学术投稿

TGF-β1 对大鼠系膜细胞增殖和纤溶酶原激活物及其抑制剂表达的影响

林文生;张农;张颂文;顾建新;郭慕依

关键词:系膜细胞, 转化生长因子-β1, 细胞增殖, 纤溶酶原激活物抑制剂-1, 纤溶酶原激活物
摘要:目的通过对大鼠系膜细胞转染TGF-β1基因和反义TGF-β1基因,观察该细胞增殖和纤溶酶原激活物及其抑制剂表达的影响。方法采用MTT、细胞计数和流式细胞仪检测细胞增殖;Northem blot和Western blot法检测其纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达;酶谱分析法检测其纤溶酶原激活物(tPA)活性。结果过表达TGF-β1的系膜细胞生长受抑制,其PAI-1 mRNA和蛋白表达增强,而tPA酶活性则降低;而低表达TGF-β1的系膜细胞增殖加速,其PAI-1 mRNA和蛋白表达降低,tPA酶活性增强。结论 TGF-β1可通过对大鼠系膜细胞增殖、纤溶酶原激活物及其抑制因子表达的影响,而促进肾小球纤维化的发生。
复旦学报(医学版)杂志相关文献
  • 肝癌病人PD-ECGF血浆水平的检测

    目的检测肝细胞癌(HCC)病人血浆中血小板衍化内皮细胞生长因子(PD-ECGF)水平,探讨其与HCC临床病理特征的关系。方法选取在我所行手术切除并经病理证实的HCC病人61例。以10例正常人和15例肝炎肝硬化病人作为对照。血浆PD-ECGF水平检测用酶联免疫吸附法(ELISA)。结果 HCC病人血浆中PD-ECGF水平明显高于正常人和肝炎肝硬化病人(P<0.05),而正常人和肝炎肝硬化病人的血浆水平比较差异无显著性(P>0.05)。高TNM分期和伴有门静脉癌栓的HCC病人PD-ECGF血浆水平分别高于低TNM分期和无门静脉癌栓者,差异有显著性(P<0.05)。PD-ECGF血浆水平在其他临床病理指标对应的肝癌病人之间比较无明显差异(P>0.05)。结论肝癌病人的血浆PD-ECGF水平升高并与门静脉癌栓形成有关。

    作者:周俭;汤钊猷;樊嘉;吴志全;郑宁;孙瑞霞;邱双健;叶胜龙 刊期: 2001年第03期

  • 前列腺素E1在酸吸入性急性呼吸窘迫综合征中的肺保护作用(摘要)

    目的研究静脉注射前列腺E1(PGE1)能否阻止酸吸入性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的发生。方法 20只新西兰兔在稀HCI经右支气管滴入后随机分成两组:(1)损伤组(n=10)在酸滴入后维持机械通气,未行其他治疗;(2)治疗组(n=10)在酸滴入后即刻缓慢静注PGE1并维持。在基础状态及酸滴入后记录血气、气道压力并抽动脉血测定6-K-PGF1α、TxB2、NO2/NO3-/和ET-1,动物处死后测定右肺的湿干比(W/D)值及测定右肺支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)的水平,并作肺组织形态学观察。结果治疗组在酸滴入后血氧分压(Pa02)显著高于损伤组。治疗组血浆6-K-PGF1α和N02-/N03-水平显著高于损伤组。而血浆TxB2和ET-1水平显著低于损伤组,治疗组右肺W/D和TP显著低于损伤组。损伤组右肺呈弥漫性炎性损伤,而治疗组则见损伤呈局灶性,且其病理损伤程度较损伤组明显减轻。结论 (1)酸吸入后即刻应用PGE1可减轻ARDS的范围和严重程度;(2)PGF1保护了肺血管内皮细胞,使内源性PGI2/TXA2和N01ET-1的产生保持平衡,有利于减轻ARDS。[全刊登于中华麻醉学杂志2001,21(1):28]

    作者:白浪 刊期: 2001年第03期

  • 心肌炎和克山病患者分离的肠道病毒核酸序列(摘要)

    目的分析自心肌炎和克山病患者分离的肠道病毒的核酸序列,探讨病毒病因的分子基础。方法使用肠道病毒特异引物对从心肌炎和克山病患者分离的肠道病毒RNA进行RT-PCR扩增,PCR产物经纯化后分别经不同的引物正反向直接核酸循环测序,并应用SeqEd和DNA软件及Assem blyLIGN软件对测序结果进行分析。结果确定7株病毒5'端从核苷酸位点40到750之间710 bp基因序列;序列分析结果发现,尽管为同血清型病毒,但其5'端非编码区基因变异率仍在25%左右,而血清型为柯萨奇B5病毒则高达34.08%,与肠道病毒各血清型之间5'端非编码区基因变异率无明显差异;对血清型为CVB3的两分离株病毒5'端基因特殊位点分析,发现与CVB3标准株(Nancy株)比较234位由T→C、690位由C→A。结论确定了所分离到的一些肠道病毒5'端非编码区基因序列;肠道病毒5'端非编码区基因与血清型关系不大;CVB3分离株5'端基因特殊位点变异与致病的关系值得进一步探讨。[全文刊登于中华微生物学和免疫学杂志2001.21(1):21]

    作者:彭天庆 刊期: 2001年第03期

  • 年龄和性别影响DAT水平的实验研究(摘要)

    目的研究年龄、性别对1255I-2β-甲酯基-3β-(4-碘苯基)托烷(β-CIF)与多巴胺转运蛋白(DAT)结合的影响。方法 6周龄与6月龄昆明小鼠年龄影响因素实验,大鼠年龄、性别影响因素实验。结果 6周龄小鼠的纹状体、额叶皮质、顶叶皮质、颞叶皮质、枕叶皮质、海马、脑干、小脑对125I-β-CIT摄取的%ID/g值及全脑摄取量(%ID)均大于6月龄小鼠。3月龄雄性SD大鼠纹状体、额叶皮质、顶叶皮质、颞叶皮质、枕叶皮质、海马、脑干、小脑对125I-β-CIT摄取的%ID/g值及全脑%ID均大于12月龄雄性SD大鼠相应组织的%ID/g或%ID值,而且也大于12月龄雌性大鼠相应组织的%ID/g值(除颞叶皮质、全脑外)。同龄(12月)SD雌性大鼠纹状体、额叶皮质、顶叶皮质、颞叶皮质、枕叶皮质、海马、脑干、小脑对125I-β-CIT摄取的%ID/g值及全脑%ID均大于同龄雄性SD大鼠相应值。结论低龄小鼠、大鼠纹状体摄取125I-β-CIT均高于高龄小鼠、大鼠;雄性大鼠纹状体摄取125I-β-CIT高于同龄雄性大鼠。提示小鼠、大鼠脑纹状体内DAT水平随年龄的增长可能减低。[全文刊登于中华核医学杂志2000,20(6):263]

    作者:刘兴党 刊期: 2001年第03期

  • 钇乙二胺四亚甲基膦酸的制备及在小鼠体内的分布

    放射性药物用于骨癌病人的治疗已成为一种常规方法,钐乙二胺四亚甲基膦酸(153Sm-EDTMP)是一种很有效的中晚期骨癌转移病人的镇痛药物,但由于153Sm必须由核反应堆生产而限制了其广泛应用。因90Y具有与153Sm相似的化学性质,而且有可以由90Sr-90Y发生器直接淋洗而得到的优点。本实验研究钇乙二胺四亚甲基膦酸(90Y-EDTMP)的制备方法、标记条件、分离纯化的方法,并观察其在小鼠体内的分布以确定90Y-EDTMP在小鼠体内的药物动力学分布。

    作者:万丹晶;高秀健;钱隽;朱建华 刊期: 2001年第03期

  • 18F-FDG PET显像对强迫症手术治疗前后的观察(摘要)

    目的应用18F-脱氧葡萄糖(FDG)PET显像评估强迫症手术治疗的疗效。方法 9例经药物和心理治疗无效的难治性强迫症患者在术前和术后分别接受了YALE-BROWN强迫症评定量表(Y-BOCS)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)及FDG PET显像,同期的PET显像在治疗前后以相同的计数、脑定位及相同的处理条件进行采集和处理,患者在注射FDG时均保持相同的条件。与10例年龄相匹配的对照者脑葡萄糖代谢进行比较,观察治疗前强迫症患者与对照者脑葡萄糖代谢的区别,并与手术治疗后的PET显像和量表评分进行比较。结果与对照者相比,9例强迫症患者在额叶、扣带回、眶回、基底节尾状核头部和丘脑等处均可见FDG的高摄取。PET显像结果与YALE-BROWN和HAMA量表评分结果相符。治疗后9例患者中6例取得良好疗效,其PET显像见额叶、扣带回、眶回、基底节尾状核头部和丘脑FDG代谢减低,且与量表评分结果一致。结论FDG PET显像可用于解释强迫症异常脑环路的存在,在治疗前有助于脑异常功能区的定位,与YALE-BROWN和HAMA的量表测定联合应用有助于强迫症的诊断。同时,FDG PET显像可用于该病的疗效观察和并发症的功能定位。

    作者:管一晖 刊期: 2001年第03期

  • H.pylori相关性溃疡病与活性氧及IL-8的相关性

    目的研究活性氧(reactive oxygen species,ROS)在H.pylori相关性溃疡病发病中的作用及其与IL-8、炎症积分、cagA基因等的相关性。方法选择活动期消化性溃疡患者100例,比较H.pylori阴性组及H.pylori-cagA阳性组和H.pylori-cagA阴性组3组间的ROS及IL-8含量的差别。结果 3组的ROS及IL-8分别为(56.66±4.50)、(68.50±6.33)、(66.33±5.00)CI/mg及[(12.65±3.47)、(27.37±6.32)、(23.42±8 07)]×103。后两组与第一组相比,ROS及IL-8含量差异显著(P<0.001),而后两组之间则无统计学差异。多元回归分析显示ROS与IL-8及炎症积分相关。结论 H.pylori感染可明显提高溃疡患者胃黏膜内的ROS含量,IL-8是ROS增高的首要相关因素。cagA基因单独并不足以促使更高的炎症反应水平和胃黏膜损害。

    作者:陈坚;林庚金;钱立平;刘珊林 刊期: 2001年第03期

  • 异种移植研究进展

    1954年Murray首次施行同卵双生姐妹间的肾移植获得成功;1959年Murray和Hamburger各自为异卵双生同胞间施行肾移植,受者接受全身照射使移植肾获得长期存活;1962年Murray施行首例尸体肾移植,受者服用硫唑嘌呤获得长期存活。自此,现代器官移植时期正式开始。随着外科技术(血管吻合技术)、组织器官低温保存技术的进步及免疫抑制药物(特别是环孢素)控制排斥反应的成功,临床同种异体移植飞速发展,移植种类逐步扩大到心、肝、脾、肺、小肠、骨髓、骨、关节及胰岛细胞等几乎所有重要脏器和组织,移植对象也扩展到儿童和老人,器官及组织移植已成为拯救脏器终末性病变的惟一有效手段。但随之而来的供体器官短缺已成为全球性的难题,越来越多的患者在等待器官中死去,这使得人们积极探索异种移植的可能性[1]。

    作者:夏国伟;张元芳 刊期: 2001年第03期

  • TGF-β1 对大鼠系膜细胞增殖和纤溶酶原激活物及其抑制剂表达的影响

    目的通过对大鼠系膜细胞转染TGF-β1基因和反义TGF-β1基因,观察该细胞增殖和纤溶酶原激活物及其抑制剂表达的影响。方法采用MTT、细胞计数和流式细胞仪检测细胞增殖;Northem blot和Western blot法检测其纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达;酶谱分析法检测其纤溶酶原激活物(tPA)活性。结果过表达TGF-β1的系膜细胞生长受抑制,其PAI-1 mRNA和蛋白表达增强,而tPA酶活性则降低;而低表达TGF-β1的系膜细胞增殖加速,其PAI-1 mRNA和蛋白表达降低,tPA酶活性增强。结论 TGF-β1可通过对大鼠系膜细胞增殖、纤溶酶原激活物及其抑制因子表达的影响,而促进肾小球纤维化的发生。

    作者:林文生;张农;张颂文;顾建新;郭慕依 刊期: 2001年第03期

  • 克林沙星在大鼠体内的药代动力学和生物利用度(摘要)

    目的研究克林沙星在大鼠体内的药动学和生物利用度。方法 HPLC法测定大鼠ig和iv克林沙星后的血药浓度,计算药动学参数和生物利用度。色谱柱为C18柱(5 μm),流动相为乙腈-0.05 mo1/L,柠檬酸三乙胺液(pH 2.5)(20:80),流速为1.0 ml/min,检测波长300 nrm。结果克林沙星0.1~20 μg/ml呈良好线性关系,在大鼠体内的药动学过程符合一室模型,大鼠ig 50和100mg/kg后,cmax和AUC均与剂量呈正比,T1/2与剂量无关;绝对生物利用度(F)为42%。结论克林沙星50~100mg/kg的吸收和消除呈一级动力学特征,在大鼠体内的生物利用度低。[全文刊登于药学学报2001,36(2):134]

    作者:周梅华 刊期: 2001年第03期

  • Droloxifene枸橼酸盐的工艺改进及其新的生物活性(摘要)

    目的探索droloxifene的合成方法,并对其新的生物活性进行研究。方法以甲氧基苯和苯乙酸为原料,经酰氯化、付-克反应、烷基化、去甲基化、醚化、格氏加成、消除脱水、构型转化及成盐共9步反应,得droloxifene枸橼酸盐,8步收率14.7%(9.2%)。结果生物活性实验发现其具有缓解肿瘤细胞多药耐药性和诱导黄体细胞凋亡的两种新的生物活性、结论对droloxifene的合成工艺进行了改进,反应步骤缩短两步,异构体分离、转化方法简便,原料及试剂易得,操作简便。两种新的生物活性的发现为新药研究及扩大临床应用提供了实验依据。[全文刊登于药学学报2000,35(12):902]

    作者:陈瑛 刊期: 2001年第03期

  • 成人斯蒂尔病54例临床分析

    成人Still病(adult still disease,ASD),是一种以发热、皮疹、关节痛和白细胞增多等为主要表现的全身性疾病。以往以儿童发病多见,近年来成人发病的报道渐见增多。由于本病缺乏特异性症状及特异性的诊断方法,常易造成误诊。为认识本病的特点,以提高对本病的诊治水平,现将我院于1987年至2000年4月间所确诊的54例报告如下。

    作者:卢清;黄玉仙;尹有宽;翁心华 刊期: 2001年第03期

  • 主动脉狭窄型多发性大动脉炎的手术治疗

    多发性大动脉炎(takayasu arteritis,TA)是主动脉及其主要分支的非特异性病变,主要引起受累血管的阻塞性改变,女性多发。

    作者:肖占祥;陈福真;符伟国;王玉琦;杨珏;蒋俊豪 刊期: 2001年第03期

  • 葡萄球菌肠毒素B突变体的纯化及其活性

    目的从基因重组菌中纯化葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体及其野生型蛋白,研究其毒力及抗原性。方法表达野生型SEB蛋白(SEB-N)和SEB突变体(SEB-M23、SEB-150)的3株重组菌经IPTG诱导,反复冻融后,制备细菌裂解液。将初步纯化的抗SEB抗血清与CNBr活化的Sepharose 4B作共价偶联,制成亲和层析柱。分柱纯化SEB-N、SEB-M23和SEB-M150蛋白。用SDS-PAGE和酚试剂改良法对纯化蛋白作纯度鉴定和定量;用双向免疫扩散试验和ELISA法作抗原性鉴定;用小鼠致死性试验作毒力鉴定。结果 SDS-PAGE和双向免疫扩散试验表明,3种纯化蛋白均为单一条带,且都能与抗SEB抗体形成明显的沉淀线。ELISA表明SEB-N、SEB-M23、SEB-M150与抗SEB抗体有相似的结合力,提示23位突变和150位突变并未改变SEB的抗原表位。小鼠致死性试验表明,LPS激发的3组小鼠(6只/组),分别用上述纯化蛋白攻击(10μg/只),SEB-N组死亡率为5/6;SEB-M150组死亡率为4/6;SEB-M23组死亡率为0/6;即使SEB-M23剂量增至200 μg,小鼠仍无死亡。结论获得了SEB-N、SEB-M23和SEB-M150 3种纯化蛋白,其中SEB突变体都保留了抗原性;SEB-M23与野生型SEB相比,毒力明显下降。为进一步研究其作为新型淋巴细胞激活分子或超抗原疫苗打下基础。

    作者:俞红;钱利生;熊思东 刊期: 2001年第03期

  • 缺血预处理对脑缺血血脑屏障通透性和MMP-9表达的影响

    目的研究缺血预处理(IP)对再缺血脑组织血脑屏障通透性和MMP-9表达的影响。方法 3组SD大鼠分别给予:①一侧颈内动脉注射生理盐水(SI);②双侧颈总动脉夹闭(BCAO);③双侧颈总动脉夹闭同时一侧颈内动脉注射生理盐水(BS)处理。24 h后,应用动脉腔内线栓法作大脑中动脉阻断(MCAO),观察3种预处理对再缺血脑组织含水量、血脑屏障(BBB)通透性和MMP-9表达的影响。结果缺血24和48 h BS组脑含水量均值分别为82.92%和83.12%,SI组和BCAO组分别为85.29%、85.96%和86.17%、85 58%;缺血24和48h BS组脑EB含量均值分别为14.01和11.74μg/mm3,明显低于SI和BCAO组(P<0.01);BS组MMP-9 mRNA和蛋白水平的表达水平明显低于其他两组(P<0.01)。结论诱导脑缺血耐受的BS预处理能明显减轻再缺血性脑水肿和BBB损伤,降低MMP-9的表达可能是脑缺血耐受现象的重要机制之一。

    作者:张法永;陈衔城;任惠民;鲍伟民 刊期: 2001年第03期

  • 颅脑外伤所致急性上消化道出血临床探讨

    急性上消化道出血是颅脑外伤的常见并发症,严重影响病人的预后,出血死亡率可达30%~50%[1]。我科自1997年9月~1999年8月,共收治颅脑外伤病人197例,其中并发上消化道出血76例。现结合本组统计资料,对颅脑外伤病人并发上消化道出血的发病机制和防治措施作一回顾性分析。

    作者:叶若兰;曹同瓦;孙旭 刊期: 2001年第03期

  • HPV在小儿喉乳头状瘤中的表达及临床意义

    目的探讨HPV与小儿喉乳头状瘤发病及发展的相关性。方法采用免疫组化方法检测46例小儿喉乳头状瘤96次手术的肿瘤组织及其HPV表达,另取8例正常小儿及成人的喉黏膜,10例成人喉乳头状瘤作对照。结果小和和成人的正常喉黏膜无HPV表达,成人喉乳头状瘤2例有HPV表达,46例96人次小儿喉乳头状瘤,其中33例61人次肿瘤组织中有HPV表达,且与肿瘤的复发频率呈正相关。结论 HPV在小儿喉乳头状瘤的发生发展过程中起重要作用。

    作者:王纾宜;李诗敏;朱莉;郑斯馨;吴韵芳 刊期: 2001年第03期

  • GAD对NOD小鼠β细胞淋巴细胞性炎症的防护作用

    目的了解GAD对NOD小鼠的1型糖尿病是否具有预防作用并探讨其免疫作用机制。方法用猪脑GAD 50μg和不完全弗氏佐剂(FIA)50μl混合后给4周龄雌性NOD小鼠腹腔注射(ip)(n=32),同时单独注射等量FIA作为对照组(n=19)。8周龄时环磷酰胺(CY)250 mg/kg ip以加速糖尿病。每周测定体重、血糖,20周龄处死小鼠后测定血清C-肽、观察胰腺病理和超微结构变化。结果 20周龄时,FIA对照组的糖尿病总发病率为73.58%,而GAD组仅有6.25%小鼠发生糖尿病(P<0.01),发病时间也明显延缓;GAD组的胰岛炎症分数较FIA组明显降低,且炎症程度减轻(P<0.05);GAD组的C-p水平也明显高于对照组(P<0.05);FIA组残存胰岛的β细胞数目稀少,有核膜和内浆网扩张、核糖体脱颗粒、分泌颗粒空泡样变等超微结构异常,而GAD组胰岛β细胞数显著多于对照组(P<0.05),且无上述超微异常。结论猪脑GAD可预防NOD小鼠胰岛炎发生,且有保护其胰岛β细胞超微结构的作用。

    作者:刘芳;俞茂华;朱秋毓;周俊淇;李吟遒;钟慈声 刊期: 2001年第03期

  • 肝细胞内两种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性

    目的观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、western Blot技术等方法。结果 (1)钙离子依赖性PC-PLC活性在诱癌过程中逐步升高;(2)鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变;(3)PC-PLC抗体对钙非依赖性PC-PLC活性具有显著抑制;(4)肝细胞中存在着与PC-PLC抗体相结合的蛋白质;(5)钙依赖性和钙非依赖性PC-PLC的蛋白峰有部分重叠;(6)亲和层析柱提纯的酶蛋白只有钙非依赖性PC-PLC活性。结论肝细胞中存在两种不同活性的磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C。

    作者:卢虹;陈迎风;吴兴中 刊期: 2001年第03期

  • 吲哚美辛对乙酸诱导大鼠胃溃疡形成和愈合的影响

    目的利用乙酸诱导大鼠胃溃疡模型研究吲哚美辛对化学诱导胃溃疡形成和愈合的影响,探讨其可能机制。方法雄性SD大鼠,体重160~180 g。分两组,即单纯乙酸诱导胃溃疡作为对照组和乙酸诱导胃溃疡加吲哚美辛处理组,各时间点每组均8只。乙酸诱导胃溃疡后1、3和7 d用RT-PCR和Western blotting分别检测胃黏膜中环氧合酶(COX)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。用ELISA测定胃黏膜中PGE2量反映COX活性。同时研究吲哚美辛对iNOS表达、活性及胃黏膜损伤的影响,以溃疡面积来评估胃黏膜损伤程度。结果 RT-PCR结果显示乙酸诱导大鼠胃溃疡后,COX2 mRNA表达明显升高;以溃疡基底部为明显,3 d高,7 d下降。胃黏膜PGE2合成也明显增高。吲哚美辛能抑制胃黏膜PGE2合成,处理组溃疡面积1 d时为(52.6±6.1)mm2,小于对照组的(71.8±5.8)mm2(P<0.05),且周围充血水肿较轻;3 d时两组溃疡大小无差异,但吲哚美辛处理组溃疡基底部厚度为(11±0.5)mm,薄于对照组的(20±0.8)mm(P<0.01);7 d时吲哚美辛组溃疡而积为(35.4±3.5)mm2,大于对照组的(24.8±3.2)mm2(P<0.05)。此外吲哚美辛能降低胃黏膜iNOS的表达及活性。结论吲哚美辛能减轻大鼠溃疡形成初期炎症反应,使组织免受进一步损伤,但使溃疡加深、延缓溃疡愈合。这一作用除和PGE2合成减少有关外,可能尚和抑制iNOS表达及活性有关。

    作者:沈锡中 刊期: 2001年第03期

复旦学报(医学版)杂志

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