期
复旦学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学
