金辛良；徐丹枫；朱晓明；谭剑敏；周伟民；张涛亮；许嘉骏；高赟；闵志廉
目的探讨更年春方对卵巢切除大鼠骨与子宫组织雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型的调节.方法10～12月龄SD雌性大鼠卵巢切除建立骨质疏松模型.分别用更年春方、尼尔雌醇灌药4个月,RT-PCR法检测胫骨骨骺与子宫组织ER亚型mRNA的表达.结果大鼠卵巢切除后,血E2水平、椎骨骨密度、子宫湿重及胫骨骨骺与子宫组织ERα、ERβmRNA的表达均明显下降.尼尔雌醇治疗后椎骨骨密度、子宫湿重及胫骨骨骺与子宫组织ERα、ERβmRNA的表达均增高;更年春方组椎骨骨密度及胫骨骨骺与子宫组织ERβmRNA的表达增高,而子宫湿重及胫骨骨骺与子宫组织ERα mRNA的表达无明显改变.结论更年春方对卵巢切除骨质疏松大鼠有防治作用,对子宫无不良反应.其机制可能与其选择性上调胫骨骨骺与子宫组织ERβmRNA的表达有关.
作者：刘克菊；王文君；金慰芳；周文江；李大金 刊期： 2005年第04期
目的明确大鼠嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病模型的适宜条件和病程演变,为该模型更好地用于肾病综合征、肾硬化发病机制及治疗的研究奠定基础.方法用6周龄雄性Wistar大鼠,一次性颈静脉注射PAN,分别以2、3、4、5、7、9 mg/100 g体重的剂量给药,以等量生理盐水作对照,测定2周内不同时间点的尿蛋白排泄量;另以9 mg/100 g体重的剂量给药,观察28周内尿蛋白、血清胆固醇和三酰甘油的变化及肾组织的病理改变.结果各个剂量的PAN均可引起不同程度的蛋白尿,约在10～14 d达到高峰,高达(592.0±61.0)mg/24 h.28周连续观察的结果显示,PAN组动物的尿蛋白呈现典型的双相曲线,即第2周达到高峰,伴有血清胆固醇及三酰甘油的升高,此后逐渐降至接近正常,但自第12周起尿蛋白再度逐渐上升,第28周可达急性期峰值的一半.结论6周龄雄性Wistar大鼠,一次性颈静脉注射适量PAN可建立不同程度的肾病模型,成功率极高,方法简单,用药量省,动物价廉易得,且急性期发病快而周期短,不失为研究人类相应疾病的良好模型.
作者：刘丽华；朱春芳；欧周罗 刊期： 2005年第04期
目的探讨出生顺序与肝癌发生的关系,估计环境因素与遗传因素在肝癌发生中的相对作用.方法应用Haldane-Smith法和Greenwood-Yule法对肝癌患者进行出生顺序分析.结果用Haldane-Smith法分析97例肝癌患者的出生顺序,∑6A=1 542,∑Χ6A=1 617,C值为0.935(P＞0.20);对肝癌先证者按HBsAg携带状态进行分层分析,HBsAg阳性者的C值为0.950(P＞0.20),阴性者的C值为0.274(P＞0.50).用Greenwood-Yule法比较肝癌患者出生顺序的实际分布和期望分布,显示两者无明显差异,实际数与期望数的比值波动在0.78～1.38,没有随出生顺序而增加或降低的趋势;按肝癌先证者HBsAg携带状态进行分层分析,无论HBsAg阳性或阴性,其出生顺序的实际分布和期望分布均无明显差异,实际数与期望数的比值亦均无随出生顺序而增加或降低的趋势.结论洛阳市肝癌的发生可能与出生顺序无关.
作者：曹燕燕；边建超；郭惠媛；王启敏；王启军；张竹梅；汤伯明 刊期： 2005年第04期
目的确定肝脂酶(hepatic lipase,HL)LIPC基因9种突变在中国人群中的频率,并探讨这些突变与脂代谢和冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病,CAD)易感性的关系.方法对224例CAD患者和129例正常人LIPC基因相应位点进行通用TaqMan探针技术的实时荧光PCR方法,检测LIPC基因单核苷酸多态性(SNP).用HWE软件、STA或SPSS软件分别进行遗传平衡检验和多变量等统计学分析.结果在正常对照组和CAD患者组中LIPC的9个高频SNPs位点均检出突变基因.RS2242064位点突变基因型为A/A、A/C、C/C,其频率在CAD患者组和对照组中分布有显著差异(P=0.019);RS2242064位点突变的等位基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡;在平衡了其他混杂因素的情况下A/C基因型是冠心病的一项独立的危险因素,且非常显著(OR=1.95,P=0.021).在CAD组中AC突变杂合子与A/A+C/C的患者相比,apo(A)显著降低(P=0.045),HDL显著降低(P=0.02).结论在中国人群中LIPC的9个高频SNPs位点突变均在入选对象中检出,LIPC基因RS2242064位点突变为A/C基因型可能是中国人的易感因子之一.
作者：傅蕾；施海明；黄薇；王颖；罗心平；何仲海；许建中；金慧根 刊期： 2005年第04期
目的表达和纯化人睫状神经营养因子(CNTF)并观察其生物学活性.方法用PCR方法构建人CNTF的结构基因,并克隆于pLy4原核表达载体中.将重组表达质粒pLy4-CNTF转化大肠埃希菌JF1125,30℃培养至A600(nm)达到0.6时,迅速升温至42℃诱导目的蛋白的表达.细菌经超声破胞,包涵体经变性、复性、透析和阴离子交换层析,获得纯化的CNTE重组蛋白.然后,用鸡胚背根神经节神经元细胞存活实验观察其生物活性.结果42℃诱导后可以获得Mr≈22.9×103的目的蛋白,Westem印迹结果进一步表明,其具有人CNTF的抗原性.表达蛋白主要以不溶形式存在,占菌体蛋白的35%以上,表达产物经变性、复性,纯化后可获得纯度90%以上的目的蛋白.该重组蛋白能够促进鸡胚背根神经节神经元细胞的存活.结论在大肠埃希菌JF1125中成功表达了人CNTF分子,经变性、复性,纯化后得到具有生物活性的蛋白.
作者：窦金民；郭莉莉；刘宏磊；陈接根；黄海燕；宋后燕；汤其群 刊期： 2005年第04期
目的探讨内侧半月板半脱位与退变性关节炎骨赘增生、半月板损伤和关节渗出的关系.方法回顾性分析120膝关节MRI图像,记录半月板突出、膝关节骨赘增生、半月板损伤、关节积液的情况.将突出≥3mm定义为半月板半脱位,统计分析半月板半脱位与骨赘增生、半月板损伤、关节积液的关系.结果半月板半脱位与骨赘增生(69%),半月板损伤(70%)有关(P＜0.05),与关节积液无关(P＞0.05),比值比(OR)及95%可信区(CI)间分别为2.347(1.102～4.997)、2.494(1.169～5.322)、0.880(0.417～1.853).结论半月板突出与骨赘增生、半月板损伤有关,可能是退变性关节炎发生、发展因素之一.
作者：黄加张；顾湘杰；王旭；陈飞雁 刊期： 2005年第04期
目的探讨A549肺腺癌多细胞球体的多药耐药基因(mdr1)和多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达,甲氧基异丁基异腈(MIBI)摄取结果能否预测化疗效果.方法①血浆高峰浓度的化疗药物顺铂(DDP)、长春花碱酰胺(VDS)、氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶,5-FU)、羟喜树碱(HCP)、丝裂霉素(MMC)、多柔比星(阿霉素,ADM)分别进行药物敏感性实验.②单层贴壁细胞培养.96孔板1个,每组4孔,2×104细胞/孔.③MTT检测观察疗效.细胞加化疗药后培养48 h,然后加MTT 5 mg/mL,每孔20 μL,4 h后用酶标仪(490 nm)测量吸光度值.④RT-PCR检测A549细胞和MCF-7耐药株的mdr1和MRP表达,β2-MG作内参照.⑤96孔板内每孔一个球体,每孔掺入99mTc-MIBI 9.25×104 Bq(2.5μCi),分别于60和120 min结束掺入并测量γ计数.结果①A549细胞药敏实验对DDP不敏感,对MMC、VDS、ADM、5-FU、HCP敏感.②MCF-7长春新碱耐药株(MCF-7/VCR)对DDP、VDS不敏感,对MMC、ADM、5-FU和HCP较敏感.③A549细胞及球体的Mdr1/β2-MG为0,MRP/β2-MG分别为0.76和0.62;MCF-7耐药细胞的mdr1/β2-MG和MRP/β2-MG分别为35和4.36.④A549多细胞球体对99mTc-MIBI 120 min的摄取值高于60 min摄取值(P＜0.05).结论A549多细胞球体的mdr1和MRP表达水平较低以及MIBI摄取阳性提示无多药耐药性产生,与化疗药物敏感性检测结果基本一致.A549细胞对DDP耐药说明除mdr1和MRP之外,还存在与转运蛋白间接相关的其他耐药机制.
作者：史德刚；黄钢；苗积生；林祥通 刊期： 2005年第04期
近年来,全反式维甲酸(全反式视黄酸,all-trans retinoic acid,ATRA)用于某些实验性增生性肾炎的治疗取得了良好的效果,引起了人们极大的兴趣.本文报告小剂量ATRA对大鼠非增生性嘌呤霉素氨基核苷肾病的改善作用.
作者：刘丽华；朱春芳；欧周罗 刊期： 2005年第04期
目的研究高压氧治疗(HBOT)对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠外周神经传导速度和血清、局部转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法STZ糖尿病大鼠造模成功2个月,经电镜证实有神经病变后,随机分为3组:①HBOT组(n=31):用胰岛素控制血糖,每天接受0.15 MPa、HBOT 1 h,连续20 d;②糖尿病对照(DM,n=32)组:仅用胰岛素控制血糖;③正常对照(NC,n=20)组:腹腔注射生理盐水的无糖尿病的正常STZ大鼠.分别在疗程10、20 d时做肌电图后处死,取股动脉血用EIA法测定血清TGF-β1水平,同时取后肢神经进行苏木精-伊红染色、病理学观察和电镜观察,并用TGF-β1多抗对神经组织做DAB二步法免疫组化染色.结果HBOT10 d后,治疗组后肢坐骨神经的传导速度明显高于同期DM组(P＜0.05),但低于NC组;HBOT 20 d后,治疗组后肢胫、腓神经的传导速度明显高于同期DM组(P＜0.01);而与NC组间无明显差异(P＞0.05);血清TGF-β1水平较DM组明显降低(P＜0.05),与NC组间无明显差异.病理观察显示神经组织髓鞘内外的TGF-β1染色明显减少.结论HBOT可改善STZ大鼠糖尿病周围神经病变,其机制可能与抑制TGF-β1生成和其在神经组织表达有关.
作者：刘芳；周景花；丁巧英；彭名淑；管佩玲；张杰；姚庆姑 刊期： 2005年第04期
目的验证上海科兴药业公司提供的89SrCl2注射液治疗转移性骨肿瘤所致骨痛的疗效.方法试验采用随机、双盲、阳性药物(英国Amersham公司生产的Metastron)对照,5个中心参加验证.对90例原发病灶诊断明确的恶性肿瘤骨转移患者进行骨痛镇痛治疗,其中资料完整的Ⅰ组(验证组)59例,Ⅱ组(对照组)29例,余2例患者剔除.
作者：刘兴党；蒯大禹；金少津；林祥通；石洪成；陈绍亮；孔令山；李林法；莫义 刊期： 2005年第04期
有研究显示,妇女绝经后卵巢功能衰退,雌激素的下降使体内糖、脂代谢发生明显改变,而且雌激素的下降与胰岛素抵抗亦有关.本实验通过卵巢切除来降低大鼠体内的雌激素水平,明确其对大鼠肥胖评定指数(Lee Index)与糖代谢的影响.
作者：丁昉；石凤英；刘邦忠；高键 刊期： 2005年第04期
目的研究肿瘤细胞自然状态下耐药时,肿瘤细胞多药耐药与转移的关系.方法选取112例未经化疗的非小细胞性肺癌手术切除标本,用免疫组织化学染色观察P-gp、CD147、MMP-1、MT1-MMP的蛋白表达,分析各指标之间的关系.结果人肺癌组织中P-gp的表达与CD147、MMP-1、MT1-MMP具有明显的一致性,CD147、MMP-1、MT1-MMP在腺癌中表达高于鳞癌,且与淋巴结转移相关.结论非小细胞性肺癌自然状态下耐药时,P-gp与CD147、MMPs等肿瘤浸润、转移相关蛋白的表达之间可能存在着共同的调节机制.CD147对MMPs的调节,可能与多药耐药肿瘤的浸润、转移特性有关.
作者：董敏；周仲文；赵仲华；张秀荣；许祖德 刊期： 2005年第04期
目的探讨饮食和禁食时间对基础呼气氢浓度的影响,寻找合适的氢呼气试验饮食准备方案.方法测定100名任意饮食者早晨基础呼气氢浓度,调查检测前2 d摄取的食物种类和前1 d晚餐结束时间,分析两者与基础氢浓度的关系.结果100名受试者中,88名禁食时间＞12 h,包括非产氢饮食48 h者10例、非产氢饮食24 h者15例、早餐产氢饮食者20例、中餐产氢饮食者23例、晚餐产氢饮食者20例,其基础呼气氢浓度分别为(1.800±1.317)、(2.267±2.314)、(3.200±2.876)、(3.609±2.904)和(5.450±3.069)ppm,与非产氢饮食48h者的基础氢浓度比较,仅晚餐产氢饮食者显著升高(P=0.003);禁食时间＜12 h者12例,其空腹氢浓度为(12.583±5.775)ppm,显著高于禁食时间＞12 h者(3.500±2.920)ppm,P＜0.01.结论禁产氢食物24 h与48 h的基础呼气氢浓度无显著差别;而禁食时间＞12 h者的基础呼气氢浓度显著低于禁食时间＜12 h者.因此氢呼气试验前,只需禁产氢食物24 h,禁食12 h或以上.
作者：刘伟；戎兰；钟良；蒋义斌；孙大裕 刊期： 2005年第04期
弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)伤情重,治疗困难,死亡率高,预后差.在平时和战时均常见,在重型颅脑损伤中占20%～50%,在车祸致重型颅脑损伤中占85%[1],在死亡患者中占29%～43%,仅次于急性硬膜下血肿[2],是颅脑损伤患者重残及植物生存的常见原因之一[3],文献报道其死亡率高达42%～62%[4].因此,对DAI的发病机制、影像学特征、临床表现和治疗措施等方面进行深入研究,将有助于提高颅脑损伤的诊治水平.
作者：颜玉峰；季耀东；昝明熙 刊期： 2005年第04期
目的通过分析35年间子宫内膜癌的病例,了解子宫内膜癌发病在35年间的变化特点.方法回顾性分析中山医院1969年3月-2003年12月收治的子宫内膜癌病例209例,以年代为限分为3组,1969-1979年第1组25例,1980-1989年第2组41例,1990-1999年第3组57例,2000年1月-2003年12月为第4组86例.采用对照研究的方法回顾性分析4组病例占同期妇科住院病例的比例、对发病例数、发病年龄、生育和月经情况、合并高血压、糖尿病及肥胖进行比较分析.结果4组病例分别是同期妇科住院病例的0.39%、0.68%、0.84%和17.4%.第4组是第1、2、3组的44.6倍、25.6倍、20.7倍,第3组是第1、2组的2.2倍、1.2倍,第2组是第1组的1.7倍.子宫内膜癌病例数以每10年几何对数的速度增长,第4组的年平均数是第1组的10倍.发病年龄每10年增大1岁,P=0.032 8.第3、4组流产数明显多于第1、2组P=0.036,P=0.003.第4组绝经年龄和行经年限增加P=0.044 4,P=0.002 0.第3、4组合并糖尿病、肥胖病例明显增加P=0.011 4,P=0.028 2.结论我国目前子宫内膜癌的病例增长迅速与国外一致,发病年龄并未年轻化,同国外相近.近10年糖尿病、肥胖发病率增加、绝经延后和行经年限增加是子宫内膜癌发病率增加的因素之一.
作者：杨丹；韩立敏 刊期： 2005年第04期
目的探讨急性排斥反应过程中RANTES基因与蛋白在移植心脏局部表达的意义及环孢素的影响.方法施行大鼠异位心脏移植术,移植大鼠分为3组,每组45只,对照组5只:SD大鼠间的移植为同系移植组(A组),Wistar至SD大鼠的移植分为未用环孢素干预组(B组)及环孢素干预组(C组),健康SD大鼠为对照组.采用RT-PCR方法检测RANTES mRNA的表达,免疫组化方法检测RANTES蛋白的表达.结果RANTESmRNA在A组各时间点和对照组均呈低水平表达,在B组的表达变化与急性排斥反应的进程相关,术后第3天RANTESmRNA表达上调至峰值(3.5±1.27);C组应用环孢素后,RANTESmRNA表达峰值(1.2±0.78)显著低于B组(t=2.18,P＜0.05).RANTES蛋白定位于移植心脏血管内皮细胞与间质单个核浸润细胞.结论RANTES基因与蛋白的表达上调与排斥反应过程中移植物间质单个核细胞浸润密切相关,可能对急性排斥反应的早期诊断有帮助;抑制RANTES信号通路可能是CsA发挥免疫抑制作用的又一分子免疫学机制.
作者：顾晓；唐孝达；顾沈阳；杨尚琪；周佩军；徐达；王祥慧；谭建明；宋言峥 刊期： 2005年第04期
目的研究无精子症和少精子症患者染色体畸变及Y染色体(Yq11区)无精子症因子(azoospermic factor,AZF)微缺失情况,建立Y染色体微缺失的临床筛查方法.对原发性无精子及少弱精症患者与AZF微缺失的关系.方法对145例患者(无精子症102例,严重少精子症43例)经染色体核型分析及AZF的3个位点8对引物PCR扩增,检测染色体畸变和Y染色体微缺失率.选取6个Y染色体特异性序列标签位点(STS),用PCR技术检测145例精子发生障碍患者AZF区微缺失情况.结果145例中染色体核型异常12例,占8.3%.AZF区微缺失21例,缺失率为14.5%.无精子症和严重少精子症AZF缺失率分别为14.70%和11.62%.145例中AZF区微缺失21例,表现为无精子症.缺失均在AZFc区,7例为DAZ(sY254、sY255)缺失,另2例为DNA加sY157缺失.结论染色体畸变和Y染色体微缺失是导致无精子症和严重少精子症的主要原因之一.无精子症缺失率高于严重少精子症患者.AZF 3个位点8对引物PCR扩增可作为Y染色体微缺失的临床筛查方法.
作者：金辛良；徐丹枫；朱晓明；谭剑敏；周伟民；张涛亮；许嘉骏；高赟；闵志廉 刊期： 2005年第04期
表皮生长因子受体(EGFR)是ErbB(ErbB1～4)家族的一员,即ErbB1.EGFR为一种跨膜糖蛋白,属受体型酪氨酸蛋白激酶(RTK),其配体包括EGF、TGFα、amphiregulin、he-patin-bind-ing-EGF、heregulin、betacellulin,后3种也可与ErbB4结合.由于EGFR在多种肿瘤中有过表达和(或)异常表达,与肿瘤的发生、发展关系密切,故其研究进展倍受关注[1].
作者：于晓棠；陆世伦；朱世能 刊期： 2005年第04期
目的探讨异氟醚对大鼠肺缺血再灌注损伤下核因子-κB(NF-κB)结合活性及细胞因子诱导的中性粒细胞趋化物(CINC)基因表达的影响.方法建立在体大鼠肺缺血再灌注模型.SD雄性大鼠120只,随机分成4组(n=30):手术对照组(C组),缺血再灌注组(IR组),异氟醚-缺血再灌注组(ISO-IR组)和异氟醚组(ISO-C组).分别在缺血45 min、再灌注30、60、120 min处死大鼠,行动脉血气分析,测定肺组织湿干比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性、NF-κB结合活性和肺组织CINC mRNA的表达、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数、沉渣白细胞分类和总蛋白(TP)的含量及肺组织病理学检查.结果①再灌注后IR组和ISO-IR组的W/D值、MPO活性、NF-κB结合活性和CINCmRNA的表达均高于C组(P＜0.05),而再灌注60 min后ISO-IR组的以上各指标较IR组均有明显降低(P＜0.05);②IR组BALF中中性粒细胞(PMN)所占的百分比较C组明显升高(P＜0.05),而ISO-IR组的升高并不显著,且较IR组明显降低;③IR组和ISO-IR组BALF中TP含量均较C组升高明显(P＜0.05),但ISO-IR组又明显低于IR组(P＜0.05);④ISO-IR组肺组织病理学变化较IR组明显减轻.结论异氟醚的应用可以减轻肺缺血再灌注损伤,作用机制可能与其抑制NF-κB的活化,降低肺组织CINC mRNA的表达上调,减少肺内PMN的浸润密切相关.
作者：王婷；蒋豪；薛张纲；欧周罗 刊期： 2005年第04期
目的建立兔角膜缘干细胞体外培养方法,观察其生物学特性.方法用含20%胎牛血清1640培养液对兔角膜缘干细胞进行体外培养,倒置显微镜观察培养细胞体外生长的形态,电镜观察培养细胞的超微结构并进行免疫细胞化学和间接免疫荧光鉴定.结果植块48～72 h细胞开始贴壁生长,7～10 d形成良好的单层,细胞呈圆形、卵圆形或多边形,类似角膜上皮细胞;电镜下,可见细胞表面有许多微绒毛,细胞间有桥粒连接,胞质丰富,胞质细胞器较多,含有线粒体等结构;免疫细胞化学和间接免疫荧光染色显示,培养第8天少量细胞角蛋白K3(AE5)免疫反应呈阳性,细胞质被染色,培养第14天和第21天,较多细胞AE5免疫反应阳性.结论含20%胎牛血清1640培养液能作为角膜缘干细胞培养的基础液.应用组织培养方法获得的原代培养细胞具有与正常角膜缘干细胞相一致的生物学特性.
作者：韩晓洁；佘振钰；俞彰；周国民 刊期： 2005年第04期
复旦学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学
